PRÁCTICO N° 7

Objetivos: conocer las técnicas de análisis para el control de calidad de inoculantes, agua y alimentos

Control de calidad microbiana de inoculantes, agua y alimentos

INOCULANTES: Productos formulados con microorganismos vivos

que se aplican a la semilla para mejorar la nutrición de los cultivos

Características de los componentes de un inoculante

Bacterias:

• específicas

• seleccionadas para fijar N2

• adaptadas a las condiciones ambientales del lugar

• número adecuado (fabricación: 10 x 108 bacterias/ g o ml de inoculante y

vencimiento: 10 x 106 bacterias/ g o ml inoculante ). Ley 20466/80

• máxima pureza

Soporte:

• sólido o líquido

• proveer alimento, oxígeno y humedad

• evitar la competencia con otros microorganismos

• no poseer sustancias tóxicas

Recomendaciones al comprar un inoculante

• Características del envase (permeable, cámara de aire)

• Fecha de vencimiento

• No formulado (mezclado) con curasemillas

• Condiciones de comercialización (cadena de frío)

• Análisis de calidad de la muestra

Análisis de control de calidad de inoculantes

Control de calidad: Verificar la cantidad de células viables de las bacterias especificas y las contaminantes

Rizobios: recuento en placa (medio YEM con rojo congo)

Azospirillum: NMP (medio NFB semisólido)

1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml

10-3

10-4

10-5

10-6

10-7

10-8

1 ml 1 ml

10-1

10-2

10 °10 °

inoculante líquidoinoculante sólido (X g + X ml H2O)

1 ml

incubar

calcular

9 ml de agua

1 ml

medio YEM

Análisis de control de calidad de inoculantes

Análisis de control de calidad de inoculantes

Rizobios: recuento en placa (medio YEM con rojo congo)

Recuento: 47 colonias contaminantes

Azospirillum: NMP (medio NFB semisólido)

6 6 6 7 7 7 8 8 8

+ + + + + - - - +

número característico: 3 2 1

NMP= 15

Actividades: - observar caja de Petri

- Inocular semillas

- resolver problemas

10 °

10 °Muestra de agua Verdura fresca

(X g en X ml H2O)

1 ml

Análisis de control de calidad de agua y alimentos

1 ml

10-1

10-2

9 ml H2Odestiladapor tubo

1 ml

1 ml

1 ml

1 ml 1 ml

Recuento bacteriano total

Escherichia coli

Organismos coliformes

LECTURA

INCUBAR

Análisis de control de calidad de agua y alimentos

Recuento bacteriano total (RBT)(medio sólido general)

Control de calidad: Verificar la cantidad de bacterias viables presentes en el agua y verdura

Recuento de organismos Coliformes (NMP)

- Totales (35-37ºC): medio liquido Mc Cokey

- Fecales (44-45ºC): medio liquido Mc Cokey o

caldo lactosa bilis verde brillante

0 0 0 -1 -1 -1 -2 -2 -2

Presencia de Escherichia coli (medio sólido Levine)

Presencia de Pseudomonas aeruginosa (medio agar cetrimida y posterior pruebas bioquímicas)

Valores límites permitidos / 100 ml

RBT Coliformestotales

Coliformesfecales

E. coli P. aerugino

sa

Agua potable (CAA)

50000 <3 NE Ausente Ausente

Agua envasada(CAA)

50000 <3 NE Ausente Ausente

Recreacional(EPA)

NE NE NE 126 NE

Efluentes (SRH)

NE < 5000 < 1000 NE NE

Normas de calidad de agua

NE: no especifica. CAA: Código Alimentario Argentino. U.S. EPA: Agencia de Protección Ambiental de los EEUU. SRH: Subsecretaría de Recursos hídricos.

Valores límites permitidos / 100 ml

Coliformesfecales

E. coli

Categoría A: riego para consumidores y trabajadores (cultivos hortícolas, campos de deportes y parques públicos)

NE Ausente

Categoría B: riesgo para trabajadores (cereales, forrajes, arboles)

NE Ausente

Categoría C: sin riesgo para consumidores ni trabajadores (forestaciones)

NE <1

Normas de calidad de agua para riego

Organización Mundial de la Salud

E. coli Salmonella sp.

E. Coli O157:H7

Hortalizas y frutas frescas (CAA) 100/ g Ausente/ 25g Ausente/ 25g

Vegetales medianamente procesados (envasadas listas para consumir) (CAA)

< 3.0/ g Ausente/ 25g Ausente/ 25g

Normas de calidad de alimentos

Actividades: - observar tubos y cajas de Petri

- resolver problemas.

CAA: Código Alimentario Argentino.