Paquio Industrial Terminado 3
96
2 0 1 2 CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO RESUMEN: El presente trabajo fue realizado en el Laboratorio de farmacia industrial de la Facultad de Ciencias farmacéuticas y bioquímicas en la Universidad Autónoma Gabriel René Moreno, el cual consiste en métodos de extracción de una marcha fitoquímica y un análisis de la actividad antibacteriana realizado con el extracto de la corteza del paquío potenciada para problemas de foliculitis , osteomielitis, meningitis, celulitis, abscesos profundos forunculosis e infecciones en la piel La muestra fue provista de la localidad de portachuelo del departamento de Santa Cruz de la Sierra. El extracto medicinal de la corteza del paquio potenciada fue realizado a una marcha fitoquimica para controlar las características de los compuestos quimicos más importantes. También se le realizo un ensayo de la actividad antibacteriana para determinar la inhibición de las bacterias presentes en las cepas. Este trabajo de investigación se basó en el estudio de la corteza de Paquío que se realizó enfocando los conocimientos básicos de la materia. En este tipo de investigación evaluamos la actividad antibacteriana del extracto hidro-alcoholico obtenido a partir de la corteza de Paquío, donde nos dio como resultado positivo a las bacterias S. Aureus, S. Epidermidis, Proteus Mirabilis y E. Coli. 1
-
Upload
hugo-richard-flores-contreras -
Category
Documents
-
view
156 -
download
0
Transcript of Paquio Industrial Terminado 3
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
RESUMEN:
El presente trabajo fue realizado en el Laboratorio de farmacia industrial de la Facultad de Ciencias
farmacéuticas y bioquímicas en la Universidad Autónoma Gabriel René Moreno, el cual consiste en
métodos de extracción de una marcha fitoquímica y un análisis de la actividad antibacteriana realizado con
el extracto de la corteza del paquío potenciada para problemas de foliculitis, osteomielitis, meningitis,
celulitis, abscesos profundos forunculosis e infecciones en la piel
La muestra fue provista de la localidad de portachuelo del departamento de Santa Cruz de la Sierra.
El extracto medicinal de la corteza del paquio potenciada fue realizado a una marcha fitoquimica para
controlar las características de los compuestos quimicos más importantes. También se le realizo un ensayo
de la actividad antibacteriana para determinar la inhibición de las bacterias presentes en las cepas.
Este trabajo de investigación se basó en el estudio de la corteza de Paquío que se realizó enfocando los
conocimientos básicos de la materia.
En este tipo de investigación evaluamos la actividad antibacteriana del extracto hidro-alcoholico obtenido a
partir de la corteza de Paquío, donde nos dio como resultado positivo a las bacterias S. Aureus, S.
Epidermidis, Proteus Mirabilis y E. Coli.
También obteniéndose los resultados de la identificación taxonómica de la planta Hymenaea courbaril-
L(Paquió o Jatobá) y de sus compuestos químicos.
El propósito de este trabajo es obtener la crema antibacteriana para tal efecto utilizamos la corteza del
Paquio.
1
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
PALABRAS CLAVES:
Actividad
Composición química
Extracción
Corteza
Pre-formulación y formulación.
2
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
1. INTRODUCCION
1.1. ANTECEDENTES
Desde tiempos antiguos el hombre ha recurrido a las plantas en busca de curación para sus afecciones,
sabiendo que las especies vegetales poseen propiedades medicinales para aliviar sus males.
El conocimiento empírico acerca de las plantas medicinales y sus efectos curativos se acumuló durante
milenios y posteriormente pasó a ser parte integral de sistemas y tradiciones curativas.
Estos conocimientos, han acumulado determinados individuos, tales como: sacerdotes, hechiceros,
curanderos, etc. Quienes los han transmitido de generación en generación a determinados aprendices y a sus
descendientes.
El uso, desde tiempos antiguos, de las plantas para curar se pone de manifiesto por la existencia de
herbarios desde la época de los sumerios, los asirios, los babilonios o los fenicios. El Papiro de Ebers
(1700 a.C.), con más de 20 m de longitud, encontrado en las ruinas de Luxor, ya recoge, por ejemplo, el uso
medicinal de 700 plantas, como el ajo o la adormidera. En China y el resto de Asia el uso de plantas para
tratar enfermedades se remonta a más de 10.000 años. Sin embargo, fueron griegos y romanos los primeros
en sistematizar en Occidente, a través de sus escritos, el estudio de las plantas medicinales. Así, Dioscórides,
en su obra De Materia Medica, describe más de 600 plantas de uso medicinal.
Los conocimientos sobre las plantas medicinales de América, fueron transmitidos por los aborígenes a
misioneros españoles, quienes los inmortalizaron en diversas obras como las de Gonzalo Fernández de
Oviedo: “de la natural historia de las indias e islas” y “ Tierra firme del Mar Océano”, publicadas en 1535,
en estas obras aparece la descripción de muchas plantas medicinales, entres ella el achiote, guaco, tabaco y
cacao.
La identificación del poder curativo de las plantas ha provenido generalmente de la información
proporcionada por el saber medico tradicional, que ha sido fuente para la investigación fotoquímica. A pesar
de las propiedades medicinales que poseen las plantas no se puede ignorar la presencia de componentes
químicos propios de su naturaleza que pueden generar deterioro en la salud del consumidor.
3
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
En Bolivia la medicina tradicional fue iniciada por diferentes culturas; En el libro del Dr. Gerardo
Fernandez Juarez, (Pág. 229) afirma que la cultura del Qollasuyo era una cultura estrictamente medicinal.
En ella los principales actores pertenecían a tres subgrupos: los Kallawaya, que probablemente eran el grupo
medico mas organizado de América.
Los habitantes del Qollasuyo y los Kullawa o farmacéuticos itinerantes, por lo general mujeres, las
Kullawa se encuentran en todos los rincones de Bolivia.
Actualmente la medicina tradicional en Bolivia está representada, por médicos naturistas afiliados a la
Sociedad de Medicina Tradicional (SOBOMETRA) cuya finalidad principal es garantizar una terapia
apropiada y unificar los conocimientos que día a día van actualizándose, y de esta manera dar mejor servicio
de salud.
Se calcula en unas 260.000 las especies de plantas que se conocen en la actualidad, de las que el 10% se
pueden considerar medicinales, es decir, se encuentran recogidas en los tratados médicos de fitoterapia,
modernos y de épocas pasadas,
4
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
1.2.- PLANTEAMIENTO DE PROBLEMA
1.2.1. Caracterización del problema:
Las infecciones producidas por los agentes bacterianos presentan un cuadro anatómico-clínico bastante
variado, ya que las características principales de estos; es que invaden las vías respiratorias y que producen
catarros, resfrió.
Generalmente las personas que habitan en lugares húmedos y cálidos, son las que están más propensas a las
infecciones ocasionadas por las bacterias. Como es el caso del Departamento de Santa Cruz de la Sierra,
que por las condiciones climáticas que esta posee, es muy frecuentes en nuestro medio encontrar,
infecciones en la piel, aumenta aun mas con la mala higiene del hospedero, facilitando de esta manera la
reproducción de bacteria especialmente en personas adultas.
Las vías de contagio de las bacterias en humanos son varias y entre ellas tenemos: gatos, perros, enfermos,
peines, rasuradoras, duchas públicas, vestidores
Los síntomas más frecuentes de este tipo de infecciones son las siguientes: enrojecimiento, picazón,
descamación y una sensación de ardor, en otros casos forman excoriaciones, ampollas y hasta pústulas.
El tratamiento de estas infecciones implican un costo elevado, tiempo prolongado y la probabilidad del
abandono del tratamiento es casi un hecho, ocasionando de esta manera una resistencia inmunológica por las
bacterias y la permanencia por tiempos prolongados en el hospedero.
Sin embargo estas infecciones también pueden ser tratados mediante la medicina tradicional, siendo más
accesibles a la economía familiar. Como es el caso de la corteza de la Hymenaea courbaril-L (Paquió o
Jatobá).
5
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
1.2.2 Pregunta del problema
Para este estudio de investigación se plantea la siguiente interrogante:
¿Poseen actividad antibacteriana los extractos obtenidos de la corteza de Hymenaea courbaril-L (Paquió o
Jatobá)?
1.3. JUSTIFICACION DEL PROBLEMA
Las personas que poseen conocimiento de las plantas curativas, son por lo general, médicos
naturistas y personas de la tercera edad que viven en los campos, que hacen uso de las plantas medicinales
para aliviar diferentes enfermedades, cuyos conocimientos basados en la experiencia y en la observación los
han acumulado de sus antepasados, que han sido transmitidos de generación en generación. Por otro lado
también conocen otras personas, como es el caso de los vendedores de plantas en los puestos de mercado y
vendedores ambulantes, con escasos conocimientos farmacológicos.
Así mismo existen personas que hacen uso de las plantas curativas mediante la automedicación, que
conocen de las propiedades y usos de algunas plantas medicinales, la mayor parte de esta información, que
los consumidores obtienen acerca de estos productos herbáceos, proviene de revistas, guías, folletos y de las
personas que venden estos productos. Desdichadamente, mucha de esta información favorece, de esta forma
tendenciosa, a estos productos.
Algunos de los datos provienen de reimpresiones de información publicada en el siglo pasado y
carece de validez científica, aunque en la actualidad muchos remedios se han eliminado por la falta de
eficacia, los derivados de algunas plantas medicinales son útiles en la medicina moderna.
6
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
1.4. OBJETIVOS
1.4.1. Objetivo general
Evaluar la actividad antibacteriana de los compuestos químicos en los extractos, hidro-alcoholico obtenidos
de la corteza de Hymenaea courbaril-L (Paquió o Jatobá) y como forma farmacéutica adecuada para la
utilización en la medicina natural.
1.4.2. Objetivo especifico
Identificar la especie y la clasificación taxonómica en el desarrollo de una forma farmaceutica
Obtener el extracto que contenga mayor concentración de metabolitos.
Identificar los grupos de compuestos químicos presentes en los extractos, mediante marchas
fitoquímicas.
Establecer sus propiedades antibacteriana.
Desarrollar las etapas de Pre-formulación y formulación de una forma farmacéutica.
7
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
2. MARCO TEORICO
2.1 CARACTERISTICAS DE LA HYMENAEA COURBARIL-L (PAQUIÓ O JATOBÁ)
2.1.1 Clasificación taxonómica.
La especie Hymenaea courbaril-L(Paquió o Jatobá) tiene la siguiente clasificación botánica:
Paquió
Clasificación científica
Reino: Plantae
División: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Orden: Fabales
Familia: Fabaceae
Subfamilia: Caesalpinioideae
Tribu: Detarieae
Género: Hymenaea
Especie: H. courbaril
Nombre binomial
Hymenaea courbaril
8
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
2.1.2 Descripción morfológica.
Forma. Arbol hermoso, grande y robusto, subcaducifolio, de 10 a 25 m (hasta 40 m) de altura, con un
diámetro a la altura del pecho de hasta 1.5 m.
Copa / Hojas. Copa redondeada muy densa, ampliamente extendida, con follaje denso verde claro y
brillante. Hojas alternas, compuestas por un par de folíolos opuestos, de 5 a 10 cm de largo incluyendo el
pecíolo, con algunos puntos aceitosos.
Tronco / Ramas. Tronco derecho, a veces cubierto en la base por una excreción gomosa ambarina; algunas
veces desarrolla contrafuertes. Ramas gruesas ascendentes.
Corteza. Externa ligeramente escamosa a lisa, pardo grisácea. Interna rosada cambiando a ligeramente
parda, fibrosa, de sabor astringente. Grosor total: 10 a 20 mm.
Flor(es). Flores grandes blanco verdosas, extendidas, perfumadas, de 3.5 cm de diámetro. Se presentan en
cimas densas terminales pubescentes de 10 a 15 cm de largo; cáliz verde crema, tubular carnoso en forma de
campana y 5 pétalos blancos con puntos morenos, erguidos y extendidos, que apenas sobresalen del cáliz.
Fruto(s). Vaina indehiscente, ligeramente aplanada, de 10 a 17.5 cm de largo por 4 a 6.5 cm de ancho,
sumamente leñosa, verdosa a moreno oscura, con pulpa harinosa, dulce y comestible. Cuando secas exudan
una resina pegajosa y fragante. El fruto contiene 3 ó 4 semillas y permanece largo tiempo en el árbol (7 a 10
meses).
Semilla(s). Semillas oblongas achatadas, pardas y duras, de 1.5 a 2.5 cm de diámetro, cubiertas por una
pulpa gruesa, dulce y olorosa de color amarilla.
Raíz. Sistema radical extendido.
Sexualidad. Hermafrodita.
Número cromosómico: 2n= 24.
Importancia de los Productos Naturales
En términos generales se refiere a los productos obtenidos directamente de la naturaleza. Para el químico el
termino “producto natural “es sinónimo de metabolito secundario.
9
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Los productos obtenidos directamente de la naturaleza, sus análogos y derivados representan en la
actualidad más del 50% de los fármacos empleados en terapéutica.
Durante mas de 70 años los químicos han utilizado las sustancias naturales activas como modelos de
laboratorio , son ejemplos clásicos los anestésicos locales derivados de la cocaína ,los anestésicos de la
morfina , las cumarinas como precursores de antitrombicos , y es probable que sin los modelos de la
naturaleza el hombre no hubiera sido capaz de encontrar la mayoría de sustancias activas .muchos de estos
principios activos , a pasar del desarrollo d la química farmacéutica , se siguen obteniendo de las plantas , ya
sea porque son difíciles de sintetizar , o bien porque el precio de la síntesis es tan elevado que se recurre a su
obtención a partir del vegetal , especialmente cuando este es de calidad conveniente y se dispone de un
buen método de extracción .
2.1.3 Distribución Geográfica.
Crecen en los bosques húmedos de llanura. Bosques semideciduos en las sabanas húmedas, en los
departamentos de Beni, La Paz ,Santa Cruz.Es considerada como una especie principal en la región del bajo
Paraguá,Guarayos Pie de monte Amazonico y la Amazonia,es clasificada como especie valiosa.
Se presenta en la vertiente del Golfo en el sur de Veracruz, Tabasco, norte y depresión central de Chiapas y
Campeche. Es más abundante en la vertiente del Pacífico, desde Nayarit hasta Chiapas. Altitud: 0 a 900 m.
2.1.4 Composición química.
La planta Hymenaea courbaril-L(Paquió o Jatobá) contiene:
--taninos condensados
--alcaloides
--azucares reductores
--diterpeno
2.1.4.1 ALCALOIDES.
El termino “alcaloide” fue propuesto por W. Meissner en 19819, siendo aplicado a compuestos
básicos de origen natural que presentan nitrógeno en su estructura. A pesar de lo clásico del término,
resulta difícil definir los alcaloides puestos que a diferencia de los compuestos pertenecientes a otras
10
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
categorías fármacos- químicas, no presentan homogeneidad química, bioquímica o de efectos
farmacológicos.
Conceptuar los alcaloides de una manera clara y concisa e difícil, se puede afirmar que si existen
unas características generales. Los alcaloides forman un grupo heterogéneo de principios activos de
origen natural, que se encuentran en drogas vegetales.
Estructura química y clasificación.
El nitrógeno de los alcaloides pertenece a un grupo amino que es el que los confiere sus propiedades
alcalinas, por lo que forman sales al combinarse con ácidos, propiedad que es más o menos marcado
dependiendo del tipo de compuesto. La función amina puede estar acompañada de otros grupos
funcionales tales como alcoholes, esteres, fenoles, etc.
Los alcaloides han sido clasificados atendiendo a distintos criterios: 1. Origen botánico, según
familia y género al que pertenecen las especies productoras (alcaloides de la coca, alcaloides del
grano, alcaloides de la
quina.). 2. De acuerdo a sus propiedades farmacológicas (alcaloides midriáticos de las solanáceas);
3. Según la naturaleza de las estructuras que derivan (alcaloides quinoleínicos, alcaloides tropánicos,
etc.) si bien este ultimo sistema clasificatorio ha sido ejemplo de amplio uso hasta épocas recientes,
en la actualidad se tiende a considerar como criterio de elección el origen biosintetico de los
alcaloides. Se ha procedido por tanto, a agrupar a los alcaloides en las siguientes clases:
a) Alcaloides derivados de al ornitina y de la lisina
- Tropánicos
- Pirrilicidínicos.
- Piperidínicos.
- Quimilicidínicos.
b) Alcaloides derivados de la fenilalanina y de la tirosina-
- Feniletilamínicos.
- Isoquinoleínicos.
c) Alcaloides derivado del troptófano.
- Indólicos.
11
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
- Quinoleínicos.
d) Alcaloides de origen diverso.
- Derivados de la histidina: imidazólicos.
- Derivados del metabolismo terpénicos
e) Otros alcaloides. Bases xánticas.
Distribución.
La mayoría de los alcaloides son elaborados por las dicotiledóneas y, en particular por las especies
pertenecientes a las siguientes familias: Rutáceas,
Loganiáceas, Apocináceas, Solanáceas, Rubiáceas, Magnoliáceas, Ranunculáceas, Menispermáceas,
Anonáceas y Papaveráceas. Se presenta en menor incidencia en la monocotiledóneas, donde se destacan por
su contenido alcaloideo, en distintos géneros pertenecientes a liliáceas y amarilidáceas.
Identificación.
Existen dos grandes grupos que se desarrollan a continuación.
a) Reactivos de precipitación:
Reactivos yodados.
Precipitan a los alcaloides de las soluciones acuosos acidas. Bajo la forma de polo-iodados
complejos: de Bouchardat o de Warner, de Mayer – Valser, Dragendorff, con estas soluciones se
obtienen soluciones amorfas, coloreadas, a veces solubles en exceso de reactivo.
- Reactivos formando por poliácidos minerales complejos.
Betrand. Scheibler.Sonnenschein, precipitan a los alcaloides en medio de acido o neutro bajo la
forma de compuestos amorfos o cristalinos
Las cuales se descomponen en medio alcalino regenerándose los alcaloides al estado de base.
- Reactivos orgánicos nitrados.
Acido pícrico, estífnico y otros derivados de núcleos bencénicos, naftalénicos y antracénicos, al
igual que los anteriores, forman precipitados cristalinos en estado acido a neutro, y se
descomponen por los álcalis.
b) Reactivos de coloración.
12
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
- Se utilizan generalmente para identificar y dosificar los alcaloides. Se emplean ácidos minerales
concentrados, especialmente el sulfúrico, a veces adicionado de molibdato de amónico (reactivo
Frohde) y otros.
-
Propiedades farmacológicas.
Los alcaloides, que constituyen las diferentes drogas de aplicaciones farmacológicas, estos compuestos son
particularmente interesante por la gran variedad de efectos que presentan, así tenemos:
a) Sistema nervioso central: estimulantes como al cafeína y la estricticina; depresores como la morfina
o, incluso, alucinógenos como las psilocina o la harmalina, alcaloides indolicos relacionados con la
estructura de la serotonina.
b) Sistema nervioso vegetativo: estimulantes del simpático como a efedrina o bloqueantes como la
yohimbina o algunos alcaloides del cornezuelo de centeno, estimulantes del parasimpático como la
policarpina o la eserina y, por ultimo bloqueantes como la atropina.
c) Igualmente se pondrían seguir mencionando su presencia en otros grupos farmacológicos que irían
desde antifibrilantes, como la quinidina, espasmolíticos como la papaverina o bloqueantes
neuromusculares como la d- tobocurarina a etiotropos como la quinina, clásicamente empleado como
antimalárico.
Por último hay que señalar la importancia de los alcaloides en el tratamiento del cáncer y como
inmunodepresores. Algunos de estos como la vincristina y vinblastina , alcaloides aislados de
Catharanthus roseus , son muy utilizados actualmente como antineoplásicos .
2.1.4.2 TANINOS
Definición
El término “tanino” fue introducido por Según en 1796 para designar a ciertas sustancias presentes en
extractos vegetales, capaces de combinarse con las proteínas de la piel, evitando su putrefacción y
convirtiéndolas en cuero. Según Bate-Smith y Swain en 1962 definió a los taninos como compuestos
fenolicos hidrosolubles de mas molecular comprendida entre 500 y3000.
Estructura química y clasificación
13
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Se distinguen dos grupos de taninos diferentes por su estructura y por su origen biosintetico: taninos
hidrosolubles y taninos condensados.
Los taninos hidrolizables son poliéster de un azúcar, generalmente glucosa o de un poliol y un número
variable de ácidos fenolicos. Son hidrolizables por alca lisis, ácidos y enzimas .Según la naturaleza del acido
unido a la glucosa o al poliol, se han distinguido clásicamente dos tipos de taninos hidrolizables. Taninos
gálicos, cuando el acido fenólico es el acido gálico y los impropiamente llamados taninos elagicos, cuando
el acido fenolico es el hexahidroxidifenilo.
Los taninos condensados son oligomeros flavanicos .Están constituidos por unidades de flavan -3-oles o
“cate quinas” unidos entre si por enlaces C-C , se diferencian de los taninos hidrolizables en que sus
moléculas son mas resistentes a la ruptura ,carecen de osas y sus estructuras están relacionas con los
flavonoides.
Distribución
Se encuentran distribuidos en vegetales superiores, encontrándose en frutos y otros productos vegetales. Se
los encuentra presentes en ciertas especies: Agallas de roble, Quercus rober, Hamamelis, Ratania, etc.
Identificación
Para la detección de los taninos en drogas se puede realizar una serie de ensayos comunes a todos los
taninos y otros que permiten distinguir entre hidrolizables y condensados.
Todos los taninos precipitan con solución de gelatina o con fenazona.
Los taninos hidrolizables y condensados se pueden diferencias según el color o precipitación con sales
férricas; los taninos hidrolizables dan coloraciones y precipitados azules-negruzcos y los taninos
condensados dan precipitado pardo-verdosos.
Los taninos gálicos dan coloración rosa con yodato potásico y los taninos elagicos con acido nitroso en
medio acético, dan coloración que vira a purpura y finalmente a azul.
Propiedades farmacológicas
Sus propiedades más reconocida y avaladas por la experimentación son debida a su capacidad de formar
complejos con varias sustancias; pero además su actividad antioxidante, basada en la captura de radicales
libre, contribuye a sus acciones farmacológicas.
14
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Los taninos se han utilizado desde tiempos antiguos por sus propiedades astringentes en uso interno y
externo. Esta propiedad está ligada como se ha comentado, a su capacidad de unirse a las proteínas de la piel
y de la mucosa, provocando una especie de curtido que hace que las capas superficiales sean menos
permeables y protejan a las capas subyacentes, de ahí su empleo en uso externo como cicatrizante y en el
tratamiento de quemaduras.
En uso interno son anti diarreicos y además disminuir el peristaltismo, tienen acción terapéutica; esta acción
se ejerce también en uso externo, por lo que son útiles en tratamientos de dermatosis. Además son
vasoconstrictores venosos por lo que se emplea en el tratamiento de varices y hemorroides.
Al precipitar las proteínas, los taninos originan un efecto antimicrobiano y anti fúngico. Además los taninos
son hemostáticos y como precipitan a los alcaloides, pueden servir de antídoto en caso de intoxicación.
2.1.4.3 Azucares reductores
Los azúcares reductores son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo (grupo funcional) intacto, y
que a través del mismo pueden reaccionar con otras moléculas.
Provocan la alteración de las proteínas mediante la reacción de glucosilación no enzimática también
denominada reacción de Maillard o glicación.
Esta reacción se produce en varias etapas: las iniciales son reversibles y se completan en tiempos
relativamente cortos, mientras que las posteriores transcurren más lentamente y son irreversibles.
La glucosa es el azúcar reductor más abundante en el organismoSin embargo, cualquier azúcar que posea un
grupo carbonilo libre puede reaccionar con los grupos amino primarios de las proteínas para formar bases de
Schiff.De hecho, los azúcares fosfato, que son azúcares reductores de gran importancia en el interior celular,
poseen mayor capacidad glucosilante que la glucosa dada su mayor proporción de forma carbonílica
(abierta)
2.1.4.4 Diterpeno
Los diterpenos son los terpenos de 20 carbonos. Entre ellos se incluye el fitol, que es el lado hidrofóbico de
la clorofila, las hormonas giberelinas, los ácidos de las resinas de las coníferas y las especies de legumbres,
las fitoalexinas, y una serie de metabolitos farmacológicamente importantes, incluyendo el taxol, un agente
anticáncer enccontrado en muy bajas concentraciones (0,01% de peso seco) un compuesto usado para tratar
el glaucoma.
15
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
2.1.5 Usos
a) Medicinales:
Medicinal [exudado (resina)]. El pericarpio del fruto contiene resina con propiedades purgantes. El
cocimiento de la corteza se usa para controlar parásitos intestinales, indigestión y curar infecciones
urinarias. Un linimento hecho con la corteza y resina en polvo se usa para tratar úlceras o salpullido.
La resina se quema y se aspira como remedio para aliviar el asma y catarro. Se ha reportado su uso
para combatir el reumatismo, estreñimiento, enfermedades venéreas.
b) Otros usos populares:
Aromatizante [exudado (látex)]. El producto del cuapinole es la resina que exuda del tronco y
ramas. Se usa como incienso y se le llama, incienso o goma de tierra, incienso de petapa, resina de
Cuapinole, Goma Animé de México, Nere, Copal de Brasil o Copal de Pará, Succino o ámbar del
país. A veces se ha encontrado hasta un barril de goma alrededor de un árbol. Es seca, blanquecina,
transparente, brillante, de sabor parecido a la trementina y de olor agradable cuando se quema.
Artesanal [madera]. Fabricación de artesanías, trabajos de tornería e instrumentos musicales
(pianos).En El Salvador, las semillas son empleadas para hacer joyería y otros pequeños ornamentos.
La semilla se parte en dos para pintar en la superficie interna.
Combustible [madera]. Leña y carbón.
Construcción [madera]. Construcción rural y naval. Madera dura de larga vida.
Forrajero [fruto (vaina)]. Se colecta la vaina y se muele para concentrados. Las hojas de esta
especie son poco apetecidas por el ganado y cuando caducan son coriáceas y no aprovechables.
Implementos de trabajo [madera]. Implementos agrícolas y mangos para herramientas.
Industrializable [exudado (resina)]. De la corteza y especialmente de las raíces se obtiene resina
para la fabricación de buenos barnices. La resina (goma amarilla-pálida o rojiza) tiene gran demanda
en la industria de materiales para artistas y artesanos y se usa en el acabado de muebles y en la
elaboración de barnices, tintas y linóleos. Contiene diterpeno ácido Labd-13-en-8-ol-15.
Maderable [madera]. Madera muy sólida o dura (gravedad específica 0.71 a 0.82), moderadamente
difícil para trabajar pero de hermoso pulimento. Muy
apreciada en la ebanistería. Se usa en carpintería, embarcaciones, aros de ruedas de carretas, muebles
de lujo, postes, durmientes, columnas, partes de
16
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
máquinas (flexores de vapor, dientes de engranes) y telares, parquet, duela, entarimados, artículos
deportivos, decoración de interiores. Comparable con
la caoba. Los indios hacían canoas de la corteza gruesa, dura y lisa, sacándola de un árbol grande en
una sola pieza, cociendo los extremos e
impermeabilizando las hendiduras con goma o resina.
2.1.6. METABOLISMO VEGETAL.
Es el conjunto de fenómenos fisico-quimicos que se producen en la planta, los mismos mediante procesos
anabólicos se llegan a sintetizar los metabolitos primeros y de estos, por reacciones biosinteticas los
metabolitos secundarios, otra parte, y de manera catabólica la materia es degradada o simplificada.
2.1.6.1. Metabolito primario.
Los metabolito primarios se encuentran en todas las plantas y desempeñan funciones vitales para el
desarrollo vegetal, como la obtención de energía, la morfiogenesis o la producción. Aquí se incluyen las
bases nitrogenadas, así como sus respectivos productos derivados finales. La mayoría carece de interés
como fármacos, si bien existen excepciones( algunos aceites, enzimas, polisacáridos, etc.)
2.1.6.2. Metabolito secundario.
A los metabolitos secundarios se les considera no esenciales para la vida, aunque pueden ser fundamentales
para que puedan operar una determinada acción biológica, sin duda alguna, son compuestos de mayor
interés farmacológico, que constituyen los llamados “principios activos de la droga”.
Existe una gran dispersión de estructuras cuya presencia a lo largo de los taxones botánicos varía
enormemente, así existen familias ricas especialmente en taninos (Rosaceae), otras con abundancia en
lactonas sesquiterpenicas (compositae) y otras muchas cuya singularidad química es manifiesta. así mismo
existen grandes diferencias entre os metabolitos primarios y secundarios
17
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
2.1.7. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA PRODUCCION DE METABOLITOS SECUNDARIOS.
Los diferentes factores que intervienen, de una forma u otra en la naturaleza y la concentración de
metabolitos secundarios de interés farmacológica, pueden ser los siguientes.
2.1.7.1. Factores climáticos.-
El clima condiciona en gran medida el establecimiento de un determinado tipo de cultivo e una región, ya
que no solo afecta al crecimiento y desarrollo de las plantas, sino que incide notablemente en la biosíntesis
de sus principios activos, se ha comprobado que la misma planta, cuando son cultivadas en zonas de
diferentes condiciones climáticas, presenta distintas composiciones químicas, tanto en calidad como en
cantidad, hoy en dia es posible estudiar la influencia que tiene los diversos factores climáticos sobre el
18
METABOLITO PRIMARIO METABOLITO SECUNDARIO
1.- producto del metabolismo general.
2.- ampliamente distribuido en plantas y
microorganismos.
3.- son imprescindibles para el desarrollo de
la planta.
4.- existen en cantidades abundantes.
5.- se han descrito como “compuesto del
bioquímico”.
6.- la mayoría carece de interés
farmacológico, con algunas excepciones
(aceites, enzimas, polisacáridos,etc.)
7.- se utilizan como sustancia base en
preparados medicamentosos.
8.- el organismo productor lo utiliza como
fuente de energía. Entre ellos tenemos:
carbohidratos, proteínas , acidos
nucleicos,grasa,etc.
1.- producto del metabolismo especial.
2.- tienen distribución restringida en ciertas
plantas y microorganismo.
3.- no son imprescindibles para e desarrollo
de la planta.
4.- existen en cantidades pequeñas.
5.- se han descrito como “compuestos del
químico”
6.- son compuestos de mayor interés
farmacológico, presentan actividad
biológica.
7.- se utilizan como principios activos en
preparaciones medicamentosas.
8.- el organismo productor lo utiliza como
mediador en interacciones ecológicas.
Entre ellos tenemos: cumarinas,taninos,
saponinas, alcaloides, terpenoides,
quinonas,etc.
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
desarrollo de una planta. Los factores climáticos que afectan al rendimiento en principio activo de las
plantas medicinales son: temperatura, humedad, radiación solar y régimen de vientos.
a) Temperatura.
Índice notablemente en el desarrollo y metabolismos de las plantas, su influencia ha de considerarse no
solo en cuanto a los valores medios, sino también en las fluctuaciones a lo largo del día y durante el año,
las especies vegetales se adaptan a las variaciones de temperatura de su entorno natural; el problema se
plantes a la hora de introducir una especie nueva en una zona de climatología distintas, ya que pueden
carecer de loa sistemas de defensa necesario para hacer frente a temperaturas extremas.
b) Humedad.
El grado de humedad del suelo y de la atmosfera incide directamente en el buen desarrollo de las
plantas. El exceso o falta de agua en el suelo pueden ser factores limitantes para el crecimiento de
determinadas plantas,. Esta variable también está directamente relacionado con el régimen d lluvias de
una determinada zona, tano a lo que respecta a la cantidad como a su distribución a lo largo del año y de
al capacidad que tenga el suelo para retener el agua. Una pluviosidad excesiva puede dar lugar a una
pérdida de principios activos hidrosolubles de las plantas por disolución (heterosidos) o a una inhibición
del desarrollo de los órganos que son imprescindibles para la producción de los metabolitos activos.
c) Radiación solar.
La variable luz ha de entenderse tanto desde el punto de vista de la cantidad, es decir, del número de
horas de exposición a la luz solar a lo largo del día, como de la cantidad(intensidad y tipo de
radiación), cada planta necesita una determinada cantidad de luz para alcanzar un buen desarrollo y
para poder realizar sus funciones metabolicas. Esta comprobado que este factor influye notablemente
en la biosíntesis de los principios activo de las plantas medicinales. Sin embargo la luz no solo
influye en el porcentaje de principios activos biosinteticos sino también en la naturaleza química de
los mismos. Por ello en el planteamiento inicial de un cultivo se deberá tener en cuenta el grado de
insoliacios de la zona elegida, que deberá ser aquel que sea mas conveniente para la producción de
un determinado principio activo.
d) Régimen de vientos .
Esta variable se debe contemplar desde su acción directa o efecto mecánico que ejerce sobre la
vegetación(protección de los cultivos), como desde su acción indirecta al modificar otros factores del
clima(temperatura).
19
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
2.1.7.2. Factores edáficos.
Las característica físicas y químicas de los suelos ,influyen notablemente en el desarrollo de las plantas.
a) Características físicas. El suelo está formado por un agregado de partículas de tamaño deferente
(textura) y por la asociación de estas partículas elementales en agregado (estructura). La textura y la
estructura unida a la composición química del suelo confieren a este otros caracteres como
son :porosidad y grado de aireación, capacidad de retención de agua y temperatura. Estas
característica pueden afectar positivamente o negativamente a la producción o negativamente a la
producción de ciertos matabolitos.
b) Característica química.
c) A la composición química del suelo puede afectar no solo al desarrollo, sino también puede limitar
su crecimiento. El pH del suelo que, dependen de la composición del mismo, es una importante
variable a tener en cuenta. Existen plantas preferentemente acido filas (ver anexo I) y las plantas que
requieren suelos alcalinos para su desarrollo. También es importante la riqueza en materia orgánica
y el contenido en nutrientes minerales, características que pueden ser modificadas en los cultivos
mediante la adición de distintos tipos de abono, se ha comprobado científicamente al incorporación
al suelo de abonos nitrogenados puede contribuye a un incremente tanto da la masa vegetal, como
de algunos de sus metabolitos secundarios, como es el caso de alcaloides.
2.1.7.3. Factores topográficos.
Los factores topográficos no pueden contemplarse de forma aislada, sino teniendo en cuenta su
influencia en el resto de las variables climaticas.el relieve ejerce en cuanto su influencia marcada
sobre las condiciones térmicas originando climas locales especiales. La temperatura decrece
regularmente con la altitud a razón de 0.55ºC por cada 1020 metros de eleva<cio. Este gradiente
latitudinal de temperatura es la causa principal de que existan distinto pisos de vegetación en las
laderas de montaña. La topografía puede también condicionar el grado de radiación solar que incide
sobre la vegetación. En las montañas, a las radiaciones que llegan a la ladera sur es de 1.6 a 1.3 veces
superior a la que incide sobre la exposición norte, lo que determina las grandes diferencia de
vegetación que se dan entre ambas exposiciones.
20
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
2.1.8. RUTAS METABOLICAS.
Todos los constituyentes químicos de las plantas, son derivados de los productos primarios de la
fotosíntesis a partir de esto y a través de una serie de reacciones biosinteticas, que son comunes en
todos los seres vivos, se forma los metabolitos secundarios. Las principales rutas biosinteitcas de los
metabolitos secundarios son las siguientes.
2.1.8.1.Derivados de la vía del acido shiquimico.
La vía del acido shiquimico comienza con la condensación aldólica de PEP y E4P y da origen a
compuestos que presentan en común un anillo aromático. Entre ellos tenemos: acido cinámico,
cumarinas y sus derivados, lignanos, aminoácidos aromáticos (fenilalanina y tirosina) y acido
antranílico.
2.1.8.2. Derivados de la vía del acetato.
La unidad básica en esta vía es el A-coA formado por degradación oxidativa de los azucares. La
condensación de unidades de acetato, por reducción se obtienen ácidos grasos, y sin reducción, da
lugar diverso compuestos aromáticos: acido orselinico, fenilpropanona y antrona.
2.1.8.3. Derivados mistos del acido shiquimico y acetato.
La combinación de derivados del shiquimato y del acetato da origen a diversos grupos de
compuestos fenolicos : flavonoides taninos catequinas, xantonas, etc., de los cuales los flavonoides
son las más importantes.
2.1.8.4. Derivados del acido mevalonico.
La ruta biogenética parte del acetato y sigue a través del mevalonato y sus productos de
condensación (ver anexo I) para dar lugar a terpenos y esteroides.
Pero la unidad biosintetica elemental de los compuesto resultante no es el acido mevalónico, sino su
derivado de este, isopentenil pirofosfato (IPP), también llamado isopreno activo. La vía se inicia por
condensación de dos moléculas de isopreno, obteniéndose los siguientes grupos: monoterpeos,
diterpenos,triterpenos tetraciclicas, eteroides,heterósidos cardiotónicos, triterpenos y saponinas.
21
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
2.1.8.5. Biosíntesis de compuestos nitrogenados.
La biosíntesis de os alcaloides se basa en la reacción de lao aminoácidos con otros metabolitos como
acetato o mevalonato, o incluso la adición de amoniaco o alquilamina a un esqueleto terpénico.
Posteriores reacciones secundarias dan lugar a gran variedad de grupos estructurales nitrogenados
existentes, entre ellos tenemos : alcaloides tropánicos, alcaloides isoquinoleiínicos y alcaloides
indolterpénicos.
2.2. BACTERIAS
Las bacterias son microorganismos unicelulares que presentan un tamaño de algunos micrómetros de largo
(entre 0,5 y 5 μm, por lo general) y diversas formas incluyendo esferas, barras y hélices. Las bacterias son
procariotas y, por lo tanto, a diferencia de las células eucariotas (de animales, plantas, etc.), no tienen núcleo
ni orgánulos internos. Generalmente poseen una pared celular compuesta de peptidoglicano. Muchas
bacterias disponen de flagelos o de otros sistemas de desplazamiento y son móviles.
2.2.1 Morfología bacteriana
Las bacterias presentan una amplia variedad de tamaños y formas. La mayoría presentan un tamaño diez
veces menor que el de las células eucariotas, es decir, entre 0,5 y 5 μm. La forma de las bacterias es muy
variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos tipos morfológicos, lo que se conoce como
pleomorfismo. De todas formas, podemos distinguir tres tipos fundamentales de bacterias:
22
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Coco (del griego kókkos, grano): de forma esférica.
o Diplococo: cocos en grupos de dos.
o Tetracoco: cocos en grupos de cuatro.
o Estreptococo: cocos en cadenas.
o Estafilococo: cocos en agrupaciones irregulares o en racimo.
Bacilo (del latín baculus, varilla): en forma de bastoncillo.
Formas helicoidales:
o Vibrio : ligeramente curvados y en forma de coma, judía o cacahuete.
o Espirilo : en forma helicoidal rígida o en forma de tirabuzón.
o Espiroqueta : en forma de tirabuzón (helicoidal flexible).
o
2.2.1.1 STAPHYLOCOCCUS AUREUS
Staphylococcus aureus (pronunciación: /ˌstafiloˈkokus ˈawrews/), conocido como estafilococo áureo o
comúnmente estafilococo dorado, es una bacteria anaerobia facultativa, grampositiva, productora
decoagulasa, catalasa, inmovil y no esporulada que se encuentra ampliamente distribuida por todo el mundo,
estimándose que una de cada tres personas se hallan colonizadas, que no infectadas.
Puede producir una amplia gama de enfermedades, que van desde infecciones cutáneas y de las mucosas
relativamente benignas, tales como foliculitis, forunculosis o conjuntivitis, hasta enfermedades de riesgo
vital, como celulitis, abscesos profundos, osteomielitis, meningitis, sepsis, endocarditis o neumonía.
Además, también puede afectar al aparato gastrointestinal, ya sea por presencia física de Staphylococcus
aureus o por la ingesta de la enterotoxina estafilocócica secretada por la bacteria.
23
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
2.2.1.2 ESCHERICHIA COLI
La Escherichia coli (también conocida por la abreviación de su nombre, E. coli) es quizás el organismo
procarionte más estudiado por el ser humano, se trata de una bacteria que se encuentra en el tracto
gastrointestinal, y por ende en las aguas negras, además de producir las vitaminas B y K. Es un bacilo que
reacciona
Vista en microscopio electrónico
negativamente a la tinción de Gram (-) es anaeróbico facultativo, móvil por flagelos perítricos (que rodean
su cuerpo), no forma esporas, es capaz de fermentar la glucosa y la lactosa
2.2.1.3 STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS
Staphylococcus epidermidis es una especie bacteriana del género Staphylococcus, consistente en
cocosGram-positivos arreglados en grupos. Es catalasa-positiva, termonucleasa-negativo aunque a veces
varia,coagulasa-negativa; y se presenta frecuentemente en la piel de humanos y de animales y en membranas
mucosas. Es sensible al antibiótico novobiocina; un concepto que lo distingue de otros organismos comunes
de coagulasa negativa como S. saprophyticus.
24
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Enfermedades:
Infecciones de cateter. Infección de implante de prótesis.
Infección de herida.
2.2.1.4 STAPHYLOCOCCUS SAPROPHYTICUS
Es un coco gram positivo, coagulasa -, anaerobio facultativo, no formador de cápsula, no formador
de espora e inmóvil.
Posee la enzima ureasa y es capaz de adherirse a las células epiteliales del tracto urogenital
Su hábitat normal no se conoce con exactitud.
Es causa frecuente de infecciones del tracto urinario en mujeres jóvenes y uretritis en varones. Durante
el coitopuede haber un arrastre de bacterias de la vagina al tejido urinario; por lo que después del coito es
muy recomendable orinar.
Diagnóstico
Clínico: piel Laboratorio: muestras y comprobación.
La detección en orina no es suficiente para el diagnóstico.
25
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
2.2.1.5 PROTEUS MIRABILIS
Es una bacteria Gram-negativa, facultativamente anaeróbico. Muestra aglutinación,motilidad, y
actividad ureasa. P. mirabilis causa el 90% de todas las infecciones por 'Proteus'. Viene de la Tribu Proteae.
Esta bacteria de colonias redondeadas tiene la habilidad de producir grandes niveles de ureasa. La ureasa
hidroliza urea a amoníaco, (NH3) y eso hace a la orina más alcalina. Y al subir la alcalinidad puede liderar
la formación de cristales de estruvita, carbonato de calcio, y/o apatita. Esta bacteria puede encontrarse en
cálculos, y esas bacterias escondidas allí, pueden reiniciar una infección post tratamientos antibióticos. Al
desarrollarse los cálculos, después de un tiempo pueden seguir creciendo más y causar obstrucción dando
fallas renales.
Proteus también puede producir infecciones de heridas, septicemia y neumonías, sobre todo en pacientes
hospitalizados.
2.3. INVESTIGACION FITOQUIMICA
La investigación fitoquímica, presenta las siguientes etapas de estudio:
2.3.1. Recolección
26
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
La recolección es una parte importante en la producción de plantas medicinales, ya que ello depende en gran
medida la calidad del producto obtenido. Es necesario determinar previamente el momento y la forma más
conveniente para realizarla. Aunque en ocasiones se deba considerar otros factores, como la edad de la
planta y la época de colecta.
2.3.2 Identificación botánica
Es importante realizar una determinación taxonómica para identificar el nivel de familia y especia, ya que
esto nos permite confirmar la identidad de la planta recolectada.
2.3.3. Desecación
En los vegetales existen agua de vegetación y de constitución, la primera aparece en proporción variable
dependiendo de la humedad o la sequedad del ambiente y se pierde con facilidad; y la segunda forma parte
de los tejidos, manteniendo la estructura vegetal, es muy difícil de eliminar y se encuentra en proporciones
constantes de cada especie vegetal.
Los procesos de secado o desecación se entiende por la separación del agua , sin alterar sus principios
activos de la droga , como medio de desecación actúa el aire que puede extraer agua hasta que el se sature.
Las principales formas de secado se detallan a continuación:
2.3.3.1 Desecación natural.-
a) Secado al aire libre y al sol:
Este procedimiento consiste en exponer el material vegetal poco frágil al aire libre y al sol,
extendiendo en capas delgadas sobre lienzos o bandejas (no directamente sobre el suelo), para
facilitar la aireación y la pérdida de humedad y evitar el desarrollo de mohos. Este método más
económico, y
tiene por inconveniente el proceso lento que puede durar varios días o semanas según la humedad del
ambiente.
b) Secado a la sombra o bajo abrigo:
27
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Se efectúa en el interior de algunas edificaciones con ventilación. Es el método más usado a escala
artesanal. Se colocan las plantas sobre bandejas metálicas, papeles, telas o arpilleras, en capas
delgadas, o bien se cuelgan en forma de ramillete y protegidos del sol.
2.3.3.2 Secado Artificial:
La desecación mediante el uso de calor artificial es el más empleado en países de clima húmedo y siempre que se quiera desecar un volumen importante de las plantas.
El aire caliente y seco se hace circular a través del material fresco y convenientemente preparado. Tanto la temperatura (20-60ºC) y la presión debe ser controlada en este tipo de secadores dependiendo del órgano que se quiera desecar.
2.3.3.3. Otros tipos de Secado
a) Estufas o armarios de desecación
Se trata de armarios o cabinas , generalmente metálicos , provistos de varias bandejas convenientes
separadas, de rejilla, para que circule ben el aire, sobre las que se disponen el vegetal a secar. Pueden
se sencillas o incluso artesanales. Estas cabinas constan de una fuente calorífica que calienta el aire
de entrada y de un ventilador para extraer el aire húmedo.
b) Secaderos de tolva
Consta en un recipiente dotado de un fondo falso o de tela metálica. Lleva a un calentador por el que
pasa el aire impulsado por un ventilador y este aire caliente atraviesa el producto a desecar.
2.13.3. Extracción
El proceso de extracción consiste en el tratamiento de la muestra vegetal con un disolvente
apropiado, que en caso ideal disuelva solo el constituyente químico deseado, sin disolver las demás
sustancias
El tipo de extracción y el medio extractivo que se utilice depende sobre todo de la solubilidad de las
sustancias a extraer de su estabilidad.16
Existen diferentes métodos de extracción las mismas se detallan a continuación:
c) Maceración
Consiste en mejorar la muestra vegetal, debidamente fragmentada en un recipiente hasta que penetre
en la primera estructura celular ablandando y disolviendo las porciones solubles. Se puede utilizar
cualquier recipiente con tapa que no reaccione con el disolvente y tapado se deja en reposo por un
28
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
determinado periodo ,23 el conjunto se conserva protegido contra luz solar directa (para evitar en lo
posible las reacciones o las alteraciones catalizadas por la luz) y se realiza agitaciones ocasionales
por día.
2.3.4 Trituración
Es una operación tecnológica que consiste en reducir el tamaño de la muestra vegetal a partículas de
menos dimensión, para que durante la extracción pueda asegurarse la obtención cuantitativa máxima
posible de principios activos deseados. La trituración se efectúa en función de las propiedades
físicas de la droga vegetal tales como dureza, adhesividad, elasticidad y fibrosidad, etc.
La trituración se efectúa mediante la aplicación de presión (molino de bolas), por percusión (molino
de martillo), por frotamiento o fragmentación por corte (molino de cuchilla).
a) Por compresión: para drogas quebradizas (fruta y semillas)
Mecanismo = por presión
Equipo = molino de rodillo
b) Por impacto: para drogas quebradizas (frutos y semillas)
Mecanismo = por golpe
Equipo = molino de martillo
c) Por corte: para materiales fibrosos (corteza, raíces, rizomas)
Mecanismo = por corte
Equipo = molino de cuchillo parecido a licuadora
d) otros: - Por fricción e impacto
2.3.5 Extracción
29
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
El termino extracción significa sacar o retirar de forma selectiva lo mas completo posible las sustancias
químicas biactivas contenidas en una droga vegetal.
Los principios a extraer se encuentran disueltos en el citoplasma de la célula vegetal o formando sales que
se encuentran incrustadas en las células.
El proceso extractivo se inicia con la interacción droga-disolvente. Dependiendo del tipo de principio a
aislar se elegirá el método u otro.
METODOS DE EXTRACCION
EXTRACCION DESTILACION EXTRACCION CON MECANICA
DISOLVENTES
POR EXPRESION POR ARRASTRE DE DISCONTINUA CONTINUA
POR INCISIONES VAPOR
MACERACION PERCOLACION
REMACERACION SOXHLET
DIGESTION
DECOCCION
2.3.5.1 EXTRACCION MECANICA
30
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
EXPRESION: Ciertas sustancias químicas pueden ser extraídas de la
droga vegetal por expresión. En este método extractivo, la planta
fresca se introduce en una prensa hidráulica y se exprime hasta que se
obtiene su jugo.
Este método extractivo se emplea para obtener zumos de cítricos, aceites, y otros.
EXTRACCION POR INCISIONES. Este método se aplica para
extraer del material vegetal exudados, los que pueden ser: gomas,
resinas, mieles y otros productos que brotan en gran cantidad al
realizarle incisiones o cortes a la planta viva. Pueden también
clavarse tubos en la corteza, por donde fluyen las sustancias).
2.3.5.2 PROCESO DE DESTILACION
DESTILACION POR ARRASTRE DE VAPOR. Es el proceso de extracción mediante el cual
se obtienen aceites esenciales.
Estos aceites son productos grasos compuestos por un número muy grande de compuestos químicos
aromáticos muy volátiles de estructura y composición muy compleja.
La mayoría son terpenos de bajo peso molecular.
La destilación es un proceso físico muy sencillo. Este sistema no necesita de unas instalaciones muy
sofisticadas y tiene un rendimiento muy alto obteniéndose una esencia de buena calidad.
Una destiladora se compone de:
• Caldera
• Serpentina-Refrigerante
• Vaso florentino
2.3.5.3 EXTRACCIÓN CON SOLVENTES
31
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
DISOLVENTES. Consiste en poner en contacto la droga con un disolvente capaz de solubilizar los
principios activos. Los principios activos deben pasar de la droga al disolvente de manera que se
obtenga un extracto líquido (con los principios activos disueltos) y el material vegetal sobrante
(bagazo).
EXTRACCIÓN DISCONTINUA CON DISOLVENTES
Se sumerge la droga en el disolvente, por lo que el total de la droga contacta con él, difundiéndose los
principios activos de la droga al disolvente hasta alcanzar el equilibrio.
A. MACERACION
La droga seca y molida se pone en contacto con el disolvente a temperatura
ambiente, dejando la mezcla en reposo durante un tiempo determinado (normalmente
de 3 a 10 días).
Transcurrido el tiempo de maceración, se decanta el extracto y se elimina el residuo vegetal. Se recomienda
hacer una segunda extracción.
B. REMACERACION:
Es cuando la operación de maceración se repite varias veces utilizando la misma muestra vegetal
cambiando solo el solvente.
C. DIGESTIÓN:
Es la maceración realizada a una temperatura ligeramente superior a la del ambiente es decir que es una
maceración entre 40 y 50 ºC.
D. INFUSION:
32
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Se realiza colocando la muestra vegetal a un solvente caliente durante 5 a 10 minutos
El disolvente se hierve y posteriormente se introduce la droga a extraer, dejándose enfriar el conjunto
hasta temperatura ambiente. El extracto recibe el nombre de INFUSION o TE.
E. DECOCCION O COCIMIENTO:
La droga se cubre con el disolvente y el conjunto se lleva a ebullición, manteniéndose así por 15 a 30
minutos. Posteriormente se enfría y se filtra. El extracto es llamado DECOCTO
Tanto en la infusión como en la decocción, se emplea agua como disolvente.
EXTRACCIÓN CONTINUA CON DISOLVENTES (DINAMICA)
El disolvente utilizado para la extracción se hace pasar por la droga,
arrastrando a los principios activos de un paso. Este proceso permite extraer
casi por completo, los compuestos químicos presentes en la droga.
a) PERCOLACION:
La droga se coloca en una columna y está en contacto permanente con el
disolvente que gotea por la parte inferior. Constantemente se adiciona
disolvente puro por la parte superior de la columna, de tal manera que se
compensa la cantidad de disolvente que sale por la parte inferior
b) SOXHLET:
Este método se utiliza para sustancias que no son termolabiles y cuando se requiere alto grado de
extracción utilizando poca cantidad de solvente para hacer varias extracciones
con el mismo solvente es decir un precolación cíclica con reaprovechamiento a
una temperatura de ebullición del solvente.
33
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Esta técnica es una variante de la anterior, emplea un aparato denominado Soxhlet, que asegura en
todo
momento la provisión de disolvente puro, el que pasa por la droga arrastrando los principios activos.
El aparato se compone de:
•Un matraz (A),
•Un cuerpo extractor (B)
•Un refrigerante (C)
•Un tubo conductor del disolvente (D)
•Un sifón que hace retornar el disolvente con el extracto (E).
2.3.6. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA EXTRACCIÓN
Característica de la droga: La droga deberá estar seca y molida.
Naturaleza del disolvente:
Agua.
Mezcla hidroalcohólicas.
Propilenglicol.
Disolventes orgánicos.
temperatura: El calor favorece y acelera la extracción pero puede descomponer los principios
activos de la droga.
Tiempo de extracción: depende de las características
de la droga (dureza, grado de división) y de la naturaleza de los principios activos (volátiles, hidrolizables,
oxidables, entre otros).
2.3.7. Purificación de la solución extractada.
34
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Consiste en el proceso de separación de los restos vegetales del líquido extractivo una vez finalizada la
extracción, para ello se puede utilizar primeramente la decantación seguido de una filtración simple, como
finalmente se exprime el residuo
2.3.8 Concentración de Extractos
La concentración de los extractos consiste en la eliminación principal del disolvente o completa del
disolvente utilizado, garantizando la estabilidad de los constituyentes químicos. Entre los equipos que se
utilizan para la concentración de extractos tenemos: al rotador, el evaporador
Evaporador rotatorio al vacío:
Se basa en la evaporación del solvente a presión reducida el vapor generado penetra en el sistema de
purificación donde consigue la condensación , el cual por gravedad se recoge en un recipiente
acumulador el balón gira dentro de un baño calentador formándose en la pared del balón una película
fina. El estar así incrementando la superficie de evaporación, la evaporación se consigue en menor
tiempo, regulando la profundidad a la que se sitúa el balón en baño Maria fijando la temperatura del
baño y el grado de vacío así como la temperatura del refrigerador , puede conseguir las condiciones
optimas del trabajo.
2.3.9. Secado de los extractos:
El secado de los extractos, se realiza de acuerdo al solvente utilizado en la extracción y son los
siguientes:
a) Vaporización a temperatura ambiente:
Consiste en la eliminación completa del líquido extractor por vaporización natural, consiguiendo de
esta manera el extracto seco y denso, de acuerdo a los constituyentes químicos generalmente este
método se utiliza para eliminar los solventes volátiles.
b) Liofilización:
La liofilización constituye un procedimiento muy elegante para deshidratar principios activos
termolábiles.
Se utiliza, sobre todo, para la desecación de vitaminas, hormonas, plasma sanguíneo, vacunas,
componentes vegetales y otros materiales vegetales.
35
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
3.- DISEÑO METODOLOGICO
3.1 Hipótesis.
3.1.1. Hipótesis de trabajo.
Los extractos obtenidos de la de la corteza de Hymenaea courbaril-L(Paquió o Jatobá) tienen actividad
antibacteriana contra los Staphilococus aureus, St. Epidermidis, Proteus Mirabilis, E. Coli.
Donde se lograra formular una crema antibacteriana que mantenga su actividad.
3.2. Variables.
3.2.1. Variables de trabajo.
3.2.2.1. Variables independientes.
El tipo de extracto presente en la muestra vegetal.
La concentración de los extractos.
Elaborar una forma farmaceutica
3.3.2.2 Variables dependientes.
La actividad antibacteriana de los metabolitos secundarios presentes.
36
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
4. DISEÑO EXPERIMENTAL
4.1. TIPO DE ESTUDIO.
4.1.1. Es Experimental porque se plantea una situación desconocida para verificar la hipótesis, entre un
grupo en estudio y un grupo control.
4.2. UNIVERSO Y MUESTRA
4.2.1. Universo de estudio
Está constituido por las plantas medicinales utilizadas en el Oriente Boliviano.
4.2.2. Muestra de estudio.
La selección de la muestra se realizó de manera no probabilística y por conveniencia, por su uso
tradicional y tomando en cuenta que no tiene estudios químicos ni biológicos. La especie seleccionada es la
Hymenaea courbaril-L(Paquió o Jatobá)
4.2.3. Unidad de análisis.
Lo constituyen los extractos, obtenidos de la corteza de la muestra vegetal.
4.3. DISEÑO EXPERIMENTAL.
4.3.1. Selección de la planta.
37
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
La muestra vegetal fue seleccionada a través de una búsqueda bibliográfica realizada en el internet y
en libros de medicina tradicional donde indica que la corteza de Hymenaea courbaril-L(Paquió o Jatobá),
tienen actividad antibacteriana.
4.3.2. Recolección.
Fue recolectada en abril del 2012 en el departamento de Santa Cruz de la Sierra, Provincia Sara,
Portachuelo.
Las partes recolectadas de la planta, es la corteza para el estudio
correspondiente, y otros órganos para la identificación botánica.
4.3.3. Secado.
El secado fue realizado a temperatura ambiente bajo sombra, para evitar posibles alteraciones
químicas por la luz solar, el tiempo de secado fue aproximadamente quince días, en la casa de la compañera
Susana Arauz por el plan 3000.
4.3.4. Trituración.
La muestra vegetal, una vez recolectada y secada, se procedió al triturado de la corteza para obtener
fracciones de menor tamaño con la finalidad de facilitar la eliminación de la humedad.
4.3.5. Extracción.
Para la extracción se utilizaron 25g. de la muestra vegetal seca y trturada.Inicialmente
se realizó la extracción con éter de petróleo en aparato de soxhelt o maceración hasta agotamiento.
Del residuo vegetal proveniente de la extracción etérea, se elimino los restos de éter de petróleo por
vaporización natural a temperatura ambiente, y luego se realizó la extracción con etanol al 96%, bajo las
mismas condiciones anteriormente mencionadas.
Finalmente se hizo la extracción acuosa con agua destilada.
Se separo la octava parte de cada extracto, para las pruebas de reconocimiento de sus
compuestos químicos y el resto para las pruebas biológicas.
38
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Diagrama del proceso de extracción de la muestra vegetal
4.3.5.1. Métodos de Extracción
a) Remaceración
Para la extracción se utilizaron 25 g de la muestra de Hymenaea courbaril-L(Paquió o Jatobá)) seca
y triturada, colocar en un recipiente con tapa.
39
25 g de droga seca y molida25 g de droga seca y molida
Extraer con 200 ml solvente éter de petróleo
Hasta agotamiento
Extraer con 200 ml solvente éter de petróleo
Hasta agotamiento
Extracto etéreoExtracto etéreo Residuo agotado con éter, secoResiduo agotado con éter, seco
Extraer con 200 ml de agua
Hasta agotamiento
Extraer con 200 ml de agua
Hasta agotamiento
Extracto acuosoExtracto acuoso
Extraer con 200 ml de etanol
Hasta agotamiento
Extraer con 200 ml de etanol
Hasta agotamiento
Residuo agotado con etanol, secoResiduo agotado con etanol, secoExtracto etanólicoExtracto etanólico
ResiduoResiduo
DesecharDesechar
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Inicialmente se realizo la extracción con éter de petróleo, dejando 1 a 2 días con agitación ocasional y
filtramos el extracto. Este proceso se debe realizar 3 veces.
Los extractos obtenidos lo guardamos para el análisis correspondiente.
El residuo vegetal proveniente de la extracción etérea, se eliminó los restos de éter de petróleo por
vaporización natural a temperatura ambiente.
Con el residuo seco, se realizo la extracción con etanol al 96 % siguiendo el mismo procedimiento
anteriormente mencionados.
Luego se realiza la extracción acuosa con agua destilada, previa eliminación de los restos de etanol
hasta su evaporación total.
b) Soxhlet
Para la extracción por el método de Soxhlet se pesaron 25g de la muestra vegetal de la Hymenaea courbaril-
L(Paquió o Jatobá)
Preparamos un cartucho de papel filtro donde colocamos la muestra pesada.
El cartucho taponado con algodón lo introducimos al cuerpo de Soxhlet.
Luego colocamos 200 ml de éter de petróleo en un balón. Realizamos las conexiones herméticamente
para evitar que escape el solvente y realizamos la extracción durante 2 hrs. hasta agotamiento de la muestra.
Los principios activos pasaran al balón, se apreciara la coloración que presente el solvente.
Pasado el tiempo mencionado se debe desconectar el extractor.
El extracto obtenido se debe guardar para la prueba de reconocimiento de sus compuestos químicos.
El residuo de cartucho se guardó y secó a temperatura ambiente para realizar la extracción con el etanol
al 96%, realizando el mismo procedimiento anteriormente mencionado.
Finalmente se realiza la extracción con agua destilada.
4.3.6. Identificación de los compuestos químicos
40
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
4.3.6.1.. Extracto Etanolico.
El extracto etanólico, se concentro hasta un volumen aproximado de 50 ml.
Se dividió en dos alícuotas A y B, aproximadamente, 25 cc cada uno y se procedió de la siguiente
manera:
Alícuota “A”
Se midió 5 cc y se adiciono 2cc de agua . Se adiciono 5 gotas de solución de FeCL3 al 1% (p/v) .
La aparición de color azul , 16,20,22, indican la presencia de...Taninos Gálicos .La aparición de una
coloración verde 16,20,22, indican la presencia de ..………………………Taninos Catecólicos
Se midió 5cc y se adiciono 2 cc de agua. Se adiciono 5 cc de solución de Fehling y se calentó a
reflujo por el espacio de 30 minutos. La formación de un precipitado rojo ladrillo, , indican la presencia
de ………………..………………………………………………Azucares reductores
Se midió 15 cc y se evaporo hasta sequedad. Se disolvió el residuo en 10 cc de HCL al 10 %. Se
filtro y se adiciono solución de NH4OH al 10 % (pH=8-9) y se extrajo con éter de petróleo. Se evaporo
la fase etérea y se retomo el residuo en 1.5 cc de HCL. Se dividió la solución en tres tubos de ensayo,
sirviendo uno de ellos como referencia. A los otros dos se adiciono respectivamente 3 gotas de reactivo
de Mayer y de Dragendorff.
La aparición de un precipitado blanco-amarillento y rojo anaranjado, , en los dos tubos, indican la
presencia de……………………...Alcaloides
Alícuota “B”
Se adiciono 15 cc de solución al 10 % (v/v) y se calentó a reflujo por el espacio de 20 minutos, se
enfrio y se extrajo con tres porciones de 15 cc de éter de petróleo. Se separo la fase etérea de la fase
acuosa acida.
41
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Se examino la coloración de la fase acuosa. Una coloración roja indica la posible presencia de
antracenosidos y/o taninos catecolicos . Se alcalinizo el medio por adicción de NH4OH, la modificación
de la coloración, indican la presencia de …………………………..……………..Antracenosidos
En la fase etérea se efectuó las siguientes reacciones:
Se midió 4 cc y se concentro a 2 cc luego se agrego 2 cc de solución de amonio al 25 % (v/v) y se
agito constantemente (reacción de Bortrager),. La aparición de color rojo-cereza, indica la presencia de
……………………………………….………………………………Antraquinonas
Se midio 5 cc y se evaporo hasta sequedad. Se disolvió el residuo en 2 cc de agua caliente. Se
aplico con un capilar dos manchas sobre papel filtro de 10 centimetros de diámetro. A una de ella se
adiciono 2 gotas de solución de NH4OH al 10 % . La presencia de fluorescencia, 16,22, siendo esta mas
intensa en la mancha tratada con NH4OH, indica la presencia
de……………………………………………………………..…………..Cumarinas
Se midio 5 cc y se evaporo hasta sequedad. Al residuo se adiciono 1 cc de metanol caliente. Se
adiciono limaduras de Mg y 1 cc de HCL concentrado (reacción de Shibata). La solución de coloración
roja indican la presencia de …………………………..……………….…Flavonoides
Se midio 5 cc y se evaporo hasta sequedad. Se efectuo la reacción de Liebermann-Burchard,.La
aparición de un anillo rojo-parduzco o violeta en la interfase , indica la presencia de ……….
…….Esteroides y Triterpenos
42
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
EXTRACCIÓN ETANOLICA
2ml 10ml 20ml 5ML de agua 2ml de agua 2.5 ML feling A 2.5ml feling B evapora a sequedad
2 gotas Fecl3 5ml HCL (10%)
Color ppdo. : Azul: taninos hidrolizables Hervir 15-20 min.
Verde: taninos condensados Formación precipitado Rojo ladrillo (+) AZUCARES REDUCTORES 1ml Ppdo. Blanco Referencia
(+)Alcaloides para comparar
43
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
B) Alícuota B.-
El reflujo hacer una extracción: Liquido – Líquido con 2 X 20 ml E.P. (Lavar 2 veces )
15 ml HCL (10%) Hervir 15-20min. Separar las dos fases:Extracto etanolico
REFLUJAR ALICUOTA B
44
Agitar
Reposar F. Acuoso
F. Eterea
F. EtéreaF. Acuoso
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
EXTRACCIÓN ETANOLICA
Evaporar a sequedad Evaporar a sequedad Evaporar a sequedad Evaporar a sequedad 1 ml NH3 2ml Metano 1ml 2ml Agua (25%) 1ml HCL © H2S04 caliente Mg (limadura)
Color: rojo Color: rojo-anaranjado Color: rojo Dos manchasANTRAQUINONAS FLAVONOIDES TRITERPENOS Y ESTEROLES (+) (+)
Llevar a lámpara U.V. Color: fluorescente CUMARINAS +
45
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
4.3.6.1.3. Extracto Acuoso
El extracto acuoso, se concentro hasta un volumen aproximado de 50 ml y se procedió de la
siguiente manera:
Se dividió en dos alícuotas de 25 cc cada uno A y B . Se hidrolizo la alícuota A y se efectuó las
siguientes pruebas.
Alícuota “A”
Se adiciono 15cc de solución de HCL al 10% (v/v) y se calentó a reflujo por el espacio de 20
minutos, se enfrió y se extrajo con tres porciones de 15 cc de éter de petróleo. Se separo la fase etérea de
la fase acuosa acida.
Se examino la coloración de la fase acuosa. Una coloración roja indica la posible presencia de
antracenosidos y/o taninos catecolicos . Se alcalinizo el medio por adicion de NH4OH, la modificación de
la coloración, indica la presencia de ……….……………………….………….Antracenosidos
En la fase etérea se efectuo las siguientes reacciones.
Se midió 4 cc y se concentro a 2 cc luego se agrego 2 cc de solución de amonio al 25 % v/v
(reacción Bortrager),. La aparición de color rojo-cereza ,indica la presencia de
…………………………......Antraquinonas
Se midió 5 cc y se evaporo hasta sequedad. Se disolvió el residuo en 2 cc de agua caliente. Se
aplico con un capilar dos manchas sobre papel filtro de 10 al 10% . La presencia de fluorescencia ,,
siendo esta mas intensa en la mancha tratada con NH4OH, indica la presencia de
…………………………………………………………………………….Cumarinas
46
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Se midió 5 cc y se evaporo hasta sequedad. Al residuo se adiciono 1cc de metanol caliente. Se
adiciono limaduras de Mg y 1 cc de HCL concentrado (reacción de Shibata ). La coloración roja, indica la
presencia de…………………………………………………………..Flavonoides
Se midió 5 cc y se evaporo hasta sequedad. Se efectuo la reacción de Liebermann- Burchard,.La
aparición de un anillo rojo-parduzco o violeta en la interfase , indica la presencia de
……………………………………..……………………Esteroides y Triterpenos
Alícuota “B”
Se midio 1cc de solución, y se adiciono 2 gotas de solución de lugol . El desarrollo de un color
azul, indican la presencia de …………………………………………….…………………………………
Almidón
Se midió 2 cc de solución, y se adiciono 10 cc de acetona y 5 gotas de hematoxilina, se filtro . La
aparición de un precipitado violeta , , indica la presencia de ……………………………...
…………………….…….Mucilagos
Se midio 1 cc de solución y se adiciono 6 gotas de reactivo de Fehling y llevo a hervir . La
aparición de un precipitado rojo-ladrillo , , indica la presencia de …...
………………………………………..Azucares reductores
Se midio 2 cc de solución y se agito enérgicamente. La aparición de una espuma persistente, , y la
reacción de Liebermann-Buchard positiva en la fracción hidrolizada , indica presencia de
…………………………………………………………………………….Saponinas
Se midio 1 cc de solución, se adiciono 2 cc de agua. Se adiciono 5 gotas de solución de FeCL3 al 1%
(p/v). La aparición de color azul, indica la presencia de…………………………………..….………...
……Taninos Galicos.
47
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
La aparición de una coloración verde, indica la presencia de
………………………………………………………… .Taninos Catecolicos
48
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
EXTRACTO ACUOSO
Dividir la muestra acuosa
50% 50%
15 ml HCL
(10%) 0.5ml 1ml 5ml 5ml 2ml 0.5ml
Reflujar 10-15 min
2ml H2O Agitar fuertemente 2 ml Feling A 10 ml Acetona Evaporar a sequedad 2 ml H2O
1-2 gtas.Lugol 5 gta. hematoxilina 3-4 gtas. Timol gta.FeCL3
Llevar a vaciar Hervir Filtrar
a un frasco 10-15min.
Color: azul oscuro Espuma: abundante ppdo. : rojo ladrillo ppdo. : Violeta color: rojo
ALMIDON Persistente AZUCARES REDUCTORES (+) MUCILAGOS (+) POLISACARIDOS (+)
SAPONINAS (+) Azul: Taninos hidrolizables (+)
49
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
FASE ETEREA
5 ml a cada tubo
Evaporar a sequedad Evaporar a sequedad Evaporar a sequedad Evaporar a sequedad
1ml NH3(25%) 1ML H2S04 2ML metano 1ML 1mlHCL© de Mg liamadura agua caliente
color: rojo Color : rojo color :anaranjado rojo dos manchas (+)QUINONA (+) TRITERPENOS Y ESTEROLES (+)FLAVONOIDES Llevar Color: fluorescente
(+) CUMARINAS
50
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
FASE ETEREA.-
REFLUJADO
EXTRACCION-LIQUIDO-LIQUIDO
20 X 2ML ETER DE PETROLEO(LAVAR 2 VECES) Agitar reposar Fase etérea
Fase acuosa
Separar las fases:
F. Acuosa F. Etérea
51
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
4.3.7 Evaluación de la actividad antibacteriana
Prueba antibacteriana por dilución en caja Petri.
PROCEDIMIENTO:
1. Preparación del material:
Esterilizar en autoclave a 121 oC 1,5 atm de presión durante 15 minutos los
siguientes ,materiales :Cajas petri, tubos, matraces, pipetas, viales, matraces con agua
destilada, mandil, barbijo, gorro, guantes, algodón, propies.
2. Preparación de la suspensión bacteriana
En un tubo esteril colocar 3 ml de medio de cultivo Soya Tripticasa.
Sembrar las bacterias e incubar a 35 oC durante….24 horas
3. Preparación del extracto
Tara la balanza usual
Pesar en un vial estéril 10mg de extracto de la planta (para cada caja petri)
Agregar al extracto 100 microlitros (ul) de DMSO (dimetil sulfoxido) con
micropipeta y punteras estériles.
Mezclar por 5 min hasta disolver el extracto.
4. Preparación del medio del cultivo.
Un tubo que contiene 10 ml de AMH(Agar Muller Himton),Calentar en baño
Maria a 45 oC (para cada caja petri).
Vaciar el medio AHM a una caja de petri esteril.Antes de vaciar el medio
previamente dividir la caja petri esteril en lados iguales por fuera con marcador de
vidrio.
52
E F
G H
A B
C D
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Agregar la dilución del extracto de la planta con DMSO preparada
anteriormente.
Inmediatamente agitar para que se mezcle bien ambos componentes .Agite en
forma de ocho.
Tapar la caja petri no completamente y esperar a que gelifique.
5. Inoculación de las bacterias en caja petri.
Una vez gelificado el AMH con el extracto con DMSO.
En la caja petri que esta previamente dividida en cuatro porciones identificar cada
una de ellas y asignarle una cepa aislada de una bacteria.
A. Staphilococus Aureus
B. E. Coli
C. Staphylococcus Epidermidis
D. Staphylococcus Saprophyticus
E. Proteus Mirabilis
Sembrar las bacterias en forma de estrias las bacterias que corresponda en cada
área asignada .
Envolver en papel madera las cajas petri.
Incubar tapa abajo a 35 oC durante 24 horas.
CONTROLES DE LA PRUEBA
1. Control del medio de cultivo.
En un tubo con AMH calentar a baño Maria a 45 oC.
Vaciar el AMH a una caja petri esteril.
Agitar unos minutos y espera hasta que gelifique.
Incubar a 35 oC durante 24 horas.
Nota:No debe haber crecimiento alguno de bacteria u hongo debe mantenerse intacto
el medio de cultivo.
2. Control del crecimiento bacteriano.
En un tubo con AMH calentar a baño Maria a 45 oC.
53
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Vaciar el AMH a una caja petri esteril .Antes de vaciar dividir las base de la caja
petri en cuatro porciones iguales .
Agitar y tapar.
Sembrar la s bacterias que correspondan.
Tapar e incubar a 35 oC.durante 24 horas
Nota: Deben crecer las bacterias de lo contrario las bacterias están muertas o
perdieron viabilidad.
3. Control del disolvente.
En un vial esteril colocar 100 ul de DMSO (sin extracto).
Calentar AMH en baño maria a 45 oC.
Vaciar AMH y 100 ul de DMSO rápidamente.
Agitar , tapar y esperar a que gelifique
Sembrar las bacterias que correspondan.
Incubar a 35 oC durante 24 horas
Nota: Observar si inhibe o no el crecimiento de las bacterias. No debe inhibir el
crecimiento de las bacterias.
DMSO (Dimetil Sulfoxido) :Concentracion máxima recomendad como disolvente
es de 1%, si se utilizaría mas de esta concentración puede interactuar con las bacterias
inhibiéndolas de su crecimiento.
4. Control del Antibiótico:
Calentar AMH en baño Maria a 45 oC.
Agregar antibiótico:Gentamicina y Cefotaxima en una cantidad de 10 mg lo que
debe hacer entre los dos antobioticos ,transformarlos a microlitros (ul).
Plaquear y dejar a que gelifique.
Sembrar las baterías qrue correspondan
Incubar a 35 oC. durante 24 horas .
Nota: Observar que no debe haber crecimiento de ninguna de las bacterias.
54
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Gentamicina: Es un antibiótico del grupo delos Aminoglucosidos ,recomendado para
infecciones del tracto respiratorio inferior y tracto urinario superior,septicemias y
otras ,producidas por cepas sensibles de :Escherichia
coli,Proteus,Citrobacter,Enterobacter,Klebsiella,Serratia,Acinetobacter,Pseudomonas,
Streptococos aureus y faecalis.
Cefotaxima: Es un antibiótico del grupo de las cefalosporinas de tercera
generación ,es un medicamento de reserva en caso de infecciones severas producidas
por bacterias resistentes a ortos antibióticos ; infeccione producidas por gérmenes
productores de betalactamasa.
55
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
4.4 ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA
-Evaluación de la actividad bacteriana.
En el extracto etanolico inhibió el crecimiento de:
St. Epidermidis……………. 20mg
St. Saprofiticus…………….. 10mg-15mg
Proteus mirabilis…………… 10mg
St. Aureus…………………….15mg
En el extracto acuoso hubo inhibición de:
Proteus mirabilis………………15mg
St. Epidermidis…………………10mg
E. Coli……………………………..20mg
CONFIRMACION CEPAS DE CENETROP
TIPOS DE CEPAS DE CENETROP:
- St. Aureus - Proteus Mirabilis
- St. Epidermidis - E. Coli
En el extracto etanolico inhibió el crecimiento de:
St. Epidermidis……………..15- 20mg
E. coli……………………. ....15mg
Proteus mirabilis…………… 10mg-15mg
St. Aureus……………………15mg-20mg
En el extracto acuoso hubo inhibición de:
Proteus mirabilis………………10mg
St. Epidermidis………………..10mg-15mg
E. coli……………………………15mg-20mg
St. Auerus………………………..15mg
56
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
FORMULACION
1. EXTRACTO DE PAQUIO…………………..10mg
2. LAURIL SULFATO DE SODIO…………….1%
3. CERA LANETTE…………………………….10%
4. ALCOHOL CETILICO……………………….2%
5. VASELINA SOLIDA…………………………..5%
6. PROPILENGLICOL……………………………3%
7. NIPAGIN………………………………………..0.25%
8. NIPAZOL……………………………………….0.25%
9. AGUA DESTILADA csp………………………100ml
FORMULACION II
EXTRACTO DE PAQUIO…………………..15mg
LAURIL SULFATO DE SODIO…………….1%
CERA LANETTE…………………………….10%
ALCOHOL CETILICO……………………….2%
VASELINA SOLIDA…………………………..5%
PROPILENGLICOL……………………………3%
NIPAGIN………………………………………..0.25%
NIPAZOL……………………………………….0.25%
AGUA DESTILADA csp………………………100ml
FORMULACION III
EXTRACTO DE PAQUIO…………………..20mg
LAURIL SULFATO DE SODIO…………….1%
CERA LANETTE…………………………….10%
ALCOHOL CETILICO……………………….2%
57
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
VASELINA SOLIDA…………………………..5%
PROPILENGLICOL……………………………3%
NIPAGIN………………………………………..0.25%
NIPAZOL……………………………………….0.25%
AGUA DESTILADA csp………………………100ml
FORMULACION FINAL
EXTRACTO DE PAQUIO…………………..15mg
LAURIL SULFATO DE SODIO…………….1%
CERA LANETTE…………………………….10%
ALCOHOL CETILICO……………………….2%
VASELINA SOLIDA…………………………..5%
PROPILENGLICOL……………………………3%
NIPAGIN………………………………………..0.25%
NIPAZOL……………………………………….0.25%
AGUA DESTILADA csp………………………100ml
58
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
4.5. FLUJOGRAMA
Pesar la materia prima
En un vaso precipitado
Mantener a una
Temperatura de 60 C
Fundir en vaso precipitado
2, 3, 4,5 y agitar ctte
Agregar nipagin y nipazol
Disolver con propilenglicol
Agregar el extracto de paquío
Agitar vigorosamente
Formar una crema homogénea
Acondicionar y etiquetar
59
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
4.6. ELABORACION DE LA CREMA ANTIBACTERIANA
MATERIALES
Vaso precipitado de 500ml, 100ml, 50ml
Varilla de vidrio
Vidrio reloj
Probeta de 100ml
Espátulas
Cocinilla malla de amianto
Balanza analítica
MATERIA PRIMA
Extracto de paquío
Lauril sulfato de sodio
Cera lanette
Alcohol cetilico
Vaselina solida
Propilenglicol
Nipagin
PROCEDIMIENTO.-
Calentamos el agua destilada a una temperatura no mayor a 70°c.
Fundir en un vaso precipitado 2, 3, 4,5.
Disolver con el propilenglicol 7,8
Agregar el extracto de paquío.
Agregar agua poco a poco hasta formar una crema homogénea
Por último se procede al acondicionamiento y etiquetado.
60
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Acondicionamiento.-
a) Acondicionamiento primario:-
Se procedió al lavado de los envases con agua y detergente neutro.
Luego con alcohol para desinfectarlos y poder acondicionar en su envase.
Se procede el acondicionado a la temperatura requerida no más de 20ºC
Se envase la cantidad del producto en un peso de aproximadamente
50g.cada frasco peso neto.
61
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
5. RESULTADOS
IDENTIFICACION TAXONOMICA:
Las partes de la planta con el que se estudio es la corteza con el fin de identificarla fue
recolectada para su estudio taxonómico en el museo Noel Kempf Mercado fue recolectada en
julio 23 del 2011en el departamento de Santa Cruz de la Sierra, en Robore sección Santiago de
Chiquitos.
Donde no se llego a realizar la identificación taxonómica, debido a la falta de la partes de la
planta a estudiar.
Identificación de los constituyentes químicos en los extractos según la marcha fitoquimica
según detalle.
En los extractos crudos etanólico y acuoso, se realizó la identificación de los grupos de
constituyentes químicos presentes en cada uno de ellos, mediante las marchas fitoquímicas.
Caracterización del extracto:
a).-Extracto etanolico
En el extracto etanolico fueron identificados los siguientes compuestos químicos:
_ Azucares reductores
_ Taninos condensado
b).- Extracto acuoso
En el extracto acuoso fueron identificados los siguientes compuestos:
- Saponinas
- Taninos condensados
62
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
6. CONCLUSIONES
En los resultados obtenidos de las pruebas microbiológicas realizados en el laboratorio de la
carrera de farmacia de las cepas cedidas por laboratorios de microbiología y cenetrop dieron
como resultado la inhibición de las cepas de la bacteria a diferentes concentraciones.
En el control de actividad antibacteriana se utilizo los siguientes tipos de cepas:
- St. Aureus - E.Coli
- St. Epidermidis - Proteus Miarabilis
En las cuales inhibieron a diferentes concentraciones lo cuan nos indica que los extractos
etanolico y acuoso tienen actividad frente a las bacterias mencionadas.
Mediante el proceso microbiológico se dio la elaboración de las pre-formulaciones llegando a
obtener la formula maestra a partir del cual se elaboró las cremas antibacterianas de uso tópico.
63
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
7. BIBLIOGRAFIA
- http://www.bellezaydietas.com/cfm?master=6005
- www.ourbodiesourselves.org/ncnv.htm
- http://www.noticiasapicolas.com.ar
- http://www.yerbasana.cl/?a=392
- www.ourbodiesourselves.org/ncnv.htm
- www.wikipedia .com. (.fecha consulta: 10/082008)
- www.portal .farma.com- (fecha consulta 11/10/2002)
- Faulí i Trillo C. Tratado de Farmacia Galénica. Luzán 5. S. A. de Ediciones, Madrid;
1993.
- 4-Rémington, Farmacia, Tomo I, 19ª ed. Editorial Médica Panamericana, Buenos
Aires; 1998.
64
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
8. ANEXOS
Fig. (1)Aquí Zaida con la corteza de la planta
Fig. (2) La planta del paquío
65
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Fig. (3) Materiales esterilizados preparados por microbiología
Fig. (4) Cepas de microbiología y medios de cultivos
66
0.01 0 0.0150.020
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Fig. (5) Gelificados y sembrados en el medio de cultivo
Colocamos el DMSO en la caja petri y colocamos nuestros extractos de la corteza
Derretimos el DMSO para sembrar
Comenzamos a sembrar cada una de nuestras
cepas la llevamos a estufa para ver su crecimiento
Fig. (6) Resultados y confirmación microbiológica
FLUJOGRAMA
67
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Fig. (7) RESULTADOS CEPAS DE CENETROP
EXTRACTO ETANOLICO
CONCENTRACION DE INHIBICION: 10mg- 20mg
EXTRACTO ACUOSO
CONCENTRACION DE INHIBICION: 10mg- 20mg
68
2012
CREMA ANTIBACTERIANA DEL PAQUIO
Fig. (8) ELABORACION DE LA CREMA BASE
69
![Caldera y turbina [terminado grupo 3]](https://static.fdocuments.ec/doc/165x107/559dd3c81a28abab738b47b3/caldera-y-turbina-terminado-grupo-3.jpg)
