Bioquimica, la celula y su importancia

Materiales para la toma de muestra sanguneaAlgodn o gasaSolucin antisptica: alcohol al 70% y yodado al 1%Ligadura o torniquete hecha con tubo de goma 2-5 mm de calibreAgujas estriles descartable N 18 o 20 X 1 pulgadaJeringas estriles con capacidad para 2,5; 10 o 20 ml.Viales o tubos de ensayo.Soluciones anticoagulantes necesarias.Rtulos para los frascos o tubos, segn el examen correspDepsito para eliminar el material utilizado.Gafas protectorasCONTROL DE CALIDADEl control de calidad es un elemento importante en todo laboratorio, ya que permite asegurar la confiabilidad de las pruebas, su reproducibilidad, asegura la calidad de los materiales, reactivos y equipos empleados, mejora la auto confianza del personal, detecta fallas que pueden reflejarse en el informe de resultados y en general provee un entorno de excelencia en todos los aspectos del trabajoUn programa de CC evala y documenta el desempeo de todos los aspectos de un procedimiento. Esto incluye la calidad de la muestra, la eficiencia de los reactivos, medios, equipos y verifica los resultados.El sistema de calidad incluye un completo proceso de aseguramiento en todas las etapas de trabajo en el laboratorio: Fase pre analtica Fase analtica Fase post-analtica

Control Pre- Analtico

Extraccin y Toma de la Muestra:Muestras de sangre: suero o plasma Muestra de orina: con un conservante (inhibe el crecimiento bacteriano) o un cido para estabilizar metabolitos. Orina de 24h.Muestra de cavidades especiales: garganta, nasofarngeos, esputo, contenido gstrico, del ID, del IG, vaginales o cervicales, heces, etc.Otro tipos de muestras: lquidos corporales o tejidos especficos.Muestras peligrosas: con infecciones deberan ser etiquetadas con un adhesivo amarillo en el que se lee muestra peligrosa

Recogida de la muestra y procesamientoLa sangre es el fluido corporal que se utiliza con ms frecuencia para fines analticos.Hay tres procedimientos generales para obtener sangre y son:1) la venipuntura, 2) la puncin arterial y 3) la puncin cutnea.La tcnica que se utilice para obtener muestras de sangre es vital para mantener su integridad.La sangre arterial es esencialmente uniforme en su composicin en todo el cuerpo.La composicin de la sangre venosa vara y depende de la actividad metablica de los rganos y tejidos baados por ella.El sitio de la extraccin puede afecta la composicin venosa.La sangre de una puncin drmica contiene fluidos intersticiales e intracelulares.

DESINFECTE Y APLIQUE EL TORNIQUETEMEZCLE SUAVEMENTESUELTE EL TORNIQUETE Y TOME LOS DEMS TUBOS EN EL ORDEN INDICADOREALICE LA VENIPUNCINDESECHEOBTENCIN DE LA MUESTRA SANGUINEAPuncin arterialLa sangre arterial se utiliza para medir la tensin de CO2 y del O2, y para medir el pH (gases en sangre arterial (GSA)).Estas mediciones de gas en sangre son vitales en la valoracin de los problemas de oxigenacin que se ven en pacientes con pneumona, neumonitis y embolia pulmonar. Tcnica de recogida de sangre arterial y preparacin del paciente.Las arterial radial y braquial son los vasos preferidos, la arteria femoral es ms fcil para su puncin pero tiende a sangrar mucho ms.

Puncin cutneaEs utilizado en pacientes peditricos.Es til en adultos con obesidad extrema, quemaduras graves y tendencia a la trombosis.Se emplea: para hemogramas, recuentes glbulos, grupos sanguneos (ABO), micromtodos.No es aconsejable para el Rcto de plaquetas.La Tcnica consiste en:Puncin cutnea del pulpejo del dedo, del borde libre del lbulo de la oreja y en nios del pulpejo del dedo gordo o del taln del pie. Seleccionar el sitio adecuado para la puncin.Calentar el sitio de la puncin con una toalla humeda y caliente que no sobrepase los 42 C, para aumentar el flujo sanguneo.Desinfectar, esperar que seque y punzar rpida con una lanceta descartable.Eliminar la I gota y recolectar la sangre.

Puncin YugularSe realiza en nios cuando las venas antecubitales son muy pequeas o estn muy laceradas.La Tcnica consiste en:Coloca al nio en el filo de la camilla permitiendo que su cabeza caiga por debajo de los hombros, lateralizndolo un poco para que se observe la yugular.Asegurarse que el nio este bien sujetado.Hacer la puncin directa y se recomienda el uso de jeringa.

Toma de muestra de orinaMateriales Torundas de algodn o gasaJabn o sol. antispticaRecolector de orina o Frasco esterilizadoRtulos para los frascosDepsito para eliminar el material utilizado.Importancia Funcin renal.Screening y detectar el uso de sustancias txicas (dopaje).

Toma de muestra: secreciones

Manejo y almacenamientoIntervalo de tiempo entre la obtencin y el anlisis. La evaporacin de la muestra. Manejo, conservacin y transporte de la muestra. Exposicin a la luz (Bilirrubinas, porfirinas, vitamina A). Descomposicin de ciertos analitos con el tiempo y latemperatura Temperatura ambiente, refrigeracin, congelacinCuando se dispone de los resultados, se validan y se emite un informe de laboratorio clnico, que permitir el Dx, Px y/o Tto de una enfermedad.

Estabilidad y Conservacin de Muestras Recuentos Celulares y Grupos Sanguneos:Preservante : solucin anticoagulante EDTA dipotsicaCantidad: 5 ml. Duracin : 12 h, en refrigeracin 24 h.Pruebas de AglutinacionesSin anticoagulante, separar el suero (cc. 5 ml)Duracin: 12 h, en refrigeracin hasta 7 das.3. Tiempo de protrombinaPreservante: 0,5 ml de citrato trisdico ( cc. 4,5 ml)Duracin: 2 h4. Anlisis de GlucosaPreservante: 5 mg de fluoruro sdico ( cc. 5 ml)Duracin: 2 h ( si se separa suero o plasma hasta 24 h)Estabilidad y Conservacin de Muestras 5. Otros ensayos bioqumicos: colesterol, protenas, creatinina, rea etc. Sin Preservante separar el suero ( cc. 5 ml)Duracin : 24 h, en refrigeracin hasta 3 das.6. Determinacin de bilirrubinaSemejante al anterior, pero debe guardarse protegido de la luz en frasco oscuro. 7. Determinacin de la actividad enzimticaSin Preservante separar el suero ( cc. 5 ml)Duracin: 2 h en refrigeracin hasta 24 horas.8. Cultivos de SangreFrasco estril con medio caldo de cultivo especial a 37Cantidad : 5 mlDuracin: 24 h

TransporteDeben ser transportados en el menor tiempo posible.Los tubos deben mantenerse en posicin vertical para promover la formacin del coagulo y minimizar la agitacin del liquido, lo cual reduce la posibilidad de hemlisis. El tubo tapado elimina la posibilidad de contaminacin exgena de la muestra, evaporacin, posibilidad de derrame y la produccin de aerosoles al momento de la centrifugacin. Muestras para determinar estado cido-base se transportar en hielo a 4c.El manejo suave evita la hemlisis y no se vern afectadas las enzimas. Debe evitarse la exposicin a la luz especialmente porque se afectaran las vitaminas A y B6, beta-carotenos, porfirinas y bilirrubina.Debe usarse un recipiente estril y la muestra debe inocularse tan pronto como sea posible (ex. Microbiolgicos)La cadena de custodiaEs el procedimiento de control que se emplea las mediciones clnicas de las muestras obtenidas, su valoracin y expresin de los resultados.Tiene como finalidad garantizar que el procedimiento empleado ha sido exitoso, desde la recoleccin de la muestra, conservacin, transporte, proceso, valoracin e informe del laboratorio.

Variables que influyen en la estabilidad de las muestrasAgitacin de la muestraExposicin a la luzOrientacin del recipiente primarioPresin atmosfricaTemperaturaTiempo de transporteLa manipulacin de las muestras debe realizarse exclusivamente por personal sanitario cualificado y autorizado a ese efectoFactores biolgicos que afectan la interpretacin de los resultados La discriminacin entre resultados normales y anormales est afectado por diversos factores fisiolgicos que deben tenerse en cuenta cuando se interpretan y se dan los resultados. Que son:Sexo y edad del paciente: Estado nutricional: ayuno, dieta especial, postprandial.Hora de recogida de la muestra y tiempo de muestreo, adicin de preservantes y conservadores a la muestra, equipos etc.Factores biolgicos que afectan la interpretacin de los resultados Estrs y ansiedadPosicin del paciente: forma de obtencin de la muestra.Efectos del ejercicioHistoria clnicaEmbarazo, Ciclo menstrualHistoria farmacolgica: metabolitos pueden interferir en el anlisis.

Variacin de los resultados:Depende de las Caractersticas metrolgicas en el laboratorio:Precisin: es la reproducibilidad de un mtodo analticoExactitud define que tan cerca est el valor determinado del valorSensibilidad : es la capacidad del test para detectar la enfermedad, es el % resultados (+) en pacientes enfermos.Especificidad : capacidad para detectar a los sanos, % resultados (-) en pacientes sanosPrevalencia : Frecuencia al interior de la poblacinControl de calidad: para confirmar que el procedimiento de medida se est aplicando de forma correcta con las muestras de los pacientes.Falso (+):Falso (-):

Caractersticas metrolgicas en el laboratorio:Control de calidad: para confirmar que el procedimiento de medida se est aplicando de forma correcta con las muestras de los pacientes.Sensibilidad : es la capacidad del test para detectar la enfermedad, es el % resultados (+) en pacientes enfermos.Especificidad : capacidad para detectar a los sanos, % resultados (-) en pacientes sanosPrevalencia : Frecuencia al interior de la poblacin

Variabilidad ligada a la sistemtica post extraccin: Validez de una prueba dxCuando se estudia una muestra de pacientes, los datos obtenidos permiten clasificar a los sujetos en cuatro grupos segn una tabla 2x2Tabla 1. Relacin entre el resultado de una prueba diagnstica y la presencia o ausencia de una enfermedad.Resultado de la pruebaVerdadero diagnsticoEnfermoSanoPositivoVerdaderos Positivos(VP)Falsos Positivos(FP)NegativoFalsos Negativos(FN)Verdaderos Negativos(VN)Criterio de Rechazo: Errores en la obtencin de las muestras Identificacin inadecuadaTcnica de recogida de la sangreEstasis prolongada durante la venipunturaMuestra insuficienteErrores en el tiempoRecipiente incorrecto para la muestraLugar inadecuado de obtencin de la muestraAlmacenamiento inadecuado

Composicin de la sangre

Ventajas y Desventajas entre plasma y el sueroSuero: Sin factores de coagulacinNo es aconsejable desprender el coagulo del tubo con un aplicador, porque es una fuente potencial de hemlisis. Si el tiempo de coagulacin no es el adecuado, la formacin latente de fibrina puede causar un problema en las determinaciones Plasma: Con factores de coagulacinSe utiliza tubo con anticoagulante, y puede ser centrifugado inmediatamente.Anticoagulantes; Citrato; EDTA; heparina sdica y heparina de litio.Economa de tiempo, se elimina la espera de la coagulacin de la sangre.Rendimiento mas alto, puede obtenerse de un 15 a 20 % ms de muestraEl resultado del plasma es mas representativo del estado biolgicoRiesgo bajo de hemlisis y trombocitolisis, las plaquetas permanecen intactas, no hay seudohiperkalemia

Referencias bibliogrficas30BERNAD HENRY J. (2005). El Laboratorio En El Diagnstico Clnico. Homenaje a Todd-Sanford & Davidsohn, 20a..Ed. Editorial Marban. S.L. Espaa. Pp 12-26.GAW A, COWAN RA, OREILLY D, STEWART MJ Y SHEPHERD J. (2006). Bioqumica Clnica. 2Ed. Editorial Harcourt - Elsevier, Espaa.MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIN