Problemas Encargados , Lab 7 Bioqi

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1. ¿En qué momento se realiza la precipitación de proteínas y por qué? Al comienzo de la técnica, la utilización del desproteinizante a base de sulfato de zinc, en medio alcalino, es utilizado para arrastrar el extractivo, las proteínas desnaturalizadas. La muestra tratada con NaOH (medio alcalino) y SO4Zn produce la reacción de oxido reducción: SO4Zn + NaOH --------- SO4Na2 + Zn(OH)2 El hidróxido de Zn insoluble arrastra las proteínas durante su precipitación, a su vez, el catión Zinc las ha desnaturalizado. 2. ¿Cuál es el papel del oxalato de amonio? 3. ¿cuál es el fundamento del método Somogy – Nelson? . Explique si se produce una reacción de oxidación o reducción. La glucosa u otro azúcar reductor reduce el reactivo cúprico alcalino, dando el oxido cuproso. Este, en presencia del reactivo arsenomolibdico de Nelson, forma un complejo de oxido molibdeno de color azul estable cuya intensidad puede ser medida en el espectrofotómetro, una vez que sigue las leyes de Lambert y Beer. Si se producen reacciones de oxidación y reducción ya que la determinación de azucares reductores por este medio se basas en la capacidad de los azúcares para reducir agentes oxidadntes suaves como el Cu2+ . El Cu2+ se reduce en Cu+. 4. En el método de Folin para determinación de azúcar en sangre, se añade a 0,1 mL de sangre, 10 mL de ácido túngstico a fin de eliminar las proteínas. Una alícuota de 2 mL de filtrado exento de proteínas se coloca en tubos para producir reacción de color, cuyo volumen final es 25 mL. La intensidad del color se compara con la que produce 4 mL de estándar de glucosa de 1mg%. Al ser procesado con los mismos reactivos, éste estándar produce un color 1.05 veces más intenso que el producido por la sangre filtrada. ¿Cuál es la concentración de azúcar en ésta muestra de sangre?

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1. ¿En qué momento se realiza la precipitación de proteínas y por qué?

Al comienzo de la técnica, la utilización del desproteinizante a base de sulfato de zinc, en medio alcalino, es utilizado para arrastrar el extractivo, las proteínas desnaturalizadas.La muestra tratada con NaOH (medio alcalino) y SO4Zn produce la reacción de oxido reducción:

SO4Zn + NaOH --------- SO4Na2 + Zn(OH)2El hidróxido de Zn insoluble arrastra las proteínas durante su precipitación,a su vez, el catión Zinc las ha desnaturalizado.

2. ¿Cuál es el papel del oxalato de amonio?3. ¿cuál es el fundamento del método Somogy – Nelson? . Explique si se

produce una reacción de oxidación o reducción.

La glucosa u otro azúcar reductor reduce el reactivo cúprico alcalino, dando el oxido cuproso. Este, en presencia del reactivo arsenomolibdico de Nelson, forma un complejo de oxido molibdeno de color azul estable cuya intensidad puede ser medida en el espectrofotómetro, una vez que sigue las leyes de Lambert y Beer.Si se producen reacciones de oxidación y reducción ya que la determinación de azucares reductores por este medio se basas en la capacidad de los azúcares para reducir agentes oxidadntes suaves como el Cu2+ . El Cu2+ se reduce en Cu+.

4. En el método de Folin para determinación de azúcar en sangre, se añade a 0,1 mL de sangre, 10 mL de ácido túngstico a fin de eliminar las proteínas. Una alícuota de 2 mL de filtrado exento de proteínas se coloca en tubos para producir reacción de color, cuyo volumen final es 25 mL. La intensidad del color se compara con la que produce 4 mL de estándar de glucosa de 1mg%. Al ser procesado con los mismos reactivos, éste estándar produce un color 1.05 veces más intenso que el producido por la sangre filtrada. ¿Cuál es la concentración de azúcar en ésta muestra de sangre?

Muestra estándar (E)

Concentración 1 mg% o 1 mg en 1 mLIntensidad de color 1.05 veces mas intenso

Tomamos en cuenta que intensidad de color proporcional a concentración de glucosa.

Concentración (E) = Concentración (S) Intensidad (E) Intensidad (S)

1 mg% = X mg% 1.05 1

X = 0.952 mg%

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Concentración de glucosa en sangre (S) = X = 0.952 mg%

1 mL 0.952 mg 25 mL Y mg = 23.81 mg

2 mL Y mg= 23.81 mg 10 mL Z mg = 119.047 mg

0.1 mL Z mg = 119.047 mg 1 mL concentración de azúcar en sangre

Concentración de azúcar en sangre = 1190.47 mg% o mg /mL

5. El coeficiente de extinción molar de una sustancia es de 3257 cm-1mol-1 en una celda de 1 cm y con una longitud de onda de 280 nm. ¿Cuál será la concentración en mg o en g si se obtuvo una absorbancia de 0,215, sabiendo que el peso molecular es 328?

A = axbxc 6.215 = 3257 cm-1mol-1 x 1 cm x c

c = 6.601 x 10-5 mol

peso molecular = 328

1 mol 3286.601 x 10-5 mol X

X = 0.0216