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Situacin de resistenciade la garrapataBo o p h i l u s microplus

a acaricidas en ColombiaS E G U N D A E N T R E G A

EFRAN BENAVIDES O RTIZ - ALVARO ROM ERO NAS AYO - JOS L RODRGUEZ BAUTISTA

E l d iagn st ico de r es i s tenc iaPara c o m p r o b a r que existe resistencia a losacar ic idas e n una f inca , se requiere un a cu i dadosa evaluacin de las prcticas util izadaspara su apl icac in , esto permite estar segurode que realmente se est ante una situacinde desarrollo gent ico de resistencia y n oante un prob l ema de inadecuado uso de unproducto .

Hecha la revisin de los mtodos de apl i cac in , se d i s pon e de dos alternativas parac o n f i r ma r la presencia de resistencia: la p r i -mera es la uti l izacin de pruebas de laborator io (conoc idas como pruebas in-vitro) y, lasegunda, es la prueba biolgica sobre an imales experimentales (bovinos ) , la que sec o n o c e como prueba in-vivo.

Las ventajas de las tcnicas in-vitro se resum en en que sus resultados se obt ienen c o n

mayor rapidez, t ienen menores costos y permiten obtener un mayor caudal d e i n f o rma c in , por la cant idad d e i nd iv iduos y c o m puestos que es fac t ible evaluar en cor tot i e m p o . Su desventaja radica en que esi mp o s i b l e representar la compleja real idadde l o que ocurre en la f inca, mediante un aprueba d e laborator io, que s lo simula partede es a c omp l e j a relacin garrapata - husped y el efecto de un ingrediente activosobre el parsito. Estas pruebas requierenexperiencia para interpretar lo s resultados yprecisar el alcan ce de sus impl i cac iones b i o lgicas; afortunadamente, la investigacinadelantada en laborator ios del pas y delexterior permi te ho y en da contar c o n cr i terios efectivos para el lo.

Pru ebas in-v i t roLas pruebas in-vitro a su vez se div iden endos grupos : las qu e ut i l izan larvas y las que

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se real izan con garrapatas repletas (adultas).Ca da una de el las t iene sus ventajas y desventa jas . En e l pr imer t i po se requieren msde seis sem anas para entregar los resultados,d e b i d o a que es necesar io recolec tar en laf i n c a garrapatas repletas , esperar cu atrosemanas para que nazcan las larvas y luegootras dos o tres has ta qu e tengan la edad ade cuada para desarrol lar la prueba. E l uso deesta tcnica permi te d i sponer de un nmeroa m p l i o de ind iv idu os y eva lua r can t idadesimpor t an tes de pr inc ip io s ac t ivos y co nce ntrac iones de producto. En e l las se mide lacapac idad de l p rodu c to pa ra mata r (o inm ov i l izar ) l os ind iv iduo s expues tos .

Existen dos formas de exponer las larvas alaca r i c ida : sumergindolas en suspensiones

de l p rodu c to , a pa r t ir de concentrados e mu l -s ionables disponib les en e l niercado, por unde t e r m i n a do t i e mp o (tcnica de emparedadoo de Sha) o ponerlas en contacto con sobresimpregnados con l . Esta ltima ha s idoadoptada por la FAO como prueba estndarpara e l es tudio de resistencia en t odo e lm u n d o . En las fotos 1 y 2 se ilustra la fo rm acomo se rea l i za .

Las tcnicas que t r aba jan co n garrapatasadultas se basan en la e \aluacin de parmet ros de f e r t i l i d ad , es decir, miden la capac i da d de u n p r odu c t o para inhibir la posturade huevos por par te de la garrapata. Esta tcn i ca es c on oc i da c o m o ' prueba de inmers inde ad u l tos " o tcnica de Drummond ( fotos 3y 4) y t rabaja con base en productos comer-

e

L

P r u e b a d el p a q u e t e d e l a r v a s ( K i d s FAO ) ; l a s l a r v a s s e e x p o n e n a l a c a r i c i d a en l o s p aq ue t es d e p ap e l d e f i l t r o ( f o t o .L u e g o d e 2 4 h o r a s s e d e t e rm i n a la m o r t a l i d a d ( f o t o 2 ) .nicamente a q u e l l a s l a r v a s q ue so n c ap ac es d e c a m i n a r s o n c o n s i d e r ad a s c om o vivas.

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o CEPAYEERONG PILLYINMERSIN C O N AMITRAZ

1.040 p.p.m.

o PRUEBA INMERSION D E A D U L T O S E N AMITRAZC E P A M O N T E C I T O S

1.040 p.p.m.

P r u e b a d e D ru m m o n d ( inmersin d e a d u l t o s ) ; l u e g o d e 1 5 ds d e h a b e r sum e r g i d o l a s g a r r a p a t a se n el acaric ida, se obse r va l a p o s t u r a . Cuan d o l a cepa es sus cep t i b l e ( f o t o 3 ) se i n h i b e l a p o s t u r a ,cuan d o es r es i s t e n t e ( f o t o 4 ) , l a po s t u r a es c o m p l e t a .

c a les , o f rec iendo informacin rpida sobrela situacin de res istenc ia en condic iones decam po (es fact ib le obtener resultados a lasdos semanas). La desventaja de esta prueba

es que requiere de un a lto nmero de garrapatas adultas (100-200) de buena cal i da d, lasque en ocas iones son dif ci les de reco lectaren c o nd i c i o nes d e c am p o .

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A n ive l nac iona l estas pruebas se han v e n i doper f ecc ionando en el l abora tor io a travs delo s aos. P r imero fueron u t i l izadas com o he r ramientas de investigacin, pe r o a c t u a lme n te estn d ispon ib les como serv i c io tar i fado,para cua lqu ier persona q u e r equ ie ra conocerla situacin de garrapatas de su f inca . En laac tua l idad se t i enen d ispon ib les tcnicaspara diagnosticar resistencia a lactonas m a-crocc l icas ( ivermect inas) , lom i s m o que a las amid inas(amitraz ) , adems de las qu ese r e lac ionan en las invest igac iones rea l izadas. CE)

desarrol lo y val idac in de diferentes pruepara el diagnstico de resistencia en p oc iones de c a m p o , trabajando p r i m e r o cuna co lon ia de l abora tor io tBenav ides et1 9 8 9 ) en el cent ro de investigacinL iber tad, enV i l l a v i c e n c i o . Ese t rabajo pm i n a r demost r que la c o l o n i a deLibertad erasuscept ib le al Amitraz, Clor ff infos, Cumafos, Eth ion y Del tamet r ina , s

r indose la presenc iares istenc ia inc ip iente hla C ipermet r ina .

Las tcnicas in-vivose c on s i deran la "prueba re ina" , yaq u e p e r m i t e n c o n o c e r elgrado de res istenc ia queocurre rea lmente sobre losanimales afectados, tratadosadecuadamente con el p r o d u c to q u e se evala. Consiste n en infestar c o n garrapatas(de manera natura l o art if ic ia l ) a grupos de an ima les(1 0 - 15 c a d a u n o ) , los queluego son tratados con elgarrapat ic ida a evaluar, rea l izando poste r io rmente eva- " " " "luac iones cuant i tativas. Estosmtodos r equ ie ren de infraestructura y personal entrenado, lo que las hace costosas yrea l izables solamente para f ines de invest igacin.

Rep o r te s de r e s i s t enc i ae n C o l o m b i aDesde i n i c ios de la dcada del ochenta ,nuestro grupo de investigacin trabaj en el

Las tcnicasin-vivo se consideran

la ''prueba reina",ya que permiten conocerel grado de resistenciaque ocurre realmente

sobre los animalesafectados, tratados

adecuadamenteco n el producto que

se evala.

A me d i a dos de los ocheen un t r aba jo pre l im ina rcu lm in un estudio endepar tamento de A n t i oq(Lpez etal.. 1989 ) r ecot an d o garrapatas en ma t aros mun ic ipa les y usacomo dos is d isc r imina ten la prueba de D r u m mla dosis recomendada p of ab r i cante ; all se sugiri exista un p r ob l e ma e mgente de resistencia a piretro ides sintticos (PSqu e a lg u n os c om pu e seran p o c o ef i caces para ct ro lar la ef icac ia r e p r o d uva en muestras de c a m

Por su parte a lgunos organo fosforados (Opesar de que f ue ron desp lazados del mcado, demost ra ron un a p r op i a do n i v e lcon t ro l .

Betancourt (1993), utiliz la prueba demersin de adu l tos y el e mpa r e da doShaw e xa m i n a n do oc h o cep as procedende losm u n i c i p i o s d e l Ta mbo , Santander

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Qui l ichao, Cartago, Zarza l , Pa lmira , Pa les t ina , Man iza les y M a r i q u i t a . En la prueba deinmersin de adu l tos , los PS f l u me t r i n a , d e l t ame t r ina , a l f ac ipermet r ina y l ambdacya lo t r i-na e jerc ieron u n con t ro l en tre ba jo y m o d e rado sobre la capac idad de reproduccin delas cepas estudiadas . El ami t raz evidenci unbuen con t ro l .

Rivera y Rodrguez ( 1989 ) ,e v a l u a r on n u e v a me n t e lac o l o n i a ma n t e n i da en el ICAd e V i l l a v i c e n c i o y c u a t r ocepas de c a mpo , u t i l i z a n dot am bin l as tcn icas deinmers in de a du l t o s , laprueba de inmers in de larvas ( emparedado de Shaw) yios Kits de FAO. Los resu l tados i n d i c a r on s u s c e p t i b i l i dad a los OP e th ion , c lo r f en-vinfos, c u ma f os y adems alami t r az . Para lo s PS c i p e r m e t r i na y d e l t a m e t r i n a , sedetect bajo efec to sobre lareproduccin de las te leogi-nas , medida en la p r u e ba deinmersin, en tanto q u e e nla prueba de mor ta l idad l a rvaria se encontr suscept ib i- ----^^^l idad. Los resultados para lascepa s de campo mos t ra ron suscept ib i l idad alos O P y a l ami t raz y diferentes grados desuscep t ib i l idad y resistencia para los rgano-c lorados OC ya los PS.

T r e s e s tud io s p o b la c io na l e sEn el Centro de Invest igac in en Salud yProduccin A n i m a l (CEISA) de Bogot , du rante esta dcada se han cu lm ina do t res es tu-

cs:>La resistencia

ha tenido su origen,la mayora de

las veces, enlas malas prcticas

de aplicacinque se dan

co n frecuenciaen nuestras

explotaciones.

dios pob lac iona les en los depar tamentos deMe t a , H u i l a y Nor t e de Santander, basadosen muestras recolec tadas direc tamente en laf i n c a y anal izadas con e l K i t FAO (Hernndez , 1993; Romero etal., 1997 ) .A l m i s mo t i e mp o se apl ic una encuesta anivel de c a mpo s ob r e los mtodos de c on t r o lparas i tar io , para establecer la pos ib le asoc ia

c in de factores de r iesgoc o n la presenc ia de res is tencia. Todos lo s factores der iesgo evaluados se asoc iar o n c o n l a p r e s e n c i a der es i s t enc ia , s i endo los dema y or i n f l u e n c i a la bajaefect iv idad de los produc tos(reportada por los encuesta-dos), e l t i e m p o de ut i l i z acin (menor de tres meses),el s istema de bao ( bombade aspersin manual ) , raza( t ipo Bo s taurus) y e l t i po deexplotac in ( leche y dob l epropsi to) . C o m o c o n c l u sin de estos estudios, se hademos t rado qu e el patrn deresistencia o suscept ib i l idadvara i n tensamente de f incaa f inca y q ue existen u n aserie de factores de r iesgo

q u e se asoc ian co n l a presenc ia de resistenc ia .

Los resultados de los es tud ios menc ionadosrevelan q u e e n e l depar tamento de l Me t a , de4 0 muestras evaluadas se demostr la p r e senc ia de resistencia a los OP en 5 f incas ,mientras q u e 2 5 f incas demostraron res is tenc ia a los PS (Hernndez, 1993 ) . En el H u i l a ,

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d e nuevo se demostr resistencia a losp i ret roides sintticos en 25/40 f incas y para losO P en el 1 2 . 5 % de las f incas. En ambosdepartamentos dentro de los factores deriesg o de resistencia seencontr el t i po rac ia l delos animales (genot ipos lecheros) . Para elcaso del Norte de Santander (Benavides,Mrquez y Romero, datos no publ icados) losresultados de l aborator io ind icaron la p r e sencia de resistencia a los PS en c i n c o dediez f incas evaluadas para estos compue stos,mientras queen 8/13 fincas se encontraronaltos niveles de resistencia para losOP. Enc i n c o deesas f incas se demostr presenciade genes multi-resistentes para los dos grup os de compuestos eva luados .

Por otra parte, en la U n i d a d deGarrapatas dePalmira, as c o m o enelCEISA sehan mult i p l i c ad o y carac ter izado parc ia lmente a lgunas c epas resistentes deo r igen c o lo m b iano ;se destacan entre ellas varias c epas resistentes a PS procedentes del Va l le del Cauc a(T inajas, Danubio y Piedras Gordas) ; LaC e p aPaso Ancho (Betancourt , A. & Cassalett, E.,comun icac in persona l , 1999 ) , la c ua l esmulti-resistente a OP, PS y algo para am i d i nas. Por su parte nuestro grupo de invest igacin aisl la C e p a Bonanza del P iedemonteLlanero, la cua l fue t ip i f i cada por el WARRC(W or ld Ac ar i c ide Res is tance ReferenceCenter) como multi-resistente para OC,OP yPS. Recientemente se ha c o n c l u i d o la caracterizacin de la C e p a Montec i tos la c ua l esmulti-resistente para OP, PS yAmit raz ( B en a vides, Romero & Snchez, 1 9 9 7 ) y de laCepa Pa lma deV i n o , la c ua l es resistente alo s PS y OP, suscept ib le a las amid inas y seposeen fuertes ind ic ios deque es resistente alas Ivermectinas. En el Mapa se observa la

ubicac in de algunas de las c epas mresistentes encontradas hasta ahora epas.

Ubicacin geogrica de c e p a s de la g a r r a p a t aBoophilus microplus, m u l t i- r e s is t e n t es a v a r i o s g r u pd e a c a r i c i d a s , en C o l o m b i a . Las caracterticasd e c a d a c e p a se d e t a l l a n en el t e x t o .

Conclusiones1 . La resistencia a losacar ic idas en C o l

b i a es un hecho rea l .2 . Se han enc o n t r ad o en el pas tanto c

resistentes a un pr i n c i p i o a c t ivo c o mvarios dee l lo s , d epend i end o de lasrentes regiones.

3. La resistencia hat en id o su or igen , layora de las veces, en las malas prctde ap l i cac in quesedan con f recueen nuestras explotac iones. V

Espere en laprxima entrega las r ecomendanes especficas de Manejo Integrado de Plque deben ponerse en prctica a nivel de fpara disminuir el impacto de la resistencia.

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colomtiia^ Reso luc i

02586 de

Im pc e r t i f i

ide fien la

| B | Zon a li bre s in vacunac in^ cer t i f i cada OIE 1997Zo na l ibre con vacunac ina cer t i f i car OIE 2001

' Zo na de protecc inZ o n a endmica