Por Donde Empezar!!

Situaciones

• Caza ilegal: caza, pesca• Adulteración de especies o fraude de alimentos• Especies en peligro: el tráfico ilegal• Casos forenses: el abuso, el robo, la evidencia

encontrada en la escena "humano " del delito• Brotes de enfermedades, las zoonosis

(tuberculosis, la EEB, etc)• No hay datos morfológicos disponibles

Los métodos disponibles

• Electroforesis de proteínas– El calor desnaturaliza en los alimentos procesados

• ADN, basados en la PCR– ¿ Específicos o universales especies?

• ¿Qué métodos utilizar?– ¿ En tiempo real PCR, RFLP, secuenciación, otros?

• Hueso, marfil, plumas, materia fecal, sangre– ¿ Muestras difíciles necesitan técnicas diferentes?

¿Qué marcadores se utilizan?

• ¿ Microsatélites? ¿Las diferentes especies?– ¿ Los pros y los contras?

• ADNmt– D-loop, 12S, 16S– Citocromo B, gen COI (citocromo c oxidasa)– ¿ Los pros y los contras?

• ¿ Marcadores universal? ¿ Bases de datos?– ¿ Los pros y los contras?

Cit B vs CO1

• Tobe et al, Genética FSI• Las pruebas fueron primero una adaptación de los

estudios filogenéticos (citb)– Universal de los cebos, la secuencia; pero no hay

directrices en cuanto a lo que la variación porcentual fue; exclusión o inclusión

• Código de barras del ADN (CO1) en 2003, para la identificación y taxonomía– Secuenciación, los cebadores universales, base de datos

disponible en línea, a continuación, comparar con secuencia de referencia

Estudio echo por Tobe • En comparación con 236 diferentes mamíferos, pedidos 29 con

ambos marcadores• Found size of each gene to be variable between species but

invariable w/in same species• Tamaño encontrados de cada gen es variable entre las especies, pero

invariable en una misma especie– Citocromo B (1149 bases) 22,4% (257 pb) se conserva en todas las muestras– CO1 (1557bp) 43.7% (680 bases) se conservaron

• Entre especie usando humanos, vaca, y perro– 82%,97& , 98% homólogo (cit b)– 88%, 97% and 98% en CO1

• Fue concluido que citocromo b trabajó mejor en los fragmentos pequeños (degradados) y en variación dentro de las especies

Uso presunto de ID de ADN mitocondrial

• Citocromo B universal; cebador adelante y atrás que son específicos de especie

• Animales domésticos

• Multiplexado

Un método rápido y simple para la identificación de las especies de carne y productos cárnicos mediante PCR

• Linea 1 – KB Ladder• Linea 2 – Cabra• Linea 3 – Cabra• Linea 4 – Pollo• Linea 5 – Pollo• Linea 6 – Equino• Linea 7 – Equino• Linea 8 – Bovino• Linea 9 – Bovino• Linea 10 – PCR - control

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Ciencia carne, Volumen 51, Número 2, febrero de 1999, páginas 143-148T. Matsunaga, K. Chikuni, R. Tanabe, S. Muroya, K. Shibata, J. y Y. Yamada Shinmura

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