Seminario inmunoterápicos castro m new
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INMUNOTERÁPICOS
Inmunología de Farmacia
Dra. Marisa Castro
2015
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Definición
Compuesto que se administre como apoyo de un
tratamiento o tratamiento en sí mismo y que
fundamente su mecanismo de acción en la
modulación de la Respuesta Inmune (RI) o que
sea en sí mismo un componente de la RI
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1- Fuentes naturales de proteínas
(Ag extractivos)
Ag idéntico al de interés
2- Técnicas de ADN
recombinante
.
FORMAS DE OBTENCIÓN
Proteína heteróloga
o recombinante
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De fuentes naturales Por tecnología del ADN recombinante
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Sistemas de expresión PROCARIOTAS
Ventajas
1) Tiempo de replicación bajo.
2) Alcanza alta densidad en cultivo usando sustratos baratos.
3) Sistemas genéticamente bien caracterizados.
4) Amplia disponibilidad de plásmidos y cepas mutantes.
Desventajas
1) Pueden carecer de actividad biológica (falta modificaciones post-traduccionales).
2) Presencia de pirógenos en proteínas de uso terapéutico.
3) Formación de cuerpos de inclusión.
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Sistemas de expresión EUCARIOTAS
Ventajas
1) Realizan algunas
modificaciones post-
traduccionales.
2) Fácil manejo microbiológico
y genéticos.
3) Las levaduras son
huéspedes GRAS (seguros).
4) No aportan toxinas.
Desventajas
1) Mayor tiempo de
replicación que los
procariontes.
2) Bajo rendimiento
3) Glicosilación no
exactamente igual que en las
proteínas nativas.
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Proteína heteróloga
Sistema de expresión
Niveles de producción
Altos
Bacterias Células de
insecto
Bajos
LevadurasCélulas de mamíferos
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Aspectos a considerar:
1- ubicación de la proteína recombinante en el sistema de
expresión.
a. Sistema celular : citoplasmática o secretada.
b. Sistema in vitro: presente en el medio de
reacción.
2- Debemos conocer: PM, PI.
3- Podemos introducir tags durante su producción para
facilitar la purificación empleando columnas de afinidad.
PURIFICACIÓN
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Según la localización
Intracelular
Ruptura celular
Métodos
Químicos Biológicos Físicos
Medio de cultivo
Métodos de concentración
Recuperación de la proteína
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Métodos de Purificación: Cromatografías
Métodos Adsortivos Métodos No Adsortivos
Afinidad.
Pseudoafinidad.
Interacción hidrofóbica.
Interacambiadores iónicos.
Concentran la muestra
Primeros pasos de
purificación
Exclusión molecular.
Diluyen la muestra.
Últimos pasos de la
purificación.
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Anticuerpos monoclonales
terapéuticos
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Método tradicional de Obtención:
Técnica de hibridoma
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Anticuerpos quiméricos y humanizados
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Nomenclatura Anticuerpos monoclonales
Sufijos:
“omab”: murinos. [Munomomab, Ac anti-CD3].
“ximab”: quiméricos. [Rituximab, Ac anti-CD20 ].
“zumab”:humanizados.[Trastuzumab, Ac anti-HER-2].
“umab”: totalmente humanos. [Figitumumab, Ac
monoclonal experimental, de secuencia humana, anti-
IGF-R].
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GRACIAS!!!