Presentación de PowerPoint -...
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Pol I Pol II pol III
gen pol A polB polC
PM (kDa) 103 90 130
mol/cél. 400 100 10
Vmax 20 nt/s 3 nt/s 750 nt/s
3' exonucl. + + +
5' exonucl + no no
procesiv. 3-200 10000 500000
DNA polimerasas en E. coli
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DNA polimerasa I
La DNA pol I rellena los espacios entre fragmentos de Okazaki
Utiliza actividad exonucleasa 5’3’ para eliminar cebador de RNA
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DNA ligasa
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La replicación causa superenrollamiento
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La topoisomerasa Girasa alivia
la tensión
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Terminación de la replicación
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Topoisomerasa IV
participa en la
terminación de la
replicación de
moléculas circulares.
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Cómo se asegura la célula que su DNA se
replica solo una vez?
Patrones de metilación del DNA
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Las enzimas Dam metilasas regulan el inicio en el origen de replicación
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ADN polimerasas en células eucariontes
Replicativas
Reparativas
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Los cromosomas eucariontes tienen múltiples
origenes de replicación
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Cantidad de DNA, pb/ cél. 4.2 106 109
Velocidad avance horquilla mm/min 30 3
Velocidad de replicación, nt / seg 750 60-90
Número de orígenes de replicación
/ célula 1 103-104
Tiempo 1 replicación genómica (hs) 0.27 8
Tiempo 1 división celular (hs) 0.33 24
E. coli Cél humanas
Replicación del ADN:
E. coli vs. células humanas
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1. Formación de un complejo pre-replicativo (comienza a finales de la fase M)
Activación de los orígenes de replicación en
eucariontes
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CycA/Cdk
2. Activación de pre-RC en el punto de control G1/S
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Hebra Retrasada
Topoisomerasa
DNA ligasa I
Rnasa HEN 1
Primasa
CDC 45
MCM 2 Helicasa
Topoisomerasa
Cebador ARN
PCNA
RFC
PCNA
RFC
Hebra Guía
DNA pol
DNA pol
RPA (SSB)
Horquilla de replicación en eucariontes
DNA pol
DNA pol : elonga cebadores de ARN DNA pol : elonga la cadena continua DNA pol : elonga la cadena discontinua
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Re-formación de cromatina durante la
replicación
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Hay complejos encargados de posicionar
los nucleosomas en las cadenas hijas
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Consultar el Artículo3 en el AMYD
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La modificación de histonas en los
nucleosomas se hereda a las cadenas
hijas (herencia epigenética)
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Existen varios modelos propuestos para la transmisión de marcas epigenéticas en la cromatina
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Se heredan patrones de metilación de citosinas en el ADN
Se heredan patrones de acetilación y metilación de las histonas
CMC= Chromatin Modifying Complex
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Planta de A. thaliana defectuosa en
metilación del DNA (Zhang lab, University of Georgia)
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¿Cómo completar la replicación de genomas lineales?
Cada uno de los dos
extremos 5’ en cada
cromosoma queda
incompleto al remover el
último cebador de RNA
3’ 5’
Solución: Elongar los telómeros
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Telomerasa
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Las células controlan el tamaño de su telómero