RECUENTO DE PLAQUETAS

OBJETIVO

-Evaluar el número de plaquetas presentes en la sangre, a través de la observación de un frotis coloreado, con el fin de comparar con el conteo directo.

· Realizar el conteo de plaquetas existentes en un milímetro cúbico de sangre total

· Identificar morfológicamente las plaquetas coloreadas con Wright en extendidos de sangre periférica y apreciar su número por campo.

· Correlacionar la práctica con la teoría expuesta en clase.

MARCO TEORICO

Las plaquetas o trombocitos constituyen el elemento forme más pequeño de la sangre; su evaluación en el hemograma manual usualmente sólo se realiza en los extendidos coloreados. En el electrónico, su estudio aporta, además del valor numérico, otros parámetros de importancia diagnóstica, tales como promedio del volumen plaquetario e histograma plaquetario. A esta valoración la llamamos plaquetograma.

Significado clínico.

Las plaquetas son células no nucleadas provenientes de la médula ósea ricas en gránulos que tiene como función mantener la hemostasia e iniciar la reparación del tejido luego de la injuria vascular y durante el proceso inflamatorio. Ante una lesión del vaso sanguíneo, el endotelio es el primero en reaccionar produciendo vasoconstricción, a continuación las plaquetas se adhieren y agregan en la zona injuriada para formar el tapón plaquetario. Estas células poseen una vida media de 7-10 días.

Existen dos métodos para el conteo de plaquetas: manual (directo) y electrónico (indirecto).

El conteo de plaquetas se realiza en sangre anticuagulada con EDTA y diluida con oxalato de amonio al 1% mediante el uso de la pipeta para dilución de hematíes y el hemocitómetro.

Evaluar el número de plaquetas presentes en la sangre, a través de la observación de un frotis. Observar si se encuentran en cantidades aproximadamente normales (de tres a ocho plaquetas por cien glóbulos rojos). La disminución de las plaquetas en un frotis puede deberse a la manera de realizarlo, pero su falta o su disminución considerable, en un frotis bien hecho pueden hacer sospechar de trombocitopenia. Debe observarse si las plaquetas que se encuentran parecen normales o existen muchas formas gigantes (macro-plaquetas)o notablemente pequeñas.

Para llevar a cabo la práctica se requiere, Frotis de sangre coloreado con Wright, Aceite de inmersión, un Microscopio.

PROCEDIMIENTO:

- Colocar la lámina coloreada en la platina del microscopio.

- Observar con el objetivo a 4x, 10x y enfocar.

-Observar con el objetivo 40x.

- Colocar una gota de aceite de inmersión en la lámina coloreada.

- Observar con el objetivo 100x.

- Contar las plaquetas en 10 campos situados entre el cuerpo y la cola del frotis (los campos deben contener aproximadamente 100 glóbulos rojos).

FUENTES DE ERROR:

- Hacer el conteo en los márgenes del frotis.

- Aceite de inmersión de mala calidad o contaminado.

-Coloración defectuosa del frotis.

- Observar el extendido con un objetivo diferente al de inmersión.

- Equipo en mal estado.

La membrana plasmática cumple varias funciones, entre las cuales las más importantes son las siguientes:

-media la interacción plaquetaria

-provee la superficie fosfolipídica para la activación del sistema de coagulación

-posee glicoproteínas que se asocian con dos etapas de formación del tapón hemostático: adhesión y agregación plaquetaria.

-posee receptores para diferentes agonistas (colágeno, trombina, epinefrina, adenosin difosfato) que producen liberación de los gránulos plaquetarios.

En el citosol plaquetario encontramos:

Lisosomas: contiene endopeptidasa, exopeptidasas, glicosidasas ácidas, heparitinasa.

Gránulos a: contienen fibrinógeno, trombospondina, fibronectina, albúmina, Factor V, Factor de von Willebrand, antitrombina (AT), PAI 1 (inhibidor del activador del plasminógeno 1).

Gránulos densos: ATP, ADP, calcio, magnesio, serotonina, fósforo.

Sistemas membranosos como el sistema tubular denso y el sistema canalicular abierto que es una invaginación de la membrana plasmática.

El tapón hemostático se forma teniendo en cuenta dos etapas:

1- Adhesión:

De las plaquetas al colágeno subendotelial a través de la glicoproteína Ib (GPIb) que se une principalmente al factor de von Willebrand presente en la matriz extracelular del subendotelio.

2- Agregación:

Las plaquetas adheridas se agregan a otras plaquetas. A través de la GP IIb/ IIIa (GP IIb/IIa). Esta GP se puede unir a fibrinógeno (que es el nexo plaqueta-plaqueta) al factor de von Willebrand y a la fibronectina.

Utilidad clínica:

Diagnóstico de trombocitopenias asociadas o no a otras patologías.

Screening prequirúrgico.

Diagnóstico de púrpura mucocutánea (trombocitopénica o no). Exclusión de un desorden hemorrágico.

Monitoreo durante la quimioterapia y durante el tratamiento con heparina.

Evaluación de enfermedades de la médula ósea.

Evaluación de destrucción plaquetaria o consumo de plaquetas.

Variables preanalíticas:

Aumentado:

Hemólisis, crioaglutininas, cirugía.

Disminuido:

Menstruación, embarazo.

Variable por enfermedad:

Aumentado:

Desórdenes mieloproliferativos, trombocitemia esencial, artritis reumatoidea, osteomielitis, anemia, enfermedad de Hodgkin, post esplenectomía (dos meses).

Disminuido:

Síndrome de Wiskott-Aldrich, síndrome de Bernard Soulier, síndrome de Fanconi.