Reporte análisis microbiológico matriz agua.pdf

M I C R O B I O L O G A A M B I E N T A L U T L A S E S O R A :

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REA DE SUSTENTABILIDAD PARA EL DESARROLLO

PROGRAMA ACADMICO DE QUMICA

ESPECIALIDAD TECNOLOGIA AMBIENTAL

GRUPO

QU-301

MATERIA

MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

TITULO

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE MICROORGANISMOS

DE LA MATRIZ AMBIENTAL: AGUA

ASESORA

Dr. ROSA RICO MATA

DATOS DE IDENTIFICACIN DE LOS ANALISTAS

Fecha de inicio del anlisis: 29 DE JUNIO DE 2015

Fecha de trmino: 10 DE JULIO DEL 2015

Nombre Cargo

MARTN DEL CAMPO ORTZ ISRAEL Responsable

GRIMALDO MNDEZ JESS ADIR Administrador

PEDROZA LVAREZ JESS OMAR Laboratorista 1

PREZ RAMREZ MIRIAM ALEJANDRA Laboratorista 2

RAMREZ RAMREZ MIGUEL NGEL Laboratorista 3

GENERACIN: 2014-2016


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DATOS DEL SITIO EN ESTUDIO

1.- Breve descripcin del estatus ambiental del sitio de estudio: La muestra se tom de la planta tratadora de agua residual de la UTL, se encuentra en buen estado a sus alrededores sin identificacin de focos de contaminacin, a su alrededor se encuentra una vasta vegetacin.

SITIO DE MUESTREO

Nombre Ubicacin /coordenadas GPS

Imagen de mapa satelital

Planta Tratadora de

Aguas Residuales de la UTL

210346.71N

1013456.96O

2. Evidencia fotogrfica del sitio Fecha: 6 de julio de 2015 Hora: 14:48

Fecha: 6 de julio de 2015 Hora: 14:49

DATOS DE LAS MUESTRAS A ANALIZAR

1. Identificacin

Matriz ambiental: Agua Hora de toma de muestra: 14:55 Hora de siembra: 15:02

Punto de Muestreo (ubicacin /coordenadas GPS): PTAR UTL 210346.71N 1013456.96O

Tiempo de exposicin (aplica solo para muestra de aire)

Nombre del/ los analistas que tomaron la muestra: Miguel ngel Ramrez Ramrez

Nombre del/ los analistas que sembr la muestra: Jess Adir Grimaldo Mndez

2.Parmetros Fisicoqumicos

Color: Caf amarilloso Temperatura (oC) ambiental: 18C pH: 7

Olor: Sulfuro de hidrgeno Describir condiciones climatolgicas: Mayormente nublado

3. Evidencia fotogrfica del sitio de toma de muestra


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AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS

1. Justificacin del proceso para la identificacin bacteriana

En una planta de tratamiento de aguas residuales se pueden encontrar un sinfn de microorganismos, que son responsables de la degradacin de la materia orgnica presente en el agua, para posteriormente convertirla en un agua provechosa para el medio ambiente como el riego de reas verdes sin que represente un riesgo a la salud de las personas. Es interesante como una forma de vida microscpica, es de vital importancia para llevar a cabo procesos de remediacin de agua contaminada y darle un segundo uso.

2. Dos medios de siembra (Nombre y Composicin)

1. Agar MacConkey Peptona.... 17 g/L Pluripeptona. 3 g/L Lactosa.. 10 g/L Mezcla de sales biliares. 1.5 g/L Cloruro de sodio.. 5 g/L Agar 13.5 g/L Rojo neutro.. 0.03 g/L Cristal violeta. 0.001 g/L

2. Agar de Eosina y Azul de metileno

Agar 13.5 g/L Lactosa ... 5.0 g/L Azul de metileno.. 0.065 g/L Peptona especial10.0 g/L Eosina Y0.4 g/L Fosfato dipotsico.2.0 g/L Sacarosa5.0 g/L

Morfologa Colonial (Medio 1) Morfologa Colonial (Medio 2)

Descripcin

Son colonias lisas y brillantes adems de convexas. Poseen un endopigmento color amarillo-naranja, banco porcelana.

Descripcin

Las colonias lactosa positiva en este medio (Staphylococcus Aureus) son colonias de color azul a morada con un brillo metlico o poseen centros oscuros con periferias transparentes incoloras, adems de ser convexas y lisas.

Imagen

Imagen


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3. Dos Medios selectivos de resiembra (Nombre y Composicin)

1. Levine EMB Agar Peptona. 10 g/L Lactosa. 10 g/L Fosfato di potsico... 2 g/L Agar 15 g/L Eosina 0.4 g/L Azul de Metileno.. 0.065 g/L

2. Simmons Citrato Agar Amonio de di hidrgeno fosfato.. 1 g Fosfato de di potasio 1 g Cloruro de sodio. 5 g Citrato de sodio.. 2g Sulfato de magnesio 0.2 g Azul de bromo timol.. 0.08 g Agar.. 15 g

Morfologa Colonial (Medio 1) Morfologa Colonial (Medio 2)

Descripcin

Las colonias lactosa positiva en este medio (Staphyococcus Aureus) son colonias de color azul a morada con un brillo metlico o poseen centros oscuros con periferias transparentes incoloras, adems de ser convexas y lisas.

Descripcin

Colonias lisas, brillantes y convexas. Poseen un endopigmento distinguible del color del medio, el cual cambio de verde a azul. En este medio las colonias que crecen son puntiformes.

Imagen

Imagen


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4. Procedimiento de Aislamiento (describir detalladamente la cantidad de materiales y los pasos a seguir)

Materiales/Reactivos/Medios de cultivo/ Equipo a utilizar

10 Gasas. Agua destilada. Autoclave. 4 Caja Petri. Simmons Citrato Agar. Incubadora. 2 Matraz Erlenmeyer de 250 mL. Agar Mac-Conkey Refrigerador. 2 Charola de pesado. Campana de flujo laminar. 2 Esptula. 1 Probeta de 100 mL. 1 Asa bacteriolgica. 2 Mechero bunsen. 1 Piceta. Aluminio. Algodn. Preparacin de medios de cultivo: Se prepararon 60 mL de Agar Mac-Conkey.

1. Pesar 3 g de Agar Mac-Conkey. 2. Con ayuda de una probeta medir 60 mL de agua destilada. 3. Vaciar en el matraz Erlenmeyer los 1.45 g del agar y disolver con los 60 mL de agua destilada. 4. Hacer con una gasa y un poco de algodn un tapn para el matraz Erlen-Meyer, taparlo y cubrirlo con

una capucha de aluminio. 5. Esterilizar en l autoclave a 115 lb de presin por 15 minutos a una temperatura de 121C

aproximadamente. 6. Vaciar el agar en las dos cajas Petri dentro de la campana de flujo laminar, esperar a que solidifique y

guardar en el refrigerador hasta la re siembra.

Se prepararon 60 mL de Agar Citrato de Simmons.

7. Pesar 1.45 g de Simmons Citrato Agar. 8. Con ayuda de una probeta medir 60 mL de agua destilada. 9. Vaciar en el matraz Erlenmeyer los 1.45 g del agar y disolver con los 60 mL de agua destilada. 10. Hacer con una gasa y un poco de algodn un tapn para el matraz Erlenmeyer, taparlo y cubrirlo con

una capucha de aluminio. 11. Esterilizar en l autoclave a 115 lb de presin por 15 minutos a una temperatura de 121C

aproximadamente. 12. Vaciar el agar en las dos cajas Petri dentro de la campana de flujo laminar, esperar a que solidifique y

guardar en el refrigerador hasta la resiembra. Pasos para el aislamiento del microorganismos (siembra, seleccin de la colonia y resiembra):


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1. Sembrar la muestra de forma estriado simple en un medio no selectivo para permitir el crecimiento de microrganismos y poder identificarla de acuerdo a su morfologa. El medio utilizado para la siembra es agar Mac Conkey.

2. Incubar por 24 horas a una temperatura de 35-37C. 3. Seleccionar una colonia de acuerdo a sus caractersticas morfolgicas esperadas para resembrar y

obtener una siembra pura. 4. Preparar el medio selectivo para la resiembra del microorganismo. 5. Resembrar en Agar Citrato de Simmons. Se hace un estriado de forma cruzada de manera que se puedan

identificar colonias aisladas. 6. Incubar por 24 horas a una temperatura de 35-37C 7. Comprobar el crecimiento bacteriolgico en el medio selectivo. 8. Seleccionar una colonia aislada para aplicar las pruebas bioqumicas.

Estriado simple para el aislamiento del microorganismo


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5. Esquema del Perfil bioqumico (metablico )

para la identificacin del microorganismo seleccionado

Bacterias

Gram - Gram +

Cpsulada

Catalasa - Catalasa +

Movilidad + Movilidad -

Rojo de Metilo (-)

Vogues Proscauer (-)

Fermenta lactosa (-)

Fermenta sacarosa (-)

Fermenta Glucosa (-)

SH2 -

Indol +

Citrato +

STAPHYLOCOCCUSAUREUS

No Cpsulada


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RESULTADOS DEL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN

1. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO DE LA MUESTRA (SIEMBRA)

Agar Mac-Conkey

2. MORFOLOGA COLONIAL OBSERVADA Tipo de colonia 1: Descripcin

Esta colonia present una forma irregular, con una superficie convexa, un borde ondulado, con un color rosado en los extremos y blanquizo de la parte central.

FOTO 1

Tipo de colonia 2: Descripcin

Esta colonia present una forma irregular, con una elevacin umbilicada, un borde ondulado, con un color violeta de los extremos y blanquzo en su parte central.

FOTO 2


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3. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO PURO ( RESIEMBRA)

Agar Mac-Conkey Crecimiento colonial de la Colonia 1 (Crculo rojo) de la

siembra

Agar Citrato de Simmons

4. MORFOLOGIA COLONIAL OBSERVADA

Descripcin

Se logr identificar colonias en forma puntiforme, algunas de ellas se agruparon y otras se encuentran aisladas. Tienen una elevacin convexa, su borde es redondeado, su color es azulado y blanco porcelana. Se encuentran circuladas con color verde algunas de las colonias que se seleccionaron para realizar las pruebas bioqumicas.


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5. EVIDENCIA FOTOGRFICA DEL RESULTADO DEL PERFIL BIOQUMICO

Nombre de la prueba

Medio de cultivo utilizado

Resultado obtenido

(positivo/negativo)

Evidencia fotogrfica

1. Tincin de

Gram.

Ninguno.

Positivo.

Objetivo: 100x

Fundamento de la prueba El cristal violeta (colorante catinico) penetra en todas las clulas bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a travs de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio), los cuales estn presente para solubilizar el yodo, y actan de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la clula bacteriana. El I2 entra en las clulas y forma un complejo insoluble en solucin acuosa con el cristal violeta. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloracin, ya que en la misma es soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos s lo hacen. Para poner de manifiesto las clulas Gram negativas se utiliza una coloracin de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina. Despus de la coloracin de contraste las clulas Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen violetas. Algunos microorganismos retienen el colorante violeta, an despus de tratarlos con un decolorante, y el color no se modifica al aadir ste; otros pierden con facilidad el primer tinte, y toman el segundo. Los que fijan el violeta, se califican de Gram positivos, y los que pierden la primera coloracin y retienen la segunda, de gramnegativos. Basndonos pues, en la reaccin Gram, podemos clasificar a los microorganismos en uno de los dos grupos. Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloracin Gram. Los representantes ms usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. En realidad, violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-rosanilina. El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el nmero de grupos metilo en la molcula; por consiguiente, de los tres grupos, el tono ms oscuro es la hexametil-p-rosanilina, (violeta cristal), y el tinte ms ligero, la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). Los nombres violeta de metilo 3R, 2R, R, B, 2B, 3B, etc., se refieren al nmero de grupos metilo contenidos. La letra R indica matices rojos, y la letra B, tonos azules. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo, y se considera como el mejor colorante primario para teir por el mtodo de Gram.


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2. Tincin de

cpsula.

Ninguno.

Positivo.

Frotis con tinta china

Aumento 100x

Fundamento de la prueba

Es la prueba que determina si la bacteria tiene capsula la cual es una capa rgida organizada en matriz impermeable que excluye colorantes como la tinta china. En cambio, la capa de material extracelular que se deforma con facilidad, es incapaz de excluir partculas y no tiene un lmite definido. En esta prueba se puede ver si la bacteria cuenta con cpsula la cual no permite que la tinta china penetre en la bacteria lo cual se observa como un fondo negro (tinta) y una diferenciacin de las bacterias.

3. Citrato.

Agar Citrato de Simmons.

Positiva.


En su formulacin contiene una mezcla de sales en la cual, el citrato de sodio es la nica fuente de carbono. No posee azcares ni tampoco inhibidores del crecimiento bacteriano. Un microorganismo que es capaz de utilizar el citrato como nica fuente de carbono, utiliza tambin las sales de amonio como su nica fuente de nitrgeno. Debido a la utilizacin de sales de amonio, se libera amoniaco, que alcaliniza el medio, y esto produce un viraje del indicador azul de bromo timol del color verde al color azul. Los productos obtenidos del metabolismo del citrato dependen del pH del medio:

pH bsico: Citrato ------> CO2 + cido frmico + 2 cido actico pH cido: 2 Piruvato -----> acetato + CO2 + lactato

2 Piruvato -----> acetona + 2CO2


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4. Catalasa

Ninguno.

Positivo.


La catalasa es una enzima perteneciente a la categora de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicin del perxido de hidrgeno en oxgeno y agua. Lo cual produce un desprendimiento de burbujas. La reaccin que sucede es la siguiente: 2 H2O2 2H2 + 2 O2 Esta enzima se encuentra en algunas bacterias o cocos y se es posible identificar su presencia aplicado esta prueba.

5. Fermentacin de sacarosa

Triple Sugar

Iron Agar (T.S.I)

Negativo


En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La sacarosa es un hidrato de carbono fermentable y asimilado por la enzima sacarasa la cual con una adicin de agua se degrada en glucosa y fructuosa. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. El agar es el agente solidificante. Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio cido.

Sacarosa (C12H22O11)+ H2O Glucosa (C6H12O6)+ Fructosa (C6C12O6)

6. Fermentacin de glucosa.

Triple Sugar Iron Agar (T.S.I)

Negativo


En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la produccin de cido sulfhdrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+ , los cuales se combinan con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. El agar es el agente solidificante. Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual


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vira al color amarillo en medio cido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el tpico sulfuro de hierro de color negro.

C6H12O6 (glucosa)+ 2 Pi + 2ATP+ 2NAD+2 cido Pirvico+ 2ATP +2NADH+ 2H+

7. Fermentacin de lactosa.

Triple Sugar Iron Agar (T.S.I)

Negativo


En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa es un hidrato de carbono fermentable, partiendo del cido pirvico producido por la fermentacin de glucosa, dando como producto final cido lctico. Se agrega un indicador de pH (rojo fenol) y cloruro de sodio, el cual mantiene el balance osmtico. El agar es el agente solidificante. Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio cido.

cido Pirvico+ NADH+ H+ cido lctico+ NAD+

8. cido sulfhdrico

Agar SIM

Triple Sugar Iron Agar

(T.S.I)

Negativo


En el medio de cultivo, el tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la produccin de cido sulfhdrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+ , los cuales se combinan con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El agar es el agente solidificante. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el tpico sulfuro de hierro de color negro. La proteolisis de las protenas en aminocidos individuales, algunas especies bacterianas son capaces de liberar azufre enzimaticamente de los diferentes aminocidos que las contienen, produciendo el gas cido sulfhdrico (SH2). La peptona, cistena y tiosulfato, todos son fuentes de azufre, pero las diferentes especies utilizan distintos compuestos o aminocidos que contienen azufre para producir SH2. La enzima responsable de esta actividad es la cisteinasa. El gas incoloro SH2 reacciona con una sal pesada, citrato frrico de amonio para producir un precipitado negro insoluble, sulfuro ferroso.

Bacteria (medio cido) + tiosulfato de sodio gas SH2 SH2 + iones frricos sulfuro ferroso (pp. Negro)


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9. Indol

Agar SIM Positivo


El triptfano es un aminocido que puede ser oxidado por ciertas bacterias para formar tres metabolitos principales: indol, escatol e indolactico. Diversas enzimas intracelulares que intervienen en ste proceso reciben el nombre de triptofanasa, lo que implica el sistema completo de enzimas vinculadas con la produccin del indol. El principal intermediario en la degradacin del triptfano es el cido indolprvico. La degradacin del triptfano libera indol, cido pirvico, amoniaco y energa. El cido pirvico puede ser nuevamente metabolizado por medio del ciclo glucoltico o entrar en el ciclo de Krebs para liberar CO2 y H2O y una gran produccin de energa.

Triptfano + indolpirvico ----> Indol + cido pirvico + amoniaco + energa

10. Movilidad

Agar SIM Negativo


Determina si un organismo es mvil o inmvil. Las bacterias tienen movilidad por medio de sus flagelos, que se encuentran principalmente entre los bacilos; sin embargo algunas formas de cocos son inmviles. Las bacterias mviles pueden contener un solo flagelo o muchos; adems su localizacin vara con su especie bacteriana y las condiciones de cultivo. A veces, las bacterias con movilidad producen variantes no mviles que parecen ser estables y raramente se revierten en formas mviles. Los organismos no mviles carecen de flagelos. El agar es el agente solidificante y a esta concentracin le otorga al medio la propiedad de ser semislido, condicin necesaria para detectar movilidad, que se evidencia por el enturbiamiento del medio o por crecimiento que difunde ms all de la lnea de siembra del microorganismo en estudio.


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11. Rojo de metilo

(Fermentacin de glucosa)

Medio MR-VP Negativo


Permite comprobar la capacidad de un organismo de producir y mantener estables los productos terminales cidos de la fermentacin de la glucosa y vencer la capacidad amortiguadora del sistema. Es una prueba cualitativa de la produccin de cido (determinacin de pH). Las bacterias que principalmente siguen la va de fermentacin de cidos mixtos (La fermentacin cido mixta produce cido actico, etanol, H2, CO2 y proporciones diferentes de cido lctico o frmico segn las especies. Es un tipo de fermentacin que llevan a cabo las enterobacterias. En esta ruta de fermentacin se produce ATP adems de la reoxidacin del NADH+H+) a menudo producen suficiente cido para mantener un pH menor de 4.4. La prueba de rojo de metilo se basa en el empleo de un indicador de pH para determinar la concentracin de iones hidrgeno presentes cuando un organismo fermenta glucosa. Las bacterias RM positivas producen cidos estables manteniendo una alta concentracin de iones hidrgeno hasta alcanzar cierta concentracin y entonces cesa toda actividad. Los organismos RM negativo tambin producen cidos pero tienen una menor concentracin de iones hidrgeno porque hay una reversin hacia la neutralidad debida a la nueva degradacin de los cidos orgnicos en carbonatos. Ocurre la fermentacin de la glucosa, mediante la glucolisis que es la ruta metablica mediante la que se degrada la glucosa hasta dos molculas de piruvato, a la vez que se produce energa en forma de ATP y de NADH.

C15H15N3O2 + fermentacin del carbohidrato ----> cidos orgnicos (viraje a rojo en el medio) 12. Vogues

Proscauer

Medio MR-VP Negativo


Determina la capacidad de algunos organismos de producir un producto final neutro, la acetona a partir de la fermentacin de glucosa. La reaccin de VP se basa en la deteccin de acetona como producto final neutro derivado del metabolismo de la glucosa. Esta es metabolizada en cido pirvico, intermediario clave en la gluclisis. A partir del cido pirvico, una bacteria puede seguir muchas vas. La produccin de acetona (precursor de la produccin de 2,3-butanediol) es uno de los ciclos para la degradacin de la glucosa en las bacterias. KOH condensacin

Alfa-naftol (catalizador) + Acetona -------------> Diacetilo + Ncleo de guanidina ----------------------> Color rojo rosado O2 oxidado


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IDENTIFICACIN DEL MICROORGANISMO AMBIENTAL

EN LA MATRIZ DE ESTUDIO: Agua

1.- Nombre cientfico del o los microorganismo identificado de acuerdo a los resultados del perfil bioqumico planteado ( gnero y especie)

Gnero: Staphylococcus

Especie presuntivamente: aureus

2. Taxonoma del o los microorganismo identificados

Reino: Bacteria Filo: Firmicutes

Clase: Bacilli Orden: Bacillales

Familia: Staphylococcaceae Gnero: Staphylococcus

3. Caractersticas generales

Desde el punto de vista estructural de S. Aureus comparte las caractersticas de los grmenes Gram positivos. La pared celular est compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano. La presencia de cpsula es variable pero es importante a nivel patognico, ya que tiene propiedades antifagocticas. Las cepas de S. Aureus que poseen cpsula son ms virulentas en modelos animales. Es un coco inmvil, de 0.8 a 1 micrmetro de dimetro, que se divide en tres planos para formar racimos, es aerobio y anaerobio facultativo por lo que puede crecer tanto en una atmosfera con o sin oxgeno, no presenta movilidad. Se pueden encontrar en el agua, polvo, suelo y aguas residuales y todo lo que entre en contacto con el hombre.

4. Ciclo(s) biogeoqumicos en el(los) que intervienen

Ciclo del fsforo

5. La funcin que juegan en la transformacin de la materia orgnica a travs de los ciclos biogeoqumicos

Cuando un agua se encuentra contaminada por un metal pesado como lo es el Plomo (Pb), la bacteria Staphylococcus aureus y Citrobacter Feundii son utilizadas para la remocin de dicho metal de la matriz contaminada, lo acumulan en su interior inmovilizndolo formando fosfato de plomo, aunque se desconoce el mecanismo de desintoxicacin. Se pueden encontrar en el agua, polvo, suelo y aguas residuales y todo lo que entre en contacto con el hombre; en este caso la bacteria se localiz en una planta de tratamiento de aguas residuales, lo cual es bastante comn porque llega a encontrarse en la materia fecal, su presencia puede eliminarse con tratamiento y desinfecciones convencionales. En cuanto a la transformacin de la materia, se estudi la bacteria Staphylococcus aureus mediante pruebas bioqumicas, cabe destacar que utiliza el citrato como nica fuente de carbono, as como sales de amonio en su nica fuente de nitrgeno, por ello es que libera amoniaco y alcaliniza el medio Agar Citrato de Simmons virndolo de un color verde a un azulado. En dicho microorganismo se encuentra la enzima catalasa, que es responsable de la descomposicin del perxido de hidrgeno, por ello en la prueba bioqumica de la catalasa se pudo observar como ocurra la reaccin en la que se desprendan burbujas. No es un fermentador de la sacarosa, el microorganismo no lleva consigo la enzima


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sacarosa la cual asimila la sacarosa. No es capaz de fermentar la glucosa ya que de esto dependa la glucosa producida por la sacarosa. No fermenta la lactosa, ya que se necesita del cido pirvico que es producido por la fermentacin de la glucosa, por lo tanto no se produjo cido lctico. En el microorganismo no se encuentra la enzima cisteinasa, que es la responsable de que se produzca SH2, dicha enzima reacciona con tiosulfato de sodio gas para producir SH2. Es productor de indol, escatol e indolctico, por lo que el microrganismo lleva consigo la enzima llamada triptofanasa que se encarga de la degradacin del triptfano liberando indol, cido pirvico, amoniaco y energa. No es un microrganismo que produzca y mantenga estable los productos terminales cidos de la fermentacin de la glucosa, ya que esta fermentacin no se present. Igualmente no produce la acetona porque previamente tuvo que fermentarse la glucosa.

6. Conclusin parcial sobre las interacciones bacterianas en la matriz estudiada y la importancia de la

microbiologa en el rea ambiental

En conclusin, podemos decir que la bacteria encontrada en la muestra de agua recolectada de la Planta de Tratamiento de Aguas Residuales de UTL corresponde al gnero Staphylococcus presuntivamente de especie Aureus, por otro lado, no se realizaron las pruebas bioqumicas necesarias para lograr afirmar la presencia de dicha bacteria por lo que se necesita plantear pruebas bioqumicas para diferencias la especie. Cabe destacar que anteriormente se crea que identificaramos Citrobacter Feundii porque se encuentra en la matriz agua, acta en el ciclo del fsforo el cual se puede identificar en el agua de una PTAR, pero la bacteria que se logr aislar es la mencionada al principio, esto tiene una relacin encontrada en la referencia bibliogrfica (Francisco,

C. 2005. Biotecnologa ambiental. Madrid, Espaa: Tbar) en la que se explica que estas dos bacterias tienen la misma funcin en cuanto a remocin de plomo presente en agua. Por lo tanto, se identific Staphylococcus mediante la prueba de tincin de gram, ya que al observarse al microscopio en lugar de observar bacilos correspondientes a Citrobacter Feundii se observaron cocos, algunos en forma de racimos, diplococos y la mayora separados unos de otros. Para lograr identificar el gnero de la bacteria aplicamos la prueba de catalasa la cual resulta positiva para cuatro gneros distintos. De estos gneros se logr distinguir mediante la prueba del indol en la cual se logra apreciar la produccin de indol resultado la prueba positiva. La prueba que nos acerca presuntivamente a la especie de la bacteria es cuagulasa, la cual resulta positiva en diferencia a las otras especies de Staphylococcus las cuales resultan negativas en dicha prueba, para confirmar la presencia de esta bacteria por lo que se propone haber realizado las pruebas bioqumicas en las cuales la Staphylocuccus Aureus es resistente a la bacitracina y sensible a furazolidona y novobiocina. En realidad no se encontr informacin bibliogrfica sobre el microorganismo y su funcin en una PTAR, pero se sostiene que es capaz de remover el plomo en una muestra de agua.

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