REPORTE DE DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO PRESA BLANCA: PUENTE 2, DE ACUERDO A LAS NORMAS...

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    REA DE SUSTENTABILIDAD PARA EL DESARROLLOPROGRAMA ACADMICO DE QUMICA

    ESPECIALIDAD TECNOLOGIA AMBIENTAL

    GRUPOQU-301

    MATERIA

    MICROBIOLOGA AMBIENTAL

    TITULO

    REPORTE DE DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO PRESA BLANCA:PUENTE 2, DE ACUERDO A LAS NORMAS PROY-NMX-AA-042-SCFI-2005

    Y NMX-AA-042-SCFI-1987

    PRESENTANFelipe Florido Mauricio Ivn

    Macas Jasso Luz EveliaMartnez Chiquito Josu Neftal de Jess

    Rea Garca Cesar Alejandro

    GENERACIN: 2014-2016

    LEN, GUANAJUATO. 24 DE JUNIO DE 2015

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    NDICE

    ANTECEDENTES ....................................................................................................................... 3

    PROCEDIMIENTO DE LA TOMA DE MUESTRA Y DE LA SIEMBRA IN SITU................. 4

    PRUEBA PRESUNTIVA PAR LA DETECCIN DE COLIFORMES TOTALES................. 6

    PRUEBA CONFIRMATIVA PARA COLIFORMES TOTALES.............................................. 8

    PRUEBADE OXIDASA PARA ORGANISMOS COLIFORMES.......................................... 10

    PRUEBA PARA LA DETECCION DE ORGANISMOSCOLIFORMESTERMOTOLERANTES ............................................................................................................ 11

    PRUEBAPRESUNTIVA DE E. coli(INDOL)......................................................................... 12

    REFERENCIAS ......................................................................................................................... 13

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    ANTECEDENTES

    A consecuencia del crecimiento demogrfico y desarrollo industrial tanacelerado que presenta el municipio de Len, se manifiestan algunos riesgos

    sanitarios que afectan al ser humano y su entorno.Proteccin civil seala En Len se cuenta con una presa de aguas negras

    y residuales (Presa Blanca), donde desembocan todo tipo de desechosindustriales y domsticos, el agua de dicha presa se conduce a travs de un canala cielo abierto, hacia las Comunidades de Santa Rosa, Plan de Ayala y San Pedrodel Monte. Su destino final es para el riego de alfalfa y lechuga, estas aguas estnfuertemente contaminadas qumica y bacteriolgicamente, al no sufrir ningntratamiento de remediacin.

    La Presa Blanca est situada en el Municipio de Len (en el Estado de

    Guanajuato), en las coordenadas 21.087510, -101.709788. Esta PresaBlanca est a 1785 metros de altitud.

    La zona sur del municipio de Len es la ms contaminada debido a laquema de pastizales y a los tiraderos clandestinos de desechos industriales.

    La presa a se ha convertido en un tiradero de desechos industriales, desdelodos de teneras, hasta llantas, madera.

    En marzo de 2013 Fidel Garca comento en el peridico am S, tenemosun problema de contaminacin por las descargas que se estn haciendo en la

    presa Blanca, que es histrico. Las descargas industriales de Len llegan a lapresa de San Germn y Silva, por ello se han registrado mortandad de peces enaos anteriores. Lo nico que se hizo fue relocalizar el problema ambiental, peroesto tiene ms de 10 aos,

    Imagen 1. Foto satelital de presa blanca en Len, Gto.

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    PROCEDIMIENTO DE LA TOMA DE MUESTRA Y DE LA SIEMBRA IN SITU

    Fundamento

    La siembra in situ involucra el mantenimiento y conservacin de los

    microorganismos en donde estos se encuentran, el agar rojo bilis violeta esutilizado para la determinacin y recuento de microorganismos de la familiaEnterobacteriaceaeen alimentos y otros.

    Materiales

    3 cajas Petri.

    1 matraz Erlenmeyer de 250mL.

    2 Frascos estriles.

    1 jeringa estril.

    Guantes.

    Etiquetas.

    Agar rojo bilis violeta.

    Autoclave.

    Campana de flujo laminar.

    hisopos estriles.

    Algodn

    Gasas

    Papel estraza

    Preparacin del medio

    Disolver 41.5g de agar Rojo Bilis Violeta en un matraz Erlenmeyer en unlitro de agua purificada. Mezclar perfectamente, calentar con agitacin frecuente yhervir durante un minuto hasta disolucin completa. Enfriar de 42 a 44Caproximadamente y usar de inmediato. Si se prefiere esterilizar en autoclave a

    121C por 15 minutos.Procedimiento

    Preparacin del medio de cultivo para la muestra.

    1. Prepara 100mL de rojo bilis violeta, de acuerdo a la receta del medio.2. El matraz se cierra con un tapn de algodn y gasa, y a su vez se cubre

    con aluminio la parte superior.3. Envolver las 3 cajas de Petri utilizando papel estraza.

    4. Se introducen las cajas Petri con un matraz Erlenmeyer de 250 previamentelavado al autoclave a 15 libras de presin (121 C) por 15 minutos. (Porseguridad supervisar todo el proceso de esterilizacin hasta su trmino).

    5. Dejar enfriar hasta que sea posible sostenerlo con las manos, y en lacampana de flujo laminar verter en las cajas Petri esterilizadas entre 20 a30 mL del agar.Retirando el tapn del matraz, sin dejarlo en la mesa, luegose levanta la tapa de la caja Petri estril, solamente lo necesario parapermitir la entrada del cuello del matraz para vaciar el agar. Inmediatamente

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    se vuelve a tapar la caja Petri. Taparlo nuevamente si es que aun contienemedio de cultivo.

    6. Es necesario mover ligeramente la caja para que el medio se distribuyauniformemente (se recomienda cerca de la campana de flujo laminar). Nose debe mover bruscamente ni destapar hasta que el agar este

    completamente solidificado, para poder ser inoculado.7. Introducir las cajas Petri a la incubadora hasta su uso.

    Toma de muestra de agua

    1. Buscar y seleccionar el lugar donde se tomara la muestra.2. Se toma con la jeringa estril 1 mL del agua a analizar y se coloca en la

    caja Petri previamente preparada con agar rojo bilis violeta, al mismotiempo se abre la caja Petri con el agar que se utilizara como control.3. Tomar una muestra del agua que se desea analizar en un frasco estril

    que debe llenarse a 2/3 partes de su capacidad para que quede un espaciode aire en el recipiente

    4. El frasco donde se colecte la muestra no se debe abrir sino hasta elmomento en que se efecte el muestreo, evitar tocar el cuello del frascocon los dedos o que entre en contacto con cualquier otro material.

    5. Cubrir el frasco de la tapa con aluminio.

    Toma de muestra de suelo1. Buscar y seleccionar el lugar donde se tomara la muestra.2. Con apoyo de una pala escavar una profundidad de 30 cm en la zona

    elegida.3. Tomar un hisopo esterilizado y frotar ligeramente en todo el contorno del

    agujero donde se llevara a cabo el muestreo.4. De manera simultnea abrir las cajas Petri que contienen agar rojo bilis

    violeta en la toma de la muestra colocar por medio de la tcnica deestratificado, dispersar cuidadosamente la muestra sobre la caja Petri; elcontrol debe permanecer abierto durante todo el proceso de la toma demuestra.

    5. Al terminar la toma de muestra, se debe de conservar la muestra a 4Cevitando cualquier contacto al sol.

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    PRUEBA PRESUNTIVA PAR LA DETECCIN DE COLIFORMES TOTALES

    Fundamento

    Caldo lactosado,Se utiliza como prueba presuntiva para investigar lapresencia de bacterias del grupo coliforme en agua, productos lcteos, etc.

    Durante la realizacin de esta prueba se genera gas debido, a lafermentacin de lactosa la cual es una de las cualidades principalescaractersticas que solo poseen los coliformes.

    Materiales

    18 tubos de ensayo 15x35.

    18 campanas Durham.

    Matraz Erlenmeyer 250 mL. Caldo lactosado BD Bioxon.

    Balanza analtica.

    Incubadora.

    1 Gradilla

    Especificaciones del fabricante

    Disolver 13g de Caldo lactosado DB Bioxon en litro de agua purificada.Disolver y distribuir en tubos con campana Durham. Esterilizar a 121C de 12 a 15minutos.

    Procedimiento

    1. Preparar 120 mL de caldo lactosado, a doble concentracin de acuerdo alas especificaciones del frasco.

    2. Llenar 6 tubos de ensayo con 10 mL del caldo lactosado y 12 tubos deensayo con 5 mL (9 matraz Erlenmeyer son para la muestra de agua y 9para la muestra de suelo).

    3. Para la muestra de agua, a 3 tubos de ensayo se le introducir 10 mL demuestra, a otros 3 tubos se le aadir 1 mL de muestra y 5 mL de aguadestilada y por ultimo a 3 tubos 0.1 mL de la muestra con 5 mL de aguadestilada. Se repiten estos pasos con la muestra de suelo.

    4. Para la muestra de suelo, se toman 1 g de suelo y se diluyen en 50 mL deagua esterilizada, despus se realizan los mismos pasos que la muestra deagua.

    5. Meter Las campanas Durhan en cada uno de los tubos con caldo lactosado,cuidando que no tengan aire dentro, si es necesario, tomar el tubo y girarlolentamente, hasta que se elimine el aire en la campana Durham.

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    6. A los tubos de ensayo se le coloca un tapn de algodn y gasa, y a su vezse Coloca capucha de aluminio.

    7. Los tubos se introducen a la incubadora (37C entre 24 y 48 horas), si a las24 la prueba es negativa, esperar hasta las 48 horas.

    8. Despus de la incubacin se producir gas que estar atrapado en la

    campana Durham y el caldo tendr un vire de violeta a amarillo a causa dela acidificacin por la fermentacin.

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    PRUEBA CONFIRMATIVA PARA COLIFORMES TOTALES

    Fundamento

    En el procedimiento para la cuantificacin por NMP se usa el medio de

    cultivo caldo lactosado bilis verde brillante, el cual es un medio selectivo, conlactosa, la cual es fermentada por los organismos coliformes y sales biliares quefuncionan como agentes selectivos e inhibidores, para la prueba confirmativa enNMP.

    Las sales biliares y el cristal violeta del medio inhiben la flora acompaantegrampositiva. La fermentacin de la lactosa hace que vire el indicador rojo neutroa un color rojo purpura.

    Materiales

    18 tubos de ensayo. 18 campanas Durham.

    1 Matraz Erlenmeyer 250 mL. 1 Gradilla

    1 Asa de platino

    Caldo verde brillante bilis al2% BD Bioxon.

    Balanza analtica.

    Incubadora.

    1 Mechero bunsen

    Especificaciones del fabricante

    Disolver 40g del medio deshidratado en un litro de agua destilada, agitandofrecuentemente para disolver el producto, dispense en tubos con campana

    Durham. Esterilizar 121C durante 15 minutos.

    Procedimiento

    1. Se cultivara una asada del cultivo obtenido en la prueba presuntiva encaldo verde brillante bilis los tubos que dieron positivo en la pruebapresuntiva.

    2. Preparar el Caldo bilis verde brillante necesario para los tubos de acuerdo alas instrucciones del fabricante.

    3. Llenar 9 tubos de ensayo con 10 mL de caldo verde brillante4. Introducir de manera invertida las campanas Durham en cada uno de los

    tubos e invertir el tubo con el caldo cuidando de eliminar completamente elaire de la campana Durham.

    5. Los tubos de ensayo se cierra con un tapn de algodn y gasa, y a su vezse cubre con aluminio la parte superior del tubo de ensayo.

    6. Esterilizar a 121C durante 15 minutos.

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    7. Tomar una asada de la muestra de los tubos que dieron positivo a la pruebapresuntiva. El asa de nicromo debe ser esterilizada con el mechero bunsen,antes y despus de que se inoculen los tubos de ensayo con el medio decultivo. Incubar a 37C durante 24 horas en observacin constante.

    8. Al finalizar el resultado ser positivo si en los tubos se presenta turbidez y

    gas en las campanas Durham.9. Para estimar el nmero ms probable de coliformes, se cuentan los

    positivos por rplicas, teniendo en cuenta la procedencia de donde viene eltubo positivo, se busca en la tabla que se eligi con anterioridad pararealizar el anlisis.

    10. Revisar las tablas estadsticas para interpretacin de resultados por elmtodo de nmero ms probable (NMP) que se pueden encontrar enPROY-NMX-AA-042-SCFI-2005.

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    PRUEBA DE OXIDASA PARA ORGANISMOS COLIFORMES

    Fundamento

    Se utiliza para determinar la presencia de Pseudomonas aeruginosa

    (+),Neisseria spp(+),Aeromonas spp (+),Vibrio spp(+), y Moraxella (-). La reaccinde la oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromooxidasa que activa laoxidacin del citocromo que es reducido por el oxgeno molecular que produceagua o perxido de hidrgeno segn la especie bacteriana.

    Los discos contienen oxalato de dimetil-para-fenilendiamina, el cual es elsustrato de la enzima oxidasa. Los microorganismos que producen la enzimaoxidasa se evidencian porque en presencia de oxgeno atmosfrico y citocromo c,se oxida el sustrato presente en los discos a un compuesto de color rojo-fucsia.

    Materiales

    Caja de Petri.

    Papel Filtro.

    1 Gradilla

    Agar bacteriolgico Bioxon

    Gotero.

    1 Mechero bunsen Asa de platino

    Receta del medio

    El agar bacteriolgico Bioxon se usa en la preparacin de medios de cultivomicrobiolgicos slidos y semislidos. Tambin puede usarse en concentracionesmenores como retardante de la penetracin del oxgeno en medioslquidos.

    Procedimiento1. Llevar a cabo la prueba con subcultivos puros de los organismos

    fermentadores de lactosa, crecidos en medio Agar nutritivo, como sigue.2. Colocar de 2 a 3 gotas de reactivo de oxidasa recientemente preparado en

    un papel filtro en una caja de Petri (Solucin 1% de NNNN, tetrametil, 1-4fenilendiamina en agua destilada).

    3. Con una barra de vidrio o un asa de alambre de platino, colocar parte delcultivo en el papel filtro preparado.

    4. Considerar la aparicin de un color azul marino purpreo en un lapso de 10

    segundos como una reaccin positiva.NOTA. - En cada ocasin que se use el reactivo de oxidasa, llevar a cabo

    pruebas de control con cultivos de organismos que se sepa dan una reaccinpositiva (Pseudomona aeruginosa) y uno que de una reaccin negativa (E, coli) en100 cm3 de la muestra.

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    PRUEBA PARA LA DETECCION DE ORGANISMOS COLIFORMESTERMOTOLERANTES

    Fundamento

    Organismos capaces de crecimiento aerobio tanto a 44 C 0,25 C como a 44,5C 0,25 C en un medio lquido de lactosa, con produccin de cido y gas en unperodo de 48 horas.

    Materiales

    1 Asa de platino

    1 Pipeta de 10 mL

    6 Tubos de ensayo

    Reactivo Kovacs

    Caldo triptona

    1 Gradilla

    Procedimiento1. Tomar una asada de los tubos de ensayo que dieron positivo a la prueba

    confirmativa de coliformes totales,la asa de platino debe ser esterilizada conel mechero bunsen, antes y despus de que entra a los tubos de ensayocon el medio) e inocular un tubo con caldo triptona, incubarlo a 44C por 24 2 h.

    2. Finalizada la incubacin, adicionar entre 0.2 y 0.3 mL de reactivo de Kovacso Ehrlich.

    3. La presencia de una coloracin roja en la superficie del tubo se considera

    como prueba positiva para la presencia de indol.

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    PRUEBA PRESUNTIVA DE E. co l i (INDOL)

    Fundamento

    EL indol es uno de los productos de la degradacin del aminocidotriptfano que se encuentran en los caldos de triptona; por su base nutritiva,permite el desarrollo de diversas especies bacterianas, adems debido a su altocontenido de triptofano, es un buen sustrato.

    El reactivo de Kovacs para detectar la produccin de indol, producidodebido a la fermentacin de las bacterias con el medio lactosado.

    Materiales

    1 Asa de platino1 Asa deplatino

    1 Pipeta de 10 mL 6 Tubos de ensayo.

    Reactivo Kovacs

    Caldo triptona

    Triptona

    Cloruro de sodio

    1 Gradilla

    Preparacin de agua Triptonada

    Suspender 15 g de polvo en 1 litro de agua destilada. Mezclar bien y distribuir.Esterilizar en autoclave a 121C durante 15 minutos

    Procedimiento

    1. Tomar una asada de los tubos de ensayo que dieron positivo a la pruebaconfirmativa de coliformes totales (la asa de platino debe ser esterilizadacon el mechero bunsen, antes y despus de que entra a los tubos deensayo con el medio) e inocular un tubo con caldo triptona, incubarlo a

    44C por 24 2 h.2. Finalizada la incubacin, adicionar entre 0.2 y 0.3 mL de reactivo de Kovacs

    o Ehrlich.3. La presencia de una coloracin roja en la superficie del tubo se considera

    como prueba positiva para la presencia de indol.

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    REFERENCIAS NORMA OFICIAL MEXICANA NMX-AA-42-1987 CALIDAD DEL AGUA

    DETERMINACION DEL NUMERO MAS PROBABLE (NMP) DECOLIFORMES TOTALES, COLIFORMES FECALES(TERMOTOLERANTES) Y Escherichia Coli PRESUNTIVA.

    NORMAS PROY-NMX-AA-042-SCFI-2005 NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-112-SSA1-1994, BIENES Y

    SERVICIOS. DETERMINACIN DE BACTERIAS COLIFORMES.TCNICA DEL NMERO MS PROBABLE.

    (sin autor).(sin fecha).dia de consulta 21 de junio del 2015. Disponible en :http://proteccioncivil.guanajuato.gob.mx/atlas/sanitario/leon.php

    Pascual R.2000.Microbiologia alimentaria: metodologa analtica paraalimentos y bebidas. Segunda edicin; Espaa. DIAZA de santos. p 20.

    http://proteccioncivil.guanajuato.gob.mx/atlas/sanitario/leon.phphttp://proteccioncivil.guanajuato.gob.mx/atlas/sanitario/leon.phphttp://proteccioncivil.guanajuato.gob.mx/atlas/sanitario/leon.php
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    ANALISIS MICROBIOLOGCO DE SITIO ALTERADODATOS DEL SITIO

    BREVE DESCRIPCION DEL ESTATUS AMIBENTAL DE LA ZONA DE ESTUDIO:

    Llenar con letra azul marino como lo indica este rengln

    ZONA DEESTUDIO

    Nombre Ubicacin Imagen de mapa satelital

    La Presa Blanca 101 41' 58.2" W,21 5' 29.32" N

    EVIDENCIA FOTOGRFIA DEL LA ZONA

    Fecha:10/03/2015

    Hora:10:48 am

    Fecha:10/03/2015

    Hora:11:39 am

    Fecha:10/03/2015

    Hora: 11:50 am

    SITIO DEMUESTREO

    Nombre Ubicacin/coordenadas GPS

    Imagen de mapa satelital

    Puente 2

    101 42' 40.06" W,21 5' 43.18" N

    EVIDENCIA FOTOGRFIA DEL SITIO

    Fecha:10/03/2015

    Hora:10:17 am

    Fecha:10/03/2015

    Hora:10:20 am

    Fecha:10/03/2015

    Hora:10:21 am

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    DATOS DE LAS MUESTRAS A ANALIZARMuestra 1

    Identificacin y condiciones de transporte

    Matriz ambiental: Agua

    Punto de Muestreo (ubicacin /coordenadas GPS):101 42' 40.1" W, 21 5' 43.08" N

    Tipo de material del contenedor:Vidrio

    Hora de toma de muestra: 12:40 pm

    Capacidad volumtrica del contenedor: 250

    Ml

    Nombre del Embalse o Ro: Presa Blanca Esterilidad del contenedor: si No

    Nombre del/ los analistas que tomaron la muestra:

    Felipe Florido Mauricio Ivn

    Martnez Chiquito Josu Neftal de Jess

    Tratamiento previo o al momento de la

    toma de muestra: si No Especificar

    cual: ningn tratamiento microbiolgico

    Describir condiciones de transporte y almacenamiento de la muestra:

    4C, obscuridad y sin contacto con el medio, contenedor lleno a 2/3 partes y cubierto con capuchas de aluminio.

    Parmetros Fisicoqumicos

    Describir condiciones climatolgicas: nublado (sin sol) Temperatura (oC): 27 C pH: 7.2

    Color: Caf turbio Volumen de muestra: 200 mL

    Olor: Desagradable ( sulfuros) Nombre del analista: Felipe Florido Mauricio

    Ivn

    Evidencia fotogrfica del sitio de toma de muestra y la muestra en su contenedor

    Muestra 2

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    Identificacin y condiciones de transporte

    Matriz ambiental: Suelo

    Punto de Muestreo (ubicacin GPS):101 42' 40.1" W, 21 5' 43.08" N

    Tipo de material del contenedor:

    Vidrio

    Hora de toma de muestra: 11:45 am

    Capacidad volumtrica del contenedor: 113 g

    Nombre del Embalse o Ro:

    Presas BlancaEsterilidad del contenedor: si No

    Nombre del/ los analistas que tomaron la

    muestra:

    Luz Evelia Macas Jasso

    Tratamiento previo o al momento de la toma de muestra: si No

    Especificar cual: Ningn tratamiento microbiolgico

    Describir condiciones de transporte y almacenamiento de la muestra:

    4C, Obscuridad y sin contacto con el medio, contenedor lleno a 2/3 partes y cubierto con capuchas de aluminio.

    Parmetros Fisicoqumicos

    Describir condiciones climatolgicas:

    Nublado

    Temp. (oC): 28C pH:N/A

    Color: Caf Obscuro Volumen de muestra: 100 g

    Olor: Desagradable Nombre del analista: Luz Evelia Macas Jasso; Cesar Alejandro Rea Garcia

    Evidencia fotogrfica del sitio de toma de muestra y la muestra en su contenedor

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    RESULTADOS DEL ANLISIS MICROBIOLGICO

    Nombre del sitio:__Presa Blanca: puente 2_____________________________

    Matriz:_____________Agua__________________________

    RESULTADOS DE LA SIEMBRA IN SITU

    Medio de cultivo utilizado: _______Agar rojo bilis violeta__________________________

    Profundidad Cantidadde muestraanalizada

    Evidencia fotogrfica Interpretacin deresultados

    10 cm 1 mlCantidad de

    crecimiento:

    crecimiento excesivo

    Morfologa colonial:

    Se puede apreciar

    una gran cantidad de

    puntos rosas, con

    una textura

    gelatinosa de

    superficie plana, los

    bordes tienen un

    color rosa con una

    textura poco rugosa.Color de la colonia:

    rosa

    Color del medio de

    cultivo: rojo

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    DATOS GENERALES DEL ANLISIS

    Prueba presuntiva paracoliformes totales

    Prueba confirmativacoliformes totales

    Prueba confirmativa paraEscherichia colipresuntiva

    Medio de cultivo

    utilizado

    Caldo lactosado Caldo verde brillante bilis al

    2%

    Agua triptonada

    Marca comercial

    del medio de

    cultivo utilizado

    Bioxon Bioxon Bioxon

    Fecha y hora de

    inicio de

    incubacin

    10 de Junio 3:30 pm 11 de Junio 3:30 pm 12 de Junio 4:00 pm

    Fecha y hora de

    fin de incubacin

    11de Junio entre 3:25 pm 12 de Junio 3:40 pm 15 de Junio 5:50 pm

    Temperatura de

    incubacin (C)

    37C 37C 44C

    Marca del

    incubador

    utilizado

    Felisa Felisa Novatech

    Dilucin de la

    muestra original

    para analizar

    N/A 5:50 N/A

    Nmero de tubos

    y volumen de la

    muestra analizada

    3 con 10 mL,

    3 con 1 mL y

    3 con 0.1 mL

    3 tubos

    Un asada del cultivo

    presuntivo

    3 tubos

    Con una asada

    Reactivos osoluciones

    especficos para la

    prueba

    N/A N/A Reactivo de Kovac

    Numero de tubos

    con crecimiento

    positivos

    9 3 3

    Numero de tubos

    con presencia de

    gas en campana

    Durham

    9 3 2 tubos de 3

    Numero de tubos

    con vire de

    indicador de pH

    purpura de

    Bromocresol

    N/A N/A N/A

    Frmula para el

    clculo de NMP

    Con ajuste de

    dilucin

    N/A NMP = Valor de cdigo detablas / Dilucin mayor

    N/A

  • 7/23/2019 REPORTE DE DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO PRESA BLANCA: PUENTE 2, DE ACUERDO A LAS NORMAS PROY-NMX-

    19/23

    19

    EVIDENCIA FOTOGRFICA

    Agua

    Prueba presuntiva paracoliformes totales

    Prueba confirmativacoliformes totales

    Prueba de coliformestermotolerantes

    Prueba confirmativa paraEscherichia coli

    presuntiva

  • 7/23/2019 REPORTE DE DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO PRESA BLANCA: PUENTE 2, DE ACUERDO A LAS NORMAS PROY-NMX-

    20/23

    20

    Nombre del sitio:___Presa Blanca: Puente 2____________________________

    Matriz:______Suelo_________________________________

    Resultados de la siembra in situ

    Medio de cultivo utilizado: _________Agar Rojo Bilis Violeta________________________

    Profundidad Cantidadde

    muestraanalizada

    Evidencia fotogrfica Interpretacin deresultados

    30 cmhisopo Cantidad de

    crecimiento:

    moderado

    Morfologa

    colonial:

    Se puede apreciar

    una superficie

    color marrn, con

    microorganismo

    de diferentes

    tamaos en

    forma de tiras de

    color negro y/ogris obscuro.

    Color de la

    colonia: blanco y

    negro

    Color del medio

    de cultivo: rojo

    claro

  • 7/23/2019 REPORTE DE DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO PRESA BLANCA: PUENTE 2, DE ACUERDO A LAS NORMAS PROY-NMX-

    21/23

    21

    Datos generales del anlisis

    Prueba presuntiva paracoliformes totales

    Prueba confirmativacoliformes totales

    Prueba confirmativa paraEscherichiacolipresuntiva

    Medio de cultivo

    utilizado

    Caldo lactosado Caldo verde brillante bilis al

    2%

    Agua triptonada

    Marca comercial

    del medio de

    cultivo utilizado

    Bioxon Bioxon Bioxon

    Fecha y hora de

    inicio de

    incubacin

    10 de junio 3:30 pm 11 de junio 3:30 pm 12 de junio 4:00 pm

    Fecha y hora de

    fin de incubacin

    11 de junio entre 3:25 pm 12 de junio 3:40 pm 15 de junio 5:50 pm

    Temperatura de

    incubacin (C)

    37C 37C 44C

    Marca del

    incubador

    utilizado

    Felisa Felisa Novatech

    Dilucin de la

    muestra original

    para analizar

    N/A 1g:50ml N/A

    Nmero de tubos

    y volumen de la

    muestra analizada

    3 con 10 mL,

    3 con 1 mL y

    3 con 0.1 mL

    3 tubos

    Un asada

    3 tubos

    Una asada

    Reactivos osoluciones

    especficos para la

    prueba

    N/A N/A Reactivo de Kovac

    Numero de tubos

    con crecimiento

    positivos

    N/A

    9 tubos de 9 3 tubos de 3

    Numero de tubos

    con presencia de

    gas en campana

    Durham

    N/A 9 tubos de 9 2 tubos de 2

    Numero de tubos

    con vire de

    indicador de pH

    purpura de

    Bromocresol

    N/A N/A N/A

    Frmula para el

    clculo de NMP

    Con ajuste de

    dilucin

    N/A NMP=332/50 N/A

  • 7/23/2019 REPORTE DE DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO PRESA BLANCA: PUENTE 2, DE ACUERDO A LAS NORMAS PROY-NMX-

    22/23

    22

    Evidencia fotogrfica

    Prueba presuntiva paracoliformes totales

    Prueba confirmativacoliformes totales

    Prueba de coliformestermotolerantes

    Prueba confirmativa paraEscherichia colipresuntiva

  • 7/23/2019 REPORTE DE DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO PRESA BLANCA: PUENTE 2, DE ACUERDO A LAS NORMAS PROY-NMX-

    23/23

    23

    RESULTADOS DEL ANALISIS MICROBIOLOGICO

    DEL SITIO: _____Presa Blanca: Puente 2______________________

    Muestra de agua: Muestra de suelo:

    Coliformes totales(NMP/100 ml)/ NMP

    24000 NMP/100 mL 24000 NMP/1 gr

    Lmite mximo permitido para el tipode muestra analizada/norma

    correspondiente

    Ausente/ PROY NOM-250-SSA1-2014

    Escherichia colipresuntiva si No si No

    Lmite mximo permitido para el tipode muestra analizada/norma

    correspondiente

    Ausente/ PROY NOM-250-SSA1-2014