AN RPS DIAGNOSTIC SOLUTION

Nota: Puede obtener más ejemplares del prospecto de FebriDx en la página de descargas de: FebriDx.com

USO PREVISTOFebriDx es un inmunoensayo rápido para la detección visual y cualitativa in vitro de niveles altos de MxA y PC-R directamente a partir de sangre completa periférica. La prueba mide una respuesta inmunitaria clínicamente significativa a una presunta infección vírica o bacteriana en pacientes de más de 2 años de edad que acudan a solicitar atención médica en los 3 días posteriores a la presentación de una fiebre de comienzo agudo (exhibida o informada) y en los 7 días posteriores de la aparición de síntomas respiratorios de nuevo comienzo indicativos de una infección de la vías respiratorias altas de adquisición comunitaria.

La prueba FebriDx facilita la identificación clínica de pacientes con una infección vírica invasiva subyacente por gripe A/B, adenovirus, virus respiratorio sincicial (VRS), metaneumovirus, virus paragripal o virus de Epstein-Barr (VEB), y de pacientes con una respuesta inmunitaria clínicamente significativa indicativa de una infección bacteriana subyacente.

La prueba está indicada para uso profesional en contextos ambulatorios y deberá utilizarse junto con otros indicios clínicos, como información de laboratorio, radiográfica y epidemiológica.

Los resultados negativos no excluyen la presencia de una infección respiratoria (p. ej., por rinovirus o coronavirus) y no deberán utilizarse como base única del diagnóstico, del tratamiento o de otras decisiones relacionadas con la atención clínica y al paciente. Además de utilizar radiografía y la presentación clínica para facilitar el diagnóstico, pueden utilizarse otras pruebas de laboratorio (p. ej., cultivos bacterianos y víricos, inmunofluorescencia y la reacción en cadena de la polimerasa [PCR]) para confirmar la presencia de un patógeno respiratorio específico.

RESUMEN Y EXPLICACIÓN DE LA PRUEBALas infecciones respiratorias agudas víricas y bacterianas son muy contagiosas y constituyen una importante fuente de morbilidad, mortalidad y gasto sanitario. Debido a la considerable coincidencia de síntomas y signos, la diferenciación clínica de la etiología de estas infecciones es difícil, y a menudo lleva al uso frecuente e innecesario de antibióticos.

Esto es especialmente cierto en contextos ambulatorios, donde el acceso al diagnóstico de laboratorio es caro, lleva tiempo y requiere varios días para producir un resultado. Los cultivos bacterianos suelen realizarse únicamente en casos de infección grave, como neumonía, o cuando las consecuencias de la omisión del diagnóstico pueden provocar complicaciones graves, como en el caso de la amigdalitis estreptocócica. Las pruebas grupales de cribado vírico por PCR son útiles, pero costosas, y no ofrecen información clínicamente relevante en el punto de atención.

La prueba FebriDx es un inmunoensayo de flujo lateral rápido para diagnóstico inmediato en el punto de atención que utiliza una muestra de sangre de punción dactilar para identificar y diferenciar una respuesta inmunitaria clínicamente significativa a una infección respiratoria febril aguda vírica o bacteriana.

BIOMARCADORES

MxALa proteína A de resistencia a mixovirus (MxA) es un derivado de células de interferón alfa/beta cuya concentración aumenta en presencia de una infección vírica aguda, pero no es específica de un tipo particular de virus. La MxA tiene una baja concentración basal de menos de 50 ng/ml, un tiempo de inducción rápido de 1-2 horas y una semivida larga de 2,3 días, lo que la hace un marcador ideal de infección vírica.1,2 Los niveles de MxA llegan a su máximo a las 16 horas y permanecen altos en presencia de concentraciones elevadas de interferón.3 Las infecciones víricas aumentan los niveles de MxA a la vez que solamente producen un ligero aumento de los niveles de PC-R.4-7 Se ha demostrado que la expresión de la proteína MxA en la sangre periférica es un marcados sensible y específico de infección vírica.8-13

Prospecto

PC-RLa proteína C-reactiva (PC-R) es un indicador no específico de la presencia de inflamación aguda y sus niveles aumentan en presencia de infección bacteriana. La PC-R es una proteína de fase aguda con concentraciones séricas normales de menos de 3 mg/l14 que aumentan durante los procesos inflamatorios, sobre todo después de una infección grave.15 En presencia de infección o inflamación graves, los niveles de PC-R pueden superar los 500 mg/l.16 La infección bacteriana es un potente estímulo de un considerable aumento de los niveles de PC-R,4 que tiene lugar en las 4-6 horas posteriores a la estimulación y alcanza su máximo tras 36 horas.14 La administración de tratamiento antibiótico provoca una rápida disminución de los niveles de PC-R.17,18

Patrón multiplexado de resultadosAisladamente, ni la MxA ni la PC-R por sí solas son suficientemente sensibles o específicas para diferenciar una infección vírica de una bacteriana. No obstante, si se examinan simultáneamente los niveles bajos y altos de PC-R, cada uno de ellos combinado con la presencia de un nivel alto de MxA, es posible distinguir a los pacientes con una infección de etiología vírica de aquellos con una infección de etiología bacteriana.

La prueba FebriDx produce un patrón multiplexado de resultados consistente en niveles umbral clínicamente relevante de PC-R baja, PC-R alta y MxA que, conjuntamente, ofrecen una forma sensible y específica de distinguir a los pacientes con una respuesta inmunitaria clínicamente significativa indicativa de una presunta infección respiratoria de aquellos con una enfermedad respiratoria no confirmada microbiológicamente. Como tal, la prueba también ayudará a diferenciar las infecciones respiratorias febriles agudas víricas y bacterianas.

PRINCIPIOS DE LA PRUEBALa prueba FebriDx es un inmunoensayo de flujo lateral que utiliza tecnología Direct Sampling Micro-Filtration (microfiltración de muestreo directo). La prueba utiliza dos tiras reactivas de flujo lateral contenidas en la misma carcasa de plástico y anticuerpos monoclonales anti-MxA y anti-PC-R. Una tira reactiva contiene una línea de control y dos líneas de resultados (MxA y PC-R baja). El valor umbral de MxA es de 40 ng/ml y el de PC-R baja es de 20 mg/l de equivalente en suero. La segunda tira reactiva contiene una línea de control y una única línea de resultado (PC-R alta). El valor umbral de PC-R alta es de 65 mg/l de equivalente en suero.

Si las muestras de sangre de punción dactilar contienen niveles altos de MxA, PC-R baja o PC-R alta, por encima de sus niveles umbral respectivos, la línea correspondiente de la prueba aparecerá en la ventana de resultado. FebriDx es una prueba rápida desechable que tarda al menos 15 minutos en proporcionar un resultado.

Materiales suministrados 20 tarjetas de prueba

22 kits de accesorios (1 lanceta y 2 pipetas)

22 tubos de solución amortiguadora

1 prospecto

1 tarjeta de referencia rápida

ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES1. Solo para uso diagnóstico in vitro.

2. Mantenga la tarjeta de la prueba FebriDx en su bolsa sellada de papel de aluminio hasta justo antes de utilizarla.

3. No utilice la tarjeta de la prueba FebriDx ni la solución amortiguadora después de su fecha de caducidad.

4. Tome las precauciones habituales al recoger y manipular muestras de sangre.

5. Todas las muestras deben considerarse potencialmente peligrosas y manipularse del mismo modo que un agente infeccioso. Deben establecerse métodos de manipulación y eliminación adecuados según la normativa local, regional y nacional.

6. Utilice guantes desechables mientras manipula las muestras y lávese las manos después de finalizar la prueba.

7. La lanceta es estéril hasta que se le quita la tapa protectora. No utilice la lanceta si la tapa protectora no está fijada en posición.

8. Después de aplicar las dos (2) muestras de sangre a la tarjeta de prueba y de cerrar esta, deberá aplicarse solución amortiguadora inmediatamente en la ventana de activación azul. La prueba debe realizarse en el minuto posterior al cierre de la lengüeta.

9. La tarjeta de la prueba FebriDx, las pipetas, la lanceta y la solución amortiguadora son elementos de un solo uso. No los reutilice con varias muestras.

10. La prueba FebriDx requiere una lectura visual. No interprete el resultado de la prueba si tiene alterada la visión de los colores.

11. La interpretación del resultado requiere un entorno con iluminación intensa.

Materiales no suministrados Temporizador

Guantes

Compresa de alcohol

Gasa

2

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDADAlmacene la prueba FebriDx entre 25 °C (77 °F) y 4 °C (39 °F). La tarjeta de la prueba FebriDx y la solución amortiguadora permanecerán estables hasta las fechas de caducidad impresas en sus envases.

COMPONENTES DE LA PRUEBA

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBACompruebe la fecha de caducidad de todos los envases. No utilice componentes caducados.

Preparación de la prueba1. Rasgue la bolsa de papel de aluminio por la perforación indicada y saque la tarjeta

de la prueba. 2. Coloque la tarjeta de la prueba sobre una superficie plana con el logotipo de FebriDx

mirando hacia arriba.3. Sujete la lengüeta de la flecha roja y levante la lengüeta hacia la izquierda para dejar al

descubierto la zona de aplicación de la muestra. Nota: Doble con cuidado la lengüeta hacia la izquierda para asegurarse de que se abra por completo. No cierre la lengüeta.

Recogida y transferencia de la muestra de sangreNota: Tome las precauciones habituales al recoger y manipular muestras de sangre.

1. Limpie la yema del dedo con una gasa empapada con alcohol y déjela secar al aire. 2. Localice la lanceta y quítele la tapa protectora. Presione firmemente la lanceta para

realizar una punción cutánea. Con una gasa, limpie la primera gota de sangre y masajee el dedo suavemente hacia el lugar de la punción para estimular el flujo de sangre.Nota: La lanceta suministrada se eligió específicamente para su uso con la prueba FebriDx. Es posible que otras lancetas no produzcan la cantidad de sangre adecuada para realizar la prueba FebriDx y que sea necesario obtener una segunda muestra de punción dactilar realizando la punción en otro lugar.

3. Sostenga una de las pipetas horizontalmente y recoja 5 µl de sangre del lugar de la punción. Nota: NO apriete el bulbo de la pipeta. La acción capilar aspirará automáticamente la cantidad requerida (5 µl) de muestra de sangre al interior de la pipeta hasta alcanzar la línea de llenado negra.

4. Coloque la pipeta sobre la tira azul en la zona de aplicación de la muestra. Ponga en contacto la punta de la pipeta con la tira y apriete el bulbo de la pipeta para transferir toda la cantidad de sangre. Una vez transferida la muestra, deseche con cuidado la pipeta contaminada en un contenedor de residuos médicos.

5. Sostenga la segunda pipeta horizontalmente y recoja otros 5 µl de sangre del lugar de la punción. Si no hay presente una cantidad adecuada de muestra de sangre, puede ser necesario masajear suavemente hacia el lugar de la punción para estimular el flujo de sangre.Nota: NO apriete el bulbo de la pipeta. La acción capilar aspirará automáticamente la cantidad requerida (5 µl) de muestra de sangre al interior de la pipeta hasta alcanzar la línea de llenado negra.

6. Coloque la pipeta sobre la tira morada en la zona de aplicación de la muestra. Ponga en contacto la punta de la pipeta con la tira y apriete el bulbo de la pipeta para transferir toda la cantidad de sangre. Una vez transferida la muestra, deseche con cuidado la pipeta contaminada en un contenedor de residuos médicos.

7. Cierre la lengüeta. Utilizando los dos pulgares, presione hacia abajo sobre las huellas digitales negras para encajar las clavijas en su sitio. Nota: No intente volver a abrir la tarjeta de prueba después de haberla cerrado.

CO

MPO

NEN

TES

Tarjeta de la prueba

Solución amortiguadora

Kit de accesorios(1 lanceta y 2 pipetas)

Zona de aplicación de

la muestra

AN RPS DIAGNOSTIC SOLUTION

3

Ejecución de la prueba1. Localice la solución amortiguadora. Sostenga el tubo en posición vertical y quítele

la tapa.2. Apriete lentamente el tubo para verter todo el contenido de solución amortiguadora

en la ventana de activación azul. Asegúrese de no derramar líquido sobre la tarjeta de la prueba.Nota: Apriete el tubo varias veces para asegurarse de vaciarlo por completo.

3. Deje la tarjeta de la prueba sobre una superficie plana durante 15 minutos.

RESULTADOS DE LA PRUEBASe observa una onda de sangre que se desplaza a través de las ventanas de resultados mientras se está ejecutando la prueba. Si no es visible una onda de sangre después de aproximadamente un (1) minuto, localice otro tubo de solución amortiguadora y apriételo lentamente para añadir más líquido (4-5 gotas) en la ventana de activación azul. El resultado de la prueba podrá leerse adecuadamente una vez que la mayor parte del fondo de cada ventana de resultado se haya despejado (aparte de pequeños trazos de sangre periférica a lo largo de los lados de cada ventana de resultado) y que hayan transcurrido al menos 15 minutos.

Nota: Si la mayor parte del fondo no se ha despejado después de 15 minutos, deje transcurrir un poco más de tiempo de revelado antes de la interpretación. Si la mayor parte del fondo no se ha despejado lo suficiente para permitir la interpretación de los resultados después de 30 minutos de tiempo de revelado, la prueba no podrá leerse adecuadamente y deberá desecharse. Utilice una nueva tarjeta de la prueba FebriDx para volver a analizar al paciente.

Los resultados de la prueba FebriDx permanecen estables durante un máximo de tres (3) horas. No interprete los resultados de la prueba después de este periodo de tiempo.

Para que la prueba sea válida, deberá aparecer una línea de control azul en cada ventana de resultado.

Resultado positivoEl resultado positivo se muestra como unas líneas rojas o negras en las ventanas de resultados. Una línea de resultado desigual o incompleta se debe a una distribución desigual de la muestra en la tira reactiva. Incluso si la línea de resultado tiene un color desvaído, está incompleta a lo largo del ancho de la tira reactiva o tiene un color desigual, deberá interpretarse como un resultado positivo. Un resultado positivo indica la presencia de un alto nivel de antígenos de MxA o PC-R.

Resultado negativoSi solamente es visible una línea de control azul en ambas ventanas de resultados, la prueba deberá interpretarse como negativa. Un resultado negativo indica la ausencia de un alto nivel de antígenos de MxA y PC-R.

Resultado no válidoPara que la prueba sea válida, deberá aparecer una línea de control azul en cada ventana de resultado. La ausencia de dos líneas de control azules indica un resultado no válido.

Si se obtiene un resultado no válido, se deberá desechar la prueba y volver a analizar al paciente utilizando una nueva tarjeta de la prueba FebriDx. Para volver a analizar al paciente, elija otro lugar de punción en un dedo diferente.

*Durante el ensayo clínico prospectivo multicéntrico de FebriDx, se categorizó a 10 pacientes como con infección vírica con un alto nivel de MxA combinado en presencia de niveles altos de PC-R baja y PC-R alta. De estos 10 pacientes, se confirmó que uno de ellos presentaba un alto nivel de procalcitonina (PCT), indicativo de una infección bacteriana y un alto nivel de MxA, pero no hubo ninguna proliferación bacteriana asociada en el cultivo celular y la PCR no detectó ningún patógeno. En nueve de los 10 pacientes se confirmó la presencia de infección vírica por PCR o se confirmó un resultado negativo para infección clínicamente significativa.

Infección bacteriana

Infección bacteriana

Negativo

No válido

No válido

No válido

Infección vírica

Infección vírica

Infección vírica*

*No se puede descartar la coinfección

4

CONTROL DE CALIDAD

Controles procedimentalesLa prueba FebriDx contiene los siguientes controles procedimentales integrados. Para un control de calidad diario, RPS recomienda documentar que estos controles procedimentales internos se comprueban con la primera muestra analizada de cada día.

Prueba sin usarUna tarjeta de prueba FebriDx sin usar tiene unas líneas naranja desvaído en cada ventana de resultado, lo que indica el aspecto potencial de las líneas de control y de resultados.

Onda de líquidoSe observa una onda de sangre que se desplaza a través de las ventanas de resultados mientras se está ejecutando la prueba. El resultado de la prueba podrá leerse adecuadamente una vez que la mayor parte del fondo de cada ventana de resultado se haya despejado y que hayan transcurrido al menos 15 minutos.

Nota: Si la mayor parte del fondo no se ha despejado después de 15 minutos, deje transcurrir un poco más de tiempo de revelado antes de la interpretación. Si la mayor parte del fondo no se ha despejado lo suficiente para permitir la interpretación de los resultados después de 30 minutos de tiempo de revelado, la prueba no podrá leerse adecuadamente y deberá desecharse. Utilice una nueva tarjeta de la prueba FebriDx para volver a analizar al paciente.

Líneas de controlPara que la prueba sea válida, deberá aparecer una línea de control azul en cada ventana de resultado. La ausencia de dos líneas de control azules indica un resultado no válido.

LIMITACIONES1. Para hacer un uso óptimo de la prueba FebriDx, esta debe utilizarse en los tres (3) días posteriores a la fiebre de comienzo

agudo y en los siete (7) días posteriores a los síntomas respiratorios de nuevo comienzo.2. La prueba FebriDx debe realizarse utilizando sangre capilar (obtenida mediante punción dactilar) reciente. 3. Para que la prueba se ejecute correctamente, deben aplicarse cinco (5) μl de sangre a cada tira reactiva. Para asegurar la

aplicación del volumen adecuado (5 µl) a cada tira reactiva, la muestra de sangre debe alcanzar la línea de llenado negra de la pipeta. Si la prueba se realiza con una cantidad insuficiente de muestra de sangre, es posible que se obtenga un resultado erróneo.

4. Las condiciones siguientes pueden llevar a obtener resultados erróneos:

Estado inmunosuprimido actual o uso actual de inmunosupresores

Uso actual de antiinfecciosos orales

Uso actual de tratamiento con interferón (p. ej., para esclerosis múltiple, VIH, VHB o VHC)

Inmunización vírica en vivo en los últimos 30 días

Traumatismo importante, intervención de cirugía mayor y quemaduras graves en los 30 días anteriores

Fiebres crónicas de más de 7 días de duración5. Se sabe que muchas bacterias, tales como especies de Streptococcus, especies de Staphylococcus, especies de Hemophilus y

especies de enterobacterias, así como muchos virus, tales como rinovirus, coronavirus, virus del herpes simple, virus de Epstein-Barr y citomegalovirus, colonizan las vías respiratorias, pero se desconoce su repercusión. No se detectará la colonización de patógenos víricos o bacterianos, ni la propagación vírica periódica sin una respuesta sistémica invasiva.

VALORES ESPERADOSLa prevalencia de infecciones respiratorias agudas varía durante el año y de región a región, con brotes que se producen normalmente durante el otoño y el invierno. En los Estados Unidos tienen lugar al año aproximadamente 76 millones de visitas a consultas por infecciones respiratorias agudas.19 Además, se ha demostrado que la fiebre constituye el motivo de un 19 % a un 30 % de todas las visitas a consultas pediátricas, lo que la hace el signo de enfermedad de presentación más frecuente.20,21 En los países desarrollados, las infecciones respiratorias agudas son la primera causa de morbilidad, y representan: el 20 % de las consultas médicas, el 30 % del absentismo y el 75 % de todas las prescripciones de antibióticos.22

CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO371 pacientes participaron en un ensayo clínico multicéntrico, prospectivo y a ciegas realizado con operadores formados y sin formación para determinar la concordancia en positivos y en negativos de la prueba FebriDx en la identificación de una respuesta inmunitaria clínicamente significativa a infecciones respiratorias febriles agudas víricas o bacterianas de adquisición comunitaria, en comparación con la evaluación de revisores clínicos expertos y con los resultados de pruebas clínicas microbiológicas, de laboratorio o radiológicas normalizadas. Este estudio se realizó en pacientes de más de 1 año de edad que acudieron a consultas de atención primaria y de atención urgente en los 3 días posteriores a la aparición de una fiebre de comienzo agudo y en los 7 días posteriores a la aparición de síntomas respiratorios de nuevo comienzo indicativos de una infección respiratoria febril aguda de adquisición comunitaria, y a salas de urgencias en los 3 días posteriores a la presentación de síntomas respiratorios de nuevo comienzo.

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AN RPS DIAGNOSTIC SOLUTION

Los resultados de la prueba FebriDx se compararon con los de las pruebas microbiológicas y de laboratorio indicadas más abajo.

Pruebas víricas: Prueba respiratoria grupal por PCR BioFire FilmArray®: Gripe A y B, adenovirus, virus respiratorio sincicial 1-2, virus paragripal 1-4, metaneumovirus

PCR en tiempo real suplementaria para virus de Epstein-Barr

Pruebas bacterianas: Prueba respiratoria grupal por PCR BioFire FilmArray® para bacterias atípicas: Chlamydophila pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae y Bordetella pertussis

Cultivos orofaríngeos (placas de sangre, chocolate y MacConkey)

Pruebas de laboratorio: Procalcitonina (PCT) y recuento de leucocitos

La colonización bacteriana faríngea se diferenció de las infecciones genuinas si la proliferación observada en el cultivo celular se produjo asociada a un alto nivel de PCT. Los pacientes sin confirmación microbiológica se categorizaron adicionalmente como bacterianos si presentaban un alto nivel de PCT. Todos los pacientes sin infección respiratoria confirmada microbiológicamente y con un nivel normal de PCT se consideraron negativos para infección clínicamente significativa.

DATOS DE RENDIMIENTO DE LA PRUEBA FEBRIDX

N = 371 pacientes participantes 165 pacientes asintomáticos

205 pacientes con infecciones de las vías respiratorias altas 38 % confirmado infeccioso por métodos de referencia

12 % bacteriana 26 % vírica

62 % con una enfermedad respiratoria no confirmada microbiológicamenteDurante los análisis de los pacientes asintomáticos, dos pruebas fueron no válidas. A uno de los pacientes con infección de las vías respiratorias altas no se le realizaron cultivos ni análisis de sangre, por lo que sus datos se excluyeron del estudio.

Diagnóstico clínico final [Negativo, Vírica, Bacteriana]

(–) IgM VEB

(+) Gripe A/B, paragripal 1-4,

metaneumovirus, adenovirus y VRS

(+) IgM VEB

(–) Gripe A/B, paragripal 1-4, metaneumovirus, adenovirus, VRS,

Bordetella, Chlamydia y Mycoplasma

PCT ≥ 0,1 ng/ml PCT

≥ 0,15 ng/ml

PCT < 0,1 ng/ml PCT < 0,15 ng/ml

PCT < 0,1 ng/ml

ColonizaciónConfirmación microbiológica Vírica

Colonización

PCT < 0,15 ng/ml 0,15 ng/ml ≤ PCT < 0,25 ng/ml Y leucocitos < 12.000

Y ausencia de bandasPCT ≥ 0,25 ng/ml o 0,15 ng/ml ≤ PCT < 0,25 ng/ml

Y leucocitos ≥ 12.000 o la presencia de bandas

Vírica BacterianaNegativo

Infección de las vías respiratorias altas

Muestra nasofaríngea + orofaríngea para PCR

(+) Cualquier bacteria excepto

Strep de grupo A o B

Muestra orofaríngea para cultivo celular

(+) Strep grupo A(+) Strep grupo C*Otras bacterias

primarias

(+) Cualquier bacteria

(+) Strep grupo A(+) Strep grupo C*Otras bacterias

primarias

(+) Bordetella, Chlamydia y Mycoplasma

Dos médicos expertos evaluarán todas las pruebas microbiológicas y de laboratorio (excepto las de MxA y PC-R) junto con los antecedentes, la exploración física y otras pruebas que son parte de la atención habitual, etc.

Sin prolifera-

ción en cultivo

Prueba respiratoria grupal BioFire FilmArray®1(+) VEB por PCR en tiempo real

[1] Los resultados de PCR BioFire positivos para rinovirus y coronavirus se tratarán como colonización y se definirán como sin confirmación microbiológica. [2] Como la PCR es altamente sensible, es improbable que no se detecte un virus o una bacteria atípica; por lo que lo más seguro es que cualquier PCT alta ≥ 0,1 ng/ml sea bacteriana. *Neisseria gonorrhea, Corynebacterium diptheria y Arcanobacterium haemolyticum

Confirmación microbiológica Bacteriana

Sin confirmación microbiológica2

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VALORES DE RENDIMIENTO DE LA PRUEBA FEBRIDX

Pacientes asintomáticos Concordancia en negativos = 99 % (161/163)

Pacientes sintomáticos

Ácido acetilsalicílico

Ácido ascórbico

Bilirrubina conjugada

Bilirrubina libre

Dayquil®

Factor reumatoide

Glutatión

Hemoglobina

IL-6

IL-8

Interferón

Isoniazida

L-dopa

Oxaloacetato

Procalcitonina

Robitussin®

Triglicéridos

Tylenol®

Entre estos, solamente el factor reumatoide a concentraciones superiores a 200 UI/ml produjo una línea de prueba positiva para PC-R baja cuando se añadió a la concentración C5 de PC-R baja. El factor reumatoide a concentraciones inferiores a 150 UI/ml no mostró ninguna interferencia. No hubo ninguna interferencia con las líneas de prueba de MxA ni de PC-R alta a ninguna de las concentraciones comprobadas.

ESTUDIO DE PRECISIÓN Y REPRODUCIBILIDADLas muestras se prepararon en sangre completa reciente conservada en EDTA, con proteínas MxA y PC-R recombinantes. Se analizaron ocho muestras, consistentes en una combinación de concentraciones C5 y C95 de tres analitos: MxA, PC-R baja y PC-R alta. Una combinación de técnicos de laboratorio, personal de enfermería y médicos realizó un total de 960 determinaciones en tres centros diferentes en cinco días consecutivos durante un periodo de dos semanas. El estudio demuestra la reproducibilidad global entres tres lotes de material, entre tres centros independientes y entre seis usuarios independientes.

Bacteriana Concordancia en positivos = 80 % (20/25)

IC del 95 % [de 60,8 a 91,1]

Concordancia en negativos = 94 % (169/180) IC del 95 % [de 89,4 a 96,6]

Valor predictivo positivo = 65 % IC del 95 % [de 47,0 a 78.9]

Valor predictivo negativo = 97 % IC del 95 % [de 93,5 a 98,8]

Vírica Concordancia en positivos = 87 % (46/53)

IC del 95 % [de 75,1 a 93,5]

Concordancia en negativos = 83 %* (126/152) IC del 95 % [de 76,1 a 88,1]

Valor predictivo positivo = 64 % IC del 95 % [de 52,4 a 74,0]

Valor predictivo negativo = 95 % IC del 95 % [de 89,5 a 97,4]

*No se detectó colonización de patógenos víricos o bacterianos, ni la propagación vírica periódica sin una respuesta sistémica invasiva. Para diferenciar la colonización bacteriana de la infección activa se requirió la presencia de un nivel alto de PCT o de un alto recuento de leucocitos asociada a patógenos conocidos. Como el rinovirus y el coronavirus son colonizadores frecuentes de las vías respiratorias y solamente causan una infección activa clínicamente significativa en aproximadamente un 10 % de los pacientes, estos dos virus no se incluyen en el uso previsto. Durante el ensayo clínico multicéntrico prospectivo de FebriDx, la presencia de rinovirus se confirmó mediante PCR en 52 sujetos; no obstante, solamente 8/52 pacientes mostraron de hecho un aumento del nivel de MxA. De estos pacientes con confirmación de rinovirus y alto nivel de MxA, la prueba FebriDx identificó correctamente a 5/8. Como el rinovirus no se incluye en el uso previsto y 8 pacientes mostraron un alto nivel de MxA, estos pacientes se consideraron «positivos falsos», a pesar de ser correctos, lo que llevó a una especificidad vírica artificialmente inferior.

SUSTANCIAS INTERFERENTESLa especificidad analítica de la prueba FebriDx se determinó evaluando una serie de sustancias interferentes mezcladas con muestras con y sin antígenos de MxA y PC-R a sus concentraciones C95 (límite de detección) y C5. Se examinó la interferencia positiva y negativa de las sustancias siguientes. La lista incluye medicamentos típicos que pueden estar tomando los pacientes febriles, así como las proteínas y otras sustancias presentes normalmente en la sangre.

Concentración de analito Número leído como positivo Total de % leído como positivo pruebas MxA ng/ml PC-R mg/l MxA PC-R baja PC-R alta MxA PC-R baja PC-R alta

0 0 0 0 0 120 0 0 0

22 3 1 0 0 120 1 0 0

89 28 109 109 65 120 91 91 54

266 84 120 120 120 120 100 100 100

0 13 0 36 13 120 0 30 11

0 60 2 120 120 120 2 100 100

0 180 0 120 120 120 0 100 100

0 42 0 118 101 120 0 98 84

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AN RPS DIAGNOSTIC SOLUTION

REFERENCIAS1. Horisberger MA. Interferon-induced human protein MxA is a GTPase which binds transiently to cellular proteins. J Virol 1992;66(8):4705-4709.

2. Ronni T, Melen K, Malygin A, Julkunen I. Control of IFN-inducible MxA gene expression in human cells. J Immunol 1993;150(5):1715-26.

3. Goetschy JF, Zeller H, Content J, Horisberger MA. Regulation of the interferon-inducible IFI-78K gene, the human equivalent of the murine mx gene, by interferons, double-stranded RNA, certain cytokines, and viruses. J Virol 1989;63(6):2616-22.

4. Makela MJ, Puhakka T, Ruuskanen O, et al. Viruses and bacteria in the etiology of the common cold. J Clin Microbiol 1998;36(2):539-42.

5. Huang N, Morlock L, Lee CH, et al. Antibiotic prescribing for children with nasopharyngitis (common colds), upper respiratory infections, and bronchitis who have health-professional parents. Pediatrics 2005;116(4):826-32.

6. Baker MD, Bell LM, Avner JR. Outpatient management without antibiotics of fever in selected infants. N Engl J Med 1993;329(20):1437-41.

7. Baskin MN, O’Rourke EJ, Fleisher GR. Outpatient treatment of febrile infants 28 to 89 days of age with intramuscular administration of ceftriaxone. J Pediatr 1992;120(1):22-27.

8. Nakabayashi M, Adachi Y, Itazawa T, et al. MxA-based recognition of viral illness in febrile children by a whole blood assay. Pediatr Res 2006;60(6):770-774.

9. Itazawa T, Adachi Y, Imamura H, et al. Increased lymphoid MxA expression in acute asthma exacerbation in children. Allergy. 2001;56(9):895-98.

10. Itazawa T, Adachi Y, Nakabayashi M, et al. Theophylline metabolism in acute asthma with MxA-indicated viral infection. Pediatr Int 2006;48(1):54-57.

11. Forster J, Schweizer M, Schumacher RF, et al. MxA protein in infants and children with respiratory tract infection. Acta Paediatr 1996;85(2):163-67.

12. Halminen M, Ilonen J, Julkunen I, et al. Expression of MxA protein in blood lymphocytes discriminates between viral and bacterial infections in febrile children. Pediatr Res 1997;41(5):647-50.

13. Chieux V, Hober D, Harvey J, et al. The MxA protein levels in whole blood lysates of patients with various viral infections. J Virol Methods 1998;70(2):183-91.

14. Okamura JM, Miyagi JM, Terada K, Hokama Y. Potential clinical applications of C-reactive protein. J Clin Lab Anal 1990;4(3):231-35.

15. Morley JJ, Kushner I. Serum C-reactive protein levels in disease. Ann N Y Acad Sci 1982;389:406-18.

16. Falk G, Fahey T. C-reactive protein and community-acquired pneumonia in ambulatory care: Systematic review of diagnostic accuracy studies. Fam Pract 2009;26(1):10-21.

17. Smith RP, Lipworth BJ. C-reactive protein in simple community-acquired pneumonia. Chest 1995;107(4):1028-31.

18. Smith RP, Lipworth BJ, Cree IA, Spiers EM,et al. C-reactive protein. A clinical marker in community-acquired pneumonia. Chest 1995;108(5):1288-91.

19. Gonzales R, Malone DC, Maselli JH, Sande MA. Excessive antibiotic use for acute respiratory infections in the United States. Clin Infect Dis 2001;33:757-62.

20. Wright P, Thompson J, McKee K, et al. Patterns of illness in the highly febrile young child: epidemiologic, clinical and laboratory correlates. Pediatrics 1981;67:694-700.

21. Eskerud J, Laerum E, Fagerthun H, et al. Fever in general practice: I. Frequency and diagnoses. Fam Pract 1992;263-69.

22. Bulletin of the World Health Organization (WHO), 1998; 76(1):101-103.

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