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RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral Tipo A Título: La determinación cuantitativa de c-myc ayuda a la

determinación del pronóstico en los pacientes con COCE. Autores:

Cintia Chamorro Petronacci, Mario Pérez-Sáyans, Jose Manuel Suárez Peñaranda, Abel García García, Elena Padín Iruegas.

Grupo de investigación Grupo de epidemiología

Institución IDIS Expone Cintia Chamorro Petronacci Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Los genes myc son una familia de proto-oncogenes cuyas proteínas están implicadas

en la regulación de la proliferación, diferenciación y apoptosis celular, así como en la

regulación de la actividad de genes implicados en la división celular. El objetivo de

este trabajo es describir cuantitativamente la expresión de c-myc y evaluar su relación

con los factores clínicos y pronósticos así como establecer un modelo multivariante

predictivo de supervivencia. Este es un estudio retrospectivo de 68 pacientes

diagnosticados con carcinoma oral de células escamosas (OSCC). Hemos construido un

microarray tisular para investigar la expresión de c-myc mediante

inmunohistoquímica. La media de expresión del c-myc fue 50.32 (SD, 26.05) con un

rango de 6.60 a 99.48; similar para estadios tumorales iniciales y avanzados. Los

pacientes no fumadores obtuvieron mayores niveles de c-myc, mostrando una

diferencia estadísticamente significativa (Kruskal-Wallis χ2=5.975; P=0.05). No hemos

encontrado relación estadísticamente significativa entre la expresión cuantitativa de

c-myc y otros parámetros clínicos o patológicos. Para cada unidad de incremento de c-

myc, el riesgo aumentó 1.15 (P<0.001; HR, 1.150; 95% CI, 1062-1245). Futuros

estudios sobre esta proteína tendrán un gran valor cuando se utilicen en conjunto con

otros marcadores para valorar el pronóstico de pacientes con carcinoma oral de

células escamosas.

Palabras clave: c-myc, carcinoma oral de células escamosas, modelo de supervivencia

multivariable.

RESUMEN COMUNICACION

Tipo de comunicación: Oral Tipo A

Título: Potencial terapéutico de la administración intravenosa de células madre pluripotentes inducidas (iPS) en la isquemia cerebral

Autores:

Tomás Sobrino1, Esteban López-Arias1*, Alba Ferreiros2*, Francisco Campos1, Sabela Da Silva-Álvarez2, Manuel Collado2, José Castillo1

Grupos de investigación

1 Neurología C7 del IDIS (IP: Prof. José Castillo); 2 Células Madre en Cáncer y Envejecimiento del IDIS E028 (IP: Dr. Manuel Collado).

Institución IDIS

Expone Tomás Sobrino Moreiras

Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Antecedentes: La reprogramación de células somáticas adultas a células madre pluripotentes inducidas (iPS) constituye una nueva aproximación para producir células madre autólogas con fines terapéuticos en terapia celular. Sin embargo, si estas iPS se diferencian a neuronas funcionales e inducen recuperación funcional en la isquemia cerebral está poco claro. Por otra parte, no existen estudios que hayan testado el potencial terapéutico de la administración intravenosa de estas iPS en la isquemia cerebral. Por ello, nuestro objetivo fue estudiar los efectos protectores y reparadores de la administración intravenosa de iPS en ratas sometidas a isquemia cerebral por oclusión transitoria de la arteria cerebral media (MCAO). Métodos: Utilizamos ratas SD macho (350-375g) sometidas a isquemia cerebral por oclusión intraluminal (60 minutos) de la arteria cerebral media. Después de la MCAO, las ratas fueron randomizadas a 2 grupos experimentales de tratamiento (N=8): 1) grupo control (1 mL de salino); grupo tratado con iPS (3x106 células en 1 mL de salino inyectable). Todos los tratamientos fueron administrados por vía intravenosa 24 horas después de la MCAO. Las iPS se obtuvieron de fibroblastos de ratón mediante la transfección con retrovirus policistrónicos hOSKM que contienen los siguientes factores de reprogramación: Oct4, Sox2, cMyc y Klf4. Estas iPS fueron caracterizadas por tinción con fosfatasa alcalina, expresión endógena de los factores de pluripotencia, silenciamiento de los factores de transcripción y formación in vivo de teratomas con las 3 capas germinales. Para evaluar los posibles efectos protectores o reparadores del tratamiento con iPS, analizamos: a) Volumen del infarto por RM a las 24 horas y a los días 7, 14, 28 y 60 tras la MCAO; b) La recuperación funcional y neurológica se determinaron mediante los test del cilindro y Bederson respectivamente, a la misma escala temporal que los estudios de neuroimagen; c) Evaluamos neurogénesis y angiogénesis por inmunohistoquímica; d) Finalmente, hemos realizado un estudio de RM a alta resolución (200 µm) de la totalidad del cuerpo de la rata con el objetivo de observar la formación o no de teratomas o tumores. Resultados: Observamos que el tratamiento con iPS induce una reducción progresiva del volumen de infarto a los 60 días después de la MCAO en comparación con el grupo control (p<0.05). De igual modo, las ratas tratadas con iPS mostraron una mejoría funcional a los 60 días tras la MCAO (p<0.05). Sin embargo, no observamos efecto en la recuperación del déficit neurológico. Por otra parte, el grupo tratado con iPS mostró una mayor neurogénesis y angiogénesis. Finalmente, el estudio de RM de alta resolución mostró la ausencia de formación de teratomas o tumores.

Conclusión: La administración intravenosa de iPS reduce el volumen de lesión y mejora la

recuperación funciona en la isquemia cerebral sin inducir la formación de teratomas.

Palabras clave: Isquemia cerebral, ictus, iPS, terapia celular, reparación cerebral


Tipo de comunicación: Oral Tipo A

Título: Validación de la acción miogénica del sistema obestatina/GPR39 en un modelo in vitro humano

Autores:

Autor/es: I. Santos Zas1, U. Gurriarán Rodríguez3, J. González Sánchez1, M. Bouzo Lorenzo1, T. Cid Díaz1, C.S. Mosteiro1, J. Señarís4, F.F. Casanueva1,2, V. Mouly5, Y. Pazos 1,2, R. Gallego6, J.P. Camiña1,2

Grupo de investigación IDISE25

Institución IDIS Expone Icía Santos Zas Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Resumen: La capacidad regenerativa del músculo esquelético es crítica para la homeostasis del músculo y la recuperación de daños físicos así como en las patologías asociadas al mismo. El desarrollo de estrategias terapéuticas depende del conocimiento de las señalas reguladoras extrínseca e intrínsecas que controlan la miogénesis. Previamente nuestro equipo demostró en un modelo animal de regeneración de músculo esquelético que el sistema obestatina/GPR39 está coordinadamente regulado como parte del programa miogénico, actuando como una señal autocrina/paracrina reguladora de la miogénesis. El principal objetivo del presente trabajo fue validar la capacidad miogénica de dicho sistema en humanos utilizando un modelo de mioblastos humanos inmortalizados in vitro. En base a los estudios realizados podemos afirmar que el músculo esquelético humano expresa el sistema obestatina/GPR39. In vitro, la obestatina se expresa preferentemente en miotubos humanos, mientras que el GPR39 se expresa por igual en mioblastos y miotubos. A nivel funcional, la obestatina estimuló la actividad mitogénica y migratoria de los mioblastos. Además, este péptido promovió la miogénesis aumentando la expresión de marcadores miogénicos. Esta acción está coordinada pos la activación de nodos intracelulares tempranos, como Akt, CREB, ERK, GSK3, p53 y RSK1. En resumen, los datos presentados demuestran que el sistema obestatina/GPR39 controla el programa de diferenciación miogénica en humanos, validando los datos obtenidos previamente en el modelo animal.

Palabras clave: Miogénesis, Obestatina, GPR39, regeneración 1Área de Endocrinología Molecular y Celular, Instituto de Investigación Sanitaria (IDIS), Complejo Hospitalario Universitario de Santiago (CHUS), SERGAS; Santiago de Compostela, España. 2CIBER Fisiopatología de la Obesidad y Nutrición (CB06/03), Instituto de Salud Carlos III. 3 Faculty of Medicine, University of Ottawa, Ottawa, Canada. 4Servicio de Cirugía Ortopédica y Traumatología, CHUS, SERGAS; Santiago de Compsotela, España. 5CNRS UMR 7215, Institut de Myologie; Paris, Francia. 6Departamento de Ciencias Morfológicas. Universidad de Santiago de Compostela. Santiago de Compostela, España.

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral Tipo A

Título: Regulación de la función de la ghrelina dependiente del patrón de fosforilación de su receptor GHSR1a

Autores:

M. Bouzo Lorenzo1,3, B. Otero Alén1, I. Santos Zas 1, J. González Sánchez1, F.F. Casanueva1,2, AB. Tobin3, Y. Pazos 1,2, AJ. Butcher3, J.P. Camiña1,2

Grupo de investigación Endocrinología Celular IDIS E-25

Institución IDIS Expone Mónica Bouzo Lorenzo Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

La ghrelina es una hormona sintetizada fundamentalmente por el estómago que se define como el ligando natural del receptor de secretagogos de la hormona del crecimiento GHSR1a. Además de estimular la secreción de hormona del crecimiento (GH) a nivel hipofisario, la ghrelina ejerce un papel clave en la regulación del metabolismo energético. Dichas acciones están definidas por un patrón de fosforilación y activación del receptor que determinan las vías de señalización intracelular y con ello las funciones fisiológicas. En este trabajo hemos realizado un estudio sobre el patrón de fosforilación del receptor GHSR1a. Para ello, hemos utilizado diferentes aproximaciones que han permitido determinar los sitios precisos de fosforilación del GHSR1a tras su estimulación con ghrelina mediante la generación de fosfopéptidos trípticos y el análisis de estos péptidos por cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS). Mediante mutagénesis dirigida de los sitios de fosforilación encontrados se han generado diversos mutantes del receptor marcados con la proteína verde fluorescente (EGFP) cuya expresión en un sistema in vitro demuestra la funcionalidad asociada al patrón de fosforilación. Los resultados derivados de este estudio muestran que los mecanismos de activación de la ghrelina asociados a un patrón de fosforilación del receptor GHSR1a son determinantes de las acciones biológicas de esta hormona.

Palabras clave: Ghrelina, GHSR1a, Fosforilación 1Área de Endocrinología Molecular y Celular, Instituto de Investigación Sanitaria (IDIS), Complejo Hospitalario Universitario de Santiago (CHUS), SERGAS; Santiago de Compostela, España. 2CIBER Fisiopatología de la Obesidad y Nutrición (CB06/03), Instituto de Salud Carlos III; Santiago de Compostela, España. 3Medical Research Council Toxicology Unit (MRC), University of Leicester, Leicester, United Kingdom.


Título: Reducción de la excitotoxicidad glutamatérgica tras el ictus isquémico mediante tratamiento celular

Autores: Francisco Campos, María Pérez-Mato, Amparo Pérez, Emilio

Cuadrado, Tomás Sobrino, José Castillo Grupo de investigación Neurología C7 del IDIS

Institución IDIS Expone Francisco Campos Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Antecedentes: La liberación de glutamato en el parénquima cerebral tras el ictus isquémico representa uno de los mecanismos más trascendentes que condiciona el deterioro neuronal tras el ictus isquémico. El bloqueo del efecto neurotóxico causado por la liberación de glutamato ha sido abordado desde múltiples enfoques farmacológicos; sin embargo, su aplicación clínica no ha mostrado efecto terapéutico, o los fármacos empleados causaban elevados efectos adversos. Con la finalidad de buscar otras alternativas terapéuticas, nuestro grupo ha descrito una nueva estrategia capaz de reducir la toxicidad glutamatérgica tras la isquémica cerebral, basada en la reducción del glutamato plasmático. Basándonos en este mismo mecanismo y en la capacidad de los transportadores EAAT2 (excitatory amino-acid transporter 2) para transportar glutamato, hemos generado un tipo celular que expresan EAAT2 y con capacidad de captar glutamato plasmático, y por lo tanto con potencial uso en el tratamiento del ictus isquémico. Métodos: Para el desarrollo del presente trabajo hemos utilizado una línea celular HEK (Human Embryonic Kidney) las cuales hemos transfectado con un plásmido para el EAAT2 asociado a un gen repórter de GFP (Green fluorescent protein) y a un gen resistente a la gentamicina. La selección de las líneas celulares positivas a la expresión de la proteína EAAT2 y GFP se realizó mediante citometría de flujo y mediante tratamiento con gentamicina. La expresión de EAAT2 se determinó mediante imagen inmunohistoquímica y western blot. La funcionalidad del trasportador se realizó mediante ensayos de captación con glutamato radiactivo. Resultados: Empleando la metodología previamente mencionada, hemos conseguido generar una línea estable de células HEK que expresan EAAT2 de forma constitutiva. Los ensayos de radiactividad han mostrado que únicamente las células transfectadas presentan capacidad para captar glutamato. Conclusión: En este estudio se propone el uso de la terapia celular como nuevo mecanismo protector frente al tratamiento del ictus isquémico. La administración de este tipo celular en modelos animales de isquemia cerebral permitirá determinar su potencial terapéutico

Palabras clave: EAAT2, Ictus, Glutamato, Protección

.

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral Tipo B

Título: Bases moleculares de la disfunción endotelial y productos de glicación avanzada

Autores: Beatriz Paradela-Dobarro, Sergio Raposeiras-Roubín, José R.

González-Juanatey, Ezequiel Álvarez Grupo de investigación ENDOTELIO VASCULAR. Dentro del grupo de

Cardiología (C016) Institución IDIS Expone Ezequiel Álvarez Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Objeto e hipótesis: estudio de las vías de señalización molecular que llevan a la disfunción endotelial y la mediación de las especies reactivas de oxígeno en estas vías, en un modelo celular humano (HUVEC). Conocer y modular estas vías permitirá prevenir o curar enfermedades vasculares como la aterosclerosis. Líneas de trabajo: 1) Análisis de la participación de la NADPH oxidasa (principal productor de radicales de oxígeno en vasos) en la función de la célula endotelial humana. Búsqueda de nuevos moduladores farmacológicos con actividad en el endotelio. 2) Papel de la glicación avanzada en la disfunción endotelial y la enfermedad vascular. Estudio a nivel experimental en células HUVEC y a nivel clínico en pacientes cardiovasculares (insuficiencia cardiaca, síndrome coronario agudo y fibrilación auricular). En el primer caso estudiamos el efecto en HUVEC de los productos finales de glicación avanzada (AGE) o de sus precursores –productos de Amadori. En el segundo caso, estudiamos el eje AGE-RAGE (receptor para AGE) en sangre y su relación con la enfermedad cardiovascular. Capacidad del grupo: Experiencia en el cambio funcional y de fenotipo conducente a la disfunción de la célula endotelial humana (modelo HUVEC). Análisis de sus vías de señalización y su regulación farmacológica. Células progenitoras endoteliales. Estudios en pacientes cardiovasculares. Interés potencial del grupo: células progenitoras endoteliales circulantes; homeostasis del calcio intracelular; modelos in vitro de cultivo en flujo y co-cultivo de distintos tipos celulares; modelos animales de aterosclerosis; búsqueda de nuevos fármacos para el endotelio.

Palabras clave: Disfunción endotelial, productos finales de glicación avanzada (AGE), especies reactivas de oxígeno, células progenitoras endoteliales, aterosclerosis

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral Tipo A / En caso de non ser seleccionada, Póster Tipo A

Título: Senescence as a mechanism to control virus proliferation

Autores: Carmen Rivas Vázquez, Manuel Collado Rodríguez

Grupo de investigación 1. Virus e Cancro. IP: Carmen Rivas Vázquez. Científico titular do CSIC no Centro de Investigacións en Medicina Molecular e Enfermidades Crónicas (CIMUS). 2. Laboratorio de Células Nai en Cancro e Envellecemento, stemCHUS. IP: Manuel Collado Rodríguez. Instituto de Investigacións Sanitarias de Santiago, IDIS. Complexo Hospitalario Universitario de Santiago (CHUS), SERGAS.

Institución IDIS Expone Maite Baz Martínez


RESUMEN

Cellular senescence is a state of permanent proliferation arrest in response to a damage that endangers cell integrity. There are many stimuli that may trigger senescence, such as telomere dysfunction, oncogene activation, DNA damage, and some chemotherapeutic drugs. Since its first description in 1961, many groups have demonstrated the role of senescence as a stress response during aging, controlling tumour progression, or during fibrosis and tissue remodelling. In the field of cancer therapies, oncolytic viruses are becoming a promising tool for specifically destroying cancerous cells, as these viruses replicate preferentially in transformed cells and not in normal cells. Moreover, the combination of viral therapy with classic chemotherapy is under study. But at this point we wondered whether these viruses were able to replicate in tumour cells induced to senesce by chemotherapy drugs. To test this hypothesis we used Vesicular Stomatitis Virus (VSV), and evaluated its ability to infect, produce viral proteins, and replicate in primary and tumour cells, undergoing or not senescence triggered by different stimuli, including chemotherapeutic drugs. Our results indicate that senescence may be an antiviral mechanism, as it limits the replication of VSV in senescent cells compared to non-senescent cells

Palabras clave: Senescencia celular, virus, VSV, cancro, viroterapia

1. Centro de Investigación en Medicina Molecular (CIMUS), Universidade de Santiago de Compostela, 15782, España. 2. Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago de Compostela (IDIS), Complexo Hospitalario Universitario de Santiago de Compostela (CHUS), SERGAS, Santiago de Compostela, 15706, España.

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral Tipo B

Título: Estudio traslacional: tejido adiposo epicárdico y enfermedad coronaria

Autores: Sonia Eiras, Ángel Fernández-Trasancos, Rosa María

Agra, Elvis Teijeira-Fernández, Rubén Fandiño-Vaquero, Juan Sierra, Ángel Luis Fernández, Antonio Salgado-Somoza, José Ramón González-Juanatey

Grupo de investigación Cardiología Institución IDIS Expone Sonia Eiras Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Una de las líneas de trabajo que se desarrolla en el grupo de Cardiología del IDIS se basa en el estudio del tejido adiposo epicárdico (TAE) y su relación con la enfermedad coronaria. Mediante la interacción clínico-básico se han obtenido resultados que nos aproximan al conocimiento de la actividad metabólica y endocrina del TAE y su implicación en los mecanismos fisiopatológicos de la enfermedad coronaria. Mediante el análisis transcriptómico, observamos que la baja expresión de adiponectina (indicador de adipocitos maduros funcionales, antiinflamatoria y sensibilizadora de la insulina) en biopsias de TAE se asocia a una mayor extensión de la enfermedad coronaria y a un peor pronóstico. Este comportamiento transcripcional nos llevó al estudio histológico del TAE para observar que los adipocitos son de menor tamaño a medida que aumenta la expresión de MCP-1 (proteína quimioatrayente de monocitos). El estudio proteómico diferencial nos señalaba un incremento de proteínas involucradas en el estrés oxidativo y mayor producción de ROS en el TAE. Todos estos resultados podrían explicar la baja producción de adipocitos funcionales o adiponectina en este tejido. Finalmente, el estudio “in vitro” de células mesenquimales aisladas de TAE y sometidas a un proceso de adipogénesis (formación de adipocitos) nos demostró un comportamiento diferencial en pacientes con y sin enfermedad coronaria. Estos estudios nos aproximan al encuentro de nuevos factores que mejoren la funcionalidad del TAE en pacientes con enfermedad coronaria. Palabras clave: Tejido adiposo epicárdico, estudio traslacional, enfermedad coronaria

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A

Título: Cellular reprogramming for cancer research

Autores: Ferreirós A., Da Silva-Álvarez S., Vilas JM., Baz-Martínez

M., Collado M. Grupo de investigación Células madre en cáncer y envejecimiento

Institución IDIS Expone Alba Ferreirós Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Induced pluripotency of somatic cells by defined genetic elements provides a powerful tool that holds the promise of improved in vitro cell models to study disease, test potential new therapies, and to serve as efficient instrument for regenerative medicine. From its initial description, the number of cells of different type, origin, species, etc, that have been successfully reprogrammed has been growing exponentially. However, a notable exception to this rule is the almost complete lack of reports describing the complete reprogramming of tumor-derived cells. Based on current knowledge on the field and our preliminary data, we hypothesize that reprogramming to induced-pluripotency and oncogenic transformation share many basic mechanisms and barriers, and therefore, reprogramming of cancer cells constitutes an ideal cellular system to study fundamental pathways and concepts in the cancer field. Some authors claim that activated oncogenes impose a barrier to cellular reprogramming to iPSCs. In order to directly address this issue, we have analyzed the effect of expressing defined activated oncogenes together with reprogramming factors, Oct4, Sox2 and Klf4. On the other hand, we are also working with cells from blind mole rats (Spalax), a rodent with a long lifespan and an extreme resistance to develop cancer. We are trying to reprogram these cells to assess if there is a relationship between cancer resistance and a block to induce pluripotency on differentiated somatic cells by defined factors.

We will present our most recent data on the reprogramming of oncogenically-transformed cells and on reprogramming of Spalax fibroblasts. Palabras clave: stem cells / oncogenes / reprogramming / Spalax / iPSCs

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Role of the pocket proteins in the regulation of SOX2

expression Autores: Jéssica María Vilas, Sabela da Silva-Álvarez, Alba Ferreirós,

Maite Baz-Martínez, Manuel Collado Grupo de investigación Células madre en cáncer y envejecimiento Institución IDIS Expone Jéssica María Vilas Martínez Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Induced pluripotency of somatic cells by defined genetic elements provides a powerful tool that holds the promise of improved in vitro cell models to study disease, test potential new therapies, and to serve as efficient instrument for regenerative medicine. The initial descriptions of cellular reprogramming to induced-pluripotent stem cells (iPSCs) identified the requirement of the expression of three transcription factors, Oct4, Sox2 and Klf4. Previous work in our laboratory showed that in the absence of the cell cycle regulator p27Kip1, mouse embryo fibroblasts could be reprogrammed into iPSCs by the expression of only two factors, Oct4 and Klf4; that is, omitting Sox2. This feature of p27Kip1-null cells was shown to be the result of imperfect transcriptional silencing of Sox2. During the course of this investigation we observed that another protein, p130, a member of the pocket protein family of cell cycle regulators, could also repress transcriptionally Sox2 and we decided to investigate further the role of p130 and the other two related proteins of the same family, RB and p107, on the repression of Sox2 using molecular and cellular techniques. The preliminary results reported in this study indicate that the loss of RB and p130 in MEFs leads to an increase in mRNA levels of Sox2. Strikingly, all three pocket proteins seem to bind to the Sox2-SRR2 enhancer in WT MEFs. We have also studied the repressive and active histone marks on the Sox2-SRR2 enhancer and how they change in cells from pocket proteins KO animals. We will present our most recent data on the specific role of each pocket protein family member (pRb, p107 and p130) on the regulation of Sox2. Palabras clave: cancer / pocket proteins / reprogramming / SOX2 / iPSCs


Título: La hormona metabólica nesfatina-1 previene la apoptosis en cardiomiocitos en cultivo. Identificación de ErbB4 como un posible mediador de nesfatina-1 mediante el análisis de microarrays

Autores: S. Feijoo - Bandin , D. Rodríguez - Penas, V. García - Rua , A.

Mosquera -Leal , E. Roselló - Lletí , M. Portolés , M. Rivera , J. Rubio, JR . González- Juanatey , MF . Lago

Grupo de investigación Células madre en cáncer y envejecimiento

Institución IDIS Expone Sandra Feijóo Bandín Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Introducción: Nesfatina-1 , una nueva hormona metabólica con efecto anorexigénico, es un regulador integral de la homeostasis energética y un coadyuvante de la insulina. Hasta la fecha no se ha demostrado la existencia de un posible receptor funcional para nesfatina-1. En trabajos anteriores, nuestro grupo ha demostrado que la nesfatina-1 se sintetiza y se secreta por los cardiomiocitos, donde también induce la captación de glucosa y la fosforilación de ERK1/2. En el presente estudio hemos investigado sus posibles mecanismos intracelulares de acción y su efecto sobre la apoptosis. Métodos: Se evaluó la expresión del genoma completo de rata utilizando el microarray Gene Rat 1,0 ST (Affymetrix , EE.UU.) para estudiar el transcriptoma de los cardiomiocitos tratados con nesfatina-1 durante 6 horas. Exploramos las interacciones funcionales entre los genes alterados mediante el programa IPA (Ingenuity Pathway Analysis) , el cual se integra con otras bases de datos como Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) metabolic pathways, Gene Ontology Database o GenBank. Se utilizó la técnica de western blot para identificar las posibles vías de señalización de nesfatina-1 en los cardiomiocitos en cultivo. Se utilizó citometría de flujo, ensayos de proliferación celular (MTT) y tinción vital con el colorante Hoechst para determinar el efecto de nesfatina-1 sobre la apoptosis inducida por citarabina ( AraC ) en HL-1 y cardiomiocitos neonatales de rata en cultivo . Resultados : El análisis de microarrays mostró que el tratamiento con nesfatina-1 a una dosis de 1μM durante 6 horas (n = 3) induce la vía de señalización de ErbB4 en cardiomiocitos neonatales de rata, como se identifica usando las bases de datos KEGG vías metabólicas (p : 0.013 ). Sin embargo , la inhibición de ErbB4 usando el agente AG1478 no revierte la fosforilación de ERK1/2 observada previamente tras el tratamiento con nesfatina – 1 mediante la técnica de western blot (n = 6). Por otro lado , el análisis de microarray también mostró que nesfatina- 1 modifica la regulación de las vías de apoptosis , como se identifica mediante la base de datos de ontología de genes (p : 0.036 ). Además, se observó que nesfatina-1 es capaz de proteger a los cardiomiocitos de los efectos pro-apoptóticos del AraC en HL- 1 (n = 8 , p : 0,0148 ) y en cardiomiocitos neonatales de rata (n = 8 , p : 0,0148 ), mientras que el tratamiento con nesfatina-1 a dosis de 10 nM - 1000 nM durante 24 h no modificó los niveles basales de la apoptosis (n = 4) o la proliferación de los cardiomiocitos (n = 6) . Conclusión : El análisis del transcriptoma de cardiomiocitos tratados con nesfatina-1 usando el microarray de genoma completo de rata Gene Rat 1,0 ST (Affymetrix , EE.UU.) ha demostrado que la vía de señalización ErbB4 se induce tras el tratamiento con nesfatina-1 en cardiomiocitos neonatales de rata . Sin embargo , el efecto intracelular de nesfatina-1 en la fosforilación de Erk1/2 es independiente del receptor ErbB4. El análisis de microarray también mostró que nesfatina-1 modifica la regulación de las vías de apoptosis en cardiomiocitos. Por otra parte , hemos demostrado que nesfatina-1 disminuye el efecto apoptótico de AraC en HL - 1 y cardiomiocitos neonatales de rata.

Palabras clave: Nesfatina-1, apoptosis, metabolismo, cardiomiocitos, microarray

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral Tipo A/B

Título: Desarrollo de una técnica de cribado para detección de la enfermedad de Fabry.

Autores: Olalla López-Suarez, Cristobal Colón, José Angel Cocho, José

Mª Fraga, María Luz Couce Grupo de investigación C012. Metabolopatías Institución IDIS Expone Olalla López Suárez Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Tratamientos como la sustitución enzimática hacen de la enfermedad de Fabry una posible candidata a formar parte del cribado neonatal, ya que, de ser eficaces, cumpliría los criterios clásicos de Wilson y Jungner. Además, su prevalencia en la población general podría estar infravalorada. Objetivo: desarrollar una técnica de cribado de Fabry apropiada para los programas de cribado neonatal, y estudiar su incidencia en nuestra población. Método: analizamos la determinación de α-GalA en 14600 muestras de sangre obtenidas en papel secante para el cribado neonatal durante un año mediante fluorometría; punto de corte α-Gal A = 2.0 µmol/L/h (P0.5 = 1.7 µmol/L/h); si la actividad enzimática detectada era baja, las muestras eran procesadas para secuenciación directa bidireccional de los siete exones del gen α-galactosidasa. Resultados: en 105 casos (0.7%) encontramos valores < 2 µmol/L/h, confirmados en segundo análisis. El test genético se realizó en 101 pacientes, encontrando variantes genéticas en 38 (31 varones). Dos de estas variantes están asociadas a Fabry según la literatura: R118C y A143T, observadas en 10 niños (1/1300 nacidos vivos). Considerando positivas sólo estas dos variantes, el valor predictivo positivo sería 10%, con una validez del método de 99.4%, comparable al test de TSH para la detección precoz del hipotiroidismo congénito, y un coste comparable al cribado de la fibrosis quística (IRT y DNA) Conclusión: La enfermedad de Fabry puede ser detectada mediante el cribado neonatal utilizando protocolos similares a los de la fibrosis quística y el hipotiriodismo, con un coste y una fiabilidad parecidos. Palabras clave: α- galactosidasa A, cribado neonatal, enfermedad de Fabry, estudio genético, incidencia


Título: Next-Generation Sequencing data strengthens the involvement of cardiac structural diseases in Sudden Infant Death Syndrome (SIDS)

Autores: M. Santori1, A. Blanco-Verea1, R. Gil1, K. Becker2, P.

Schneider2, A. Carracedo3, M. Brion4

Grupo de investigación Xenética de Enfermidades Cardiovasculares e Oftalmolóxicas – Grupo de Medicina Xenómica

Institución IDIS Expone Montserrat Santori Gómez Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

The Sudden Infant Death Syndrome (SIDS) represents the most prevalent cause of death in children less than 1 year of age in developed countries. Cardiac channelopathies have been found to be responsible of a significant percentage of SIDS cases, but the involvement of other sudden cardiac death-related (SCD) diseases such as Hypertrophic (HCM) or Dilated (DCM) cardiomyopathies as the underlying cause of death in some cases in the absence of a visible phenotype remains currently poorly known. We had previously reported the presence of known HCM-associated mutations in SIDS cases that have now shown to produce defective proteins that disrupt the sarcomeric Ca2+ homeostasis, which may ultimately affect the cardiac contractile properties leading to disease phenotypes. In this study, we used Next-Generation Sequencing (NGS) technologies to identify putative pathogenic genomic variants in 86 arrhythmogenic, structural, and aortic disease-related genes with an increased risk of SCD in a 41 SIDS cases cohort. After the computational analysis, 62 validated variants were categorized as a function of their pathogenic likelihood, according to current recommendations. Among these, we identified 2 missense variants (3.5%) previously associated with HCM and myopathy, respectively, with supporting functional evidence, and after a review of the literature, public and private databases, we categorized these variants as "likely pathogenic", although further studies are necessary to consider them as "pathogenic". In conclusion, NGS has widened the limits of research in this field in a more affordable way, and has reinforced the hypothesis of the involvement of incipient forms of structural cardiac diseases in some SIDS cases. Palabras clave: Next-Generation Sequencing, Sudden Infant Death Syndrome, Sudden Cardiac Death, Hypertrophic Cardiomiopathy, Ca2+ homeostasis (1) Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago, Santiago De Compostela, Spain (2) University of Cologne, Institute of Legal Medicine, Cologne University Hospital, Cologne, Germany (3) University of Santiago de Compostela, Fundacion Pública Galega de Medicina Xenómica, Santiago De Compostela, Spain (4) University Hospital of Santiago de Compostela, Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago, Santiago De Compostela, Spain

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster tipo A

Título: La valoración del daño corporal: fiabilidad del baremo español

Autores: Ordóñez Mayán Lucía, Represas Carlos, Miguens Xoan,

Rodríguez Calvo María Sol, Febrero Bande Manuel, Muñoz Barús José Ignacio

Grupo de investigación

Institución IDIS Expone Lucía Ordóñez Mayán Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Resumo: Como método para cuantificar o calificar el daño corporal después de un traumatismo y los aspectos de importancia jurídico-social, se utilizan baremos o normas. En España es obligatorio el uso de estos baremos para la valoración médico-legal del daño corporal resultante de un accidente de circulación no doloso (Real Decreto Legislativo 8/2004). Material y método: Con el fin de evaluar la fiabilidad del baremo español se ha medido la concordancia, empleando el índice Kappa, entre las valoraciones obtenidas de un mismo paciente por parte de 24 observadores cualificados que han seguido el Real Decreto 8/2004. Las variables valoradas fueron los días de hospitalización, los días impeditivos, los días no impeditivos y las secuelas del paciente, asignando los puntos correspondientes, tanto funcionales como de perjuicio estético, a cada secuela valuada. Resultados: Una vez obtenidos los datos de las 24 valoraciones, se estudió el índice kappa de Fleiss. El resultado obtenido fue 0.37, lo que indica un “fair agreement” de acuerdo con la escala de valoración propuesta por Landis and Koch. Palabras clave: daño corporal, baremo, medicina legal, RDL 8/2004, fiabilidad

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster

Título: Determinación de percentiles de carnitina y acilcarnitinas en prematuros de muy bajo peso.

Autores: Olalla López-Suárez, Paula Sánchez- Pintos, José Angel Cocho,

Daisy Castiñeiras, Cristobal colón, José Mª Fraga, María Luz Couce

Grupo de investigación C012. Metabolopatías Institución IDIS Expone Olalla López Suárez Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Detectar los defectos de la β-oxidación mitocondrial y algunas acidurias orgánicas es posible mediante el perfil de carnitina y acilcarnitinas en muestras de cribado metabólico neonatal, si bien el conocimiento de estos perfiles en prematuros, todavía es muy limitado. Objetivo: establecer la media, mediana y percentiles de normalidad de carnitina libre (CL), carnitina total (CT) y ésteres de carnitina en las dos primeras semanas de vida en prematuros <1500g. Método: Durante 6 años se analizaron mediante espectometría de masas en tándem, 144 muestras de sangre obtenidas en papel secante para cribado metabólico a los 3-5 días de vida y a los 15, de prematuros <1500g (edad gestacional media 30 semanas, peso medio 1210g). Resultados: concentraciones medias al 3-5º día: carnitina libre- CL 29,19 µmol/L, carnitina total- CT 58,09 µmol/L y total de acilcarnitinas -tAC 29,69 µmol/L; a los 15 días:CL 22,22µmol/L, CT 42,65µmol/L y tAC 20,69µmol/L. Se establecieron los percentiles de referencia de carnitina libre y de los ésteres de carnitinas en la población estudiada. Conclusión: El establecimiento de estos percentiles en prematuros contribuye a una valoración más precisa del cribado neonatal en esta población Palabras clave: acidurias orgánicas, β-oxidación mitocondrial, carnitina, cribando neonatal, prematuros


Título: Programmed-cell senescence during embryonic development and in adult tissues

Autores: Da Silva-Álvarez S., Lamas-González O., Ferreirós A.,

Vilas JM., Baz-Martínez M., Cameselle-Teijeiro J, Vidal A, Garcia-González MA., Collado M

Grupo de investigación Stem cells in cancer and aging laboratory

Institución IDIS Expone Sabela Da Silva Álvarez Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Cellular senescence is a protective stable cell cycle arrest often associated with pathological situations, typically cancer and aging. Apart from these two contexts, senescence is increasingly recognized as a response that can be triggered by many other stimuli, but also in normal physiological situations. In this sense, recent evidences proved the existence of a programmed-cell senescence operating during embryo development. Among other structures, the mesonephros, an embryonic kidney, was shown to undergo cell senescence between 12.5-14.5 dpc. This process was mediated by cell cycle inhibitor p21 in a p53-independent manner. Interestingly, autosomal dominant polycystic kidney disease, caused by genetic mutations in PKD genes, produces renal manifestations originated from 12.5 dpc in a mouse model of PKD deficiency. Additionally, PKD proteins can exert cell cycle control through induction of p21 in a p53-independent manner. This raised our interest in exploring the possibility of a defective cell senescence response occurring during embryo development in ADPKD mouse models as the basis of their pathology and we have carefully analyzed this response in embryos from these animals. Finally, we are also interested in exploring the possibility of other examples of programmed-cell senescence in adult unstressed tissues Palabras clave: stress-induced senescence/ programmed-cell senescence/ ischemia/ development/ adult unstressed tissues


Título: Estudio de la influencia genética en las infecciones bacterianas graves de la infancia (proyecto euclids)

Autores: Alberto Gómez Carballa, Lucía Vilanova Trillo, Miriam Cebey López,

Nazareth Martinón Torres, Jacobo Pardo-Seco, Susana Beatriz Reyes, Eider Oñate Vergara, Pilar Azcón González de Aguilar, Andrés Concha Torre, Francisco Giménez Sánchez, Román Payo, César Pérez-Caballero Macarrón, Pablo Rojo, Marisa Navarro, Joaquín Dueñas, Carlos Rodrigo, Cristina Álvarez Álvarez, David Moreno, Eduardo Carreras, Manuel Baca Cots, Olaf Neth, Mª del Carmen Martínez Padilla, Luis Manuel Prieto Tato, Luis Escosa García, Carmen Rodríguez-Tenreiro, Leticia Pías Peleteiro, Natalia Fernández, Pilar Leboráns, Antonio Salas, José María Martinón Sánchez, Federico Martinón-Torres

Grupo de investigación grupo GENVIP - grupo ESIGEM - grupo EUCLIDS Institución IDIS Expone Alberto Gómez Carballa Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Hoy sabemos que existe una evidencia clara de que factores genéticos subyacen tras la susceptibilidad y severidad de las principales enfermedades infecciosas de la infancia. La identificación de los genes implicados en el proceso infeccioso puede constituir una clave en el conocimiento de la patogénesis de la enfermedad, la identificación de individuos susceptibles, el conocimiento de las rutas biológicas implicadas, o la identificación de nuevas dianas terapéuticas y preventivas. El proyecto europeo EUCLIDS (EUCLIDS FP7–GA279185) busca comprender dichas bases genéticas usando como modelo prototípico la enfermedad meningocócica. Para ello se establece una red multicéntrica internacional con capacidad potencial para captar a todos los pacientes con sepsis o infección focal grave, recogiendo muestras seriadas de sangre, suero, plasma, orina y saliva. Esta red clínica cuenta con un total de 143 centros repartidos por 10 países de Europa y África Occidental, y está coordinada por el nodo Español desde nuestro centro. Para su puesta en marcha se remite a la documentación pertinente a todos los comités éticos (CEICs), se generan procedimientos generales de laboratorio (SOPs), formularios clínicos en papel (CRFs) y electrónicos (eCRFs) a través de la creación de una base de datos global “online” para el registro de pacientes y muestras (InForm®). Se prepara a los integrantes de la red para los procedimientos requeridos y se establecen controles de calidad periódicos. A día de hoy el estado de reclutamiento de la red internacional es de algo más de 2000 sujetos. La constitución de grandes consorcios clínicos exige un gran esfuerzo organizativo y de coordinación y en este aspecto, la contribución española al proyecto es esencial para el éxito del mismo. Ofertamos: Acceso a la red clínica más importante del mundo en infección bacteriana grave en niños. Demandamos: Investigadores con experiencia en infecciones pediátricas. Investigadores clínicos que quieran unirse a nuestra red. Palabras clave: Enfermedad bacteriana grave – Enfermedad meningocócica - Sepsis - Susceptibilidad genética


Título: Estudio multicéntrico para la investigación de las enfermedades respiratorias pediátricas en España: Proyecto Gen‐D‐Res

Autores: Miriam Cebey López, Alberto Gómez Carballa, Jacobo Pardo

Seco, Antonio José Justicia Grande, Nazareth Martinón Torres, Isabel Villanueva González, Lucía Vilanova Trillo, Natalia Fernández Pedrós, Lorenzo Redondo Collazo, Carmen Rodríguez-Tenreiro, Antonio Salas Ellacuriaga, José María Martinón Sánchez, Enrique Bernaola Iturbe, Teresa González López,Francisco Giménez Sánchez, Cristina Calvo Rey, Paula Alonso Quintela, Cristina Calvo Monge, María del Carmen Martínez Padilla, Manuel Baca Cots, David Moreno Pérez, Susana Beatriz Reyes, Elena Rodrigo Sáez, Miriam Puente Puig, Carmen Curros Novo, Federico Martinón-Torres, red Gen-D-Res

Grupo de investigación Grupo de Genética, Vacunas, Infecciones y Pediatría (GENVIP)

Institución IDIS Expone Miriam Cebey López Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Introducción: Las infecciones respiratorias agudas (IRA) constituyen la principal causa de mortalidad en lactantes y niños con el virus respiratorio sincitial(VRS) y el virus influenza(VI) a la cabeza. El objetivo fue desarrollar una red nacional multicéntrica para la investigación de las IRA. Métodos: Se realizó un análisis descriptivo de la fundación, configuración y desarrollo de la estructura clínica multicéntrica nacional Gen-D-Res para el estudio de IRAs pediátricas. Resultados: En el año 2010 se creó la red clínica Gen-D-Res (www.gendres.org) para el estudio de la influencia genética y la vitamina D en las infecciones respiratorias, coordinado desde el grupo de Genética, Vacunas, Infecciones y Pediatría(GENVIP). La red está formada por 13 hospitales y más de 50 investigadores multidisciplinares. Entre sus proyectos en ejecución figuran la evaluación de la multi-infección, identificación de factores genéticos que influyen en la susceptibilidad individual, evolución y pronóstico de niños con infección por VRS o VI, desarrollo de una escala clínica integral y evaluación del papel de la vitaminaD. Estos proyectos están financiados en un 70% por convocatorias competitivas (FIS y Plan Galego I+D+i). Se han establecido además colaboraciones con el Imperial Collage-Londres (Prof.M.Levin, Dr.J.Herberg), Micropathology (Dr.C.Fink), Research Institute at Nationwide Children's Hospital-Ohio-USA (Prof.A.Mejías, Prof.O.Ramilo), red ReSVinet(www.resvinet.org) y el consorcio PREPARE. Conclusión: La red Gen-D-Res es la respuesta nacional organizada a la investigación en infecciones respiratorias pediátricas. La constitución y mantenimiento de una red como esta está supeditado a una enorme carga burocrática y carece de ayudas específicas que permitan su competitividad en igualdad de condiciones. A pesar de ello, Gen-D-Res se ha integrado en elmarco de importantes colaboraciones internacionales, y está involucrada en una decena de proyectos competitivos Palabras clave: Enfermedad respiratoria- vitamina D- susceptibilidad genética


Título: Obestatina/gpr39: sistema autocrino/paracrino implicado en la regeneración del músculo esquelético

Autores: J. González-Sánchez1,2; U. Gurriarán Rodríguez3; I. Santos

Zas1,2; M. Bouzo-Lorenzo1,2; T. Cid-Díaz1,2; C.S. Mosteiro1,2, D. Beiroa2,4, R. Nogueiras2,4, J. Señarís, R5. Gallego6, T. Garcia-Caballero6, F.F. Casanueva1,2, Y. Pazos1,2, y J.P. Camiña1,2

Grupo de investigación Grupo IDIS-E25 Endocrinología celular

Institución IDIS Expone Jessica González Sánchez Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

El mantenimiento y la reparación del músculo esquelético se atribuyen a una elaborada interacción entre señales extrínsicas e intrínsicas que regulan el proceso miogénico. En este trabajo demostramos que la obestatina, un péptido de 23 aminoácidos codificado por el gen de la ghrelina, y el receptor GPR39 se expresan en músculo esquelético de rata y se sobreexpresan tras un daño experimental. Para definir sus papeles en regeneración muscular, se usaron células L6E9 para llevar a cabo los ensayos in vitro y tejido muscular esquelético de ratas hembras mantenido bajo infusión subcutánea continua de obestatina para los ensayos in vivo. En células L6E9 diferenciadas, la expresión de preproghrelina y obestatina aumenta durante la miogénesis manteniéndose en la diferenciación terminal. La acción autocrina fue demostrada mediante la neutralización de la obestatina endógena secretada por células L6E9 diferenciadas usando un anticuerpo específico anti-obestatina. Los experimentos de silenciado de preproghrelina confirman la contribución de la obestatina al programa miogénico. Además, el silenciado de GPR39 redujo la acción de la obestatina y la diferenciación miogénica. Se demostró que la estimulación exógena con obestatina también regula la migración de mioblastos y la proliferación. Además, la adición de obestatina al medio de diferenciación incrementó la diferenciación miogénica de células L6E9. La relevancia de las acciones de la obestatina fue confirmada in vivo por la sobreexpresión de Pax-7, MyoD, Myf5, Myf6, miogenina, y myosin heavy chain (MHC). Estos datos demuestran que el sistema obestatina/GPR39 es parte del programa miogénico, actuando como una señal autocrina/paracrina reguladora de la regeneración del músculo esquelético. Palabras clave: Biología celular, diferenciación celular, músculo, regeneración muscular, miogénesis 1Área de Endocrinología Molecular y Celular, Instituto de Investigación Sanitaria (IDIS), Complejo Hospitalario Universitario de Santiago (CHUS), SERGAS; Santiago de Compostela, España. 2CIBER Fisiopatología de la Obesidad y Nutrición (CB06/03), Instituto de Salud Carlos III. 3Faculty of Medicine, University of Ottawa, Ottawa, Canada. Universidad de Santiago de Compostela. Santiago de Compostela, España. 4Departamento de Fisiología. Universidad de Santiago de Compostela. Santiago de Compostela, España. 5Servicio de Cirugía Ortopédica y Traumatología, CHUS, SERGAS; Santiago de Compostela, España. 6Departamento de Ciencias Morfológicas. Universidad de Santiago de Compostela. Santiago de Compostela, España


Título: Estudo dos requerimentos estruturais necesarios para a interacción da obestatina co seu receptor gpr39

Autores: Begoña O. Alén,1 Carlos S. Mosteiro,1 Lara Estévez Pérez, 1 Saúl

Leal López,1 Agustín Sánchez Temprano,1 Felipe F. Casanueva,1 Lidia Nieto,2 Manuel Martín Pastor,3 Jesús P. Camiña,1 Yolanda Pazos.1

Grupo de investigación Grupo IDISE24: Bioquímica Estrutural da Patoloxía Endocrinolóxica, dirixido pola Dra. Yolanda Pazos Randulfe

Institución IDIS Expone Begoña Otero Alén Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

O obxectivo do traballo foi o estudo da conformación bioactiva da obestatina na interacción co seu receptor mediante RMN utilizando células vivas enriquecidas co GPR39. Transfectáronse as células HEK293 co receptor GPR39 de forma transitoria e leváronse a cabo experimentos 2D 1H TOCSY, ROESY e/ou NOESY en auga, PBS, SDS e en presenza de células vivas HEK-WT e HEK-GPR39. Calculáronse os índices (CSI) e as perturbacións de desprazamentos químicos (CSP). A obestatina adquire distintas conformacións dependendo do medio no que se atope. En auga, preséntase coma un péptido altamente estruturado. En PBS, a presenza do ión fosfato induce cambios nos desprazamentos químicos, indicativos de algún tipo de reorganización estrutural. En presenza de SDS, entorno micelar que imita á membrana, prodúcese unha reestruturación do péptido que leva á formación de zonas pequenas de hélice 310 e hélice alfa. En presenza de células wild type e transfectadas, mantense a zona de hélice alfa C-terminal. Obsérvase unha diferenza crítica nos datos entre HEK-WT e HEK-GPR39: a prolina 4 da obestatina presenta unha diferenza considerable entre os dous tipos celulares, o que podería implicar unha isomerización E/Z do residuo. Estes datos indican que, aínda que o SDS é unha ferramenta plausible para o estudo das interaccións ligando-receptor, o correcto estudo debe facerse nun entorno fisiolóxico. A presenza de células transfectadas co receptor imita de forma fidedigna estas condicións. Os datos obtidos neste traballo indican que o GPR39 podería provocar unha posible isomerización da Pro4 da obestatina, comportándose este receptor como unha prolil-cis-trans isomerasa. Palabras clave: obestatina, GPR39, RMN, isomerización, prolina 1 Área de Endocrinoloxía Molecular e Celular, Instituto de Investigación Sanitaria (IDIS), Complexo Hospitalario Universitario de Santiago (CHUS), SERGAS, Santiago de Compostela. CIBER Fisiopatología de la Obesidad y Nutrición (CB06/03), Instituto de Salud Carlos III. 2 Laboratory of Chemical Biology, Departament of Biomedical Engineering, Eindhoven University of Technology, Eindhoven (The Netherlands). 3 Unidade de Resonancia Magnética, RIAIDT, Edif. CACTUS, Campus Vida, Universidade de Santiago de Compo


Título: Impaired adipogenesis and insulin resistance in epicardial fat-mesenchymal cells from patients with cardiovascular disease.

Autores: Ángel Fernández-Trasancos, Rubén Fandiño-Vaquero,

Rosa María Agra, Ángel Luis Fernández, Juan E. Viñuela,

José Ramón González-Juanatey, Sonia Eiras

Grupo de investigación Cardioloxía

Institución IDIS Expone Ángel Fernández Trasancos


RESUMEN

Resumo Objective: The thickness of epicardial adipose tissue (EAT), which is an inflammatory source for coronary artery disease (CAD), correlates with insulin resistance. One trigger factor is impaired adipogenesis. Here, our aim was to clarify the underlying mechanisms of insulin resistance on EAT-mesenchymal cells (MC). Subjects and Methods: EAT and subcutaneous adipose tissue (SAT) were collected from 19 patients who were undergoing heart surgery. Their dedifferentiated adipocytes (DAs) and/or MCs were cultured. After the induction of adipogenesis or stimulation with insulin, the expression of adipokines was analyzed using real-time polymerase chain reaction (PCR). Colorimetric assays were performed to measure glucose levels, proliferation rate and proteins modifications were detected via the proteomic approach and western blot. Results: Our results showed lower adipogenic ability in EAT-MCs than in SAT-MCs. Maximum adiponectin levels were reached within 28-35 days of exposure to adipogenic inducers. Moreover, the adipogenesis profile in EAT-MCs was dependent on the patients’ clinical characteristics. The low adipogenic ability of EAT-MCs might be associated with an insulin-resistant state because chronic insulin treatment reduced the inflammatory cytokine expression levels, improved the glucose consumption, and increased the posttranslational modifications of the glycolytic enzyme phosphoglycerate mutase 1 (PGAM1). Conclusion: We found lower adipogenic ability in EAT-MCs than in SAT-MCs. This lower ability level was dependent on gender and the presence of diabetes, obesity, and CAD. Lower adipogenesis ability and higher insulin resistance in EAT-MCs than in SAT-MCs might shed light on the association between EAT dysfunction and patients with cardiovascular disease. Palabras clave: epicardial, diabetes, adipogenesis, mesenchymal, cardiovascular


Título: Exome array study for the identification of the genetic factors involved in the development of the bicuspid aortic valve and the sometimes concomitant aortic dilation

Autores: Marina Gago, María Brión, Amelia Carro, Francisco Calvo,

Pastora Gallego, Daniel Saura, MI Rodríguez, David García-Dorado, Ángel Carracedo, Arturo Evangelista

Grupo de investigación Xenética de Enfermidades Cardiovasculares y Oftalmolóxicas

Institución IDIS Expone Marina Gago


RESUMEN

Bicuspid aortic valve disease is the most common adult cardiac congenital malformation, affecting 1-2% of general population. It’s considered a complex and genetic heterogenic disease with variable expression; to date, the genetic factors implicated in its pathogenesis are still unknown. The objective of this exome-wide association study was to identify these genetic factors in a Spanish cohort of 570 cases and 484 controls. Focusing attention on codifying regions, Axiom Exome Array (Affymetrix) was chosen for genotyping almost 300,000 variants (many of them rare) per sample. All the results obtained were submitted to a strict per-individual and per-marker quality control using PLINK, GCTA and R. Association analysis is now being performed based on every single marker or on an aggregated entity: gene or pathway. Moreover, not only the whole cohort is being considered; it’s also being divided in different subgroups of cases based on critical clinical characteristics such as the morphology of the bicuspid aortic valve or the presence of concomitant aortic dilatation. The analysis toolsets used to complete every analysis are PLINK and R (GenABEL and skatMeta packages) and all results are being corrected by sex, population stratification and age. Variable expression and genetic heterogeneity of bicuspid aortic valve disease make it difficult to identify the causal genetic variants, suspected to be rare and to collaborate with trigger environmental factors. This new array focused on codifying and rare variants suppose a new approach for the identification of these putative pathogenic rare variants related with the development of this complex disease. Palabras clave: exome-array study, bicuspid aortic valve, aortic dilatation


Título: Interacción do receptor GPR39 cos receptores tirosina quinase no cancro gástrico

Autores: Saúl Leal López, Begoña Otero Alén, Carlos Seoane Mosteiro,

Agustín Sánchez Temprano, Lara Estévez Pérez, Tomás García-Caballero, Rosalía Gallego, Felipe F. Casanueva, Xesús Casabiell, Jesús P. Camiña, Yolanda Pazos

Grupo de investigación IDIS E024 Bioquímica Estrutural da Patoloxía Endocrinolóxica

Institución IDIS Expone Saúl Leal López


RESUMEN

Ademais do coñecido papel da obestatina na regulación da proliferación celular no cancro gástrico, este péptido engádese ao grupo de factores reguladores de MMPs, que están implicados en doenzas inflamatorias e cancro. A transactivación de EGFR inducida pola obestatina podería ser un mecanismo clave polo cal as MMPs regulan estas doenzas. O obxectivo deste traballo foi a identificación dos RTKs e MMPs implicados na sinalización do GPR39 dependente de obestatina e a súa implicación no desenvolvemento tumoral gástrico. Os resultados obtidos do cribado dos RTKs en dúas liñas celulares de cancro gástrico (AGS e KATO-III) en resposta á obestatina corroboraron a súa implicación na proliferación, supervivencia, diferenciación celular, migración ou apoptose. Entre as metaloproteases, ADAMTS1, calicreína 7 e MMP-7 foron as máis sobreexpresadas. Están implicadas na plasticidade, malignidade, invasión e metástase tumoral. Unha diminución na expresión de CSK provocou un aumento na fosforilación da maioría dos receptores avaliados. Estes receptores están implicados na vía de Src, que xoga un importante papel na proliferación, diferenciación e supervivencia celular, desenvolvemento embrionario, adhesión celular e procesos de migración. As proteases máis sobreexpresadas (fracción secretoma) participan na degradación de compoñentes da matriz extracelular que permite un fenotipo invasivo favorecendo á metástase. Estes datos confirman o papel de Src na ruta de activación obestatina/GPR39 e engádense elementos na vía de activación dependente das β-arrestinas, nas que as MMPs, EGFR e outros RTKs actúan amplificando a resposta da obestatina. Nos adenocarcinomas gástricos humanos, as proteases máis expresadas asócianse con procesos oncoxénicos, especialmente no cancro gástrico. Palabras clave: obestatina, GPR39, cancro gástrico, RTK, MMP


Título: Regulación de la producción gástrica de nesfatina-1 por el sistema cannabinoide endógeno

Autores: Laura Prado Fernández, Silvia Barja Fernández, Lucia

López Senin, Cecilia Castelao Taboada, Cintia Folgueira Cobos, Sulay Tovar Carro, Felipe Casanueva Freijo, Luisa Maria Seoane Camino

Grupo de investigación Fisiopatología endocrina

Institución IDIS Expone Laura Prado Fernández


RESUMEN

La implicación del sistema cannabinoide endógeno en la modulación del balance energético ha sido ampliamente estudiada en los últimos años. Datos previos del grupo han demostrado la presencia del receptor cannabinoide CB1 en tejido gástrico y su interacción con el sistema de la ghrelina a través de la vía de señalización mTOR/S6k1. La nesfatina-1 es un péptido anorexigénico expresado en las mismas células productoras de ghrelina. Por tanto, el objetivo del presente estudio es determinar si la nesfatina-1 gástrica también forma parte de este sistema regulador de la homeostasis energética. Modelos animales: Ratas Sprague-Dawley macho en ayuno con bloqueo farmacológico periférico del receptor CB1 (ANT) y el respectivo control (C). Modelos ex vivo: Sistema de explantes de tejido gástrico. Técnicas experimentales: Western Blot, RT-PCR y ELISA para la medida de los niveles de nesfastina-1 (proteína, ARNm y secretoma) en mucosa gástrica, secretoma y plasma. Resultados: El bloqueo farmacológico de los receptores CB1 por la inyección de un antagonista induce un incremento en la secreción gástrica de nesfatina-1 (C: 100 ± 8,32 vs ANT: 131,30 ± 11,66; P<0,05). Asimismo, el bloqueo de los receptores CB1 por dicho antagonista incrementa la expresión de mTOR en la mucosa gástrica (C: 100 ± 8,86 vs 166,72 ± 10,66; P<0,05), indicando que la vía de señalización intracelular mTOR/S6k1 está activada. Conclusión: A nivel gástrico, el sistema cannabinoide endógeno modula la producción de nesfatina-1 a través de la vía de señalización intracelular mTOR/S6k1 con el fin de regular el balance energético. Palabras clave: Nesfatina-1, sistema cannabinoide endógeno, estómago, receptor CB1, mTOR


Título: A multimarker panel for Circulating Tumor Cells detection predicts patient outcome and therapy response in metastatic colorectal cancer.

Autores: Jorge Barbazán1,#, Laura Muinelo-Romay1, María Vieito1, Sonia

Candamio 1, Antonio Díaz-López2, Amparo Cano2, Antonio Gómez-Tato3, María de los Ángeles Casares de Cal3, Miguel Abal1,* & Rafael López-López1

Grupo de investigación Translational Medical Oncology Laboratory

Institución IDIS Expone Jorge Bazan Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Circulating Tumor Cells (CTCs), proposed as major players in cancer dissemination, have demonstrated clinical prognostic significance in several cancer types. However, their predictive value remains unclear. Here we evaluated the clinical utility of six CTC markers (tissue specific and Epithelial to Mesenchymal Transition transcripts) both as prognostic and predictive tools in metastatic Colorectal Cancer (mCRC) patients. CTCs were immunoisolated from blood in 50 mCRC patients at baseline and at four and sixteen weeks after treatment onset. Expression levels of GAPDH, VIL1, CLU, TIMP1, LOXL3 and ZEB2 were determined by qPCR and normalized to the unspecific cell isolation marker CD45. At baseline, median Progression Free Survival (PFS) and Overall Survival (OS) for patients with high CTC-markers were 6,3 and 12,7 months, respectively, versus 12,7 and 24,2 for patients with low CTC-markers (PFS; p=0,0003; OS; p=0,044). Concerning response to therapy, PFS and OS for patients with increased CTC-markers along treatment were respectively 6,6 and 13,1 months, compared with 12,7 and 24,3 for patients presenting CTC-markers reduction (PFS; p=0,004; OS; p=0,007). Of note, CTC-markers identified therapy-refractory patients not detected by standard image techniques. Patients with increased CTC-markers along treatment, but classified as responders by computed tomography, showed significantly shorter survival times (PFS: 7,8 vs 13,2; OS: 14,4 vs 24,4; months). In conclusion, we have generated a CTC-marker panel for prognosis evaluation and the identification of patients benefiting or not from therapy in mCRC. Our methodology efficiently classified patients earlier than routine computed tomography and from a minimally invasive liquid biopsy. Palabras clave: Circulating Tumor Cells, Epithelial to Mesenchymal Transition, Metastatic Colorectal Cancer, Patient outcome, Therapy response Translational Medical Oncology Laboratory. Health Research Institute of Santiago (IDIS); SERGAS. Santiago de Compostela, Spain. 2 Departament of Biochemistry, Universidad Autónoma de Madrid (UAM), Instituto de Investigaciones Biomédicas "Alberto Sols" (CSIC-UAM), IdiPAZ, Madrid, Spain. 3 School of Mathematics. University of Santiago de Compostela (USC) (Campus Vida). Santiago de Compostela, Spain

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Análise comparativo da estrutura poboacional en variantes raras

e comúns en poboación española Autores: Rey-Gonzalez,Danel; Cruz,Raquel; Brión, María; Quintela, Inés;

Riancho, Jose Antonio; Carracedo, Ángel Grupo de investigación Xenética (IDIS) Institución IDIS Expone Rey-Gonzalez, Danel Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Tradicionalmente nos estudos de asociación analízase a subestrutura poboacional utilizando SNPs comúns. Varios traballos recentes abordan a existencia de diferentes patróns de estratificación para as variantes comúns e raras, implicando a necesidade de técnicas de corrección específicas. Ademais, o estudo de rexións xenómicas codificantes -enriquecidas en variantes raras putativamente funcionais e probables candidatos a explicar a herdabilidade perdida en enfermidades complexas- está cobrando importancia. Neste estudo investigouse a estrutura poboacional a escala local analizando preto de 250 individuos de cinco poboacións españolas. Xenotipáronse máis de 300000 SNPs codificantes do Axiom® Exome 319 Genotyping Array de Affymetrix co obxectivo de observar se existen diferentes patróns de estratificación en función da frecuencia do alelo menor, clasificando os marcadores en catro categorías: SNPs (> 5%), SNVs (5%- 1%), Variantes de Baixa Frecuencia (1%-0.6%) e Variantes Raras (< 0.6%). A caracterización da variabilidade xenética en cada categoría realizouse con análise de compoñentes principais (eigenstrat) e DAPC (discriminant analysis of principal components). Como a porcentaxe de varianza explicada polos sucesivos PCs diminúe moi gradualmente, para comparar os patróns analizamos a correlación entre cada PC e os 10 primeiros PCs de cada unha das outras categorías. O patrón obtido coas variantes raras semella menos correlacionado co resto e amosa maior eficiencia na diferenciación das poboacións con DAPC. Sen embargo parte da súa variabilidade pode vir determinada pola baixa N do estudo. En xeral, os patróns de estratificación obtidos son bastante homoxéneos, e a variabilidade caracterizada con SNPs, SNVs ou variantes de baixa frecuencia está altamente correlacionada. Palabras clave: Variantes raras; Exome array; Análises multivariantes; Estrutura poboacional

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Quantification and molecular characterization of circulating

tumor cells in in castration resistant prostate cancer patients under Docetaxel treatment

Autores: Laura Muinelo-Romay, Alicia Abalo, Helena Casas, Maria

Vieito, Urbano Anido, Miguel Abal, Luis León, Rafael López López

Grupo de investigación Plataforma de análisis de Biopsia Líquida, Oncología Médica Traslacional

Institución IDIS Expone Laura Muinelo Romay Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Prostate cancer (PC) represents one of the most important medical problems for males, being the second major cause of cancer related deaths. In last years, significant interest has focused on examining circulating tumor cells (CTCs) as prognostic or predictive biomarkers in several malignancies, including prostate cancer. We investigated whether baseline CTCs and their relative changes during treatment were prognostic for overall (OS) and progression-free survival (PFS) in castration resistant prostate cancer (CRPC) patients under Docetaxel treatment. We also characterize the molecular changes of the CTC population associated with the progression of the disease. For that, 30 CRPC patients were enrolled in the study and their CTCs analysed using both CellSearch technology and a RT-PCR based approach at the Liquid Biopsy Analysis Unit (IDIS). We identified new CTC markers with high value for the CTC monitoring within the treatment and a list of potential genes candidate to be involved in Docetaxel resistance. We also found a statistical correlation between CTCs levels at baseline and patients outcomes. In conclusion, our study provides evidence that isolation and characterization of CTCs could have clinical impact in the prognostic and follow-up of patients with advanced prostate cancer. Palabras clave: liquid biopsy, circulating tumor cells (CTC), prostate cancer (PC), tumour marker

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral Tipo B Título: Plataforma de análisis de biopsia líquida Autores: Laura Muinelo-Romay, Alicia Abalo, Miguel Abal, Rafael López

López Grupo de investigación Plataforma de análisis de Biopsia Líquida, Oncología Médica

Traslacional Institución IDIS Expone Laura Muinelo Romay Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

La detección y caracterización molecular de las células tumorales circulantes (CTCs) se ha convertido en los últimos años en una de las líneas de trabajo más activas y prometedoras de la investigación oncológica traslacional. Los avances en el estudio de esta subpoblación tumoral junto con el DNA tumoral circulante (ctDNA) han proporcionado a los clínicos nuevas herramientas para el diagnóstico, pronóstico y monitorización de distintos tipos de tumores. Frente a las limitaciones del estudio molecular de las biopsias de tejido, el análisis de los componentes tumorales presentes en la sangre proporciona la posibilidad de evaluar la enfermedad a ‘tiempo real’ y de forma no invasiva. Esto supone un importante avance para conseguir aplicar estrategias terapéuticas más eficaces y personalizadas en los pacientes oncológicos. En la Plataforma de análisis de biopsia líquida del IDIS se dispone de la única tecnología para el análisis de CTCs aprobada en la actualidad para uso clínico (CellSearch). Con esta tecnología la plataforma participa en distintos ensayos clínicos multi-céntricos y estudios de investigación básica en una gran variedad de tumores. La plataforma también participa en el desarrollo pre-clínico de nuevos sistemas diseñados para el análisis de CTCs. Todo ello con el objetivo final de proporcionar a los clínicos una herramienta de gran valor para el manejo de las terapias y a los investigadores básicos la posibilidad de comprender mejor los eventos moleculares que son claves para la diseminación tumoral. Palabras clave: biopsia líquida, célula tumoral circulante (CTC), marcador tumoral, terapia personalizada, CellSearch

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: A new PNPLA1 mutation in a Spanish family with autosomal

recessive congenital ichthyosis Autores: L. Fachal, L. Rodríguez-Pazos, M. Ginarte, Á. Carracedo, J.

Toribio, A. Vega Grupo de investigación IDIS, E17, Genética del cáncer Institución IDIS Expone A. Vega Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

PNPLA1 has recently been identified as one of the eight genes (ALOX12B, ALOXE3, CERS3, CYP4F22, NIPAL4 or TGM1) in which mutations can cause autosomal recessive congenital ichthyosis (ARCI), although only two families harbouring such mutations (both of North African origin) have been identified. In a study of ALOX12B, ALOXE3, CYP4F22, NIPAL4 and TGM1 performed in 17 ARCI families in Galicia (NW Spain), about 80% of these families had mutant TGM1 or ALOXE3, while no mutations of NIPAL4, CYP4F22 or ALOX12B were found. In 2012 a new locus of ARCI mutations, in PNPLA1, was published and we accordingly investigated the prevalence of PNPLA1 mutations in our series of 18 ARCI families, which constitute 95% of the 19 Galician ARCI families identified to date. Four Galician families known to have no deleterious mutations of ALOX12B, ALOXE3, CYP4F22, NIPAL4 or TGM1 were studied. The potential pathogenic effect of the variant identified was evaluated using the programs Align-GVGD, MAPP, PolyPhen and SIFT. One consanguineous family was found to harbour the missense substitution c.100G>A (p.Ala34Thr), located in the catalytic domain of PNPLA1. Cosegregation analysis indicating the deleterious nature of this variant was supported by the bioinformatic predictions. We have identified the third known ARCI family with PNPLA1 mutations, and the first of European ancestry. Although mutant PNPLA1 was found in about 6% of our Galician ARCI series, the small number of Galician ARCI families prevents us from generalizing this figure. This work was funded by a grant from the Ramon Areces Foundation awarded to AV. Palabras clave: PNPLA1 ;Ichthyosis ;autosomal recessive congenital ichthyosis, ARCI

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: La prolongación de la lactancia materna modifica distintos

factores termogénicos en el tejido adiposo pardo protegiendo frente al desarrollo de obesidad inducida por dieta en la edad adulta.

Autores: Silvia Barja-Fernández, Lucía López Senin, Cintia

Folgueira Cobos, Cecilia Castelao Taboada, Felipe F. Casanueva, Rosaura Leis, Luisa M Seoane

Grupo de investigación Fisiopatología endocrina Institución IDIS Expone Silvia Barja Fernández Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

La obesidad, con elevada prevalencia en edad pediátrica, constituye una epidemia con inicio a edades cada vez más tempranas. La nutrición posnatal es uno de los principales factores de riesgo en el desarrollo de esta patología [1]. Estudios epidemiológicos defienden el papel protector de la lactancia materna [2], sin embargo no existen datos conclusivos ni se han descrito mecanismos asociados a dicho fenómeno. Objetivo: Determinar si la prolongación de la lactancia constituye un factor protector frente a obesidad en edad adulta, favoreciendo la termogénesis en tejido adiposo pardo. Modelos animales: Ratas Sprague-Dawley macho con destete normal (C) o lactancia prolongada (DW), alimentadas con una dieta estándar (SD) o una dieta alta en grasa (HF) tras el destete hasta la edad adulta. Técnicas experimentales: Monitorización de la homeostasis energética y estudio de señales plasmáticas relacionadas con la misma. RT-PCR y Western Blot para el estudio de diferentes factores termogénicos en tejido adiposo pardo. Resultados: La prolongación del periodo de lactancia redujo el incremento en composición grasa corporal asociado a dieta alta en grasa, así como los elevados niveles circulantes de triglicéridos, colesterol, ácidos grasos libres y leptina en la edad adulta. En tejido adiposo pardo el retraso en el destete alteró la expresión de PGC1α, UCP-1 y FGF-21, sugiriendo que los individuos con lactancia prolongada presentan una mayor termogénesis. Conclusión: La lactancia prolongada ejerce un efecto protector frente al desarrollo de obesidad en edad adulta en respuesta a dieta alta en grasa, actuando sobre la termogénesis en tejido adiposo pardo. [1] Langley-Evans S.C. J Hum Nutr Diet, (2014). [2] A. Singhal, J. Lanigan. Obes Rev, (2007). Palabras clave: lactancia, obesidad, tejido adiposo pardo, termogénesis, metabolismo

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: La nueva adipocitoquina chemerina induce apoptosis en

cardiomiocitos en cultivo y su expresión se ve afectada por el sexo y enfermedades cardiovasculares en corazón humano

Autores: D. Rodríguez-Penas, S. Feijóo-Bandín, V. García-Rúa, A.

Mosquera-Leal, E. Roselló-Lleti, M. Portolés, M. Rivera, J. Rubio, JR. González-Juanatey, MF. Lago

Grupo de investigación Cardioloxía Celular e Molecular-Laboratorio 7 Institución IDIS Expone D. Rodríguez-Penas Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Objetivo:La adipocitoquina chemerina tiene un importante papel en el metabolismo y la inflamación. En trabajos anteriores hemos demostrado que la chemerina es sintetizada por cardiomiocitos y su expresión está regulada por mediadores inflamatorios y anti-inflamatorios, y por la insulina. Nuestro objetivo ha sido investigar el posible efecto de la chemerina sobre la apoptosis en cardiomiocitos y su regulación a nivel cardíaco por diferentes fármacos y patologías. Métodos:Se utilizó la tinción vital de Hoechst y análisis de ciclo celular mediante citometría de flujo para determinar el efecto de la chemerina sobre la apoptosis en la línea cardiomiocitaria de ratón HL-1 y en cardiomiocitos neonatales de rata. Mediante PCR en tiempo real se cuantificaron los niveles de ARNm de chemerina en apéndice auricular derecho procedentes de 246 pacientes sometidos a cirugía valvular o cirugía de revascularización coronaria. Resultados: El tratamiento con chemerina 0,1nM-100nM durante 48 h tuvo un efecto significativo en la inducción de la apoptosis de manera dosis dependiente, con un efecto máximo a 100nM (p=0,0152; incremento frente al control=2,5) en cardiomiocitos HL-1 y cardiomiocitos neonatales de rata (n= 6). Estos resultados fueron confirmados mediante el análisis del ciclo celular por citometría de flujo. Los niveles en aurícula de ARNm de chemerina (mediana, [rango intercuartílico], n) son significativamente mayores en mujeres (0.031, [0,023; 0,046], n=81) que en hombres (0,026 [0,019; 0,034], n=165) (p=0,006). Por otra parte, se observó que los niveles de ARNm de chemerina estaban correlacionados positivamente con el peso (ρ=0,372, p=0,043, n= 30) en pacientes con infarto agudo de miocardio previo. Conclusiones:En el presente estudio hemos demostrado que el tratamiento con chemerina aumenta los niveles de apoptosis en HL -1 y en cardiomiocitos neonatales de rata. Se encontró que los niveles de ARNm de chemerina en aurícula eran significativamente mayores en las mujeres que en los hombres, lo que sugiere una relación sexo-dependiente en los niveles de chemerina cardíacos. También hemos observado que los niveles de ARNm de chemerina se correlacionan positivamente con el peso en pacientes con infarto de miocardio previo; lo que sugiere una posible relación entre la chemerina y enfermedad cardiovascular Palabras clave: chemerina, apoptosis, cardiomiocitos, corazón, inflamación

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Título: Expansion of the spectrum of TSFM-related disorders: a new

phenotype associated with a novel mutation in the TSFM gene Autores: Fernández-Marmiesse A., Felgueroso Juliana B., Montoya J.,

Fraga JM, Couce ML Grupo de investigación Metabolopatías (C012) Institución IDIS Expone Dra. Couce Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Human nuclear-encoded TSFM gene encodes a mitochondrial translation elongation factor. Mutations in this gene have been associated with combined oxidative phosphorylation deficiency-3 syndrome (COXPD3). A unique missense mutation in the TSFM gene (p.Arg312Trp) has been identified so far in 5 newborns with extremely severe clinical course: hypotonia, lactic acidosis with encephalomyopathy or hypertrophic cardiomyopathy, and death within two months of life. Here, we describe a twenty years old patient with slowly progressive ataxia starting at age 6, decreased visual acuity, poor school performance and hypertrophic cardiomyopathy. A comprehensive clinical examination including neuroimaging, cardiological and ophthalmological studies, and extensive biochemical tests including muscular biopsy were carried out. Finally, a mitochondrial disease was the main diagnosis suspicion. Targeted exome sequencing of 150 genes associated with oxidative phosphorylation defect was performed, using in-solution hibridization as enrichment method and Miseq (Illumina) as sequencing platform. Such analysis revealed a novel p.Cys240Ser homozygous mutation in the TSFM gene. Functional studies of respiratory chain complex were carried out showing an important decrease in Complex I, IV and V. This case expands the phenotypic spectrum of TSFM-related disorders and illustrates the enormous potential of targeted NGS assays to solve difficult diagnosis cases. Palabras clave: mitochondrial diseases, next generation sequencing panels, diagnosis

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Título: Diagnóstico de enfermedades neurometabólicas mediante

herramientas basadas en tecnología de secuenciación masiva y bioinformática: un año de experiencia

Autores: Fernández-Marmiesse A., Gouveia S, Otero I, Cocho JA,

Castiñeiras DE, Fraga JM, Couce ML Grupo de investigación Metabolopatías (C012) Institución IDIS Expone Sofía Gouveia / Dra. Castiñeiras Correo electrónico [email protected]/ [email protected]

RESUMEN

Para la Unidad de Diagnóstico y Tratamiento de Enfermedades Congénitas del Metabolismo la investigación genómica en enfermedades metabólicas es fundamental para: 1) el diagnóstico, pronóstico y tratamiento de estas enfermedades, 2) la aplicación de tratamientos preventivos y/o su inclusión en ensayos clínicos de nuevos fármacos, 3) proveer, en un plazo de tiempo razonable, un buen consejo genético familiar, y 4) evitar los calvarios diagnósticos. Las nuevas tecnologías de secuenciación nos obligan a dar el salto hacia una nueva medicina y a un nuevo paradigma en el que las herramientas genómicas serán esenciales en el proceso diagnóstico del paciente y, en muchos casos para el diagnóstico precoz de enfermedades que solo con el tiempo podrían ser diagnosticadas mediante los signos y síntomas clínicos que desarrollase el paciente. En los últimos años, ha habido un crecimiento exponencial en el conocimiento de las bases genéticas de las enfermedades. Este incremento exponencial del conocimiento constituye actualmente uno de los mayores desafíos para los sistemas sanitarios y para los facultativos para con sus pacientes. Por este motivo, la construcción de competencias propias es fundamental, sobre todo en una unidad de referencia, y se sustenta en proyectos ya desarrollados (diagnostico de enfermedades lisosomales, lipodistrofias y diabetes monogénicas mediante secuenciación masiva). Desde octubre de 2012 hemos desarrollado e implementado en nuestra Unidad un total de 12 paneles génicos basados en tecnología de secuenciación masiva enfocados principalmente al diagnóstico de enfermedades metabólicas y neuropediátricas. Hasta el momento hemos analizado un total de 150 de muestras de pacientes provenientes de hasta 15 hospitales diferentes del país alcanzando un porcentaje de diagnósticos de entre un 40-45%. Mediante esta comunicación pretendemos relatar los resultados obtenidos con la aplicación de estos paneles al diagnóstico pediátrico, así como los retos a los que debemos enfrentarnos para conseguir aumentar la rapidez, eficacia y seguridad de estas herramientas diagnósticas Palabras clave: enfermedades metabólicas y neuropediátricas, secuenciación masiva

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Título: CARACTERIZACIÓN DE LA PROTEÍNA MUSCLIN/OSTEOCRIN

COMO NUEVA SEÑAL PERIFÉRICA SECRETADA POR EL TEJIDO ADIPOSO

Autores: Perez-Sotelo D 1; Larrosa-García M 1; Roca-Rivada A 1,3; Castelao C

1,2,3; Lucia L Senin 2; Baltar J 4; Crujeiras AB 3,5; Seoane LM 2,3; Casanueva FF 3,5; Pardo M 1,3

Grupo de investigación Grupo Obesidómica (IDIS-E23) Institución IDIS Expone Diego Pérez Sotelo Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Introducción: La musclin se ha descrito como una proteína secretada por el músculo capaz de inducir la resistencia a insulina in vitro a través de la inhibición de Akt/PKB en el músculo esquelético de rata; así se ha propuesto su implicación en el metabolismo de la glucosa y en la sensibilidad a insulina en el tejido muscular. Estudios previos de nuestro grupo que demuestran la secreción de musclin por el tejido adiposo blanco nos llevan a postular que la musclin secretada por este tejido podría estar implicada en la resistencia a insulina en el propio tejido graso y probablemente en el músculo. Métodos: Se caracterizó la secreción de musclin (inmunodetección), proteína intracelular (inmunodetección) y ARNm (RT-PCR) en el tejido adiposo visceral (TAV) y subcutáneo (TAS) procedente de diferentes modelos animales fisiológicos (ayuno y ejercicio) y patológicos (obesidad y anorexia). Resultados: Se confirma la expresión del ARNm de musclin en el TAV y TAS; esta expresión se eleva significativamente con el ejercicio en ambos casos, mientras que disminuye en los animales anoréxicos. Los estudios de secreción en TAV confirman la disminución de musclin con el ayuno y en animales anoréxicos, mientras que se observa un aumento significativo en el TAV obeso. La musclin procedente de TAS se ve disminuida también en animales anoréxicos, pero parece no estar alterada tras el ayuno o en la obesidad. Conclusiones: La musclin secretada por el tejido adiposo, y en concreto por el visceral, podría participar en la resistencia a insulina propia de la obesidad. Palabras clave: musculin/osteocrin, tejido adiposo, obesidad, diabetes tipo II 1 Grupo Obesidómica, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago de Compostela (IDIS), Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain. 2 Grupo Fisiopatología Endocrina, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago de Compostela (IDIS), Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain. 3 CIBER Fisiopatología Obesidad y Nutrición (CB06/03), Instituto de Salud Carlos III, Santiago de Compostela, Spain. 4 Servicio de Cirugía General, Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain. 5 Laboratorio de Endocrinología Molecular y Celular, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago (IDIS), Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Asociación entre la adiposidad y la expresión de MYC y PTEN

en tejido mamario de ratas con obesidad inducida por dieta Autores: Begoña Cabia*, Maria Amil, Sara Andrade, Marcos C.

Carreira, Felipe F. Casanueva, Ana B. Crujeiras Grupo de investigación Laboratorio de Endocrinología Molecular y Celular Institución IDIS Expone Begoña Cabia Correo electrónico [email protected] / [email protected]

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El objetivo de este trabajo ha sido estudiar la correlación entre el exceso de adiposidad producido por la obesidad y la expresión de PTEN, un gen supresor de tumores y MYC, un oncogen, en mama de un modelo animal con obesidad inducida por dieta. Se emplearon ratas hembra Sprague Dawley de 3 semanas de edad alimentadas con una dieta alta en grasa (DIO: 60% Kcal/g grasa; n=15) o pienso habitual (LEAN: 3% Kcal/g grasa; n=5) durante 10 semanas y acceso ad libitum a comida y agua. Semanalmente se cuantificó ingesta y peso corporal. Tras el sacrificio, de cada animal se extrajo el tejido mamario, tejido adiposo retroperitoneal y se congeló inmediatamente a -80ºC para la posterior cuantificación mediante qRT-PCR de PTEN y MYC. Observamos que el grupo DIO presentó un incremento de peso del 9,61% respecto al grupo LEAN (p=0,005), que se reflejó en mayor cantidad de grasa retroperitoneal en el grupo DIO (3,32±0,23g; p=0,006) respecto al grupo LEAN (2,30±0,21g). De manera relevante, la expresión génica en tejido mamario del oncogen MYC se asoció positivamente con el peso corporal (r=0,52;p=0,023), la masa grasa (r=0,51;p=0,044) y la cantidad de tejido adiposo retroperitoneal (r=0,61;p=0,012). Por el contrario, los niveles de mRNA del supresor tumoral PTEN se asociaron inversamente con el peso corporal (r=-0,57;p=0,014), masa grasa (r=-0,65;p=0,013) y tejido adiposo retroperitoneal (r=-0,71;p=0,003). La susceptibilidad a cáncer de mama observada en sujetos obesos podría estar determinada por una desregulación de la función proliferativa/antitumoral que favorece la transformación tumoral asociada con el exceso de adiposidad. Palabras clave: obesidad, cáncer de mama, expresión génica, proliferación, tejido adiposo Área Endocrinología Molecular y Celular, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago de Compostela (IDIS), Complejo Hospitalario Universitario de Santiago de Compostela (CHUS) y Universidad de Santiago de Compostela (USC).4 Servicio de Cirugía General, Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain. 5 Laboratorio de Endocrinología Molecular y Celular, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago (IDIS), Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: El estudio cuantitativo del secretoma por la técnica cilair muestra

patrones específicos de secreción entre el tejido adiposo visceral y subcutáneo humano.

Autores: Roca-Rivada A 1,2; Bravo SB3; Alonso J3; Perez-Sotelo D1; Larrosa-

García M1; Baamonde I4; Baltar J 4; Casanueva FF 2,5; Pardo M 1,2 Grupo de investigación Grupo Obesidómica (IDIS-E23) Institución IDIS Expone Arturo Roca-Rivada Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Introducción: Los estudios de secreción de los diferentes depósitos de tejido adiposo del organismo son un paso fundamental para entender los mecanismos de regulación energética producidos en este tejido, así como la relación observada entre el tamaño de determinados depósitos como el visceral, y el desarrollo de diferentes enfermedades metabólicas como la diabetes tipo 2. En este estudio se utilizó por primera vez la técnica CILAIR (comparison of isotope-labelled amino acid incorporation rates) para la cuantificación de proteínas secretadas por los depósitos visceral y subcutáneo del mismo paciente obeso. Métodos: Los experimentos fueron realizados 3 veces a partir de explantes tisulares obtenidos de pacientes obesos sometidos a cirugía bariátrica. Tras 26.5h en medio de cultivo libre de Lys y Arg, con el fin de reducir al mínimo la cantidad de [12C6]Lys y [12C6]Arg, los explantes se incubaron durante 72h en medio de cultivo suplementado con [13C6,14N2]Lys and [13C6,14N2]Arg. La separación e identificaron fue realizada mediante cromatografía líquida–espectrometría de masas (Nano-HPLC eksigen-ABSciex y MALDI-TOF/TOF-ABSciex), y la cuantificación de los ratios de incorporación se realizó mediante el software Protein Pilot (ABSciex). Resultados y discusión: En este trabajo se identificaron proteínas secretadas conocidas como la IL-6, adiponectina o gelsolina; así como otras nunca antes relacionadas con estos depósitos, mostrando la existencia de diferencias significativas en la secreción según su localización anatómica. Estos resultados confirman una funcionalidad endocrina distinta y por tanto una contribución específica y característica de cada depósito al desarrollo de las enfermedades metabólicas relacionadas con la obesidad. Palabras clave: CILAIR, tejido adiposo, secreción, obesidad 1 Grupo Obesidómica, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago de Compostela (IDIS), Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain. 2 CIBER Fisiopatología Obesidad y Nutrición (CB06/03), Instituto de Salud Carlos III, Santiago de Compostela, Spain. 3 Unidad de Proteómica, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago de Compostela (IDIS), Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain. 4 Servicio de Cirugía General, Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain. 5 Laboratorio de Endocrinología Molecular y Celular, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago (IDIS), Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain


Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Analysis and classification of splicing variants in the BRCA1 and

BRCA2 genes using bioinformatics tools and splicing assay data. Autores: López-Cortabitarte, Belén; Santamariña, Marta; Blanco, Ana;

Fachal, Laura; Rodriguez-Lage, Belinda; Vega, Ana Grupo de investigación Grupo E17, Genética del Cáncer Institución IDIS Expone López-Cortabitarte, Belén Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

About 5%-10% of all breast carcinomas are due to an inherited predisposition. Germline mutations in breast cancer susceptibility genes BRCA1 and BRCA2 are associated with a significant increase risk of breast and other cancers. Whilst many thousands of disease-associated mutations have been identified in these genes, many DNA sequence changes (mainly missense and intronic variants) are unclassified variants, as their functional and clinical significance is not immediately clear. Unclassified variants have the potential to alter protein function, by changing the coding sequence of a transcript, or the level or structure of the gene transcript, by disrupting regulatory regions in promoters, untranslated regions, exons or introns. Such regulatory variants include those affecting normal splicing of BRCA1 and BRCA2. In the FPGMX, we identified three novel variants in BRCA1 and BRCA2 (BRCA1-IVS11+34G>C, BRCA1-IVS17+1G>C and BRCA2-IVS11+1G>C). We performed splicing analyses for these variants using SpliceSiteFinder-like, MaxEntScan, NNSPLICE, GeneSplicer, and Human Splicing Finder in silico tools, and found a putative effect on the splicing process. Peripheral blood lymphocytes of the patients were cultured with and without puromycin. RNA analysis was performed by reverse transcriptase-PCR sequencing and fragment detection by sensitive capillary electrophoresis (CSCE) and Agilent Bioanalyzer. Results of these analyses will be shown at the conference Palabras clave: BRCA1 and BRCA2; breast cancer; splicing assay; splicing; unclassified variant

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Functional characterization of variants in the 5UTR Untranslated

Region of BRCA1 Autores: Marta Santamariña, Ana Blanco, Laura Fachal, Belén López-

Cortabitarte, Belinda Rodríguez-Lage, Ana Vega Grupo de investigación IDIS-Grupo emergente de Genética de Cáncer (E17) Institución IDIS Expone Marta Santamariña Correo electrónico [email protected]

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BRCA1 and BRCA2 are the major hereditary breast/ovarian cancer predisposing genes. The 5UTR region is known to be involved in the regulation of translation, RNA´s stability efficiency and in alternative splicing. Germline and somatic mutations in this region had been attributed to reduced BRCA1 expression in some breast cancer patients. Our aim is to evaluate five new variants of unknown significance localized in the 5´UTR of the BRCA1 gene from Breast/ovarian Cancer families by bioinformatics and in vitro splicing minigene assay. Variants were analyzed through bioinformatics tools: i) splice tools (SpliceSiteFinder-like, MaxEntScan, NNSPLICE, GeneSplicer, Human Splicing Finder), ii) tools for the identification of evolutionarily conserved elements (PhastCons score, phyloP) and iii) TRANSFAC, that provides data on eukaryotic transcription factors. In our in vitro splicing experiments, hybrid minigene constructs were created inserting BRCA1 exon1a,1b,2 and flanking intron sequences into pSPL3. These constructs were built by PCR using purified DNA from human blood samples. Variants samples were analyzed on a 2% agarose gel and Agilent Bioanalyzer, then reanalyzed in a semi-quantitative PCR conditions and resolved on capillary electrophoresis. Three of the variants studied were not previously reported, nor listed in SNP databases. None of the variants were found in 150 controls analyzed. The region is semi-conserved in primates. Four of these variants lie within binding site of transcription factor. The bioinformatics prediction for four of the variants showed splice aberrations. In vitro splicing minigene assay showed that the variant c.-20+125_-20+130delinsC affect the splicing, leading to skipping of exon 2. Palabras clave: BRCA1 and BRCA2; breast cancer; splicing assay; 5UTR; unclassified variant

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Effect of alcohol exposure on pre-adipocyte proliferation

and adipogenic capacity Autores: Sara Andrade, Marcos Carreira, Begoña Cabia, Maria

Amil, Ana Crujeiras, Mariana Pereira Monteiro, Felipe Freijo Casanueva

Grupo de investigación Laboratorio de Endocrinología Molecular y Celular Institución IDIS Expone Sara Andrade Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Obesity is a multifactorial disorder that develops from genetic and environmental causes. In western cultures, alcohol consumption is a generalized practice and is associated with obesity. The average alcohol intake among consumers is approximately 10–30 g/day or 3–9% of an individual’s total energy intake. Since alcohol cannot be stored it is preferably oxidized when comparing to fat and carbohydrates. Our goal is to evaluate, in vitro, the effects of alcohol in pre-adipocyte proliferation and adipogenic capacity. 3T3-F442A cells were cultured in DMEM 10% FBS in the presence of three different ethanol concentrations (35g, 70g and 140g), a negative control (free media) and a positive control (DMEM 10% FBS) in 96-well microplates (1000 cells/well) to perform a proliferation assay using WST1 reagent (Roche), or in 6-well multiwell plaques to test the effect of ethanol in the adipogenic capacity of adipocytes. 3T3-F442A pre-adipocytes were submitted to standard cocktail in order to promote adipocyte differentiation and on days 0 or 2 of the differentiation protocol, culture media was supplemented with the different ethanol concentrations stated above. On the final day of the differentiation protocol, cells were lysed for RNA and protein extraction and stained with oil red in order to access lipid content. Ethanol exposure appears to have a dose-dependent effect on pre-adipocyte proliferation and adipogenic capacity of the 3T3-F442A cells. These data suggests the existence of a direct effect of ethanol on adipocyte proliferation and adipogenic capacity which may further contribute to explain the association between obesity and alcohol consumption. Palabras clave: obesidad, adipogenesis, ethanol, proliferación, tejido adiposo 1CiberObn CB06/03 2Anatomy Department, Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar, University of Oporto, Portugal 3Departamento de Epigenetica del Cancer del Instituto de Investigacion Bellvitge (IDIBELL) 4Departamento de Medicina, Universidade de Santiago de Compostela, España; Complejo Hospitalario Universitario *[email protected]

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: New Functional Microsatellite Associated with Osteoarthritis

Susceptibility Autores: Laura Vidal1, Cristina Rodriguez-Fontenla1, Manuel Calaza1,

Natividad Oreiro2, Francisco J Blanco2, Andrew Carr3, Adrian Odriozola4, José Antonio Riancho4, Juan J. Gomez-Reino1,5, Aspasia Tsezou6, John Loughlin7, Antonio Gonzalez1

Grupo de investigación Genética Osteoarticular Institución IDIS Expone Laura Vidal Bralo Correo electrónico [email protected]

RESUMEN Purpose: Considering that two functional microsatellites are associated with OA, BMP5 and ASPN, we test in a large case-control study six additional functional microsatellites in the interleukin, calcitonin, estrogen receptor 2, tyroxine hydroxylase and macrophage migration inhibitory factor genes.

Methods: Microsatellites were amplified in 3557 patients (1775 of knee and 1782 of hip OA) and in 1878 healthy controls. All were of European ancestry either from the UK, Greece or Spain. Genotypes of SNPs in the neighborhood of the microsatellites region were obtained from the arcOGEN GWAS for the UK samples included in this study to assess imputation of microsatellite genotypes with Beagle and IMPUTE algorithms.

Results: The MIF microsatellite showed alleles from 4 to 8 repeats. This microsatellite was associated with hip OA with contrasting effects in women (PMantel-Haenszel=0.018) and men (PM-H=0.029): the 6 repeat allele was in excess in control women relative to women with hip OA, whereas it was in excess in men with hip OA relative to control. In addition, TH microsatellite showed alleles from 4 to 11 repeats and association with knee OA in the Spanish samples (P=0.008) that was not replicated in the other two populations and that resulted in a non-significant association in the global analysis (PM-H=0.12).

Conclusions: A new functional microsatellite has been found associated with hip OA, in a MIF gene, of potential relevance for OA as a cytokine produced by chondrocytes in repair and inflammatory responses. This microsatellite together with those in BMP5, ASPN, and TH, require further study to definitively establish their status Palabras clave: 1. Instituto Investigacion Sanitaria –Hospital Clinico Universitario de Santiago, Santiago de Compostela, Spain. 2. INIBIC-Complejo Hospitalario Universitario A Coruna, A Coruna, Spain 3. University ofOxford, Oxford, UK 4. Hospital U. M. Valdecilla-IFIMAV, University of Cantabria, Santander, Spain 5. University of Santiago de Compostela, Santiago de Compostela, Spain 6. University of Thessaly, Larissa, Greece 7. Institute of Cellular Medicine, Newcastle University, Newcastle upon Tyne, UK ABSTRACT

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral Tipo A Título: Differential effects of early and advanced glycation

products on endothelial responses involved in diabetic vascular complications

Autores: B. Paradela-Dobarro, BK. Rodiño-Janeiro, J. Alonso, MI.

Castiñeiras-Landeira, S. Raposeiras-Roubín, M. González-Peteiro, JR González-Juanatey, E. Álvarez

Grupo de investigación ENDOTELIO VASCULAR. Dentro del grupo de Cardiología (C016)

Institución IDIS Expone Beatriz Paradela-Dobarro Correo electrónico [email protected]

RESUMEN Aims: The roles that different non-enzymatic glycated products play on vascular diabetic complications are not fully understood. We analyzed the effects of glycated human serum albumin (gHSA), advanced glycation end-product albumin (AGE-HSA) and carboxy-methyl lysine (CML) on human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). Methods: AGE-HSA, HSA and gHSA were comparatively analyzed by MALDI-TOF MS and their AGE composition was characterized by trypsin digestion and peptide-fingerprint analysis. CML was obtained from Dr. Ann Marie Schmidt’s lab. HUVEC were treated with these glycation products (12.5 – 400 µg/mL) and changes in the expression of adhesion molecules genes (VCAM-1 and ICAM-1) by real time PCR were measured. Leukocyte adhesion to treated or non-treated HUVEC monolayers was measured as functional assay. Results: The molecular changes caused by the glycation process were confirmed by MALDI-TOF MS. The results showed the different but synergic effects of these molecules on endothelial cell biology. AGE-HSA caused an increase in ICAM expression at 2h in a concentration-dependent manner, with maximum values at 100 µg/mL. We also detected enhanced VCAM and ICAM expression levels at 4h. Furthermore, these increases in the mRNA expression were correlated with an increase in the adhesion of leukocytes to HUVEC. Conclusions: These data support the hypothesis that early and advanced glycation products have different effects on the activation and adhesion capabilities of the endothelial cells and, therefore, an important role in vascular diabetic complications. Advanced glycation end-products contribute to anticipate the effects of early glycation proteins, endangering the endothelial function, which would have important clinical consequences Palabras clave: early glycation products, advanced glycation end-products, adhesion molecules, vascular diabetic complications

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Análisis proteómico de la vía de señalización del receptor

plaquetario CLEC-2 Autores: Irene Izquierdo-Berjano1,2*, Isaac Rosa1,2, Ángel García1,2 Grupo de investigación Proteómica de Plaquetas Institución IDIS Expone Irene Izquierdo-Berjano Correo electrónico [email protected]

RESUMEN CLEC-2 (C-type lectin-like receptor 2) es un receptor de membrana presente en plaquetas que juega un papel esencial en trombosis, por lo que está siendo estudiado como posible diana farmacológica. CLEC-2 se activa con Rhodocytin (proteína extraída de un veneno de serpiente) y con el ligando endógeno podoplanina. Recientemente hemos llevado a cabo un estudio proteómico de la vía de señalización de CLEC-2 en plaquetas [Parguiña et al. Blood 2012;120:e117-e126]. Dicho estudio se basó en electroforesis bidimensional diferencial en-gel (2D-DIGE) para la separación de proteínas (fracción de punto isoeléctrico (pI) de 4-7) y espectrometría de masas para su identificación. En el presente trabajo, hemos completado dicho estudio mediante el análisis de la fracción más básica del proteoma (pI 6-11), para lo cual se compararon plaquetas sin activar y activadas con rhodocytin (300 nM, 5 min). Tras extraerse las proteínas y compararse el proteoma mediante electroforesis bidimensional (2D), se detectaron 27 diferencias (fold change≥1,5; p<0,05), de las que se identificaron 22, correspondientes a 12 open- reading frames (ORFs). Sumando los datos de 4-7 y de 6-11, se detectaron 100 diferencias, de las que se identificaron 85, correspondientes a 66 ORFs. La mayoría de las proteínas identificadas son de citoesqueleto y de señalización, grupos que juegan un papel fundamental en los procesos de activación plaquetaria. Proteínas relevantes de estos grupos incluyen pleckstrina, proteínas adaptadoras como CrkL y Grb2, y de citoesqueleto como HSPB1, VASP, y MYL9. En conclusión, nuestro estudio contribuye a un mejor conocimiento de la vía de CLEC-2 y sus mecanismos de activación. Palabras clave: proteómica, plaquetas, CLEC-2 1Centro de Investigación en Medicina Molecular y Enfermedades Crónicas (CIMUS), USC; 2Grupo de Proteómica de Plaquetas. Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago (IDIS

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Molecular profiling of circulating tumor cells links plasticity to

the metastatic process in endometrial cancer Autores: Lorena Alonso-Alconada, Laura Muinelo-Romay, Kadri

Madissoo, Antonio Diaz-Lopez, Camilla Krakstad, Jone Trovik, Elisabeth Wik, Dharani Hapangama, Lieve Coenegrachts, Amparo Cano, Antonio Gil-Moreno, Luis Chiva, Juan Cueva, Maria Vieito, Eugenia Ortega, Javier Mariscal, Eva Colas, Josep Castellvi, Maite Cusido, Xavier Dolcet, Hans W Nijman, Tjalling Bosse, John A Green, Andrea Romano, Jaume Reventos, Rafael Lopez-Lopez, Helga B Salvesen, Frederic Amant, Xavier Matias-Guiu, Gema Moreno-Bueno, Miguel Abal (ENITEC Consortium)

Grupo de investigación Laboratorio de Oncología Traslacional Institución IDIS Expone Lorena Alonso Alconada Correo electrónico [email protected]

RESUMEN Abstract About 20% of patients diagnosed with endometrial cancer (EC) are considered high-risk with unfavorable prognosis. In the framework of the European Network for Individualized Treatment in EC (ENITEC), we investigated the potential of Circulating Tumor Cells (CTC) as biomarkers of disseminated disease in high-risk EC patients. Methods CTC isolation was carried out in peripheral blood samples from 34 patients and 27 healthy controls using two methodologies. Samples were subjected to EpCAM-based immunoisolation using the CELLectionTM Epithelial Enrich kit (Invitrogen) followed by RTqPCR analysis. A second sample was processed by CellSearch (Veridex) technology. Results EpCAM-based immunoisolation positively detected CTC in high-risk EC patients. CTC characterization indicated a plasticity phenotype defined by the expression of the EMT markers ETV5, NOTCH1, SNAI1, TGFB1, ZEB1 and ZEB2. In addition, the expression of ALDH and CD44 pointed to an association with stemness, while the expression of CTNNB1, STS, GDF15, RELA, RUNX1, BRAF and PIK3CA suggested potential therapeutic targets. We further recapitulated the EMT phenotype through the up-regulation of ETV5 in an EC cell line, and validated in an animal model of systemic dissemination the propensity of these CTC in the accomplishment of metastasis. Conclusions Our results associate the presence of CTC with high-risk EC. Gene-expression profiling characterized a CTC-plasticity phenotype with stemness and EMT features. We finally recapitulated this CTC-phenotype by over-expressing ETV5 in the EC cell line Hec1A and demonstrated an advantage in the promotion of metastasis in an in vivo mouse model of CTC dissemination and homing. Palabras clave:

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: La valoración del daño corporal: fiabilidad del baremo español Autores: Ordóñez Mayán Lucía, Represas Carlos, Miguens Xoan,

Rodríguez Calvo María Sol, Febrero Bande Manuel, Muñoz Barús José

Grupo de investigación Instituto de medicina legal, USC Institución IDIS Expone Lucía Ordóñez Mayán Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Como método para cuantificar o calificar el daño corporal después de un traumatismo y los aspectos de importancia jurídico-social, se utilizan baremos o normas. En España es obligatorio el uso de estos baremos para la valoración médico-legal del daño corporal resultante de un accidente de circulación no doloso (Real Decreto Legislativo 8/2004). Material y método: Con el fin de evaluar la fiabilidad del baremo español se ha medido la concordancia, empleando el índice Kappa, entre las valoraciones obtenidas de un mismo paciente por parte de 24 observadores cualificados que han seguido el Real Decreto 8/2004. Las variables valoradas fueron los días de hospitalización, los días impeditivos, los días no impeditivos y las secuelas del paciente, asignando los puntos correspondientes, tanto funcionales como de perjuicio estético, a cada secuela valuada. Resultados: Una vez obtenidos los datos de las 24 valoraciones, se estudió el índice kappa de Fleiss. El resultado obtenido fue 0.37, lo que indica un “fair agreement” de acuerdo con la escala de valoración propuesta por Landis and Koch. Palabras clave: daño corporal, baremo, medicina legal, RDL 8/2004, fiabilidad

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: La alpha-2-hs-glycoprotein (fetuin-a) secretada por el tejido

adiposo podría participar en la resistencia a insulina en la obesidad

Autores: Larrosa-García M 1; Perez-Sotelo D 1; Roca-Rivada A 1,3;

Castelao C 1,2,3; Lucia L Senin 2; Baamonde I 4; Crujeiras AB 3,5; Seoane LM 2,3; Casanueva FF 3,5; Pardo M 1,3

Grupo de investigación Grupo Obesidómica (IDIS-E23) Institución IDIS Expone María Larrosa-García Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Introducción: La α2HSG puede inhibir el receptor de insulina aumentando la resistencia a la misma; así, los niveles circulantes de α2HSG se correlacionan con la obesidad y sus comorbilidades. Estudios previos de nuestro grupo demuestran la secreción de α2HSG por el tejido adiposo blanco a pesar de que se consideraba secretada exclusivamente por el hígado. Posteriormente otros han descrito que la α2HSG secretada por los adipocitos induce la migración de macrófagos hacia este tejido, y que además activa receptores TLR4 promoviendo la resistencia a insulina. Postulamos que la α2HSG producida por el tejido adiposo podría inhibir el receptor de insulina a nivel autocrino, paracrino y/o endocrino. Métodos: Se caracterizó la secreción de α2HSG (ELISA e inmunodetección), proteína intracelular (inmunodetección) y ARNm (RT-PCR) en el tejido adiposo visceral (TAV) y subcutáneo (TAS) procedente de diferentes modelos animales fisiológicos (ayuno y ejercicio) y patológicos (obesidad y anorexia). Resultados: Se confirma la expresión de α2HSG en adipocitos maduros. Se observa una relación negativa entre los niveles de expresión y secreción de esta proteína y el ejercicio físico, así como con la restricción calórica en el TAV. El TAV procedente de animales obesos secreta significativamente más α2HSG que el procedente de animales normopeso. Estas asociaciones no se observan en el TAS. Conclusiones: Los datos obtenidos confieren un mayor protagonismo al TAV en la regulación de la secreción de α2HSG. Esto podría explicar en parte la relación observada entre la cantidad de TAV en individuos obesos y la resistencia a insulina o diabetes tipo 2. Palabras clave: α2HSG, obesidad, diabetes tipo II, tejido adiposo 1 Grupo Obesidómica, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago de Compostela (IDIS), Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain. 2 Grupo Fisiopatología Endocrina, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago de Compostela (IDIS), Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain. 3 CIBER Fisiopatología Obesidad y Nutrición (CB06/03), Instituto de Salud Carlos III, Santiago de Compostela, Spain. 4 Servicio de Cirugía General, Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain. 5 Laboratorio de Endocrinología Molecular y Celular, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago (IDIS), Xerencia de Xestión Integrada de Santiago (SERGAS), Santiago de Compostela, Spain


Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Análise da frecuencia de brotes de esclerose múltiple e a súa

relación con variables climáticas Autores: Martínez-Calvo, Laura; Prieto, Jose M.; Dapena, D.; Carracedo,

A. e Cruz, R. Grupo de investigación Xenética - IDIS Institución CIMUS – USC - IDIS Expone Laura Martínez-Calvo Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

A esclerose múltiple (EM) é unha enfermidade complexa que presenta unha prevalencia moi variable xeograficamente. En Galicia acada unha prevalencia de 79 casos por cada 100.000 habitantes, a taxa máis alta das zonas xeográficas de España estudadas ata o momento. Aínda que cada vez se coñece máis da súa base xenética, parece que os factores ambientais (entre eles, as variables meteorolóxicas) xogan un papel importante na distribución espacial desta patoloxía. Por exemplo, a radiación solar está considerada coma un factor climático chave na susceptibilidade a EM, debido á súa participación directa na produción endóxena de vitamina D. En canto á súa influencia na evolución da enfermidade, o rol desta e doutras variables meteorolóxicas aínda non está claro. No presente traballo combínase información ambiental e epidemiolóxica para avaliar a relación entre factores climáticos (en especial o seu posible efecto acumulativo e/ou diferido no tempo) e a frecuencia de brotes en pacientes diagnosticados de EM remitente-recorrente da zona sanitaria de Santiago de Compostela ao longo dos últimos 15 anos. Os resultados obtidos suxiren que a correlación entre a radiación e a frecuencia de brotes pode ser diferente ao longo do ano, sendo beneficiosa nos meses de primavera (cando se rexistra o maior número de brotes) e mesmo perxudicial en outono-inverno, cando a duración do día é menor. Tamén se atopa un posible efecto dos veráns máis cálidos do normal sobre a sensibilidade dos pacientes durante inverno seguinte, o cal se podería relacionar coa susceptibilidade á calor, xa previamente documentada, pero dun xeito diferido Palabras clave: esclerose múltiple - Santiago de Compostela - brote - vitamina D - radiación solar


Tipo de comunicación: Oral tipo A Título: Identificación de xenes modificadores da penetrancia de

microduplicacións e microdelecións asociadas a esquizofrenia mediante secuenciación de nova xeración.

Autores: Julio Rodríguez-López, Manuel Arrojo, Beatriz Sobrino, Noa

Carrera, Marián Suárez, Jorge Amigo, Eduardo Paz, Ramón Ramos-Ríos, Santiago Agra, Julio Brenlla, Ángel Carracedo, Mario Páramo, Javier Costas.

Grupo de investigación Grupo Emerxente de Xenética Psiquiátrica-IDIS Institución IDIS Expone Julio Rodríguez-López Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

A esquizofrenia é considerada un trastorno multifactorial complexo, con especial importancia dos factores xenéticos, principalmente multitude de polimorfismos comúns cun efecto individual moi baixo. Nos últimos anos téñense atopado microdelecións e microduplicacións submicroscópicas raras, coñecidas como CNVs (por copy number variants), que confiren un risco elevado a padecer diversos trastornos do neurodesenvolvemento, como deficiencia intelectual, autismo ou esquizofrenia. Esta expresividade clínica variable, así como a penetrancia incompleta, suxiren a existencia de loci modificadores da manifestación destas CNVs. Comenzamos o traballo deseñando un método rápido, fiable e económico para identificar individuos portadores de 10 CNVs recurrentes que confiren susceptibilidade a padecer esquizofrenia. O método está baseado en PCR competitiva interespecífica ligada a detección de variantes por espectrometría de masas. A continuación, aplicamos o método á nosa colección de 513 pacientes esquizofrénicos. Finalmente, secuenciamos as rexións codificantes dos individuos con CNVs ao longo do xenoma mediante tecnoloxía de nova xeración (Solid system), para identificar potenciais loci modificadores entre aqueles ausentes das bases de datos de variantes (The 1000 Genome Project e The 6500 Exome Sequencing Project) e con elevada probabilidade de ser patoxénicos segundo prediccións bioinformáticas (CADD score). Centrámonos en datos bibliográficos, variantes en homozigose, ou implicadas en interaccións proteicas. O método amosou unha gran especificidade e sensibilidade, detectando 10 mostras portadoras de CNVs de risco. A secuenciación exónica permitiu identificar variantes con elevada probabilidade de actuar como loci modificadores en 7 dos 10 individuos. Polo tanto, concluimos que a esquizofenia pode ter unha base xenética relativamente simple nunha parte dos individuos afectados. Palabras clave: secuenciación de nova xeración, variante de número de copias, esquizofrenia, neurodesenvolvemento

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Regulación diferencial de la expresión de la hormona

gastrointestinal uroguanylinapor factores nutricionales Autores: Cintia Folgueira Cobos, Begoña PorteiroCouto, Silvia Barja-

Fernández, Cecilia Castelao, Felipe F Casanueva, Rubén Nogueiras y Luisa M Seoane

Grupo de investigación Grupos Metabolismo Molecular y Fisiopatología Endocrina Institución IDIS Expone Cintia Folgueira Cobos Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Las hormonas gastrointestinales ejercen numerosos efectos sobre el metabolismo, y se han relacionado con la efectividad de las intervenciones de cirugía bariátrica en el tratamiento de la obesidad. La uroguanylina es un péptido de 16 aminoácidos secretado principalmente por el tracto gastrointestinal que regula la homeostasis energética y peso corporal como parte fundamental en el eje cerebro-tracto gastrointestinal. Por tanto, el objetivo de este trabajo ha sido evaluar el efecto del estado nutricional sobre la expresión de la uroguanylina en diferentes tejidos. Se utilizaron ratones macho adultos Swiss bajo distintas modificaciones del estado nutricional: ad libitum, ayuno, realimentación tras el ayuno y la administración de leptina. Los niveles de expresión de uroguanylina se midieron en intestino, mucosa gástrica e hipotálamo mediante Western blot. Nuestros datos indican que el ayuno incrementa los niveles de uroguanylina en hipotálamo reduciendo los mismos a nivel periférico en el tracto gastrointestinal (en mucosa gástrica e intestino). Además, tanto la realimentación como el tratamiento con leptina en animales en ayuno restaura los niveles de uroguanylina a niveles encontrados en animales ad libitum tanto en hipotálamo como en tracto gastrointestinal. Estos resultados indican que la expresión de uroguanylina se regula de manera tejido-específica por el estado nutricional, donde el ayuno incrementa sus niveles en el hipotálamo y disminuyen en el tracto gastrointestinal. Esta regulación por el estado nutricional parece estar mediada por la leptina, ya que su administración exógena o la realimentación restauran los niveles de uroguanylina. Palabras clave: uroguanylina, obesidad, eje cerebro-tracto intestinal, GUCY2C, leptina

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral o Poster Tipo A Título: New in vitro models for research in cystogenesis and renal

disease Autores: Calviño Louzao, Vanesa; Couceiro Otero, Ramiro; Díaz

Rodríguez, Cándido; García González, Miguel A Grupo de investigación Grupo de Genética y Biología del Desarrollo de las

Enfermedades Renales Institución IDIS Expone Vanesa Calviño Louzao Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Polycystic kidney disease (PKD) is a group of hereditary and chronic diseases that cause renal failure due to cystic proliferation in nephrons during kidney morphogenesis. Cysts are formed from specific cells of the nephron by increased cellular proliferation and loss of planar cell polarity (PCP). This disease can be autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD) due to mutations in PKD1 or PKD2 genes or autosomal recessive polycystic kidney disease (ARPKD) due to mutations in PKHD1 gene. Cystic kidneys are unable to function properly, cause liquid retention, hypertension and renal insufficiency resulting in dialysis or transplantation besides several extrarenal manifestations as cardiovascular diseases, hepatic polycystic diseases, situs inversus, eye affectations, growth retardation, polydactyly ...

Our research group has developed several in vitro models to study the mechanisms undergoing cystogenesis. Here we describe the first cystogenic model of embryogenic tissue explants culture derived from conditional mouse models mimicking ADPKD and ARPKD. This systems allows us to develop polycystic disease in less than 5 days, contrary to other models like mouse models itself that develop PKD in 1-2years. This model is an invaluable tool to identify potential drugs by massive screening of a battery of drugs. Our next step is to develop “pseudonephrons” by establishing renal PKd1 and Pkd2 conditional cell-line culture in 4D, being flow the fourth dimension, mimicking urine. In this model, some of these cells will be mutated to PKD1 or PKD2 in a 1:100000 ratio.

In summary, we describe to new models as a powerful tool to understand molecular mechanisms underlying cystogenesis and to identify potential drug targets.. Palabras clave: polycystic kidney disease (PKD), in vitro model, embryos explants, 4D, flow


Tipo de comunicación: Oral Tipo A | Póster Tipo A Título: Validation of a genetic and functional test for prognosis and

diagnosis of all cystic kidney diseases Autores: María Lara Besada Cerecedo, Lisbeth Sousa Silva, Beatriz

Sobrino, Jorge Amigo Lechuga, Olaya Lamas González, Helena Covelo, Marina García Vidal, Patricia Regueiro Casuso, Angel Carracedo, Cándido Díaz Rodríguez and Miguel A. García-González

Grupo de investigación Genetics and developmental biology of kidney diseases Institución IDIS Expone María Lara Besada Cerecedo Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Polycystic Kidney Disease (PKD) is a group of genetic disorders characterized by the bilateral

formation and progressive expansion of renal cysts that lead to end stage kidney disease. There

are two Mendelian diseases associated with this pathology: the autosomal dominant polycystic

kidney disease (ADPKD), the most common form of PKD, caused by mutations in PKD1 and

PKD2; and the autosomal recessive form (ARPKD), that results from mutations in PKHD1. It

could also include a third group with the atypical forms, that are caused by mutations in

HNF1β or genes that usually cause other diseases that can mimic PKD. All of them have in

common a dysfunction of the cilium, so they are called ciliopathies.

Our group designed the first genetic and functional strategy for diagnostic and prognosis of all

cystic kidney diseases using Next Generation Sequencing (NGS). Three panels of genes were

created: one of them includes the eight genes associated with PKD that are more common in

the population, a second panel includes the eight genes with the replicated portion of PKD1

(exon 1-34) and finally, the other includes all the genes associated with PKD (72 genes).

Applying the tests to some patients with PKD, herein we are able to validate and demonstrate

the efficiency of the tests by analyzing the coverage of the target genes and validating the

mutations found by Sanger sequencing. The analysis of the data coverage was realized to

different depth of coverage (200X and 400X). Based on the result we conclude that an increase

in depth of coverage improves the coverage percentages obtained and the specificity of the test.

Here we describe the first genetic test for all known hereditary cystic diseases.

Palabras clave: Ciliopathies, Next Generation Sequencing, cystic diseases, PKD1, diagnostic and prognostic tests.

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral Tipo A | Póster Tipo A Título: Development and characterization of the first

diagnostic/prognostic genetic test for all hereditary glomerular diseases

Autores: Helena Covelo, Lisbeth Sousa, Olaya Lamas, María Sanchez

Ares, Beatriz Sobrino, Jorge Amigo Lechuga Lara Besada, Patricia Regueiro, Francisco Barros, Angel Carracedo, Díaz Rodríguez, Cándido, Miguel A. García

Grupo de investigación Genética y desarrollo de enfermedades renales Institución IDIS Expone Helena Covelo Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Next generation sequencing (NGS) is replacing classic Sanger sequencing in the detection of mutations in genetic based diseases. Using IonTorrent NGS, our group has developed a genetic test which allows the simultaneous analysis of 26 genes responsible or associated with hereditary glomerular diseases in different patients. To validate this test, we have analyzed patients with clinical suspicion or familiar history of renal glomerular disease from different Spanish hospitals. The initial design (Glom panel) included 25 bp as flank regions of the exons; this length was increased until 50 bp (Glom 50frt) in following analysis in order to improve the coverage of the exon boundary. Additionally, we tested two different sequencing depths of coverage: 200X and 400X, looking for the optimal balance between efficiency and reliable results. Once we had the results, we compared the coverage between the different conditions and this real coverage with the theoretical one. The mutations detected in the NGS analysis were further validated by Sanger sequencing. This exhaustive analysis shows the validity of the genetic test that we have developed in both clinical practice and research work, allowing the detection of unusual genetic interactions responsible for some genetic based glomerulophaties.

Palabras clave: glomerulophaties, genetic test, NGS, coverage, IonTorrent

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral Tipo A | Póster Tipo A Título: Development and characterization of the first

diagnostic/prognostic test for all primary tubulopathies Autores: Olaya Lamas González, Lisbeth Sousa Silva, Beatriz Sobrino,

Jorge Amigo Lechuga, Lara Besada, Helena Covelo, Patricia Regueiro Casuso, Marina García Vidal, Francisco Barros, Angel Carracedo, Cándido Díaz Rodríguez, Miguel Garcia-Gonzalez.

Grupo de investigación Xenética e Bioloxía do Desenvolvemento das enfermidades renais

Institución IDIS Expone Olaya Lamas González Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Renal hereditary tubulopathies (primary tubulopathies) are a group of disorders with different clinical outcome but sharing as common feature the alteration of tubular function and the paedriatic appearance. Their complexity, signs and symptoms vary, but reabsorption and excretion of proteins, aminoacids, glucose, uric acid, water or minerals (phosphate, calcium, sodium, magnesium and potassium) are altered and depend on which part of the tubule is the most affected. The consequences are reflected on the osmotic balance, acid-base regulation, mineral metabolism and extracellular volume homeostasis. Most tubular inherited pathologies have overlapping symptoms, interfamilial and intrafamilial heterogeneity and the clinical diagnosis depends on the physician experience and biochemical abnormalities. Indeed, there are not specific therapeutic strategies and just the symptoms are treated, not the cause. Wrong diagnosis or treatment, nevertheless, may cause serious complications as sensorineural deafness, oculocerebralrenal abnormalities, severe maladaptive behaviors, epilepsia, ataxia, rickets, tetany or development delay as well. We performed a Haloplex design for Ion Torrent platform with all the 36 genes implicated to date in primary tubulopathies. Our goal was to join all the genes in a single multiplexed test. Here we show the first genetic test for all known primary tubulopathies in an effort to provide the physician a tool to distinguish between different diseases, their genetic cause and to improve the clinical management, long-term outcome and specific therapy of each patient. Our preliminary results show high efficiency and specificity and take up our stance in accurate, feasible and quick diagnosis of the different target pathologies.

Palabras clave: inherited renal tubulopathies/ diagnosis test /prognostic test/ Ion Torrent multiplexed test/specific treatment

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: Factores genéticos asociados con la fibromialgia: un estudio de

réplica Autores: Alberto González Villar, Pilar Cacheiro, Yolanda Triñanes,

María García-Murias, María-Jesús Sobrido, Sonia Veiras, Manuel Arias, María Teresa Carrillo-de-la-Peña

Grupo de investigación Neurociencia Cognitiva, Neurogenética Institución IDIS Expone Alberto González Villar Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

La fibromialgia (FM) es un síndrome de dolor crónico con patogénesis no muy clara. Existen

evidencias de que factores genéticos contribuyen al desarrollo de la FM. En un estudio reciente

de secuenciación del exoma completo, se han observado dos variantes que pueden estar

relacionadas con la FM (p.W32X en el gen C11ORf40 y p.Q100X en el gen ZNF77). En el

presente trabajo nos planteamos replicar estos resultados analizando 81 pacientes FM, 75

familiares sanos y 89 controles poblacionales. Tras la secuenciación de los genes mencionados,

se realizó un análisis de asociación caso-control y un test basado en familias. Las dos variantes

estudiadas se encontraron en equilibrio de Hardy-Weinberg. En el estudio caso-control no

encontramos asociaciones significativas considerando las frecuencias alélicas (test de Fisher) o

genotípicas bajo diferentes modelos de herencia (regresión logística). Tampoco observamos

diferencias significativas para ninguna de las variantes al realizar la comparación de las

frecuencias alélicas reportadas en la serie publicada con las registradas en bases de datos como

1000 Genomes o Exome Variant Server. Igualmente, no aparecieron asociaciones significativas

en el estudio de asociación basado en familias, aunque estos resultados deben tomarse con

cautela debido al escaso número de heterocigotos. Dada la limitación que supone el poder

estadístico de los estudios realizados, tanto para confirmar como para descartar la asociación de

estas dos variantes con la FM se necesitaría un mayor tamaño muestral.

Palabras clave: Fibromialgia, genética, C11ORf40, ZNF77, estudio de asociación basado en familias


Tipo de comunicación: Tipo B Título: Nefrochus: first diagnostic/prognostic tests for all hereditary

kidney diseases Autores: Lisbeth Sousa Silva, Olaya Lamas Gonzalez, Beatriz Sobrino,

Angel Carracedo, Lara Besada, Helena Covelo, Marina Garcia Vidal, Patricia Regueiro Casuso, Francisco Barros Angueira, Miguel A. Garcia-Gonzalez

Grupo de investigación Grupo de Genética y Biología del Desarrollo de las Enfermedades Renales

Institución IDIS Expone Lisbeth Sousa Silva Correo electrónico [email protected]

RESUMEN Our group study hereditary kidney disease like polycystic kidney disease (PKD), tubulophaties and glomerulophaties. These diseases are associated with mutations in a large number of genes. Sanger sequencing is the traditional and reliable method of sequencing, but we know the time and cost that takes to sequence a single gene. So, recently we developed rapid genetic tests for all these genes using the next generation sequencer, Ion Torrent. The Haloplex allow the preparation of libraries with barcodes that can be mixed and loaded into a single Ion chip to streamline workflow and enable an effective comparison sample to sample. So, we can have in a single Ion chip multiple genes and several patients which reduce the price and time of this technique. At this time we have 4 panels/tests: Common Cystic Disease Panel: This panel has 8 genes to be sequenced (genes associated with polycystic more prevalent in the population, and therefore more likely to be responsible for the disease). This can be applied to patients with a family history or a history of cystic disease. Diagnostic/prognostic Panel for all Cystic Diseases: This panel sequence the complete list of 72 genes associated with cystic disease, which directly or indirectly has been a report in the literature associated with PKD family mutation. This can be applied to patients without a family history or who need to know not only the diagnosis, but also prognosis. Diagnosis/prognosis Panel for all glomerular kidney diseases: Sequence 26 genes associated with hereditary glomerular disease. Diagnostic/prognostic Panel for all tubular kidney disease: Sequence 36 genes associated with hereditary tubular disease. The in silico design of these tests predict a coverage region target of 98.5% for the common cystic disease panel, 99.06% for the diagnostic/prognostic panel for all cystic diseases, 99.97% for the diagnosis/prognosis panel for all glomerular kidney diseases, 99.97% for the diagnostic/prognostic panel for all tubular kidney disease. The reads resulting from sequencing by Ion Torrent are processed by applying algorithms giving us a list of variants. These variants are filtered in order to find the possibly pathogenic variants, which are confirmed by Sanger. To the novel missenses mutations we apply a functional test using a cell culture system that allows us to observe the functional damage produced by the mutation. It is a quick and efficient way to have complete certainty that the patient carries or not a pathogenic mutation.

Palabras clave: genetic test; cystic kidney disease; glomerular disease; tubular disease; Ion Torrent


Tipo de comunicación: Póster Tipo A

Título: Identificación de nuevos biomarcadores de infarto agudo de miocardio mediante análisis proteómico de las micropartículas derivadas del plasma

Autores: Paula Vélez1,2*, Andrés F. Parguiña1,2, Lilian Grigorian-

Shamagian3, Isaac Rosa1,2, Raymundo Ocaranza-Sánchez3, José Ramón González-Juanatey3, Ángel García1,2

Grupo de investigación Grupo del IDIS “Proteómica de Plaquetas

Institución CIMUS - IDIS Expone Paula Velez


RESUMEN

Las micropartículas del plasma (MPP) son vesículas rodeadas de membrana celular, de menos de una micra, originadas fundamentalmente a partir de plaquetas. Representan un modo importante de comunicación intercelular y su número está aumentado en pacientes con síndrome coronario agudo. Nuestro objetivo fue comparar el proteoma de las MPP de pacientes con infarto de miocardio agudo de miocardio con elevación del segmento ST (IAMCEST) y de controles con cardiopatía isquémica crónica estable, con el fin de identificar biomarcadores o dianas farmacológicas para el evento agudo. Obtuvimos las micropartículas mediante un protocolo estandarizado basado en ultracentrifugaciones y las caracterizamos mediante FACS, microscopía electrónica, y anemometría laser doppler. El estudio proteómico se basó en electroforesis bidimensional diferencial en-gel (2D-DIGE) e incluyó 10 pacientes IAMCEST y 10 crónicos. Las proteínas fueron identificadas por espectrometría de masas y las validaciones realizadas por western blot en una cohorte independiente de pacientes (15 IAMCEST, 13 crónicos y 10 donantes sanos). Detectamos 117 spots regulados diferencialmente entre ambas condiciones (diferencia de expresión≥2 y p<0,01); 73 estaban aumentados en IAMCEST y 44 disminuidos. Conseguimos identificar 102 spots, correspondientes a 25 open-reading frames (ORFs). Mediante biología de sistemas (Ingenuity Pathways) descubrimos que 20 de los ORFs identificados están relacionados con respuesta inflamatoria y enfermedad cardiovascular, y 11 directamente con infarto. Entre las proteínas aumentadas en IAMCEST se encuentra alpha-2-macroglobulin y fibrinógeno, ambas relacionadas con trombogénesis, y viperin que está sobrexpresada en aterosclerosis. En resumen, nuestro estudio aporta nueva información sobre el papel relevante que las micropartículas juegan en los eventos patofisiológicos que subyacen al infarto agudo de miocardio, pudiendo constituir una fuente prometedora de biomarcadores/dianas farmacológicas para la enfermedad.

Palabras clave: Micropartículas, proteómica, infarto agudo de miocardio 1Centro de Investigación en Medicina Molecular y Enfermedades Crónicas (CIMUS), USC; 2Grupo de Proteómica de Plaquetas. Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago (IDIS). 3Servicio de Cardiología y Unidad de Hemodinámica, CHUS


Título: Evaluación neuropsicológica en SCA36: la ataxia da Costa da Morte

Autores: Martínez-Regueiro, R.; Maria-Jesus Sobrido; Quintáns, B.;

Manuel Arias; Pardo, J.; Pardo, M. ; María Taboada; García-Murias, M.; Cortés, J.; Torcuato Labella-Caballero; José M. Pumar; Carracedo Álvarez, A.; Fernández-Prieto, M

Grupo de investigación Grupo de Medicina Xenómica

Institución IDIS Expone Rocío Martínez Regueiro


RESUMEN

SCA36 es una ataxia espinocerebelosa descrita recientemente, causada por una expansión de la repetición intrónica GGCCTG en NOP56, siendo relativamente frecuente en los pacientes con ataxia de Galicia. Aunque el deterioro cognitivo en pacientes con diferentes SCA es variable, la disfunción prefrontal es común a todos los subtipos. Nuestro objetivo fue explorar las áreas cognitivas y afectivas en SCA36. MÉTODOS : Se evaluaron 15 pacientes (9 mujeres y 6 hombres, con una edad media de 62,7 ± 14,4 años), procedentes da “Costa da Morte”. Se utilizaron las siguientes pruebas para el estudio: Frontal Assessment Battery (FAB), para el screening de funciones ejecutivas; Mini Mental State Examination (MMSE) para el rendimiento cognitivo general y la Geriatric Depression Scale (GDS) para detectar la presencia de problemas afectivos. RESULTADOS: La media de puntuación obtenida con la FAB fue 12,1 ± 3,9, mientras que los resultados del MMSE fueron 24,8 ± 4,4 y la puntuación GDS varió de 14 ± 8.2 CONCLUSIONES : De forma preliminar estos resultados indican que existe deterioro cognitivo leve en SCA36 a medida que la enfermedad progresa, sin embargo la demencia es poco común. En concordancia con lo observado en otras SCA, los pacientes con SCA36 muestran un grado variable de déficit -frontal ejecutivo. Debemos prestar especial atención a los aspectos afectivos y del estado de ánimo, que también se encuentran frecuentemente alterados. Añadir que la deficiencia auditiva neurosensorial, característica de la SCA36, dificulta la aplicación de algunas pruebas neuropsicológicas.

Palabras clave: SCA36, screening neuropsicológico, FAB, MMSE, GDS

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Tipo B, Póster Título: Profesionalización de la unidad de investigación en vacunas del

instituto de investigación sanitaria de santiago (idis). Autores: Carmen Rodríguez-Tenreiro, Antonio Justicia Grande, Natalia

Fernández Pedrós, Luisa García Vicente, Lucia Vilanova Trillo, Pilar Leborans Iglesias, Natalia García Sánchez, Nazareth Martinón-Torres, Lorenzo Redondo Collazo y Federico Martinón-Torres

Grupo de investigación GENVIP

Institución IDIS Expone Carmen Rodríguez-Tenreiro Sánchez Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Introducción: La investigación en vacunas constituye uno de los campos más activos de la infectología y la prevención. El marco regulatorio actual y la competitividad internacional exigen la profesionalización progresiva de las unidades que se dedican a este tipo de investigación. Objetivo: Analizar la trayectoria de la Unidad de Investigación en Vacunas en el Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago (IDIS) desde su creación hasta la fecha. Material y Métodos: Análisis descriptivo del funcionamiento de la Unidad de Investigación en Vacunas del IDIS. Resultados: La implicación de la Unidad en el desarrollo de ensayos clínicos ha aumentado de manera exponencial en los últimos tiempos asumiendo tasas de reclutamiento competitivas internacionalmente e involucrándose directamente en el diseño y en la coordinación nacional e internacional de dichos estudios. Hasta la fecha se han realizado más de 20 ensayos clínicos, (7 fase 1-2(32 %)), lo que ha supuesto el tratamiento y seguimiento de más 1000 niños (más de 15.000 dosis vacunales administradas y más de 3000 extracciones sanguíneas realizadas). La multidisciplinaridad del equipo que conforma la Unidad en la que trabajan 20 personas, 5 en exclusiva, en sinergia con el personal de GENVIP ha sido fundamental para la consecución de los objetivos planteados. La producción científica de la Unidad se plasma en 12 publicaciones derivadas en revistas Q1 y están en prensa o redacción otras cuatro. Conclusiones: La profesionalización de nuestra Unidad de Investigación ha permitido afrontar más ensayos y con más garantías, así como competir al máximo nivel con otros grupos internacionales similares, sin embargo desde la Unidad se demanda de manera activa la necesidad de contar con una Unidad de ensayos clínicos en Fase I que permita afrontar este tipo de estudios de acuerdo con los estándares de calidad requeridos por los promotores y la legislación vigente. Asimismo se ofrece la posibilidad de que otras unidades locales similares puedan unirse a la red de ensayos clínicos que coordinamos (RITIP).

Palabras clave: Investigación, vacunas, profesionalización, ensayos clínicos


Tipo de comunicación:

Título: Estudio de asociación genética a la longevidad con Axiom® Exome Array

Autores: Martinez-Matilla M, Blanco-Verea A, Cruz Guerrero R,

Martínez Sellés M, Quintela I, García de la Villa BJ, Cruz-Jentoft AJ, Vidán MT, Diaz J, Carracedo A, Brion M.

Grupo de investigación Xenética de enfermidades cardiovasculares e oftalmolóxicas Institución IDIS Expone Marina Martínez Matilla Correo electrónico [email protected]

RESUMEN Estudios previos demuestran que la contribución genética a la variación de la esperanza de vida es aproximadamente 25-30%. Este porcentaje es mayor en familias con antecedentes de longevidad e incrementa con la edad, de forma que en centenarios es mucho mayor. Puesto que la longevidad es un rasgo poligénico complejo, aún no está claro cómo los factores genéticos y su interacción con otros factores como los medioambientales contribuyen a ella. El objetivo principal del estudio es evaluar si existe asociación entre la presencia de variantes genéticas y la longevidad. Para ello se utilizó el panel de genotipado “Axiom®Exome 319 Array” de Affymetrix que contiene aproximadamente 319.000 variantes distribuidas por todo el genoma, está enriquecido en variantes raras e incluye SNPs no sinónimos, indels, AIMs y marcadores localizados en la región HLA, entre otros. Se genotiparon un total 295.988 variantes en 93 casos y 484 controles y se llevó a cabo un análisis de asociación de variante única, corrigiendo por estratificación poblacional y sexo, y un análisis agregado a nivel de gen mediante diferentes tests (Burden, SKAT y SKAT-O). Tras un estricto control de calidad, los resultados preliminares del análisis estadístico señalan una variante rara localizada en un gen previamente señalado como posible candidato de la enfermedad de Alzheimer. Esta variante, confirmada por secuenciación convencional, es una deleción de cinco nucleótidos localizada en la región intrónica de dicho gen.

Palabras clave: Longevidad, centenarios, exome array

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral tipo B

Título: Proyecto Niemann-Pick tipo C: modelo de alianza entre servicios asistenciales, plataforma de ultrasecuenciación e industria para optimizar el diagnóstico de enfermedades raras en Galicia

Autores: C Castro Fernández1, B Quintáns Castro1, MJ Moreno

Carretero2 , P Blanco-Arias1,3, C Pérez Sousa4, R Rodriguez5, M Alberte Woodward6, A Ordóñez Ugalde1, S Mederer8, B.Sobrino3, A Carracedo3, MJ Sobrido1,3,*, M Arias1,7,*.

Grupo de investigación Genética de enfermedades neurológicas

Institución IDIS Expone Cristina Castro Fernández


RESUMEN OBJETIVO: La enfermedad de Niemann-Pick tipo C (NPC) es un trastorno autosómico recesivo que dificulta el tráfico lipídico intracelular y produce acumulación de esfingolípidos. Las manifestaciones psiquiátricas y neurológicas diversas y su afectación visceral inconstante, el solapamiento clínico con otras patologías, así como la frecuente ausencia de antecedentes familiares, dificultan su diagnóstico, de suma importancia dada la disponibilidad de un tratamiento eficaz. METODOLOGÍA: Se implementó un protocolo para la selección de pacientes candidatos, atendidos en hospitales de Galicia, con criterios consensuados por un grupo de trabajo ad hoc. Se desarrolló un documento de información al paciente y consentimiento informado que han sido aprobados por el Comité Autonómico de Ética de la Investigación de Galicia. Se diseñó un panel de ultrasecuenciación para Ion PGM® utilizando el programa AmpliSeq® Designer (Life Technologies), que posee una cobertura media de 99.8% para las dianas primarias, genes NPC1 y NPC2, así como para otros genes que pueden causar un fenotipo similar (PSAP, GBA, GBA2, ATP7A, CYP27A1, HFE, POLG1, APTX). CONCLUSIONES: El coste accesible y flexibilidad para el diseño de paneles de genes hacen que la ultrasecuenciación con el Ion PGM® sea coste-eficiente en el despistaje de NPC y otras enfermedades neurodegenerativas. El diagnóstico genético posibilitará la detección temprana de otros casos familiares y asesoramiento genético. Este proyecto está abierto a todos los médicos de Galicia que deseen participar. Proponemos un modelo de trabajo colaborativo entre el área de investigación en genética del IDIS, los servicios asistenciales (Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica, servicios clínicos), la plataforma de ultrasecuenciación y el Centro de Supercomputación de Galicia (CESGA). La unión de capacidades es imprescindible para optimizar el diagnóstico de estos pacientes, para que ser competitivos en el panorama internacional sobre enfermedades raras y para establecer alianzas con la industria de interés estratégico. Financiación: Proyecto PI12/00742, convenio MINECO-USC para el Proyecto Innopharma y donación de Actelion Pharmaceuticals. Palabras clave: Ultrasecuenciación, enfermedad de Niemann-Pick, diagnóstico genético, enfermedades raras, estudio multicéntrico

Genética de enfermedades neurológicas IDIS-CHUS, Servicio de Neurología, 2CHUVI, 3Fundación Galega de Medicina Xenómica, Servicio de Neurología 4CHUAC, 5CHOU, 6HULA, 7CHUS, 8 CHOP

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral Tipo A Título: M-Trap: exosome-based capture of tumor cells as a new

technology in peritoneal metastasis Autores: Alexandre de la Fuente, Lorena Alonso-Alconada, Juan Cueva,

Tomas Garcia-Caballero, Rafael Lopez-Lopez, Miguel Abal Grupo de investigación Translational Medical Oncology (IDIS). Institución IDIS Expone Alexandre De La Fuente Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Resumo (máximo 250 palabras): The molecular and cellular bases that determine the stepwise process of metastasis suggest an intense dialogue of the primary tumor with the environment. Tissue specific metastasis and pre-metastatic niches are concepts that are beginning to illustrate an active role of carcinomas in the determination of the most adequate sites to colonize: signals emitted and sensed both from the tumor and from the environment govern the remodeling of targeted tissues for a favored reception of prone tumor cells disseminated from primary lesions. We here describe a novel approach in oncology trying to hamper the process of metastasis by interfering with this intense dialogue, and a probe of concept in a model of ovarian cancer intraperitoneal dissemination: we generated a nanotechnology-based capture device by embedding exosomes onto a 3D-scaffold where metastatic tumor cells preferentially home; M-Trap completely remodeled the peritoneal pattern of metastasis in an ovarian cancer model; we finally evaluated the impact of M-Trap on the outcome of the animal model with a benefit on survival. We created an artificial pre-metastatic niche based on exosomes as key drivers of the crosstalk between metastatic tumor cells and their environment that might compete with natural niches for their capture in M-Trap device. In clinical setting, this represent the capacity to modulate the pattern of metastatic dissemination, the alteration of the process of metastasis by preventing the generation of new foci, and the possibility to transform a systemic disease into a focalized disease where the therapeutic approaches would present again a reasonable effectiveness. Palabras clave: metastasis, peritoneal dissemination, ovarian cancer, pre-metastatic niche, exosomes.

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Título: Caracterización de la calponina-1 en el estómago Autores: Lucía L Senín1, Cecilia Castelao1,2, Arturo Roca-Rivada1,2, Jana

Alonso3, Omar Al-Massadi1,4, Felipe F Casanueva1,2,5, María Pardo1,2, Luisa María Seoane1,2

Grupo de investigación Fisiopatología endocrina Institución IDIS Expone Lucía López Senín Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

La calponina-1 es una proteína de 34kDa conocida por su papel en la contracción del músculo liso. El ratón knockout de calponin-1 presenta un incremento de la ingesta de comida y agua, aumento de la actividad locomotora y una disminución de la población de neuronas del núcleo hipotalámico paraventricular, sin alteración del peso corporal. Nuestro objetivo es caracterizar la regulación de la calponina-1 gástrica bajo distintas situaciones nutricionales y patológicas. Se utilizaron ratas sprague-dawley sometidas a tres condiciones nutricionales: alimentación control ad libitum, ayuno de 48 horas y realimentación de 1 hora tras 48 horas de ayuno; y un modelo de obesidad inducida por la dieta (DIO). Los niveles de mRNA en mucosa gástrica se midieron por RT-PCR y los niveles de proteína en plasma, mucosa y secreción gástrica por western blot. En este trabajo demostramos que la calponina-1 se expresa y secreta en AGS y Kato III dos líneas celulares de la mucosa gástrica. Empleando electroforesis bidimensional hemos identificado dos isoformas de menor peso molecular en el secretoma de explantes de estómago que aumentan tras el ayuno y realimentación. Estos resultados han sido validados por western blot confirmando las variaciones de la calponina-1 de 34 y 17kDa en secreción gástrica, aunque los niveles de expresión permanecen constantes. Además los niveles plasmáticos de ambas isoformas también aumentan en ayuno y realimentación. En ratas DIO disminuye la secreción gástrica de ambas isoformas. Por lo tanto, la alimentación y la obesidad regulan los niveles gástricos de calponina-1. Palabras clave: estómago, calponina-1, regulación de la ingesta, obesidad 1 Lab de Endocrinología Molecular y Celular, Lab 3. Instituto de Investigaciones Sanitarias de Santiago (IDIS). Complejo Hospitalario Universitario de Santiago (CHUS/SERGAS). 2 CIBER Fisiopatología de la Obesidad y Nutrición (CB06/03), Instituto de Salud Carlos III. Spain. 3 MRC Protein Phosphorylation & Ubiquitylation Unit. University of Dundee. 4Departamento de Fisiología y 5 Departamento de Medicina, Universidad de Santiago de Compostela.

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Oral o poster Tipo A Título: Biomarkers in Kidney Diseases Autores: Anna Minasyan, Olaya Lamas Gonzalez, Ana Barcia de la

Iglesia, Carmen Vázquez, Rafael Romero Burgos, Cándido Díaz Rodriguez , Miguel Garcia Gonzalez, Secundino Cigarrán

Grupo de investigación Grupo de Genética y Biología del Desarrollo de las Enfermedades Renales

Institución IDIS Expone Anna Minasyan Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

Fibroblast growth factor 23 (FGF23), M-type phospholipase A2 receptor (PLA2R ) and advanced glycation end products (AGEs) have been established as new interesting and robust biomarkers of some aspects of renal disease. FGF23 regulates phosphorus and vitamin D metabolism and has been found to progressively increase during CKD (chronic kidney disease). Studies suggest that FGF23 is associated with progression of CKD, endothelial dysfunction, left ventricular hypertrophy and mortality. In addition, PLA2R has been identified as a major target antigen in IMN (idiopathic membranous nephropathy) in adults. IMN is an autoimmune disease, one of the common cause of nephrotic syndrome in adult population. AGE s are formed by Maillard reaction, their quantity depends on alimentary intake and smoking, and are generally excreted by urine. They accumulate in CKD and specially in patients receiving dialysis, causing mitochondrial changes (oxidative stress increase ), endothelial and vascular damage (activation of NFkB and cytokines). Our study shows the correlation between FGF23 and aPLA2R serum levels during renal disease progression, and evaluates the response to clinical treatment. In addition, asses cardiovascular risk in patients with hemodialysis and kidney transplant via AGE measurement and its relations with biochemical parameters of inflammation and CV risk. Finally, we conclude the necessity of including this and other new biomarkers as additional support in kidney disease management and treatment Palabras clave: CKD, IMN, FGF23, aPLA2R, AGE, AGE reader

RESUMEN COMUNICACION Tipo de comunicación: Póster Tipo A Título: The REQUITE Project: Validating Predictive Models and

Biomarkers of Radiotherapy toxicity to reduce side-effects and improve quality-of-life in cancer survivors

Autores: Ana Vega, Antonio Gómez Caamaño, Laura Fachal, Paula

Peleteiro, Ana Carballo, Patricia Calvo, Sara Gutiérrez-Enríquez, Meritxell Mollà, Manuel Altabas, Anusha Appanvel, David Azria, Anthony Brookes ,Tom Burr, Jenny Chang-Claude, Susan Davidson, Dirk De Ruysscher, Alison Dunning, Rebecca Elliott, Philippe Lambin, Laura Lozza, Genevieve Pridham, Tiziana Rancati, Barry Rosenstein, Petra Seibold, R. Paul Symonds, Christopher Talbot, Hubert Thierens, Riccardo Valdagni, Frederik Wenz, Adam Webb, Martin Yuille, Catharine West

Grupo de investigación IDIS-Grupo emergente de Genética de Cáncer (E17) Institución IDIS Expone Ana Vega Correo electrónico [email protected]

RESUMEN

The REQUITE project is a new collaborative project funded by the European Union aimed to develop validated clinical models incorporating biomarkers to identify patients at risk of side-effects and use the models to design interventional trials aimed at reducing and to improve quality-of-life in cancer survivors. The main objectives are:

1. Carry out a prospective multi-centre cohort study in 8 countries to collect standardized data on patient characteristics, treatment, radiation side-effects and quality of life as well as blood samples

2. Produce a centralised database and a biobank of DNA for 5,300 patients (breast, prostate, lung cancer)

3. Validate published biomarkers of radiosensitivity 4. Validate clinical predictors of radiotherapy toxicity in breast, prostate and lung cancer and

incorporate biomarker data, 5. Design interventional trials to reduce long-term side-effects 6. Provide a resource for dissemination and exploitation to the radiotherapy community.

In Spain, 180 breast, 290 prostate and 100 lung cancer patients will be recruited at the Fundación Publica Galega de Medicina Xenómica/Hospital Clínico de Santiago de Compostela and Vall d’Hebron Hospital in Barcelona. Radiotherapy toxicity will be evaluated using CTCAE v4.0 criteria. Quality of life data will be comprehensively assessed at four time points: before and at end of radiotherapy, as well as 1 and 2 years after start of radiotherapy. Recruitment will start in May 2014. Accrual period will be 24 months with additional 2 years of follow-up. The project will be completed in September 2018. Further study details can be found at http://requite.eu Palabras clave:

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