RECUENTO DE SPORAS CLOSTRIDIUM SULFITO REDUCTOR. OBJETIVOS.Detectar el nmero de unidades formadoras de colonias de clostridium presentes en el alimento.Evaluar que la concentracin de los microorganismos se encuentran en los lmites permitidos por la normatividad vigente.Adquirir destreza en el recuento de esporas de Clostridium Sulfito Reductor. MARCO TEORICOEste anlisis es considerado como el recuento de indicador ms importante de las bacterias anaerobias espero formadoras.Varias especies del genero Clostridium tienen la propiedad de reducir el Ion Sulfito a Sulfuro, que en presencia de citrato frrico y otra sal de metales pesados dan colonias negras. EQUIPO Y MATERIAL.

Los mencionados anteriormente para la preparacin y la dilucin de la homogenizados de los alimentos. Agar OPSP (Oleandomycin Pdymixin Sulphodiazine Perfringes). Pipetas de 1cm. Estufa de incubacin a 35c. 3 tubos de ensayo. Solucin de Agua Peptonada 0.1% Esptula Erlenmeyer Frascos Shott Gradillas Micro pipeta, puntas azules y amarillas Pipetas Pipeteador Probetas Tubos de Ensayo Cajas de Petri

EQUIPOS Y UTENCILIOS UTILIZADOS

Bao de Mara Incubadora Balanza Analtica Mechero de Bunsen Trpode Malla Jarras de Anaerobiosis

TECNICA EN TUBOPipetear 1 ml de cada una de las diluciones en tubos de ensayo estriles.Calentar los tubos con cada una de las diluciones a 80c por 10 minutos. Enfriar rpidamente en agua corriente.Adicionar de 10 a 12 ml del medio de cultivo OPSP.Luego lo incubamos a 35c por 72 horas.

ANALISISMETODOMEDIO UTILIZADOCARACTERISTICAS MACROSCOPICASIMAGEN

PRESENCIA O AUSENCIA DE CLOSTRIDIUM EN EL ALIMENTO.SIEMBRA DE CLOSTRIDIUM EN TUBO DE ENSAYO.

AGAR OSPSEn este caso el enlatado se encuentra libre de cualquier bacteria anaerobia o aerobio. Ya que no presenta colonias negras el medio utilizado. Dando a entender que el alimento fue manipulado en ptimas condiciones.

CONCLUSION No se evidencia crecimiento. Lo cual permite ver que el alimento utilizado cumple la legislacin vigente.El alimento tuvo una excelente manipulacin en cada uno de su mismo proceso.

INFORME DE BACILLUS CEREUS.BaciloGram positivo, esporulado,aerobiooanaerobio facultativo, mvil. La espora es ovoidea, central y no deformante. Hidroliza lalecitinade la yema del huevo y no fermenta elmanitol. Temperatura ptima 30C a 37C, su temperatura de crecimiento 5C a 55C y temperatura de germinacin 5C a 8C. Su pH ptimo 4.5 a 9.3, Aw 0.95 y su concentracin de sal 7.5%. Produce dos tipos de toxiinfecciones alimentarias: la forma diarreica y la forma emtica.

OBJETIVOS*Desarrollar habilidades en la preparacin de reactivos, pruebas bioqumicas ymedio de cultivo para B.cereus.*Adquirir destreza en el recuento de B.cereus en diferentes alimentos.*Elaborar informe e interpretar los resultados de la muestra analizada.

MATERIALES

1.Agar MYP para B. cereus2.Solucin de polimixina3.Emulsin de yema de huevo al 10%4.Cajas Petri5.Erlenmeyer6.Tubos de ensayo7.Morteros8.Agua peptona da9.Puntas estriles 10.Muestra a analizar enlatado carne de diablo zenu.

METODOLOGIA 1. Se funde el medio de base y se mantiene en un bao de agua regulado entre 45 C 2Cy seaaden los otros componentes(PolimixinaB,Emulsin de yema de huevo estril)mezclandobien despus de cada adicin. Sema tiene el medio completo en un bao de agua a 45C2. Tomar 10g de muestra y macerarla. En caso que la muestra sea liquida tome10mL en una probeta estril.3. Agregar la muestra crnica al Erlenmeyer que contiene 90mL de agua peptona da,obteniendo la dilucin 10-1. Realice diluciones seriadas hasta 10-34. Sembrar 0.1mL de cada una de las diluciones en la superficie de la placa de agarMYP.5. Dejar secar y seguidamente invertir la caja Petri e incubarla a 35C+/-2 durante48 horas.6. Contar las colonias rosadas (manitol negativo) que presenten un lalo denso(lecitina positiva) sobre un fondo rojo violeta (colocando la caja invertida).Nota: Debe tomar tres colonias y realizarle pruebas bioqumicas.

EXPRESION DE RESULTADOSSe redondea el resultado calculado con dos cifras significativas. Se toma como resultado el nmero de unidades formadoras de colonias, UFC/ml o UFC/g de producto carnico que evaluamos, expresado como un nmero entre 1,0 y 9,9 multiplicado por 10x donde x es la potencia apropiadade 10.Se calcula el nmero de N de colonias por mililitro o por gramo de producto,dependiendo del caso, usando la siguiente ecuacin:

N= suma de todas las colonias Suma de cajas reteidas x el factor de dilucion.

CONCLUCIONEl analisis de Bacilos cereus en la carne de diablo de zenu muestra presencia de la bacteria por su color blaco y esporulado , en las cajas petri de las 3 diluciones de forma expanciva donde no podrias aplicar la formula de la suma de ufc.

BIBLIGRAFIA*www.biologia.edu.ar/microgeneral/micro-ianez/14_micro.htm*gua de laboratorio.*es.wikipedia.org/wiki/Microbiologa

MARCO TEORICOSon todas aquellas bacterias aerobias o anaerobias facultativas, mesfilas o psicrfilas capaces de crecer en agar nutritivo. Se investigan por el mtodo de recuento en placa con siembra en profundidad, los microorganismos mesfilos son aquellos que se desarrollan entre 15 y 35 C y que tienen una temperatura ptima decrecimiento y proliferacin en un ambiente o medio que tenga una temperatura de 37C. En este grupo se encuentran los microorganismos patgenos es decir los causantes de enfermedades. El intervalo de temperaturas en el que crecen los microorganismos es muy amplio: de34 C a > 90 C. En funcin de esto se encuadra a los microorganismos en tres grupos:a)Los que crecen bien a 7 C o por debajo de esta temperatura cuya temperatura: psicrfilos.b) los que crecen entre 2030 C, con una temperatura ptima de crecimiento est entre 3040C: mesfilosc)los que crecen por encima de los 45 C: termfilos.El hbitat de los organismos mesfilos incluye el suelo, el cuerpo de un animal, etc. Sutemperatura ptimade crecimientose encuentraen los37C, la temperatura normal de un cuerpo humano

Al igual que las protenas, la larga molcula de ADN en espiral emprende un proceso de desnaturalizacin desenrollarse y rompiendo sus enlaces mientras aumenta la temperatura. Las bacterias termfilas evitan que esto ocurra con la ayuda de una enzima conocida comoADN girasa reversa.Este recurso adaptativo hace que el ADN se enrolle y doble sobre s mismo hacindola ms resistente frente a las temperaturas tan altas del medio donde viven.

OBJETIVOS Determinacin en placa de termfilos Determinar termfilos presentes en la muestra a analizar Observar la influencia de la temperatura en el crecimiento de los termfilos

MATERIALES UTILIZADOS Standar Plate Count Agar Cajas Petri Erlenmeyer Tubos de ensayo Morteros Agua peptonada 0.1 % Puntas estriles Micropipetas

Equipos autoclave incubadoras Procedimiento1. Tomar 10g de muestra en este caso utilizamos para la muestra.2. Tomar la muestra y adicionarla al Erlenmeyer que contiene 90mL de agua peptonada.3. Realizar las diluciones seriadas hasta 10-3.4. Sembrar en profundidad cada una de las diluciones por duplicado en el medio SPC.5. Incubar a 35C +/-2 durante 72 horas.6. Posteriormente Realizar el recuento de UFC.

CUADRO DE RESULTADOSCARACT.MICROSCOPOCASDILUCIONCARACT. MACROSCPICASMEDION DE COLONIASIMAGEN

. TERMOFILOS

10-1Filamentosaplanaonduladomate

SPC(STNDAR PLATE COUNT)1 caja crecimiento masivo2 caja crecimiento masivo3 caja crecimiento masivo

10-2ElpticaPlana irregular y extendidaMate

10-3.ElpticaPlanaIrregular y extendidaMate

RecomendacionesSe recomienda tener especial cuidado con los productos enlatados ya que si no se almacenan correctamente podra permitir el desarrollo de estos microorganismos y esto podra acarrear problemas para la salud del consumidor del producto.Al momento de realizar el anlisis verifique que cuente con todos los elementos de proteccin personal esto con el fin de no contaminar de ningn modo la muestra y que tampoco adquirir ningn tipo de contaminacin por parte de la muestra a analizar.Antes y despus de cada anlisis realizado en el laboratorio es muy importante que lave y desinfecte sus manos para prevenir cualquier tipo de contaminacin.

ConclusionesCon estos anlisis nos podemos concluir que siempre habrn riesgos presentes en los procesos productivos que traten alimentos por eso es difcil ejercer un control para reducir a cero los riesgos presentes en los alimentos sin embargo con la ayuda de estos anlisis podemos conocer los factores que estn presentes y que inciden en las intoxicaciones por alimentos para as minimizar al mximo los posibles riesgos que se puedan presentar, tambin nos permite saber si los procesos de limpieza y desinfeccin tanto para los manipuladores como para superficies empaques o envases utilizados y que hacen parte de los procesos de produccin realizados en una empresa.FUNDAMENTO TEORICOEscherichia coli Bacilo corto gram negativo que forma parte de la flora normal del intestino de animales de sangre caliente. Es aerobio facultativo, de metabolismo fermentativo, O-Nitrofenli--D- galactopiransido positivo y su crecimiento ptimo es a 37 C. Algunas cepas pueden producir entero toxinas y tiene otros factores de virulencia de colonizacin e invasin por lo cual pueden causar enfermedades diarreicas, as como infecciones urinarias y nosocomiales.

OBJETIVOSAdquirir destreza en la determinacin de presencia o ausencia de E. Coli en la muestra Realizar informe de los resultados obtenidos por la muestra analizada

MATERIALESEosina Azul de Metileno (EMB)Cajas petriFrasco shotVidrio relojBalanza analiticaMorterosCaldo lactosadoPuntas estrilesMicropipetas

METODOLOGIA

1.Tomar 10g de muestra y macerarla. En caso que la muestra sea liquida tome 10mL en una probeta estril.2.Agregar la muestra al frasco de shot ya preparado que contiene 225mL de caldo lactosado llevar durante 24 horas en la incubadora 35c.3.Realice diluciones seriadas hasta 10-3.4.Siembre por duplicado todas las diluciones (siembra profunda).5.Incubar a 35C +/- 1 durante 24 horas.

RESULTADOSMedio de cultivoCaractersticas macroscopicasCaracteristicasmicroscopicasDilucionNo de coloniasImagen

Escherichia coliCALDO LACTOSADO EMB-AGAR(No presenta)AUSENCIA(No presenta)AUSENCIACaldo lactosado3g 1000mlx 225mlx=0.675gEMB-AGAR37,5 1000mlx 60 mlx=2,25g O

CONCLUSIONTeniendo en cuenta los resultados de la muestra el Jamn endiablado no hay PRESENCIA de E-coli ya que por ser un producto enlatado cumpli con ese anlisis dando un resultado Negativo sin presencia de la bacteria en el producto. Cumpliendo as con la normaDISCUSION DE RESULTADOSCon el grupo llegamos a imaginar que el anlisis se hizo acorde a las instrucciones de la gua y la profesora teniendo en cuenta el protocolo necesario para realizar bien el anlisis dando un resultado satisfactorio de la no presencia de la bacteria E-COLI en el producto RECOMENDACIONES Teniendo en cuenta los protocolos de realizacin del anlisis y los EPP tendremos siempre un resultado optima en el momento de realizar un anlisis a una muestra de un alimento.