UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.Alumno: Bastidas Guerrero Tania LorenaCurso: Quinto Paralelo: A

Fecha de Elaboración de la Práctica: Lunes 2 de Junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: Lunes 9 de Junio del 2014

PRÁCTICA N° 1

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CIANURO.

Animal de Experimentación: Cobayo.

Vía de Administración: Vía Parenteral.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta la rata ante la Intoxicación por Cianuro.2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa

el Cianuro en el cobayo.3. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de Cianuro.

MATERIALES

Jeringuilla de 10cc Panema Campana Cronómetro Equipo de disección Tabla de disección Bisturí Vaso de precipitación Erlenmeyer Equipo de destilación. Tapón de corcho Tubos de ensayo Soporte universal Nuez de metal

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“Página 1

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Aro de metal Lámpara de alcohol fósforos Perlas de vidrio Probeta Cinta aislante Agitador Pipetas Guantes de látex Mascarilla Mandil

EQUIPOS:

Balanza analítica SUSTANCIAS

1. Cianuro de Sodio 5%2. Agua destilada3. Acido tartárico4. Hidróxido de sodio 0.1N

PROCEDIMIENTO

1. Tener todos los materiales listos en el mesón de trabajo 2. Preparar una solución de NaCN al 5% (con 1.06gr de NaCN en 20ml de agua)3. Administrar 5 ml NaCN al 5% por vía peritoneal 4. Colocar al cobayo en la panema.5. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte.6. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir ala cobayo y a observar las

manifestaciones que se han presentado tras la administración 7. Colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado

(Vaso de precipitación). 8. Añadir 50 ml de ácido tartárico para acidificar el contenido con las vísceras y se

colocan las 50 perlas.9. Se procede a destilar por 30 minutos. 10. El residuo de la destilación, se recoge en un Erlenmeyer con 20 ml de NaOH

0.1N, se practican las diferentes reacciones de reconocimiento.

Reacciones:

1. Azul de prusia - Una pequeña porción del destilado (después de comprobar su alcalinidad) se le agregan unos pocos cristales de sulfato ferroso, un exceso de ácido sulfúrico diluido y unas cuantas gotas de solución diluida de cloruro férrico, se calienta y se agita levemente y se acidifica con ácido clorhídrico diluido, obteniéndose un color azul intenso llamado azul de Prusia.

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HCN+NaOH → CNNa+H 2O

2 CNNa+S O4 Fe→ Na4 S O4+Fe ¿

Na2CN +Fe ¿

Na4 Fe ¿

2. Reacción de la fenolftaleína.- Se agregan a una pequeña porción de destilado unas gotas de solución de sulfato de cobre (1:2000) y previamente unas gotas de fenolftaleína con lo que le producirá un intenso color rojo debido a la oxidación de la fenolftaleína a fenolftaleína

3. Transformación de Cianuros a Sulfocianuros.- Se alcaliniza la muestra con hidróxido de sodio o potasio y se adiciona hiposulfuro de amonio recientemente preparado. Se evapora a baño maría y se recoge el residuo con ácido clorhídrico. Se filtra para eliminar el azufre que eventualmente pudiera estar presente y se agrega solución diluida de cloruro férrico. En caso positivo aparece un color rojo sangre por formación de sulfocianato férrico.

NaCN+(NH 4)2 S2→ NaSCN +(NH 4)2 S

3 NaCN+Cl2 Fe → Fe (SCN )3+3 NaCl

4. Reacción de la Bencidina.- Una pequeña cantidad de muestra se agrega a una solución de bencidina en ácido acético mezclada con solución de sulfato de cobre, produce color azul si en la. muestra se encuentra el ácido cianhídrico.

5. Con el Ácido Pícrico.- Una pequeña porción de la muestra, se le agregan. unas gotas de ácido Pícrico al 2 %; en case positivo el color amarillo del reactivo se toma anaranjado.

6. Con Yoduro de Plata Si agregamos unas gotas de la solución de la muestra sobre un precipitado de yoduro de plata se producirá la solución del precipitado en caso positivo.

7. Con Solución de Yodo.- Al adicionar unas cuantas gotas de la muestra sobre una solución de yodo, se producirá la decoloración del yodo en caso positivo.

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GRÁFICOS DEL PROCEDIMIENTO

GRÁFICOS DE LAS REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

Reacción con azul de prusiaReacción Negativa no da color azul.

Reacción de la Fenolftaleína

Reacción Positivo característico intenso color rojo.

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Preparar una solución de NaCN 5%

Inyectar 5 ml de solución al cobayoSe procede a la disección del

cobayoSe recogen las vísceras en un

vaso y se las pica fino

Se procede a destilar por 30 minutos recogiendo el residuo en

una solución de NaOH 0.1N

Reacción 1: Azul de Reacción 2: Fenolftaleína Reacción 5: Ácido pícrico Reacción 7: Solución de yodo

Reacción con ácido pícrico Reacción Positivo característico cambio a color anaranjado

Reacción con soluciones estañosasReacción Positivo No característico no decolora completamente

OBSERVACIONES

Se pudo observar que al administrar la solución de cianuro por vía intraperitoneal al cobayo presentó inicialmente:

- Respiración agitada- Se puso tembloroso- Levantaba la cabeza y a los 10 minutos se le empiezan a coger las orejas.

A los 20 minutos se le administran 3 ml más de solución de cianuro donde la respiración disminuye y deja de moverse.A los 36 minutos de la primera administración se le suministran 5 ml más de solución inmediatamente presenta convulsiones, y se orina.A los 42 minutos se produce el deceso.

CONCLUSIONES

Al término de la práctica aprendimos a identificar los síntomas que produce una intoxicación por cianuro a la vez que determinamos que es elevadamente tóxico ya que

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le produjo la muerte al cobayo a los 42 minutos. Asimismo se pudo determinar la presencia del tóxico en la muestra biológica al realizar las reacciones de identificación.

RECOMENDACIONES

Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla.

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar pipetas específicas para cada reactivo. Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida Tener mucho cuidado a la hora de administrar el tóxico al animal En lo posible evitar inhalar los gases que se emana de la solución de cianuro

CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es la toxicidad aguda del Cianuro en animales de experimentacion?

Por vía oral: Gettler y Baine informan que tratan oralmente a perros con 20, 50 y 100 mg/kg cianuro de potasio y mueren a los 155, 21 y 8 minutos después de la ingestión, respectivamente. La DL50 oral en ratas es 8,5 mg/kg para el cianuro de hidrógeno, 6,4 mg/kg para cianuro de sodio, 10 mg/kg para cianuro de potasio, 39 mg/kg para cianuro de calcio.

Por vía respiratoria: Higgins, en 1972, informa una DL50 respiratoria de 323 ppm para ratones y 503 ppm para ratas expuestas a HCN durante 5 minutos. La DL50 estimada para 30 minutos fue 142 ppm en ratas, de 182 ppm para gatos y 410 ppm para cabras. Monos expuestos entre 87 y 196 ppm de HCN durante 30 minutos presentaron pérdida de conciencia, hiperventilación, bradicardia, arritmia, y onda T anormal en el electrocardiograma.

Por otras vías: La DL50 para conejos a los que se instiló solución de cianuro de hidrógeno en la bolsa conjuntival del ojo fue 1,09 mg/kg, 7,87 mg/kg para cianuro de potasio y 5,05 mg/kg para cianuro de sodio. Para todos ellos, los signos de toxicidad y muerte ocurrieron entre 3 y 12 minutos postinstilación.

2. ¿Cuál es el antídoto ante una exposición por cianuro?

a) Con polipnea y ansiedad se indicarán gasometría y electrocardiograma y se evaluarán sus signos constantes vitales; si todos los hallazgos son normales, se administrará diazepam y se procederá al alta. La presencia de acidosis metabólica evidencia exposición al cianuro, por lo cual debe considerarse, si procede, corregir la acidosis con bicarbonato, administrar diazepam.

b) Con polipnea, acidosis metabólica, trastornos de conducta y alteraciones cardiovasculares (taquicardia, hipotensión, choque) se considera un caso grave, que debe ser tratado como sigue:

- Corrección de la acidosis metabólica.- Oxigenación con máscara, con reservorio tipo Monagan, para dar la máxima fracción inspiratoria de oxígeno posible (100 %).

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- Hidroxicobalamina o vitamina B12: 5 g por vía intravenosa (IV) en 15 min.- Si continúa sin respuesta, añadir tiosulfato sódico al 25 %, 50 mL por vía  IV, e incluso puede administrarse luego una dosis de 25 mL a los 30 min.

c) Pacientes en paro cardiorrespiratorio: Se iniciarán las medidas de reanimación, oxigenoterapia al 100 %, corrección de la acidosis láctica con bicarbonato, hidroxicobalamina (primera opción) más EDTA di cobalto (segunda opción) o complemento de la primera a las dosis ya descritas.

3. ¿Cuáles son los usos del cianuro?

En el sector industrial, el cianuro se utiliza para producir papel, textiles y plásticos.

Está presente en las sustancias químicas que se utilizan para revelar fotografías. Las sales de cianuro son utilizadas en la metalurgia para galvanización, limpieza

de metales y la recuperación del oro del resto de material removido. El gas de cianuro se utiliza para exterminar plagas e insectos en barcos y

edificios. Las sustancias químicas encontradas en productos hechos con base en

acetonitrilo, utilizados para remover uñas postizas, pueden producir cianuro si se ingieren (se tragan) accidentalmente.

El cianuro de hidrógeno resulta indispensable en la industra química, pues se utiliza en la elaboración de compuestos como adiponitrilo, para producir nylon; metacrilato de metilo, para obtener plásticos acrílicos; cianuro de sodio, para recuperar oro y plata; triazinas, para herbicidas; metionina, usado como suplemento alimenticio de animales y como quelatante en el tratamiento de agua residual, entre otros usos.

GLOSARIO

1) Afasia: Trastorno causado por lesiones en las partes del cerebro que controlan el lenguaje. Puede dificultar la lectura, la escritura y expresar lo que se desea decir.

2) Catártico: Purgante, purificador.3) Disnea: Enfermedad caracterizada por la falta de aire o dificultad para respirar.

La intensidad de la enfermedad varía de leve a grave, como lo hace el número de episodios de una persona con disnea puede experimentar.

4) Hipoxemia: o los niveles bajos de oxígeno arterial, son una condición en la que hay un nivel inferior de oxígeno en la sangre. Para funcionar correctamente, el cuerpo necesita un nivel constante de oxígeno que circule por la sangre a las células y a los tejidos. Cuando este nivel de oxígeno cae por debajo de una cierta cantidad, se produce la hipoxemia y el paciente puede experimentar dificultad para respirar.

5) Síncope: Pérdida transitoria de conciencia que cursa con recuperación espontánea y sin secuelas que se debe a una hipoperfusión cerebral general y transitoria, es un cuadro clínico muy prevalente.

BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA

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RAMIREZ A. (2010). Toxicidad del cianuro. Investigación bibliográfica de sus efectos en animales y en el hombre. Recuperado de http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-55832010000100011

RODRÍGUEZ A. (2001). Intoxicación por Cianuro. Medisan;5(4):103-107. Recuperado de http://www.bvs.sld.cu/revistas/san/vol5_4_01/san13401.htm

Machala 2 de junio de 2014

FIRMAS DE LOS INTEGRANTES

Tania Bastidas Jessica Ramírez

ANEXOS:

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