Taller internacional de

producción sustentable de

cultivos agrícolas

Universidad de las Américas UDLA

05 de mayo del 2016

Cuenca, 02 de diciembre del 2015

Experiencias y resultados del

laboratorio de Control Biológico del

INIAP - EESC

Inicios del control biológico en INIAP - EESC

• Insectos plaga:

– Premnotrypes vorax y Tecia solanivora en papa

– Macrodactylus spp en maíz

– Neoleucinodes elegantalis en naranjilla

– Larvas de Scarabeidos en mora

• Enemigos naturales:

Bacterias, virus, parasitoides, nemátodos y hongos

entomopatógenos.

• Procedimiento:

Recolecciones, aislamientos, patogenicidad,

bioensayos, multiplicación (laboratorio)

Cronología de investigación • 1998 Ensayos con Baculovirus para T. solanivora. INIAP – CIP

• 2003 Prospección, bioensayos, multiplicación lab/artesanal de HEP de P. vorax en papa. IPM-CRSP

• 2005 (2010) Prospección, bioensayos, multiplicación lab/artesanal de NE para T. solanivora y P. vorax en papa. FONTAGRO

• 2006 Prospección de HE y bioensayos. Ohio University

• 2008 Baculovirus para T. solanivora en papa. IRD, PUCE, INIAP. McKnight

• 2008 Recolección de HE de T. vaporariorum.

• 2009 Prospección enemigos (HE, B, V, parasitoides) naturales de N. elegantalis en naranjilla. Fontagro

• 2010 Prospección de parasitoides de polillas de la papa. Fontagro

• 2011 – 2013 Manejo biológico de P. vorax con bioformulaciones a base de B. bassiana en campo de agricultores. Chimborazo. AgResearch.

• 2013 - 2014 Prospección y evaluación de bacterias entomopatógenas para manejo de larvas de Scarabeidos en papa y pastos. Fortalecimiento

• 2015 Bioformulaciones para nematodos entomopatógenos. Fortalecimiento

• 2016 Desarrollo de bioformulaciones para manejo de nematodos fitoparásitos y trips de la mancha roja en banano. AgResearch.

Hongos Benéficos • 29 aislamientos del género Metarhizium. • 37 aislamientos del género Beauveria. • 38 aislamientos del género Trichoderma. • TOTAL = 104 aislamientos

Nemátodos Entomopatógenos • 10 aislamientos de nematodos a partir de larvas de P. vorax. (Carchi, Cotopaxi,

Chimborazo)

N. Elegantalis (naranjilla) • 3 HE: 2 Beauveria y 1 Verticillium • 2 BE: Bacillus cereus y Paenibacillus polymyxa • Parasitoides

T. solanivora (papa) • Baculovirus • Parasitoides

Colecciones de enemigos naturales

Evaluación de cepas en laboratorio para control de adultos de gusano blanco de la papa.

Cod lab Hongo entomopatogeno TL 50

dias

17 Beauveria 6

21 Beauveria 10

22 Beauveria 11.5

25 Beauveria 6

26 Beauveria 13

28 Beauveria 5.8

30 Beauveria 13

36 Metarhizium 12.5

Cod lab HE % Mortalidad

9 dias

16 Beauveria 100

17 Beauveria 100

24 Beauveria 72

25 Beauveria 93

28 Beauveria 100

29 Beauveria 65

Barriga, E. 2003.

Barriga, E. 2003.

98,87

1,15

99,74

0

50

100

150

CEPA 54 CEPA 26 CEPA 64

Via

bili

dad

(%

)

Evaluación de tres cepas de Beauveria sp. para control de adultos de gusano blanco de la papa.

INIAP, 2011

INIAP, 2011

Determinación de curva de crecimiento de la cepa 64 Beauveria sp. en sustrato arroz.

1,00E+09

2,00E+09

3,00E+09

4,00E+09

15 25 33 40 47 54 61 68 75 82 89 96

Co

ncn

etra

ció

n (

e/g

)

Días desde la inoculación

Curva de crecimiento de la cepa 64

INIAP, 2012

BIOFORMULADOS/BIOPESTICIDAS “Son ciertos tipos de plaguicidas derivados de materiales naturales tales como animales, plantas, bacterias y ciertos minerales” EPA 2015.

Microorganismos

están suspendidos en

materiales adecuados.

Sobrevivencia

en almacenamiento por

uso de aditivos

Optimización en aplicación y

protección de microorganismos

CLASES DE BIOPESTICIDAS

Bioquímicos

Feromonas sexuales Atrayentes

Microbianos

Hongos Nematodos

PIPs Plant-Incorporated-Protectans

TIPOS DE FORMULACIONES

Polvos (P) Sustancia activa más un portador inerte. Aplicaciones directamente al suelo.

Granulados (G) Sustancia activa con un soporte mineral y un agente humectante que le da cohesión. Útil para aplicaciones directamente al suelo.

Polvos mojables (WP) Sustancia activa con un soporte mineral y materiales que contribuyen a su suspendibilidad, dispersabilidad y estabilidad Aspersiones foliares.

TIPOS DE FORMULACIONES

Gránulos dispersables (WG) Granulado del ingrediente activo junto a otros componentes similares al polvo mojable. Utilizados para aspersiones foliares.

Gránulos cubiertos (CG) Partícula sólida o líquida del ingrediente activo cubierta por un material sintético. Apropiada si se necesita proteger al principio activo del medio circundante y controlar el tiempo de liberación del mismo

Suspensiones concentradas (SC) Ingrediente activo con emulsificantes y dispersantes. Se obtiene una acción rápida del principio activo.

Sustratos 1 2 Lavado de esporas 3 Caldo Madre

4 Ingredientes Mezcla 5 Peletización

PROCESO DE FORMULACIÓN

6 Secamiento 7 Empaque

8 Control de calidad de formulaciones

PROCESO DE FORMULACIÓN

Gránulos cubiertos Gránulos solubles

Geles

PROTOTIPOS DE FORMULACIÓN

Formulaciones de gránulos solubles en agua con el hongo Beauveria sp. para gusano blanco de la papa Premnotrypex vorax

Materiales Nueva Zelanda (AgResearch)

Materiales Ecuador (INIAP) Porcentaje en la formulación

Bentonita Arcilla (Prov. Chimborazo) 32,5 %

Talco Talco sin olor 32,5 %

Almidón de papa Almidón de yuca 5,0 %

Caldo madre con agua esterilizada y esporas 30,0%

OBJETIVOS DE UN ANÁLISIS DE CALIDAD DE

BIOFORMULADOS

Asegurar que un producto cumpla con los parámetros requeridos

Estandarizar los lotes de producción

Generar mayor aceptación de los productos biológicos en el mercado

VARIABLES CONSIDERADAS EN UN ANÁLISIS

DE CALIDAD DE BIOFORMULADOS

Concentración de esporas por gramo o mililitro de producto

Muy bueno: Entre 108 y 109

VARIABLES CONSIDERADAS EN UN ANÁLISIS

DE CALIDAD DE BIOFORMULADOS

Concentración de unidades formadoras de colonias por

gramo o mililitro de producto

Muy bueno: Entre 108 y 109

VARIABLES CONSIDERADAS EN UN ANÁLISIS

DE CALIDAD DE BIOFORMULADOS

Viabilidad de esporas en el producto expresado en porcentaje

Debe ser superior al 90%

VARIABLES CONSIDERADAS EN UN ANÁLISIS

DE CALIDAD DE BIOFORMULADOS

Pureza del producto expresado en porcentaje

Debe ser superior al 90%

VARIABLES CONSIDERADAS EN UN ANÁLISIS

DE CALIDAD DE BIOFORMULADOS

Actividad de agua del producto

Específico para cada microorganismo

CALIDAD EN SUSTRATOS

2,50E+09

9,78E+10

5,31E+09

5,82E+07

1,00E+07

1,00E+08

1,00E+09

1,00E+10

1,00E+11

19B 20T 12T 21B 18T 1T 17B

Concentración del producto

Concentración del laboratorio

CALIDAD EN POLVOS MOJABLES

2,5E+11

6,00E+06

1,50E+09

8,72E+06

1,00E+06

1,00E+07

1,00E+08

1,00E+09

1,00E+10

1,00E+11

1,00E+12

15T 7T 22T 8B1 23T 8B2 9B1 4T 3T2 3T1 9B2

Concentración del producto

Concentración en laboratorio

CALIDAD EN FORMULACIONES LÍQUIDAS

2,50E+09

1,00E+08

3,18E+08

8,41E+06

1,00E+06

1,00E+07

1,00E+08

1,00E+09

1,00E+10

13T 11T 10B 6T 5B

Concentración del producto

Concentración en laboratorio

CONCLUSIONES Sustratos de Trichoderma y Beauveria están bien si estos

se encuentran relativamente secos aw ≤ 0.600

Polvos mojables presentan mayor estabilidad en relación a las demás formulaciones y está podría incrementarse si su aw ˂ 0.300

Trichoderma presenta mayor estabilidad en formulaciones líquidas que Beauveria.

Proyecto Biocontrol for sustainable farming systems, Ecuador

2015 – 2019

RESUMEN DE ACTIVIDADES

Instituto Nacional de Investigaciones Agropecuarias INIAP

Efecto de Trichoderma spp. en el cultivo de mora de castilla (Rubus glaucus)

plantado en diferentes condiciones ambientales de la granja Experimental de Nono.

Objetivos

Evaluar el establecimiento y sobrevivencia de dos cepas de Trichoderma spp. en plantas de mora de castilla cultivadas en invernadero y en campo

abierto.

Evaluar el vigor de las plantas de mora de castilla cultivadas en distintas condiciones ambientales.

Evaluar el rendimiento de mora de castilla en plantas cultivadas en distintas condiciones ambientales.

Autor: Melissa Ivonne Rivadeneira Rivadeneira

R1 R2 R3 R4 PROMEDIO

T1 0,00E+00 1,27E+04 1,53E+04 1,60E+04 1,10E+04

T2 0,00E+00 2,57E+03 3,00E+03 0,00E+00 1,39E+03

T3 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00

T4 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00

T5 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00

T6 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00

0

100

200

300

400

500

09-mar 16-mar 23-mar 30-mar 06-abr 13-abr 20-abr

Rendimiento por tratamientos mayo-abril

T1 T2 T3 T4 T5 T6

Estandarización de una metodología para la inoculación de Cylindrocarpon

destructans, hongo asociado a la marchitez en plantas de mora de castilla (Rubus

glaucus), EESC – 2016.

Objetivos

• Identificar morfológica y molecularmente varios aislamientos de Cylindrocarpon destructans obtenidos de plantas de mora de castilla

con sintomatología de marchitez.

• Determinar el método de inoculación más efectivo para Cylindrocarpon destructans en plantas de mora de castilla.

Autor: Paola Iturralde

Aislamiento de C.

destructans a partir de

plantas de mora

Identificación morfológica

de C. destructans

Identificación molecular C.

destructans,

Preparación del inóculos

Preparación de plántulas de

mora para pruebas de

inoculación.

Evaluación in vitro de productos convencionales y alternativos para controlar Cylindrocarpon destructans, hongo asociado a la marchitez en mora de castilla (Rubus glaucus).

Objetivos

• Realizar pruebas de sensibilidad in vitro de fungicidas químicos y orgánicos con tres diferentes concentraciones.

• Determinar los mejores fungicidas para el control in vitro de Cylindrocarpon destructans aislado de mora de castilla con síntomas de

marchitez.

Autor: Mónica Alejandra Jarrín Cerda

Testigo 100pp 10ppm 1ppm Evaluación de crecimiento de micelio de C. destructans a los 7 días;

tratamiento Carbendazim. Se ha avanzado con nueve productos químicos, las

evaluaciones se realizan a los siete y trece días.

Pruebas de sensibilidad in vitro de

C. destructans a fungicidas. Se está

trabajando con diez productos

químicos y cinco orgánicos.

Identificación morfológica y molecular de nematodos entomopatógenos

pertenecientes a la colección del laboratorio de Control Biológico de la Estación

Experimental Santa Catalina, 2016.

Objetivos

• Identificar mediante claves taxonómicas 10 aislamientos de nematodos entomopatógenos.

• Determinar a nivel molecular los especímenes descritos morfológicamente mediante amplificación de segmentos de ADN ribosomal nuclear.

Autor: Byron Pallo

Cría de Galleria mellonela

Evaluación de NEP´s

Renovación de NEP´s

Recuperación de NEP´s de larvas de Galleria mellonela

Observación microscópica: Adiestramiento en la identificación de estructuras de NEP´s

Pruebas preliminares identificación molecular de nematodos

GRACIAS POR SU ATENCIÓN

ING. AGR. FRANCISCO BÁEZ INIAP – ESTACIÓN EXPERIMENTAL SANTA CATALINA

DEPARTAMENTO NACIONAL DE PROTECCIÓN VEGETAL LABORATORIO DE CONTROL BIOLÓGICO

(02) 3006433 / 0994049748 francisco.baez@iniap.gob.ec