LABORATORIO DE TECNOLOGA FARMACUTICAASEGURAMIENTO DE CALIDADMANUAL DE CALIDADFORMAS FARMACEUTICAS LIQUIDAS: RECUENTO DE Escherichia coli

Cdigo: MCTF-01-01

Rige desde: Mayo 2015Vigencia hasta: Mayo 2017Sustituye a: NuevoPgina 9 de 9

1. OBJETIVO:

Establecer el procedimiento para la preparacin de la muestra y contaje de Escheria coli en producto semielaborado y terminado, mediante un procedimiento escrito y validado en el Laboratorio de Tecnologa Farmacutica, con el fin de proporcionar resultados correctos.

2. ALCANCE:

Este procedimiento involucra a todos los productos lquidos que se elabora en el Laboratorio de Tecnologa Farmacutica, sean productos semielaborados o terminados.

3. POLTICAS:

Es responsabilidad de todo el personal involucrado en el anlisis microbiolgico de Escherichia coli del Laboratorio de Tecnologa Farmacutica, conocer y dar cumplimiento a lo establecido en este procedimiento, establecer los lineamientos a seguir en el presente procedimiento, aprobar su contenido.

4. TRMINOS Y DEFINICIONES:

Descripcin de los trminos que se aplicarn dentro de los documentos del Laboratorio de Tecnologa Farmacutica de la ESPOCH.

Agar MacCkonkey: Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativosAgua peptonada: Medio usado como diluyente y para enriquecimiento bacteriano a partir de alimentos y otros materiales de inters sanitario.Caldo lactosado: Se recomienda como prueba presuntiva para investigar la presencia de bacterias del grupo coliformes como la E. coli.

5. PROCEDIMIENTO:

5.1 Productos nuevosLos tres primero lotes en su presentacin de frasco.

5.2 Programa de rutinaCada ao el Analista de Control de Calidad elabora una Lista de productos para anlisis microbiolgico (Ver Anexo 2) y su especificacin, en base a la frecuencia de fabricacin y criticidad de los mismos. Toma en cuenta los siguientes parmetros: En el caso de formas lquidas se toman muestras para anlisis microbiolgico de todos los lotes producidos en etapa de envase (frasco). En el caso de productos que tengan en su composicin productos de origen vegetal, se toman muestras para anlisis microbiolgico de todos los lotes producidos, en su envase primario. En productos de baja rotacin con produccin menor a 3 lotes al ao, realiza un control microbiolgico de un lote al ao.

5.3 Instrucciones de muestreo para producto terminado. Para el muestreo se debe tener en cuenta, no manipular los productos con las manos, ni abrir los frascos. El Jefe de Produccin enva muestras para anlisis microbiolgico de todos los lotes producidos en etapa de envase y se coloca en una funda plstica, rotula con la etiqueta destinada para ello y enva las muestras al laboratorio. Se debe tomar una cantidad de muestra significativa de todos los lotes producidos en etapa de envase (Ver anexo 3).

5.4 Equipos necesarios y reactivos Frascos estriles Vasos estriles Probeta estril Esptulas estriles Guantes Mascarillas Pipetas estriles Marcador permanente Etiquetas Etanol 70% Fundas plsticas Asas de aluminio Cajas Petri Incubadoras Balanza Mechero Bunsen Reverbero Pipetas de 5 mL Cabina de Bioseguridad Autoclave Medios de Cultivo (Agar MacCokeny, Caldo lactosado) Agua peptonada Tubos de ensayo Frascos o matraz Erlenmeyer de 100 mL

5.5 Procedimiento de anlisisEl Analista de Microbiologa realiza lo siguiente:a) Ingresa la muestra, anota en la bitcora de Microbiologa (Ver Registro RPOTF-02-02).b) Prepara los medios de cultivo de acuerdo a las instrucciones del fabricante.c) Prepara el material de vidrio necesario y lo esteriliza. Introduce el material necesario al rea de siembra.d) Encienda la Cabina de Bioseguridad o ubique un mechero Bunsen.e) Limpia la mesa de trabajo con ETANOL 70%.f) Prepara previamente tubos de ensayo con 9 mL de caldo lactosado.g) Previamente rotula las Cajas Petri y tubos con los caldos; los datos son: nombre, fecha, lote y medio de cultivo.h) Enciende el mechero y junto a ste toma 10 mL de muestra liquida.i) Una vez tomadas las muestras disuelve con 90 mL de Agua Peptonada, previamente estriles utilizando una probeta estril y con asepsia, bajo flujo laminar (dilucin 10-1).j) Si la muestra es inmiscible la disuelve con agua peptonada estril.k) Coloca en cada tubo de caldo lactosado, 1 mL de la dilucin anterior, trabaja cada muestra por duplicado utilizando una pipeta de 5 mL. En cada caja de siembra coloca de 20 a 25 mL del medio de cultivo Agar MacCkonkey. Realizar movimientos circulares para homogenizar la muestra y deja enfriar con las tapas a medio cerrar bajo la Cabina de Flujo laminar. Adems realiza un blanco con el medio de cultivo correspondiente. l) Tomar una asada de este caldo y estriar en una caja petri que contiene Agar MacCkonkey previamente fundido y enfriado.m) Incubar las Cajas Petri invertidas y los tubos por 24-48 horas 35C 1C. n) Transcurrido este tiempo, proceder a realizar la lectura de las cajas y los caldos o) Si el caldo lactosado da positivo proceder a identificar Salmonella o E. coli de acuerdo a Farmacopea.p) Determinar si hay crecimiento de Escherichia coli (Colonias color rojo ladrillo).q) Registra los resultados en la hoja de Resultados de Anlisis Microbiolgico de Producto Terminado (Ver Registro RPOTF-02-02) y enva una copia del mismo al analista a cargo del anlisis qumico del producto.

5.6 EspecificacionesLos lmites de contaje microbiano se rigen a la Farmacopea Europea 2005, CONTROL MICROBIOLGICO DE PREPARACIONES FARMACUTICAS de acuerdo a la categora correspondiente.

6. REGISTROS

Ver anexo # 1

7. RAZONES PARA LA REVISIN:

FechaEdicinRazn de cambioObservaciones

Mayo 20151Elaboracin del SOP MCTF-01-01Prxima revisin mayo 2017

8. ANEXOS:

ANEXO N1.

REGISTRO DE FORMAS FARMACUTICAS LIQUIDAS CONTROLES MICROBIOLGICOS EN PRODUCTOS SEMIELABORADOS Y ENVASADOS. RMCTF01-01Producto: Presentacin: Lote:Elab : Vence:

Observaciones:

ITEM / HORA

RECUENTO DE BACTERIAS AEROBIAS

RECUENTO DE HONGOS Y LEVADURAS

RECUENTO DE Escherichia coli

RECUENTO DE Salmonella

RECUENTO DE Pseudomona

C=Conforme; N/C=No Conforme; N/A=No Aplica

Produccin: ______________________ Control de Calidad: ______________________

ANEXO N2. LISTA DE PRODUCTOS PARA ANLISIS MICROBIOLGICOS.

ANEXO N3.LISTA DE CANTIDAD DE MUESTRAS REQUERIDAS PARA LA VERIFICACIN DE LA CALIDAD DE LOS MEDICAMENTOS PARA USO HUMANO

Elaborado por:

Revisado por:

Aprobado por:

Margarita LlundoEstudianteBqf. Vctor GuangasigDOCENTE ESPOCHDra. Adriana RincnDOCENTE UDLA