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Técnica de FISHHibridación In Situ Fluorescente

Max CidEstudiante de Tecnología MédicaAyudante de AnatomíaUNAB, Concepción

Profesora Silvana MartínezBiología Molecular y Genética

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¿Que es la Técnica de FISH?

• ADN

• Estructuras anómalas

• “Sonda"

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Características de la Técnica de FISH

• No requiere células en división

• Solo aporta información de la sonda que se utiliza

• Moderado coste económico• Requiere un microscopio de fluorescencia

• Menor tiempo de procesado

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Preparación de la muestra

• a) Generación de ácidos nucleicos marcados para una detecciónsubsecuente.

• b) Fijación de tejidos (seccionados), preparación de cromosomas.

• c) Preparación del tejido para incrementar el acceso del ácido nucleicomarcado.

• d) Hibridación de la sonda marcada en cromosomas o tejidos.

• e) Lavados selectivos que remuevan las sondas que no hibridan.

• f) Detección de la sonda marcada, revelando la localización celular delos ácidos nucleicos.

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Sondas

FISH utiliza tres tipos de sonda

• Sondas específicas de un locus

•

Sondas alfoides o centroméricas

• Sondas para cromosomas completos

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Tipos de FISH

• FISH de Metafase

• FISH de Interface

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• FISH de Metafase

Tipos de FISH

 

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• FISH de Interface

Tipos de FISH

 

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Bibliografía

• http://www.terra.com/salud/articulo/html/sal7589.htm 

• http://biomodel.uah.es/citogene/dynacare/intfish.htm 

• http://www.institutomarques.com/es/reproduccion_asistid

a/infertilidad_masculina/tecnicas_de_estudio/hibridacion _in_situ_fluorescente_fish.html 

• http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/hibridacion_in _situ.pdf