Parte 3
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PRUEBA N° 3 ENZIMAS 1.- un extracto crudo contiene 15000 ug proteína/ml, se utilizó un esnayo de catálisis enzimática con 5 ul del extracto en un volumen final de 500 ul por tubo, que dieron como resultado 5x10-2 umoles/min por tubo en condiciones optimas (condiciones saturantes 10 veces Km) Km=2mM a) Vmax (umoles/ml min) b)Actividad enzimática (U/ml) considerando volumen experimental c)Actividad especifica (U/mg) considerando volumen experimental d)Actividad específica (U/mg) si se utilizaron 15 ul del extracto y se obtuviere la misma Vexperimental. 2.- Una enzima cataliza la conversión de 205 umoles/min de sustrato a producto con una concentración de sustrato de un decimo su Km (Km=5uM) Bajo estas condiciones, cuando se agrega un inhibidor acompetitivo, se produce un 40% de Inhibición con 500 nM del Inhibidor. 3.- Una enzima presenta una velocidad enzimática de 60 umoles/min en presencia de 0,7 mM de sustrato Km=7uM. Cuando se le agregan 3,2 uM de un Inhibidor Mixto a este sistema, se produce un importante cambio en la velocidad. Las constantes son Ki= 2 uM ; Ki´=0,8 uM. 4.- A una enzima que cataliza la conversión de 30 uM/min de sustrato a producto a una concentración de un cuarto su Km ([s] =1/4Km), cuando se le agrega un inhibidor competitivo, produce un 60% de inhibición. Ki=1,5x10-5 ; Km=4x10-3.
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PRUEBA N° 3 ENZIMAS
1.- un extracto crudo contiene 15000 ug proteína/ml, se utilizó un esnayo de catálisis enzimática con 5 ul del extracto en un volumen final de 500 ul por tubo, que dieron como resultado 5x10-2 umoles/min por tubo en condiciones optimas (condiciones saturantes 10 veces Km) Km=2mM
a) Vmax (umoles/ml min) b)Actividad enzimática (U/ml) considerando volumen experimental
c)Actividad especifica (U/mg) considerando volumen experimental
d)Actividad específica (U/mg) si se utilizaron 15 ul del extracto y se obtuviere la misma Vexperimental.
2.- Una enzima cataliza la conversión de 205 umoles/min de sustrato a producto con una concentración de sustrato de un decimo su Km (Km=5uM) Bajo estas condiciones, cuando se agrega un inhibidor acompetitivo, se produce un 40% de Inhibición con 500 nM del Inhibidor.
3.- Una enzima presenta una velocidad enzimática de 60 umoles/min en presencia de 0,7 mM de sustrato Km=7uM. Cuando se le agregan 3,2 uM de un Inhibidor Mixto a este sistema, se produce un importante cambio en la velocidad. Las constantes son Ki= 2 uM ; Ki´=0,8 uM.
4.- A una enzima que cataliza la conversión de 30 uM/min de sustrato a producto a una concentración de un cuarto su Km ([s] =1/4Km), cuando se le agrega un inhibidor competitivo, produce un 60% de inhibición. Ki=1,5x10-5 ; Km=4x10-3.
