Reconocimiento de Los Microorganismos Del Reino Protista

5/13/2018 Reconocimiento de Los Microorganismos Del Reino Protista - slidepdf.com

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´Año de la Integración Nacional y el Reconocimiento de Nuestra Diversidadµ

1 MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

RECONOCIMIENTO DE LOS MICROORGANISMOS DEL REINO

PROTISTA

1. OBJETIVOS:

Demostrar la presencia de diversos tipos de microorganismos en la

naturaleza.

R econocer la coloración simple y compuesta.

Buscar algas, bacterias, protozoarios.





2. MARCO TEOR ICO

El R eino Protista está conformado por un grupo de organismos que presentaban unconjunto de características que impedían colocarlos en los reinos ya existentes de una

manera plenamente definida. Esto se debe a que algunos protistas pueden parecerse yactuar como individuos del reino plantas, otros protistas pueden parecerse y actuar

como organismos del reino animal, pero los organismos del reino protista no son ni

animales ni plantas.

Los individuos del reino de los protistas son los que presentan las estructuras biológicasmás sencillas entre los eucariotas (ya que su ADN está incluido en el núcleo de la

célula), y pueden presentar una estructura unicelular (siendo esta la más común),multicelular o colonial (pero sin llegar a formar tejidos). Los protistas son autótrofos (en

su mayoría) y producen un alto porcentaje del oxígeno de la tierra. Sin embargo, es

complicado establecer un cuadro de características generales para los organismos del

reino protista. Con todo, procuraremos presentar las características más comunes en la

mayoría (No están presentes en todos los protistas) de estos organismos a continuación:

El microscopio de campo claro es más útil para la observación de especímenes teñidos. Los colorantes son compuestos químicos utilizados para aumentar el contraste. Existenalgunos, llamados colorantes vitales, que pueden añadirse directamente a una

preparación en fresco; por tanto, colorean células vivas. No obstante, la mayoría de loscolorantes son solamente efectivos después de que los microorganismos hayan sido

fijados, es decir, se encuentren muertos y adheridos al portaobjetos.

TIPOS DE COLORANTES.- Casi todos los colorantes son sales, compuestos

formados por iones cargados. Los colorantes básicos son aquellos en los cuales elagente que tiñe es el ion cargado positivamente, mientras que en los ácidos, el colorante

es el ion cargado negativamente. Los colorantes más utilizados son los de tipo básico,va que la mayor parte de las células microbianas Poseen cargas débilmente negativas en

su superficie, lo cual facilita su unión. Entre los colorantes básicos más comunes seencuentran la safranina, la fucsina básica, el cristal violeta y el azul de metileno. Los

colorantes ácidos se unen a las partes de las células cargadas positivamente. Se utilizan

para teñir tejidos animales infectados con microorganismos. Entre los más frecuentes

están la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo.

La forma más simple de preparar un espécimen para su examen microscópico es hacer

una preparación en fresco. Existen dos técnicas, una preparación en fresco simple

("entre porta y cubre")

Las preparaciones en fresco se utilizan para observar microorganismos vivos. Por

ejemplo, para la búsqueda de Trichomonas vaginalis en secreciones vaginales. Este

protozoo de gran movilidad causa inflamación de la vagina y la uretra. Si en la

preparación se observan células en forma de huso que se mueven mediantecontracciones o sacudidas cruzando el campo, probablemente se tratará de T. vaginalis,

pudiéndose efectuar el diagnóstico.

Sin embargo, el inconveniente de la observación en fresco es que no permite aumentar

el contraste de la preparación. Por tanto, su uso, con un microscopio óptico de campo

claro, está bastante limitado. Normalmente, para observar microorganismos vivos se

utiliza alguno de los otros microscopios ópticos que hemos mencionado anteriormente.





COLORACIÓ N SIMPLE.- Un colorante; proporciona contraste para observar mejor un

organismo completo.

COLORACIO N COMPUESTA (GRAM).- Dos o más colorantes; distingue entre

bacterias Gram positivas y Gram negativas

3. PR OCEDIMIE NTO EXPER IME NTAL:

- MATERI AL ES:

Microscopio

Cubre objeto

Porta objeto

Agua estancada

Azul de metileno

Cristal violeta

Lugol

Alcohol

Safranina

Aceite de inmersión

mechero





OBSERV AC IÓN AL AGUA EST A N CADA:

Tomamos pequeñas muestras del agua estancada y colocamos algunas gotas en

el porta objeto para luego ser cubierto con el cubre objeto.

A continuación se deberá colocar en el microscopio para poder observar los

microorganismos existentes en la muestra tomada la medida que utilizamos fue

10x 40x Pudimos distinguir los siguientes microorganismos:

- S e pudo observar protozooarios y bacterias(chica)

OBSERV AC IÓN A LA N U ESTR A D E S AL IV A:

Tomamos pequeñas muestras de la saliva y colocamos al porta objeto para luego

llevarlo al mechero para que la llama pueda fijar la muestra, teniendo en cuenta

que el calor no debe ser directo (sólo se pasa por la llama), puesto que el calor

excesivo puede cambiar la morfología celular de las bacterias a observar . El

calor deseable es aquél en el que el portaobjetos sea apenas demasiado caliente

para ser colocado sobre el dorso de la mano.





C O LO R AC IÓN SI MPL E:

Con azul de metileno se utiliza una cantidad

suficiente sobre la muestra, luego se debe

enjuagar la lámina conteniendo la muestra

con agua destilada. Para realizar el lavado, se

debe tener en cuenta que el chorro de agua

NO debe caer directamente sobre la muestra,ésta debe caer sobre la parte superior de lalámina que no contiene muestra. El chorro

debe ser un chorro delgado,aproximadamente de medio a un milímetro

de espesor . También el enjuague se deberealizar poniendo la lámina portaobjetos en

posición inclinada hacia abajo.

Pudimos distinguir los siguientes microorganismos:

-Estafilococos, estreptococos.

C O LO R AC IÒN C O MPU EST A:

Se utiliza cristal violeta como para lograr cubrirla por completo; se deja actuar el

colorante por 1 minuto. Esta tinción de 1 minuto está dada para trabajar a una

temperatura ambiente de 25 °C. Luego se enjuaga con agua destilada





Una vez enjuagado el portaobjetos, se aplica como mordiente yodo o lugol

durante 3 minuto más. El mordiente es cualquier sustancia que forme

compuestos insolubles con colorantes y determine su fijación a las bacterias.

Pasado el minuto de haber actuado el mordiente, el frotis se decolora con

alcohol-acetona, hasta que ya no escurra más líquido azul. Para esto se utiliza elgotero del frasco del decolorante. Se van añadiendo cantidades suficientes del

decolorante, hasta lograr que éste salga totalmente transparente, es decir, hastaque ya no escurra más líquido azul.

Una vez que la lámina ya secó, procedemos a teñir nuevamente, pero esta vez se

va a utilizar un colorante de contraste como por ejemplo la safranina, dejar

actuar durante 1 minuto.





Para observar al microscopio óptico es conveniente hacerlo a 100x con aceite de

inmersión.

Pudimos distinguir los siguientes microorganismos:

- Staphylococcus aureus (Coco Gram positivo) y Escherichia coli (bacilo Gram negative)





4. CO NCLUSIÓ N

Los protozooarios se trasladan más rápido que las bacterias.

Los virus no pueden ser observados por microscopios normales.

El aceite de inmersión tiene los siguientes usos:

a) Los objetivos de mayor aumento, tienen una distancia focal muy pequeña y además la

primera lente del objetivo es de pequeño diámetro.

b) Los rayos que desde la muestra se dirigen al objetivo atraviesan el vidrio del

cubreobjetos y al pasar al aire se separan de la normal . Algunos rayos incluso sufren

reflexión total en la interface vidrio-aire

c) Solo llega al microscopio una pequeña parte de la luz que parte de la muestra, con el

problema que conlleva para la visión.

d) Al intercalar, entre el objetivo y el cubreobjetos una gota de aceite de cedro o aceite

de inmersión, al índice de refracción casi igual al vidrio, los rayos emergentes ya no se

apartan de la normal, sino que continúan su camino sin desviación, consiguiendo así que

una mayor cantidad de luz llegue al objetivo, mejorando notablemente la visión.





5. BIBLIOGRAFÍA

http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen/uni

_ 02/56/cap304.htm

http://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n__Gram

http://www.slideshare.net/andresricote/tincin-simple- presentation

http://mx.answers.yahoo.com/question/index?qid=20080212164301AAO7moG





1. I NDICE:

OBJETIVOS ««««««««««««««««....1

MARCO TEOR ICO ««««««««««««««««....2

PR OCEDIMIE NTO EXPER IME NTAL«««««««««««««««««..3

CO NCLUCIO N ««««««««««««««.8

BBLIOGRAFIA «««««««««««««««««.9

I NDICE ««««««««««««««««.....10

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