“Neoplasias Cutáneas Comunes en Caninos, Diagnosticadas Por Medio de Citología (Diff-quick) en...

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NEOPLASIAS CUTÁNEAS COMUNES EN CANINOS, DIAGNOSTICADAS POR MEDIO DE CITOLOGÍA (DIFF- QUICK) EN EL HOSPITAL DOCENTE VETERINARIO “CÉSAR AUGUSTO GUERRERO” DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA Y CLÍNICAS VETERINARIAS DE LA CIUDAD” “Tesis de Grado previa a la obtención del título de Médico Veterinario Zootecnista” Lenin Ernesto Moreno Gálvez Dra. Laura Peña Merino LOJA ECUADOR 2012

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de interés clínico veterinario un avance en la practica clínica utilizando herramientas diagnosticas de certeza y baja economía en problemas dermatologicos

Transcript of “Neoplasias Cutáneas Comunes en Caninos, Diagnosticadas Por Medio de Citología (Diff-quick) en...

  • i

    NEOPLASIAS CUTNEAS COMUNES EN CANINOS, DIAGNOSTICADAS POR MEDIO DE CITOLOGA (DIFF-

    QUICK) EN EL HOSPITAL DOCENTE VETERINARIO CSAR AUGUSTO GUERRERO DE LA UNIVERSIDAD

    NACIONAL DE LOJA Y CLNICAS VETERINARIAS DE LA CIUDAD

    Tesis de Grado previa a la obtencin del ttulo de Mdico

    Veterinario Zootecnista

    Lenin Ernesto Moreno Glvez

    Dra. Laura Pea Merino

    LOJA ECUADOR

    2012

  • ii

    NEOPLASIAS CUTNEAS COMUNES EN CANINOS,

    DIAGNOSTICADAS POR MEDIO DE CITOLOGA (DIFF-QUICK) EN EL

    HOSPITAL DOCENTE VETERINARIO CSAR AUGUSTO GUERRERO

    DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA Y CLNICAS VETERINARIAS

    DE LA CIUDAD

    TRABAJO DE INVESTIGACIN PRESENTADO AL TRIBUNAL COMO

    REQUISITO PREVIO A LA OBTENCIN DEL TTULO DE: MDICO

    VETERINARIO ZOOTECNISTA.

    APROBADA:

    Dr. Alfonso Saraguro Martnez Mg Sc.

    PRESIDENTE DEL TRIBUNAL .

    Dr. Jos Gaona Mg Sc.

    MIEMBRO DEL TRIBUNAL .

    Mdica Veterinaria Diana Romero Labanda

    MIEMBRO DEL TRIBUNAL

  • iii

    CERTIFICACIN

    Dra. Laura Pea Merino

    DIRECTORA DE LA TESIS.

    Certifica:

    Que una vez revisado el trabajo de investigacin denominado

    NEOPLASIAS CUTNEAS COMUNES EN CANINOS,

    DIAGNOSTICADAS POR MEDIO DE CITOLOGA (DIFF-QUICK)

    EN EL HOSPITAL DOCENTE VETERINARIO CSAR

    AUGUSTO GUERRERO DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE

    LOJA Y CLNICAS VETERINARIAS DE LA CIUDAD realizado por

    el seor egresado Lenin Ernesto Moreno Glvez, previo a la obtencin del

    Ttulo de MDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA, se autoriza su

    presentacin final para la evaluacin correspondiente.

    Dra. Laura Pea Merino

    DIRECTORA

  • iv

    AUTORA

    En el presente trabajo investigativo, cada

    una de las opiniones, conceptos vertidos y

    conclusiones son de exclusiva

    responsabilidad del autor.

    Lenin Ernesto Moreno Glvez

  • v

    AGRADECIMIENTO

    Al culminar la presente tesis de grado, que constituye un requisito

    indispensable para obtener el ttulo profesional de Mdico Veterinario

    Zootecnista, es mi deseo dejar constancia de un sincero agradecimiento a la

    Universidad Nacional de Loja, por haberme acogido en sus aulas durante

    cinco aos de carrera estudiantil, a todos los docentes que me han formado y

    enriquecido con sus sabios conocimientos a lo largo de mi carrera; una

    especial gratitud a la Dra. Laura Pea Merino, Directora de Tesis, por sus

    sabias enseanzas.

    A ms del apoyo acadmico, esta tarea lleva impregnada en cada una de

    sus pginas el apoyo moral y econmico brindado por mis padres, a quienes

    hago manifiesto el ms eterno agradecimiento por impulsarme a culminar

    esta gran labor, la misma que la pondr al servicio de la sociedad.

    Gracias tambin a mi novia, hermanos, familiares, amigos y compaeros, con

    quienes he compartido experiencias gratas que forjaron el rumbo de esta

    grandiosa profesin.

    EL Autor.

  • vi

    DEDICATORIA Con amor, gratitud, respeto y gran orgullo dedico

    esta investigacin a mis padres Bolvar y Mara

    Carmelina que con su amor, apoyo y ejemplo de

    responsabilidad, han sabido guiar mi formacin

    profesional.

    A mis hermanos Bolvar, Vanessa y Andrea

    baluartes de este logro, por haberme brindado su

    cario y consejos; y para todas las personas que

    creyeron en m.

    Lenin Moreno

  • vii

    NDICE GENERAL

    PRESENTACIN i

    APROBACIN ii

    CERTIFICACIN iii

    AUTORA iv

    AGRADECIMIENTO v

    DEDICATORIA vi

    NDICE GENERAL vii

    NDICE DE CUADROS xi

    NDICE DE FIGURAS xiii

    RESUMEN xv

    SUMARY xviii

    1. INTRODUCCIN 1

    2. REVISIN DE LITERATURA 3

    2.1 TUMORES CUTNEOS 3

    2.1.1. Definicin 3

    2.1.2. Etiologa 4

    2.1.3 Denominacin de los tumores 6

    2.1.4. Constitucin de los tumores 7

    2.1.5. Apariencia macroscpica 8

    2.1.6. Apariencia microscpica 8

    2.1.7. Crecimiento de los tumores 9

  • viii

    2.1.8. Propagacin de tumores a travs del cuerpo. 9

    2.1.8.1. Infiltracin 10

    2.1.8.2. Metstasis 10

    2.1.8.3. Implantacin 11

    2.1.9. Frecuencia y localizacin de los tumores en el perro 11

    2.1.10. Clasificacin de tumores cutneos 12

    2.1.10.1. Por su comportamiento 12

    2.1.10.2. Por su origen 13

    2.1.11. Lesiones seudotumorales e inflamatorias cutneas

    Frecuentes 21

    2.1.11.1. Nevus o lunares 21

    2.1.11.2. Quiste Epidrmico 22

    2.1.11.3. Inflamacin granulomatosa 22

    2.1.11.4. Inflamacin piogranulomatosa 22

    2.2. CITOLOGA DE MASAS NEOPLSICAS E

    INFLAMATORIAS 23

    2.2.1. Definicin 23

    2.2.2. Citologa normal de piel y tejidos blandos 23

    2.2.3. Tcnicas citolgicas 26

    2.2.3.1. Preparacin del extendido 26

    2.2.3.2. Tinciones 27

    2.2.3.3. Microscopio 29

  • ix

    2.2.4. Conclusiones citolgicas 31

    2.2.4.1. Masas inflamatorias 31

    2.2.4.2. Masas proliferativas (neoplasias) 34

    2.2.4.3. Diagnstico citolgico seleccionado 38

    2.2.4.4. Contaminantes en los especmenes citolgicos 43

    3. MATERIALES Y METODOS 47

    3.1. MATERIALES 47

    3.1.1 Materiales del campo 47

    3.1.2. Materiales de laboratorio 47

    3.1.3. Materiales de Escritorio 48

    3.2. MTODOS 48

    3.2.1. Mtodos de campo 48

    3.2.1.1 Localizacin 48

    3.2.1.2 Descripcin de las Unidades Experimentales 49

    3.2.1.3. Recoleccin de muestras 49

    3.2.2 Mtodo de laboratorio 50

    3.2.2.1. Tincin del material de laboratorio 50

    3.2.2.2. Identificacin microscpica 52

    3.2.3. Variables en estudio 53

    3.2.4. Toma y registro de datos 53

    4. RESULTADOS 55

    5. DISCUSIN 88

  • x

    5.1. Frecuencia de tipos de Neoplasias Cutneas 88

    5.2. Frecuencia de Neoplasias Cutneas segn el sexo

    y clasificacin 90

    5.3. Frecuencia de las edades con relacin a la clasificacin

    de Neoplasias Cutneas 91

    5.4. Frecuencia de la raza con relacin a la clasificacin de

    Neoplasias Cutneas 92

    6. CONCLUSIONES 94

    7. RECOMENDACIONES 96

    8. BIBLIOGRAFA 98

    9. ANEXOS 103

  • xi

    NDICE DE CUADROS

    Cuadro 1. Clasificacin de Neoplasias Cutneas por Comportamiento 55

    Cuadro 2. Clasificacin de Neoplasias Cutneas por origen de clulas

    tumorales 57

    Cuadro 3. Prevalencia de Neoplasias Cutneas de acuerdo a la raza 60

    Cuadro 4. Prevalencia de Neoplasias Cutneas de acuerdo al sexo 62

    Cuadro 5. Prevalencia de Neoplasias Cutneas de acuerdo a la edad 63

    Cuadro 6. Prevalencia de Neoplasias Cutneas de acuerdo a la raza

    segn su comportamiento 65

    Cuadro 7. Prevalencia de Neoplasias Cutneas benignas de acuerdo

    a la raza 67

    Cuadro 8. Prevalencia de Neoplasias Cutneas malignas de acuerdo

    a la raza 69

    Cuadro 9. Prevalencia de Neoplasias Cutneas por comportamiento

    celular de acuerdo al sexo. 71

    Cuadro 10. Prevalencia de Neoplasias Cutneas benignas de acuerdo

    al sexo 72

    Cuadro 11. Prevalencia de Neoplasias Cutneas malignas de acuerdo

    al sexo 74

    Cuadro 12. Prevalencia de Neoplasias Cutneas por comportamiento

    celular de acuerdo a la edad 76

  • xii

    Cuadro 13. Prevalencia de Neoplasias Cutneas benignas de acuerdo

    a la edad 78

    Cuadro 14. Prevalencia de Neoplasias Cutneas malignas de acuerdo

    a la edad 81

    Cuadro 15. Frecuencia de presentacin de neoplasias cutneas

    benignas con relacin a la ubicacin 84

    Cuadro 16. Frecuencia de presentacin de neoplasias cutneas

    malignas con relacin a su ubicacin 86

  • xiii

    NDICE DE FIGURAS

    Figura 1. Composicin de la masa tumoral 28

    Figura 2. Abordaje citolgico general 32

    Figura 3. Ejemplos benignos y malignos de clulas epiteliales y

    mesenquimatosas 36

    Figura 4. Tumores de clulas redondas 37

    Figura 5. Porcentaje de Tumores por comportamiento 56

    Figura 6. Porcentaje de neoplasias cutneas por Origen de clulas

    tumorales benignas 59

    Figura 7. Porcentaje de neoplasias cutneas por Origen de clulas

    tumorales malignas 59

    Figura 8. Porcentaje de Neoplasias Cutneas de acuerdo a la raza 61

    Figura 9. Porcentaje de Neoplasias Cutneas de acuerdo al sexo 62

    Figura 10. Porcentaje de Neoplasias Cutneas de acuerdo a la edad 64

    Figura 11. Porcentaje de Neoplasias Cutneas por comportamiento

    celular de acuerdo a la raza 66

    Figura 12. Porcentaje de Neoplasias Cutneas benignas de acuerdo

    a la raza 68

    Figura 13. Porcentaje de Neoplasias Cutneas malignas de acuerdo

    a la raza 70

    Figura. 14 Porcentaje de Neoplasias Cutneas por comportamiento

  • xiv

    celular de acuerdo al sexo 71

    Figura 15. Porcentaje de Neoplasias Cutneas benignas de acuerdo

    al sexo 73

    Figura 16. Porcentaje de Neoplasias Cutneas malignas de acuerdo

    al sexo 75

    Figura 17. Porcentaje de Neoplasias Cutneas por comportamiento

    celular por edad 77

    Figura 18. Porcentaje de Neoplasias Cutneas benignas de acuerdo

    a la edad 80

    Figura 19. Porcentaje de Neoplasias Cutneas malignas de acuerdo

    a la edad 82

    Figura 20. Porcentaje de Neoplasias Cutneas benignas de acuerdo

    a su ubicacin 85

    Figura 21. Porcentaje de Neoplasias Cutneas malignas de acuerdo

    a la ubicacin 87

  • xv

    RESUMEN

    El presente trabajo de investigacin titulado: NEOPLASIAS CUTNEAS

    COMUNES EN CANINOS, DIAGNOSTICADAS POR MEDIO DE

    CITOLOGA (DIFF-QUICK) EN EL HOSPITAL DOCENTE VETERINARIO

    CSAR AUGUSTO GUERRERO DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE

    LOJA Y CLNICAS VETERINARIAS DE LA CIUDAD, se realiz en la ciudad

    de Loja, Repblica del Ecuador; se llev a cabo en el periodo comprendido entre

    el 13 de junio del 2011 al 17 de noviembre del mismo ao.

    Este estudio tuvo como objetivo determinar los tipos de tumores cutneos

    comunes que adolecen los caninos mediante el diagnstico citolgico.

    Para el efecto se seleccionaron todos los caninos que durante este tiempo

    llegaron a consulta mdica a las diferentes clnicas de la ciudad y Hospital

    Docente Veterinario dndonos un total de 24 caninos provenientes de una

    poblacin estimada en 2277 animales, atendidos en estos centros mdicos

    durante cuatro meses. Se obtuvo la muestra mediante la puncin con aguja fina

    de las masas cutneas que presentaban los caninos. En aquellos casos que las

    masas fueron extirpadas se realiz la tcnica de impronta y estudio

    histopatolgico; las muestras se analizaron en los siguientes laboratorios:

    Laboratorio de Diagnstico Integral Veterinario del rea Agropecuaria y de

  • xvi

    Recursos Naturales Renovables de la Universidad Nacional de Loja y

    Laboratorio de Histopatologa de la Clnica SAN JOS de la ciudad, para el

    efecto se utiliz un tipo de tincin (Tincin de Diff- Quick).

    De los 24 canes que presentaron tumores cutneos, el 54.87% correspondieron

    a tumores benignos; y, el 45.83% a tumores malignos.

    Los tumores cutneos comunes de tipo benigno en orden de descendencia de

    frecuencia fueron: mastocitoma (46.16%), histiocitoma (15.39%), con una

    frecuencia de tan slo (7.69%) se presentaron: lipoma, inflamacin

    granulomatosa, seminoma, leiomioma y tumor de clulas de sertoli.

    Los tumores cutneos comunes de tipo maligno en orden de descendencia de

    frecuencia fueron: Tumor Venreo Transmisible (36.36%), con una frecuencia de

    (18.18%) se presentaron sarcoma, carcinoma y adenocarcinoma y con una

    frecuencia 9.10% se present osteosarcoma.

    Los resultados obtenidos de acuerdo a la edad fueron los siguientes: en

    animales que comprenden entre 0-3 aos (25%), de 3-6 aos (12.5%), de 6-9

    aos (25%) y mayores a 9 aos (37.5%). En lo que se refiere a raza se encontr

    un 79.17% en las razas mestizas 20.83% y de acuerdo al sexo se encontr

    mayor presencia de tumores en los machos con 62.5% mientras que en

    hembras fue 37.5%.

  • xvii

    La presentacin de neoplasias revelada en este trabajo, implica la necesidad

    de realizar otros trabajos, que permitan determinar los factores ambientales

    que puedan estar implicados, tales como nutricin, uso de aditivos y

    conservantes en los concentrados, contaminacin de los mismos con

    micotoxinas, dioxinas, presencia de grasas rancias, compuestos

    nitrogenados, etc., los cuales podran actuar como factores iniciadores y

    promotores de procesos neoplsicos.

  • xviii

    SUMMARY

    This research paper entitled "COMMON SKIN NEOPLASMS IN DOGS

    DIAGNOSED BY CYTOLOGY (DIFF-QUICK) VETERINARY TEACHING

    HOSPITAL" CESAR AUGUSTO GUERRERO "NATIONAL UNIVERSITY OF

    VETERINARY AND CLINICS LOJA CITY", was held in the city of Loja,

    Republic of Ecuador, was conducted in the period from June 13, 2011 to

    November 17 of that year.

    This study aimed to determine the types of common skin tumors afflicting the

    canine by cytologic diagnosis.

    For this purpose we selected all dogs during this time came to medical

    consultation to different clinics and Veterinary Teaching Hospital giving a total

    of 24 dogs from an estimated population treated at medical centers in 2277

    these animals. The sample was obtained by fine needle aspiration of the

    dogs that had skin masses, and also some that were removed we proceeded

    to perform the technique of imprinting of the plate for observation, the

    samples were analyzed in the following laboratories: Laboratory

    Comprehensive Diagnostic Veterinary and Agricultural Area of Natural

    Resources of the National University of Loja and Histopathology Laboratory

  • xix

    SAN JOSE Clinic in the city, to the effect we used a type of staining (Diff-

    Quick staining).

    Of the 24 dogs that had skin tumors, the 54.87% of benign tumors, and the

    45.83% of malignant tumors.

    Common skin tumors benign in order of frequency offspring were

    mastocytoma (46.16%), histiocytoma (15.39%), with a frequency of only

    (7.69%) occurred: lipoma, granulomatous inflammation, seminoma,

    leiomyoma and tumor sertoli cell.

    Common skin tumors malignant offspring in order of frequency were:

    Transmissible Venereal Tumor (36.36%), with a frequency (18.18%)

    presented sarcoma, carcinoma and adenocarcinoma and a 9.10% rate was

    introduced osteosarcoma.

    The results obtained according to the age were as follows: in animals

    comprising between 0-3 years (25%) of 3-6 years (12.5%) of 6-9 years (25%)

    and higher than 9 years (37.5%). In terms of race was obtained, that the pure

    breeds was found 79.17% and 20.83% mixed races and according to sex was

    found for tumors greater in males with 62.5% while in females was 37.5% .

  • xx

    The presentation of malignancy revealed in this work implies the need for

    further work, to determine the environmental factors that may be involved,

    such as nutrition, use of additives and preservatives in concentrated

    contamination of food with mycotoxins, dioxins, presence of rancid fats,

    nitrogenous compounds, etc.., which factors could act as initiators and

    promoters of neoplastic processes.

  • 1

    1. INTRODUCCIN

    La piel es el asiento ms comn de diferentes tipos de neoplasias en los

    perros y ocupa el segundo lugar en los gatos. En la prctica de la Medicina

    Veterinaria, en la piel de las mascotas (perros) cada da es ms comn

    encontrar casos de neoformaciones razn por la que los propietarios asisten

    a la consulta debido a la presencia de pequeas masas encontradas en la

    piel de sus mascotas y en ocasiones observan que estas han aumentado de

    tamao, color o firmeza. Por lo antes expuesto se ha planteado realizar esta

    investigacin sobre los diferentes tumores cutneos comunes que pueden

    afectar a los caninos de la ciudad de Loja.

    En nuestro medio la mayora de profesionales tienen dificultades en el

    diagnstico de neoplasias existentes en nuestras mascotas debido a la falta

    de material para este tipo de diagnstico.

    El presente trabajo tuvo como finalidad, abordar algunos conocimientos

    sobre las neoplasias cutneas que afectan a los caninos, los mismos que

    ayudarn al profesional a identificarlos de una manera correcta y as obtener

    un diagnstico y posterior tratamiento adecuado para la recuperacin del

    paciente.

  • 2

    El diagnstico citolgico tiene muchas ventajas: se requiere el mnimo de

    equipo, los resultados son prcticamente inmediatos y nos ahorra un tiempo

    de espera de uno o ms das; las muestras tomadas con aguja fina tienen

    una invasividad mnima y producen poco estrs en el animal.

    Este trabajo de investigacin permitir que los profesionales de las clnicas

    veterinarias tomen conciencia para realizar un diagnstico presuntivo, el

    mismo que debe ser confirmado a travs de laboratorio y as identificar los

    tipos de masas tumorales frecuentes, su ubicacin ms comn y su

    trascendencia en el estado de salud o enfermedad del individuo, para ello se

    han planteado los siguientes objetivos

    Objetivo General:

    - Contribuir al estudio de la incidencia de neoplasias cutneas en caninos

    que se atienden en las Clnicas Veterinarias y Hospital Docente

    Veterinario.

    Objetivos Especficos:

    - Identificar las diferentes tipos de neoplasias cutneas en caninos.

    - Clasificar las neoplasias cutneas de acuerdo a la raza, sexo y edad.

    - Determinar la frecuencia de presentacin de pacientes con neoplasias.

  • 3

    2. REVISIN DE LITERATURA

    2.1 TUMORES CUTNEOS

    La piel y el tejido subcutneo constituyen el lugar donde se asientan con

    mayor frecuencia, los diferentes tipos de neoplasias en los caninos

    (alrededor del 30%). Las neoplasias ms frecuentes son los lipomas, los

    tumores de clulas cebadas, la hiperplasia de glndulas sebceos, los

    adenomas y los papilomas (Stunzi, Weiss, 1984).

    2.1.1. Definicin.

    Las neoplasias son un grupo de clulas de crecimiento anrquico, patolgico,

    cuyas caractersticas son: crecimiento autnomo, es decir, independiente,

    ilimitado; que se realiza fuera del plan general del desarrollo del organismo y

    que este crecimiento no es til, ocasionndole la mayor parte de las veces

    graves trastornos (Mascotia, 2007).

    Denominaciones sinnimas para los tumores son: blastoma, neoblastoma,

    excrescencia, neoplasia, neoplasma y neoformacin (Wilkinson, Harvey,

    1996).

  • 4

    2.1.2. Etiologa.

    Los diferentes agentes que producen o favorecen la aparicin de un tumor

    reciben el nombre de cancergenos y pueden ser qumicos, fsicos, vricos y

    parasitarios, sin olvidar la existencias de factores intrnsecos del organismo

    que colaboran en la presentacin de un proceso neoplsico (Runnells,

    Monlua, Monlux, 1984).

    Estos agentes qumicos pueden ser contaminantes del medio ambiente,

    especialmente el aire, as como determinadas sustancias con las que se

    relacionan por su forma de vida, entre las que se encuentran los alquitranes,

    derivados del petrleo (parafinas), etc (Runnells, Monlua, Monlux, 1984).

    Igualmente la ingestin de determinadas sustancias conservantes puede

    producir tumores. Entre los agentes fsicos considerados como cancergenos

    se encuentran los estmulos mecnicos. Fue VIRCHOW, 1992 quien con su

    "teora de la irritacin", sugiri la idea de que los tumores pueden aparecer

    en aquellos lugares donde actan sobre las clulas y los tejidos ciertos

    estmulos crnicos o externos. Otros agentes fsicos cancergenos son las

    radiaciones, que en animales de experimentacin provocan primero radio

    dermatitis y despus carcinomas cutneos, as como carcinoma de tiroides.

  • 5

    Los rayos ultravioleta, pueden producir tumores en regiones cutneas

    despigmentadas y de pelo escaso (Runnells, Monlua, Monlux, 1984).

    La teora vrica en la gnesis de los tumores ha alcanzado una gran

    importancia en el momento actual, habindose llegado al conocimiento de un

    abundante nmero de virus oncognicos (papiloma virus, herpes virus y

    particularmente retrovirus) (Runnells, Monlua, Monlux, 1984).

    Entre los factores endgenos (predisponentes) que pueden originar tumores,

    debemos citar a las siguientes.

    Hormonas. El cncer de mama, es posible que estn favorecidos por

    esteroides hormonales femeninos (estrgeno), ya que experimentalmente se

    ha observado que la ovariectoma precoz reduce ostensiblemente la

    aparicin de tumores de mama por anular la fuente de estrgenos (Cheville,

    1980).

    Herencia. Maude Slye, 1996 realiz investigaciones profundas en el campo

    de la gentica y su relacin con las neoplasias, en ratones del laboratorio y

    concluyo que la susceptibilidad a los tumores estaba asociada con un factor

    mendeliano recesivo simple (Cheville, 1980).

  • 6

    Edad. La incidencia de los tumores, as como sus tipos, est estrechamente

    asociado con la edad del individuo. Los tumores son mucho ms frecuentes,

    en individuos, de edad avanzada, por tener un periodo de incubacin muy

    largo (Cheville, 1980).

    El tipo de tumor varia, en cierta forma, con la edad del individuo. Los

    sarcomas se observan con ms frecuencia en individuos ms jvenes en

    tanto que los carcinomas se encuentran ms en animales de mayor edad

    (Cheville, 1980).

    Color. Es un factor en los animales de piel blanca (Cheville, 1980).

    Sexo. Los tumores son tan comunes en el macho como en las hembras. Sin

    embargo hay una diferencia en cuanto a la incidencia en los diferentes

    rganos, especialmente en los rganos genitales (Cheville, 1980).

    2.1.3 Denominacin de los tumores

    En general los tumores se designan aadiendo al nombre de la clula o del

    tejido que est afectando, al sufijo -oma, que significan tumor; as el tumor

    benigno del tejido fibroso recibe el nombre de fibroma. Los tumores malignos

    del tejido epitelial se designan el sufijo -carcinomas, mientras que los

  • 7

    tumores malignos de los tejidos conectivos se designan el sufijo sarcomas

    (Gazquez, 1991).

    Ahora bien, no siempre en los tumores est representado un solo tipo celular.

    En los casos en que hay ms de uno se obtiene su denominacin uniendo

    los trminos races de los elementos a que pertenecen, situado en primer

    lugar el tejido neoplsico que este menos representado (Gazquez, 1991)

    2.1.4. Constitucin de los tumores

    Los tumores estn formados por dos partes: una, de tejido propio y de cuya

    proliferacin celular resulta la masa neoplsica propiamente dicha,

    denominada parnquima y otra, de un tejido conectivo vascular procedente

    del crecimiento de los constituyentes normales del organismo y cuya misin

    es suministrar materiales nutritivos a las clulas tumorales, recibe el nombre

    de estroma que es independiente del parnquima (Gazquez, 1991).

    Las clulas neoplsicas manifiestan diferentes morfologas (anisomorfia),

    tienen diversos dimetros (anisocitosis) o bien tienen diferentes tamaos de

    ncleos (anisocariosis). As mismo las clulas neoplsicas tienen un diverso

    comportamiento con respecto a los colorante hipocrmicas e hipercrmicas

    (Gazquez, 1991).

  • 8

    2.1.5. Apariencia macroscpica

    Conviene recordar que los neoplasmas no tienen forma, tamao, color o

    consistencia definidos. Varios factores, tales como la localizacin, el tipo de

    tumor, el suministro sanguneo, grado de desarrollo y tiempo que tiene

    presente el tumor, influyen sobre la aparicin macroscpica del neoplasma

    (Runnells, Monlua, Monlux, 1984).

    Bsicamente un tumor puede crecer hacia fuera (exoftico) o hacia dentro

    (endoftico) de los rganos donde asienta (Wilkinson, Harvey, 1996).

    2.1.6. Apariencia microscpica

    Los tumores estn compuestos de clulas igual que cualquier otro tejido del

    organismo. Estas clulas se asemejan a las clulas del tejido del cual se ha

    derivado el tumor. La apariencia de estas clulas vara en el grado de

    malignidad del tumor. Cuando el tumor es benigno se asemejan las clulas al

    tipo de clula adulta. Si es maligno el tumor, ms se aparecen al tipo de

    clula inmadura o embrionaria. Cuando una clula tumoral es maligna, su

    estructura es de tipo embrionario y a este cambio se le llama anaplasia por el

    cambio de la estructura celular; existen varios factores que indican el grado

    presente de anaplasia: Agrandamiento del ncleo, mltiples ncleos en una

  • 9

    clula, agrandamiento de los nuclolos, numero aumentado de figuras

    mitticas (Runnells, Monlua, Monlux, 1984).

    2.1.7. Crecimiento de los tumores

    Por regla general, los tumores benignos crecen lentamente, mientras que los

    malignos lo hacen con rapidez. El crecimiento puede ser de dos formas: por

    expansin o por infiltracin (Runnells, Monlua, Monlux, 1984).

    El crecimiento por expansin, es caracterstico de los tumores benignos y

    consiste en un aumento lento de su masa en todas direcciones que aplastan

    a los tejidos adyacentes. En ocasiones, los tejidos circundantes reaccionan

    formando una cpsula que delimita el tumor y no se reproduce a distancia.

    El crecimiento por infiltracin, es caracterstico de los tumores malignos y

    consiste en la invasin y destruccin de los tejidos vecinos normales

    (Runnells, Monlua, Monlux, 1984).

    2.1.8. Propagacin de tumores a travs del cuerpo

    Existen tres formas importantes por las cuales las clulas malignas pueden

    propagarse en el cuerpo y son: infiltracin, metstasis e implantacin.

  • 10

    2.1.8.1. Infiltracin

    Es el mtodo de propagacin ms comn de las clulas malignas. Existe una

    tendencia en las clulas a crecer a lo largo de la lnea de menor resistencia,

    y por lo tanto tienden a propagarse por el tejido conjuntivo laxo y se

    entrelazan con el tejido parenquimatoso e intersticial del tejido

    comprometido. El tumor tambin puede invadir los vasos sanguneos y

    linfticos, extendindose a grandes distancias, creciendo a lo largo del lumen

    del vaso sanguneo (Runnells, Monlua, Monlux, 1984).

    2.1.8.2. Metstasis

    Consiste en el transporte de clulas tumorales del lugar donde se asienta el

    tumor a cualquier parte del cuerpo, por va sangunea o linftica, dando lugar

    a la formacin de una masa tumoral con las mismas caractersticas del tumor

    primitivo en un lugar alejado de su implantacin original (Runnells, Monlua,

    Monlux, 1984).

    Para que exista una metstasis es necesario que las clulas tumorales se

    desprendan del tumor primitivo y posteriormente realizarse el transporte, bien

    activo o pasivo a travs de las diferentes vas (Runnells, Monlua, Monlux,

    1984).

  • 11

    2.1.8.3 Implantacin

    La implantacin de un neoplasma es el traspaso de las clulas tumorales de

    una superficie serosa o mucosa a otra por contacto directo (Runnells,

    Monlua, Monlux, 1984)

    2.1.9 Frecuencia y localizacin de los tumores en el perro

    De todos los animales domsticos, los tumores se dan con mayor frecuencia

    en el perro. Segn recientes estudios los tumores benignos y malignos

    afectan en total al 1,1% de los perros. La raza bxer es la ms predisponerte

    a sufrir enfermedades tumorales, especialmente de tipo mesenquimatosos.

    En cuanto a la localizacin, en el perro ocupan la piel y el tejido subcutneo

    en primer lugar (67,6%); seguido de la glndula mamaria (15,1%) y de otros

    rganos (17,3%) (Fenner, 1989).

    Generalmente la mayora de los tumores cutneos o tumores de la piel,

    ocurren en perros de edades comprendidas entre los 6-14 aos con la

    incidencia mxima a los 9-10 aos respectivamente. Sin embargo, algunos

    tumores aparecen en animales jvenes tal como el papiloma infeccioso

    bucal y el histiocitoma del perro (Wilkinson, Harvey, 1996).

  • 12

    2.1.10. Clasificacin de tumores cutneos

    Los tumores de piel se clasifican de acuerdo a su comportamiento (benigno

    o maligno) y de acuerdo al origen de la clula tumoral en la piel.

    2.1.10.1. Por su comportamiento

    Los tumores pueden tener comportamiento benigno (tumor benigno) o

    maligno (tumor maligno llamado cncer).

    a. Tumor Benigno En general no producen ningn dao significativo ya que

    su proliferacin es muy lenta, clulas anormales permanecen agrupadas

    en una masa nica, encapsuladas y cuya curacin es posible mediante la

    extraccin de dicho tumor (Chvez, 2004).

    b. Tumor Maligno Tambin llamado cncer o canceroso estas clulas son

    capaces de invadir tejidos vecinos en forma violenta para entrar en el

    torrente sanguneo o/y en los vasos linfticos invadir tejidos lejanos y

    formar tumores malignos secundarios o metstasis a lugares muy

    distantes (Chvez, 2004).

  • 13

    2.1.10.2. Por su origen

    Tenemos los siguientes:

    a. Adenoma Tumor benigno del epitelio glandular, pueden ser masas

    solitarias, de dimetro variable, redondas, periformes, la mayora de las

    veces libres de los tejidos profundos, frecuentemente se ulceran, en estos

    casos sobrevienen las infecciones secundarias (Chvez, 2004).

    b. Adenocarcinomas Tumor maligno del epitelio glandular, pueden ser

    masas mltiples, de dimetro variable, redondas o nodulares,

    generalmente de consistencia dura, frecuentemente se ulceran, en estos

    casos sobrevienen las infecciones secundarias (Davies, 1985)

    c. Angioma Tumor benigno formado por pequeos vasos sanguneos

    (Hemangioma) o linfticos (linfangioma) bien desarrollados y funcionales

    (Arquero, 2002).

    d. Basalioma Tumor que se origina a partir del epitelio basal de la piel.

    Son masas solitarias, bien delimitadas, alopcicas e intradrmica,

    tpicamente alojada sobre cabeza, cuello, hombros y variable en

    tamao (Helton, 2006).

  • 14

    e. Carcinoma de clulas escamosas El carcinoma es un tumor maligno

    comn que afecta la piel de perros y con mayor frecuencia la de los

    gatos. El inicio se hace a partir de alteracin en los queratinocitos. Las

    reas frecuentemente afectadas son las zonas no pigmentadas de la piel

    y se considera la exposicin solar como una de las etiologas que

    predisponen su aparicin (Mascotia, 2000). Se han reportado casos de

    enfermedades autoinmunes como lupus eritematoso discoide que pueden

    evolucionar al carcinoma de clulas escamosas (Centro de estudios

    avanzados en Medicina Veterinaria, 2005). Aunque no est clara, la

    etiologa del carcinoma de clulas escamosas (CCE) puede ser la

    induccin solar o, en raras ocasiones, se asocia a lesiones trmicas

    severa previa de la epidermis, congelacin o infecciones crnicas

    (Helton, 2006).

    f. Carcinoma de clulas bsales Son tumores epiteliales malignos que se

    inician como ppulas que crecen en profundidad que sangran fcilmente.

    Son de crecimiento lento y se relaciona con la exposicin de reas

    hipopigmentadas a la luz solar. La predisposicin racial en perros

    comprende a los Spaniel, Shetland shep dog, Siberian Husky y Poodle

    (Centro de estudios avanzados en Medicina Veterinaria, 2005).

  • 15

    g. Fibroma Los fibromas son tumores benignos de clulas de tejido fibroso

    o conectivo, que pueden ocurrir en la dermis o en el tejido subcutneo,

    tanto los aspirados con aguja fina y las impresiones proporciona

    suficiente material para su anlisis. Estas masas pueden ulcerarse y

    generalmente son duras, redondas o nodulares (Chvez, 2004).

    h. Fibrosarcoma El Fibrosarcoma es un tumor de clulas de origen

    mesenquimatoso, que se ubica principalmente a nivel cutneo y

    subcutneo; en caninos de edad temprana (4-6meses).

    Macroscrpicamente son de tamao variable con elevada anisocariosis,

    no estn delimitados por una cpsula y tienen consistencia firme. Cuando

    se proyecta sobre una superficie, tienden a ulcerarse y con mucha

    frecuencia presentando infecciones secundarias (Chvez, 2004).

    i. Granuloma venreo Esta enfermedad que se presenta con

    ulceraciones que afecta a los perros, se caracteriza por ser una masa

    blanda y de fcil disgregacin (friable), que se ubica en las mucosas de

    los animales, tambin se puede encontrar en piel y en otros rganos

    internos. De transmisin principalmente sexual, y distribuida mayormente

    en la poblacin de perros vagos o callejeros (Mascotia, 2007).

  • 16

    j. Histiocitoma El histiocitoma cutneo es un neoplasma benigna de las

    clulas mononucleares que deriva de las clulas de Langerhans

    epiteliales. Es comn en los perros y la incidencia ms alta se ha

    observado en los perros adultos jvenes de menos de 4 aos de edad

    (Medleau, Hnilica, 2007). Se presenta generalmente como un ndulo

    nico (aunque puede ser mltiple), de crecimiento rpido, alopcico,

    eritematoso. Una de las principales caractersticas es que presenta

    regresin espontnea. Se puede presentar en cualquier lugar de la piel,

    pero es ms comn en la cabeza (Chvez, 2004).

    k. Hematoma de la oreja Esta enfermedad est causada por la rotura

    traumtica de los vasos y los capilares dentro de la oreja. Cuando el

    animal sacude la cabeza con fuerza, la accin centrifuga y el movimiento

    de la oreja hace que se rompan los vasos. Entonces la sangre se

    derrama en el espacio que hay entre la piel y el cartlago, crendose as

    un hematoma. El hematoma puede ser pequeo pero, generalmente, las

    sacudidas persistentes de la cabeza producen hematomas que se

    extiende por toda la oreja. Normalmente, los hematomas son unilaterales,

    pero pueden desarrollarse lesiones bilaterales. Con el tiempo, los

    hematomas se solidifican, convirtindose en masas firmes (Medleau,

    Hnilica, 2007).

  • 17

    l. Papiloma (Tumor benigno del epitelio Escamoso) Los papilomas

    reconocidos tambin con el nombre de verrugas, son neoplasias

    benignas que afectan al epitelio escamoso. Pueden ser mltiples,

    pedunculados o de forma ssil. Son causados por un virus filtrante

    Moletor bucates el cual es un virus de filamento doble de DNA y se

    presenta en la cavidad bucal (Gazquez, 1991). Los papilomas se

    transmiten por contacto directo e indirecto entre mascotas, como por

    ejemplo cuando un animal afectado comparte sus recipientes para el

    alimento o para beber agua. El periodo de incubacin de Moletor

    bucates vara de 1 a 2 meses. Si bien, ya fue mencionado que los

    papilomas cutneos caninos suelen ser benignos, a veces exhiben

    transformacin en carcinomas de clulas escamosas (Centro de estudios

    avanzados en Medicina Veterinaria, 2005).

    m. Lipoma Es un tumor benigno comn de clulas grasas maduras. No hay

    predisposicin de raza pero se menciona al Labrador, Doberman,

    Schnauzer, Cocker spaniel, Dachshund y Weimaraner como

    predisponentes. Generalmente es una masa redonda, solitaria, suave,

    bien delimitada y pueden aparecer en cualquier lugar del cuerpo

    (Chvez, 2004).

  • 18

    n. Liposarcomas Un Liposarcoma es un tumor maligno de clulas grasas

    primitivas subcutneas. Los liposarcomas son invasivos localmente y

    pueden hacer metstazis a los pulmones, el hgado, el bazo, o los

    huesos. Son raros en los perros y los gatos. Los animales ancianos

    tienen predisposicin. Los liposarcomas son masas solitarias, poco

    delimitada, blanda o firmes, cuyo dimetro varia de 0.5 20cm (Medleau,

    Hnilica, 2007).

    o. Linfoma cutneo Es un tumor de tejido linfoide, se presenta en los

    ganglios linfticos, es producido por un linfocito T que normalmente

    recircula por la piel y se vuelve maligno (Rhodes, 2006). La afectacin

    exclusiva de la piel en el linfoma es muy rara en el perro. Las

    manifestaciones cutneas son diversas y multifocales con o sin afectacin

    sistmica (Mascotia, 2007).

    p. Linfosarcoma Es una neoplasia maligna que puede originarse a partir

    de los linfocitos B o T. Es poco comn en perros y en los gatos, y afectan

    ms a los animales ancianos. Generalmente aparecen ndulos cutneos

    o subcutneos, mltiples, firmes, que pueden ser alopcicos y se ulceran

    con frecuencia (Medleau, Hnilica, 2007).

  • 19

    q. Mastocitoma Los mastocitos son clulas que sintetizan y almacenan

    histamina y que se encuentran en la mayora de los tejidos del cuerpo,

    particularmente por debajo de las superficies epiteliales, cavidad serosas

    y alrededor de los vasos sanguneos. Es una respuesta alrgica, un

    alergeno estimula la liberacin de anticuerpos, las cuales se unen a la

    superficie de los mastocitos El mastocitoma o tumores de clulas

    cebadas son comunes en perros y gatos que presentaron grandes

    grnulos de basfilos (Centro de estudios avanzados en Medicina

    Veterinaria, 2005).

    r. Melanoma Melanosarcoma Son tumores malignos, compuesto por

    melanocitos que representan alrededor del 6% de los tumores cutneos

    del canino, en perros afecta principalmente a animales maduros entre los

    7 y 14 aos de edad, se menciona que es ms comn en el Scottish

    Terrier, el Aireadle y el Cocker Spaniel y en otras razas con piel muy

    pigmentada, no hay predisposicin sexual. Macroscpicamente pueden

    aparecer como placas planas o pequeas deformaciones redondeadas de

    hasta 2 cm de dimetro, situadas dentro de la dermis. Pueden tener una

    coloracin que va desde el marrn oscuro al negro dependiendo de la

    cantidad de melanina, pudiendo ser blancos o amelanticos tambin, por

    lo general estn bien definidos. Se lo observa con mayor frecuencia en la

    cabeza, principalmente en los prpados donde su apariencia es

  • 20

    verrugosa, se lo observa tambin en el tronco y en las extremidades

    (Gazquez, 1991).

    Los tumores malignos pueden alcanzar un gran tamao y con frecuencia

    se ulceran.

    s. Mixomas y mixosarcomas Tumor formado por clulas del conjuntivo

    primitivo, se presenta ms en animales adultos, su distribucin en el

    organismo es muy diversa, aunque con mayor frecuencia se detecta en la

    piel. Los mixomas tienen un crecimiento expansivo, al contrario que los

    mixosarcomas que es infiltrante; tanto uno como otro se manifiestan de

    un color gris o blanco y son de consistencia viscosa. Los mixosarcomas,

    con mayor frecuencia, suelen producir metstasis. En caso de los

    mixomas muestran una cpsula desde la que se emiten trabculas hacia

    el interior, formando una estructura seudolobular. El mixosarcoma, por su

    carcter infiltrativo, no presenta cpsula y el estroma se expande

    irregularmente en todas la direcciones. El parnquima de estas

    neoplasias se constituye por clulas estrelladas, vacuoladas y basfilicas,

    de diferente grado de desdiferenciacin (Gazquez, 1991).

    En el caso de mixosarcoma tienden a ser esfricas, con ncleos

    hipercromticos y un alto ndice mittico. Los mixomas manifiestan una

  • 21

    variedad telangiectsica, denominada mixoma erctil que contiene zonas

    de tejidos mixomatoso (Gazquez, 1991).

    t. Sarcoma Constituye un grupo importante de neoplasias en la que el

    comn denominador son clulas mesenquimatosas grandes, pleomorficos

    cuya histiogenesis, no se puede determinar fcilmente. Se desarrolla en

    el tejido fibroso, graso, muscular y sinovial, se presenta como una

    tumefaccin carnosa (Wanke, Gobello, 2006).

    u. Tumor venreo transmisible (TVT) o sarcoma de Sticker Es una

    neoplasia especfica del perro y se encuentra principalmente en los

    rganos genitales externos de la hembra y del macho. La transmisin se

    produce durante el coito o el contacto social debido a la transferencia

    directa de las clulas neoplsicas (Wanke, Gobello, 2006).

    2.1.11. Lesiones seudotumorales e inflamatorias cutneas frecuentes

    2.1.11.1. Nevus o lunares

    Los nevus son manchas cutneas conjuntas benignas y rara vez puede

    volverse maligno, que pueden provenir de cualquier componente de la piel o

    de combinacin de varios de ellos. Este efecto del desarrollo toma la forma

  • 22

    de la hiperplasia de los tejidos afectados, presentando cambios de color,

    tamao, textura (Chvez, 2004).

    2.1.11.2. Quiste Epidrmico

    Es una tumoracin benigna de la piel, de origen ectodrmico, que se localiza

    en posicin intercutnea o subcutnea. Estos quistes pueden localizarse en

    cualquier parte del cuerpo pero predominan en cabeza y cuello (Medleau,

    Hnilica, 2007).

    2.1.11.3. Inflamacin granulomatosa

    Aparecen en forma de ndulos firmes nicos o mltiples y generalmente no

    pruriginoso, raras veces con fstulas de drenaje. Las lesiones se desarrollan

    lentamente y pueden aparecer en cualquier parte del cuerpo (Medleau,

    Hnilica, 2007).

    2.1.11.4. Inflamacin piogranulomatosa

    Se manifiesta por ppulas y ndulos firmes no pruriginosos y no dolorosos

    que se vuelve alopcicos o ulcerados. Las lesiones pueden aparecer en

    cualquier parte del cuerpo (Medleau, Hnilica, 2007).

  • 23

    2.2. CITOLOGA DE MASAS NEOPLSICAS E INFLAMATORIAS

    2.2.1. Definicin

    La citologa es la evaluacin microscpica de las clulas individuales de un

    tejido, sin contemplar la estructura arquitectural del tejido como es el caso de

    la histopatologa (Arquero,2002)

    El diagnostico citolgico tiene muchas ventajas. Se requiere de mnimo

    equipo, por lo que la citologa es posible en cualquier prctica.

    Una conclusin citolgica casi inmediata elimina la espera de uno o ms das

    para el diagnostico histolgico, los aspirados con aguja fina tiene una

    invasividad mnima y escaso estrs para el paciente; la citologa puede

    ahorrar el costo de la anestesia y la ciruga (Tvedten, 2002).

    2.2.2 Citologa normal de piel y tejidos blandos

    La piel est formada por dos capas, la epidermis y la dermis: La epidermis es un

    epitelio plano estratificado con queratina, compuesto por las siguientes clulas:

  • 24

    a. Estrato basal o germinal. Est formado por una sola capa de clulas

    columnares pequeas, de citoplasma basoflico y ncleos ovoides hiper-

    cromticos (Arquero,2002)

    b. Estrato espinoso Aqu las clulas son polidricas, de citoplasma basoflico y

    se encuentran firmemente unidas unas a otras por puentes intercelulares

    (Arquero,2002)

    c. Estrato granuloso Conforme las clulas avanzan hacia la superficie de la piel

    se aplanan, el ncleo se hace vesicular, disminuye la relacin ncleo-

    citoplasma y se observan en ste grnulos de queratohialina (Arquero,2002)

    d. Estrato lcido Es una capa poco definida en la que las clulas se degeneran

    y el ncleo desaparece, el citoplasma tambin contiene queratohialina

    (Arquero,2002)

    e. Estrato crneo Es la capa ms superficial de la epidermis, en la que las

    clulas muertas son reemplazadas por escamas de queratina (Arquero,2002)

    f. Melanocitos Son clulas pequeas de citoplasma claro con grnulos de

    pigmento. Se encuentran entre las clulas de la capa germinal

    (Arquero,2002)

  • 25

    La dermis contiene fibroblastos, fibrocitos, histiocitos, clulas cebadas y

    clulas adiposas, as como folculos pilosos, glndulas sebceas y glndulas

    sudorparas:

    a. Glndulas sebceas Estn formadas por clulas cbicas pequeas, que dan

    lugar a clulas ms grandes que contienen grnulos lipidos en su citoplasma

    (Arquero,2002)

    b. Glndulas sudorparas Son glndulas tubulares cubiertas por una sola capa de

    clulas cuboidales que pueden ser serosas o mucosas (Arquero,2002)

    La piel se ve afectada por diferentes agentes infecciosos tales como virus, bacterias,

    hongos y parsitos, adems de problemas nutricionales, endocrinos, metablicos,

    congnitos, traumticos y neoplsicos. La patologa infecciosa y neoplsica es la que

    se puede diagnosticar ms fcilmente a travs de citologa (Arquero,2002)

    En la citologa de procesos inflamatorios de la piel se observan neutrfilos,

    macrfagos, clulas epiteliales de los diferentes estratos de epidermis y

    detritus celulares; en ocasiones se identifica al agente etiolgico, ya sea bacteriano,

    viral, micotico o parasitario (Arquero, 2002).

  • 26

    2.2.3. Tcnicas citolgicas

    2.2.3.1. Preparacin del extendido El objetivo principal es obtener un

    nmero importante de clulas intactas bien teidas que reflejen la

    composicin de la masa (fig 1).

    Un aspirado con aguja fina solo necesita obtener una o poca cantidad de

    gotas de liquido para extender como un frtis de sangre (Tvedten, 2002).

    Muchas combinaciones de jeringas y agujas se pueden utilizar para realizar

    este procedimiento. Para aspirar los tejidos ms blandos se emplean las

    agujas y jeringas ms pequeas. Los autores prefieren una aguja calibre 23

    acoplada a una jeringa de 3cc o de calibre 22 y jeringa de 6cc. Sin importar

    las combinaciones empleadas, se inserta la aguja con cuidado en el centro

    lesional (Tvedten, 2002).

    Se retrae el mbolo 1-2 ml (o una cantidad comparable con las jeringas mas

    grandes) para obtener presin negativa dentro de la jeringa. Se libera la

    presin negativa y se puede redirigir la aguja dentro de la lesin y repetir el

    proceso. Antes de retirar la aguja desde la lesin, la presin negativa se

    libera por completo, de manera que la muestra recolectada permanezca

    dentro de la aguja o en su cono. Luego se desacopla la aguja y se carga aire

  • 27

    con la jeringa. La aguja se vuelve a colocar sobre la jeringa y se expulsan

    los contenidos sobre un portaobjetos limpio. El procedimiento puede

    repetirse para recolectar material desde diversas reas de la lesin, si esta

    tiene tamao suficiente (Helton, 2006).

    El frtis debe tener un rea delgada donde las clulas se depositen en forma

    plana y exponer una superficie amplia para visualizar. Si el frtis es grueso,

    las clulas se ubican ms hacia arriba en el extendido y tienen un dimetro

    menor. Las clulas en reas gruesas son ms altas y as se tien ms

    oscuras (Tvedten, 2002).

    La identificacin del paciente y la fecha deben anotarse en el portaobjetos.

    Se necesita la descripcin de un sitio para interpretar los resultados, en

    especial si se muestrean mltiples sitios (Lynch, Millor, 1977).

    2.2.3.2. Tinciones La mayora de las prcticas solo necesitan la tincin de

    Wright modificado y NAN. La tincin de Wright tiene los colores azul y

    naranja. Tien de azul o prpura las estructuras cidas como los cidos

    nucleicos (ADN y ARN) en los ncleos y las estructuras bsicas como

    protena (por ej. hemoglobina en los eritrocitos) de color naranja. El pH

    cambia en el agua de enjuague o la muestra puede afectar las caractersticas

    tintoriales (Chvez, 2004).

  • 28

    La Tincin Diff-Quik es popular debido a que uno puede ajustar el color de

    las clulas con facilidad. Las tinciones del azul y naranja estn en tarros

    separados, y aumentados o disminuyendo el nmero de veces que uno

    sumerja el extendido en un color, la intensidad del azul o naranja aumentar

    o disminuir (Chvez, 2004)

    FIGURA 1. Composicin de la masa tumoral. Diferentes poblaciones celulares extradas de diferentes sitios. Las clulas de la masa (rea rayada) son representativas y diagnosticas. Las muestras de la superficie pueden ser solo un exudado sptico y necrtico. Las clulas epiteliales hiperplsicas (EH) de apariencia inmadura de borde de una ulcera pueden simular una carcinoma. El material de un centro necrtico (CN) puede representar solo desechos. Las clulas de un borde (B) pueden ser fibroblasto de la cpsula o una respuesta inflamatoria local. La grasa madura o sangre puede recolectarse de un tejido adyacente normal. (Tvedten, 2002).

    a. Tincin. DiffQuick Es una tincin panptica de tipo Romanovsky que

    nos permite diferenciar reas basfilas y acidfilas en una preparacin,

    para su estudio citolgico. Tiene como principal ventaja sobre otros tipos

    U L C E R A

  • 29

    de tinciones similares, la sencillez y la rapidez en su utilizacin. Adems,

    no es imprescindible filtrar los colorantes con regularidad (Chvez, 2004)

    b. - Materiales necesarios Se necesita la citologa realizada previamente,

    una solucin colorante cida, una solucin colorante bsica, una solucin

    fijadora y agua destilada (Tvedten, 2002).

    c. - Procedimiento tcnico Se coloca las soluciones colorantes cida y

    bsica y la fijadora cada una en un recipiente. La tincin es muy sencilla:

    se coge el porta objeto y se realizan 20 inmersiones en cada una de las

    soluciones empezando por la cida, despus la bsica y por ltimo la

    fijadora, secando despus de cada una de ellas el porta objeto

    apoyndolo sobre papel de filtro para no contaminar la siguiente solucin.

    Finalmente se lava el porta objeto cuidadosamente con agua destilada

    para eliminar el exceso de colorante, se seca con papel de filtro y la

    citologa est lista para ser observada con microscopio ptico (Tvedten,

    2002).

    2.2.3.3. Microscopio

    Un microscopio bien mantenido y de buena calidad es necesario para la

    citologa. Un microscopio binocular es ms cmodo para largos periodos de

    visin (Tvedten, 2002).

  • 30

    La observacin de la muestra debe realizarse de manera lgica y

    estandarizada. Toda la muestra debe ser observada microscpicamente con

    el objetivo 10X, con esta magnificacin se pueden detectar caractersticas

    anormales como grupos de clulas representativas para el estudio (las zonas

    de clulas intactas y no distorsionadas a causa de la preparacin son las que

    deben ser elegidas), artefactos en la muestra o de la tincin y determinar si la

    muestra y tincin son adecuadas. Una vez identificadas las reas con

    celularidad nica o aumentada y son elegidas las zonas a estudiar se debe

    observar con el objetivo 40X donde se puede distinguir la composicin

    celular y la presencia de microorganismos (Memoria de curso de oncolgia,

    2001).

    El objetivo de 100X se utiliza para observar la morfologa celular, los detalles

    citoplasmticos y nucleares y para la confirmacin de la presencia de ciertos

    microorganismos. Lo primero es reconocer si las clulas del tejido

    recolectadas son normales o anormales para ese tejido en particular

    (Memoria de curso de oncolgia, 2001).

    Si es anormal se debe de identificar la presencia y tipo de clulas

    inflamatorias, ya que en muchos procesos inflamatorios, las clulas pueden

    sufrir cambios morfolgicos (Memoria de curso de oncolgia, 2001).

  • 31

    Si el proceso no es inflamatorio, se puede sospechar de una neoplasia y se

    debe determinar el tipo celular (epitelial, mesenquimal o de clulas discretas),

    una vez clasificado el tipo tisular, se consideran los criterios de malignidad

    con el fin de clasificar el proceso como benigno o maligno (Memoria de curso

    de oncolgia, 2001).

    2.2.4. Conclusiones citolgicas

    La composicin usual de una masa es una proliferacin de clulas tisulares,

    una acumulacin de clulas inflamatorias o ambas a la vez. Las masas

    miscelneas incluyen hematoma, quistes o reas focales de necrosis. A

    continuacin se detallan las caractersticas de cada tipo y sus variantes y se

    resumen en la figura 2 (Chvez, 2004).

    2.2.4.1. Masas inflamatorias

    La inflamacin se diagnostica con mayor frecuencia mediante la citologa que

    la neoplasia. El diagnostico citolgico solo requiere un nmero adecuado de

    clulas inflamatorias. Este vara con la muestra. Una clula plasmtica rara y

    macrfagos fagocticos aspirados del ojo indican inflamacin, mientras que

    en la pus hay miles de neutrfilos (Tvedten, 2002).

  • 32

    FIGURA 2. Abordaje citolgico general. (Tvedten, 2002).

    a. Inflamacin neutroflica Los infiltrados neutroflicos (por ej. exudacin,

    supuracin, formacin de abscesos e inflamacin purulenta) son tan

    frecuentes que son casi sinnimos de inflamacin. Los neutrfilos son los

    (GB) glbulos blancos ms mviles y los primeros en infiltrar un rea.

    Algunos llaman a la inflamacin neutroflica inflamacin aguda aunque

    los neutrfilos puede estar presente en la inflamacin crnica pero activa.

    Por ello termino agudo, puede referirse al tipo celular (predominio de

    neutrfilos) y no al intervalo de tiempo. La pus est compuesto en su

    mayora por neutrfilos en una matriz proteincea laxa de desechos

  • 33

    celulares, por eso estas clulas son ms fciles de obtener de un

    aspirado o impronta (Tvedten, 2002).

    b. Inflamacin granulomatosa y piogranulomatosa Cuando la poblacin

    inflamatoria es principalmente por macrfagos (granulomatosa) o una

    mezcla de neutrfilos y macrfagos (piogranulomatosa), se debe

    considerar un agente etiolgico ms grande que una bacteria (por ej.

    hongos o cuerpos extraos). Si no se encuentra un agente, solo se llega

    a una conclusin morfolgica de inflamacin piogranulomatosa o

    granulomatosa (Tvedten, 2002).

    c. Inflamacin crnica Las lesiones inflamatorias crnicas que carecen de

    la abundancia de macrfagos descriptos en la categora granulomatosa

    tienen una mezcla de clulas inflamatorias, clulas plasmticas, linfocitos,

    macrfagos, neutrfilos y fibroblastos ocasionales (Tvedten, 2002).

    d. Inflamacin eosinoflica La inflamacin suele clasificar por el tipo de GB

    ms numeroso. Debido a que los eosinfilos en general son raros, los

    frotis eosinoflicos necesitan superar solo el 20-30% de una poblacin

    significativamente grande de GB para sealar inflamacin eosinoflica

    (Tvedten, 2002).

  • 34

    e. Inflamacin linfoctica Una masa o elevacin pequea de una

    superficie puede consistir en linfocitos bien diferenciados y un nmero

    variable de clulas plasmticas. Esto se producen el rea nasofarngea,

    vagina e intestino, donde no se debe esperar un linfondulo o un tejido

    linfoideo focal (Tvedten, 2002).

    2.2.4.2. Masas proliferativas (neoplasias)

    a. Decisiones iniciales Las principales conclusiones iniciales son: 1) los

    frtis representan la masa y 2) la lesin es una proliferacin no

    inflamatoria de clulas tisulares (por ej. neoplasia benigna, neoplasia

    maligna, hiperplasia focal o tejido normal. Estas conclusiones deben

    hacerse previo a la consideracin del tipo de tejido o la malignidad

    citolgica de la masa (Tvedten, 2002).

    b. Tipificacin celular La forma de las clulas, la asociacin con otras

    clulas, en especial en fragmentos de tejidos, y las caractersticas

    citoplasmticas se usan para indicar el tejido de origen. No espere

    identificar de rutina tipos celulares exactos por citologa, mejor determine

    si es un tumor epitelial, mesenquimtico (es decir, tejido conectivo,

    clulas en forma de huso) o de clulas redondas. La informacin adicional

  • 35

    como la ubicacin (por ej. tumor mamario) a menudo sugiere un

    diagnostico especifico (Tvedten, 2002).

    Algunas neoplasias muy malignas por ejemplo pueden carecer de

    caractersticas de diferenciacin para identificar el tipo celular, pero la

    conclusin citolgica de neoplasia muy maligna-tipo no determinado es

    suficiente. Una masa puede estar compuesto por mltiples tipos celulares

    (por ej., una masa epitelial con frecuencia tiene estroma de tejido

    conectivo). El melanoma es una neoplasia que puede tener apariencia de

    tejido conectivo epitelial (Tvedten, 2002).

    Las clulas epiteliales estn mejor indicados por las uniones celulares

    distintivas (Fig. 3). Las clulas epiteliales forman superficies ms fuertes

    con fuertes uniones celulares que persisten hasta un grado variable en el

    frtis. Las clulas epiteliales bien diferenciadas pueden retener formas

    escamosas, polidricas, cuboides o cilndricas y ciliaris. El material

    secretor como mucus, grnulos o vacuolas sugiere epitelio glandular

    (Tvedten, 2002).

    Las clulas se clasifican como mesenquimticas (por ej., tejido fibroso,

    seo, muscular o conectivo neural) principalmente por la forma elongada

    semejante a una cola o extensiones cnicas (vase fig. 3). Las clulas

  • 36

    estrelladas tienen tres o ms colas. Los ncleos tienden a ser ms

    ovales. Las clulas mesenquimticas suelen ser individualizadas o

    discretas, carentes de bordes celulares bien definidos (Tvedten, 2002).

    La categora de clulas redondas tradicionalmente incluye cuatro tumores

    especficos pero debe comprender tambin algunos tumores poco

    diferenciados. Los cuatro tumores en esta categora son: Linfosarcoma, y

    otra neoplasias de clulas hematopoyticas, tumor de clulas cebadas,

    tumor venreo transmisible e Histiocitoma canino. Sus caractersticas

    estn ilustradas en la figura 4 y se describe ms adelante (Tvedten,

    2002).

    FIGURA 3. Ejemplos benignos y malignos de clulas epiteliales y mesenquimticas

    (Tvedten, 2002).

    Sarcoma Benigna

    Mesenquimtica

    Benigna Carcinoma

  • 37

    Histiocitoma

    c. Criterio de Malignidad Despus de decidir que la poblacin citolgica

    representa una masa proliferativa, se evala el criterio maligno.

    La malignidad es indicada mejor por la variabilidad nuclear. La variacin

    en el tamao nuclear (anisocariosis) y tamaos nucleares muy grandes

    son obvios aun en frtis de mala calidad. Cuando ms grande es el

    tamao nuclear y la anisocariosis, mayor es la evidencia de malignidad.

    Las clulas anaplsicas tienden a tener ncleos grandes y citoplasmas

    mnimos, resultando en una proporcin ncleo:citoplasma (N:C) alta. La

    rara variacin en la forma nuclear, como con los seudpodos y las

    convoluciones marcadas, es evidencia fuerte. La polinucleacin en las

    clulas que no suelen ser multinucleadas ocurre en clulas malignas y

    reactivas. El moldeado de un ncleo alrededor del ncleo de una clula

    adyacente es evidencia de que las clulas crecieron una al lado de la otra

    ms que un criterio fuerte de malignidad (Tvedten, 2002).

    FIGURA 4. Tumores de clulas redondas (Tvedten, 2002).

    Tumor venreo

    transmisible

    Linfocito pequeo para comparacin

    Linfosarcoma Tumor de clula cebada

    Histiocitoma

  • 38

    Las clulas malignas suelen tener variacin nuclear marcada, como excesiva

    alteracin en la cantidad de nuclolos (desde uno a cinco o ms), gran

    tamao de ncleo (puede ser mayor que un Glbulo Rojo) (GR), variacin en

    la forma (aserrado, punteado fino o irregular) y alteracin en el tamao del

    nuclolo aun dentro del mismo ncleo (Chvez, 2004).

    Los ncleos malignos carecen de uniformidad entre ellos. Las clulas

    benignas tienen nmeros compatibles de nuclolos lisos, de tamao

    pequeo a moderado, redondos (Chvez, 2004).

    2.2.4.3. Diagnostico citolgico seleccionado

    a. Adenoma Son tumores de origen epitelial que tienden a exfoliar una gran

    cantidad de clulas en grupos o racimos, con una ligera a moderada

    anisocitosis, con moderado a abundante citoplasma, ncleos redondos con

    ligera a moderada anisocariosis, su cromatina es granular fina homognea a

    gruesa. No se observan nucleolos aparentes (Chvez, 2004).

    b. Tumor de glndulas perianales Las clulas del tumor de glndulas

    perianales (tumor hepatoide) se asemejan a los hepatocitos con una forma

    cuadrada o polidrica y abundante citoplasma. El citoplasma tiene

  • 39

    granularidad caracterstica con Tinsin de Wright. El ncleo redondo posee

    uno o dos nuclolos prominentes (Tvedten, 2002).

    c. Adenocarcinomas Son tumores de origen epitelial que presentan signos

    de malignidad, tienden a exfoliar una gran cantidad de clulas en grupos o

    racimos, con una elevada anisocitosis, con moderado a abundante

    citoplasma que puede ser espumoso y vacuolado, ncleos redondos con

    elevada anisocariosis, su cromatina es granular gruesa, reticulada o

    acordonada, presenta nuclolos en nmero variable y con ligeras a elevadas

    anisonucleolosis as como la presencia de nuclolos angulares y

    macronucleolos (Chvez, 2004).

    d. Basalioma Estas clulas tienen una relacin ncleo: citoplasma de 1:1 o

    1:2, son de citoplasma basoflico. Algunos tumores pueden ser muy

    melanocticos y podra ser difcil diferenciarlos de un melanoma. Muchos de

    los tumores citolgicamente diagnosticados como basaliomas han sido

    reclasificados como subtipo en tricoblastoma o carcinoma basal debido a su

    tendencia a formar folculos, o caractersticas infiltrativas (Helton, 2006).

    e. Carcinomas de clulas escamosas Este tipo de tumor usualmente

    exfolia un buen nmero de clulas para citologa. Los que son pobremente

    diferenciados se caracterizan por poseer clulas largas, con uno o ms

  • 40

    ncleos gigantes y polimorfos. Los bordes del citoplasma aparecen

    angulares por la produccin de queratina y en el interior de citoplasma se

    observa vacuolas. Clulas queratinizadas pequeas son comunes, estos son

    signos caractersticos que fortalecen nuestro diagnostico (Davies, 1985).

    Estas lesiones suelen contener abundantes clulas inflamatorias y bacterias

    que pueden confundir al clnico por lo que se recomienda limpiar siempre las

    lesiones antes de realizar la recoleccin de la muestra (Davies, 1985).

    f. Fibroma Las clulas de los fibromas son de tamao uniforme y de forma

    alargada o fusiforme, con un citoplasma moderado y generalmente de color

    basfilo plido con un ncleo en el centro de forma redondo u ovalado de

    tamao uniforme, su cromatina es granular fina o gruesa homognea, con

    presencia de nuclolos ocasionales muy pequeos (Chvez, 2004)

    g. Histiocitoma Un Histiocitoma puede ser un problema para el diagnostico

    citolgico debido a que la clulas son menos diferenciables que los otros

    tumores de clula redondas. Las clulas pueden exfoliar poco y puede

    existir inflamacin secundaria. Las clulas son redondas a ovales con bordes

    celulares diferenciables. En ocasiones tienen ncleos serrados sin nuclolo

    aparente. La cromatina es fina y la actividad mittica es mnima (Tvedten,

    2002

  • 41

    El citoplasma en la Tinsin de Wright es azul plido. La proporcin N:C varia

    y suele ser 1:1. Los linfosarcomas pueden tener un aspecto histioctico y

    confundirse con un Histiocitoma, por lo tanto se aconseja cuidado si la

    presentacin no es tpica para Histiocitoma (Tvedten, 2002).

    h. Hematoma/seroma Los hematomas son masas fluctuantes que

    contienen lquidos con cantidad variable de sangre en diversos estados de

    degeneracin. Los hematomas de formacin reciente tienen semejanza a

    frtis de sangre. Las plaquetas, si estn presentes sugieren sangrado activo

    debido a que estas se pierden con rapidez desde la sangre fuera de los

    vasos (Tvedten, 2002).

    Con el tiempo, los GR son ingeridos y convertidos a pigmentos sanguneos

    de varios colores por infiltracin de macrfagos. Los pigmentos granulares o

    cristales tienen diversos colores (azul, verde, negro, dorado y amarillo). El

    lquido proteinceo del seroma tiene pocos GR (Tvedten, 2002).

    i. Lipoma El diagnostico es rpido y simple, Los frtis macroscpicamente

    tienen gotas clara de lpidos que no se secan. Los frtis teidos con Wright

    pueden carecer de clulas o tener nmeros variables de adipositos nicos o

    en fragmentos de tejidos. Los adipositos son clulas grandes con un ncleo

    pequeo oscuro en un borde. La fina membrana celular puede aparecer

  • 42

    arrugada debido a que el alcohol en la Tinsin de Wright elimina los lpidos

    (Tvedten, 2002).

    j. Linfoma Estas clulas son ms largas que los neutrfilos y tienen un

    moderado citoplasma de color azul oscuro. El ncleo es redondo o de forma

    irregular, algunas veces retorcidos, con cromatina que va de acordonada a

    muy densa en la mayora de casos. Se puede apreciar uno o varios

    nuclolos (Tvedten, 2002).

    k. Papiloma Se observa una hiperplasia de clulas epiteliales queratinizadas

    que pueden encontrarse formando papilas; hay numerosos fibroblastos y en

    ocasiones se observan inclusiones intranucleares, nuclolo (muy prominente

    aunque se mantiene redondo y de tamao razonable) el citoplasma es

    ligeramente basoflico con vacuolas eventuales (Tvedten, 2002).

    l. Neoplasia de clulas cebadas Las neoplasias de clulas cebadas se

    diagnostican con seguridad por el hallazgo de una poblacin moderada a

    grande de clulas cebadas con un nmero variable de eosinfilos de una

    masa. Las clulas redondas, granulares distintivas se identifican con facilidad

    en la Tinsin de Wright. La Tincin de Wright modificada puede fallar en teir

    los grnulos del mastocito en algunos tumores de clulas cebadas. Todos

  • 43

    estos tumores deben considerarse como potencialmente malignos (Tvedten,

    2002).

    m. Melanoma Las clulas del melanoma contienen melanina de diferentes

    formas, fina, como polvo, forma de huso o granular. Si hay ruptura celular

    durante la puncin con aguja fina, la melanina se puede encontrar suelta en

    el fondo del preparado. Con menos frecuencia, los melanomas pueden ser

    amelanocticos o dbilmente pigmentados. Suele observarse variable

    nmero de mitosis (Chvez, 2004)

    n. Tumor venreo transmisible El tumor venreo transmisible es un tumor

    de clulas redondas con clulas discretas que pueden mostrar una variacin

    moderada a marcada en su tamao. El ncleo redondo u oval tiene un

    nuclolo prominente y cromatina lineal tipo cordn. El citoplasma es azul

    plido hialino con vacuolas distintivas. La actividad mittica es comn. La

    localizacin de la masa en el cuerpo, el hecho de que provenga de una rea

    endmica, apoyan el diagnostico (Tvedten, 2002).

    2.2.4.4. Contaminantes en los especmenes citolgicos

    Es importante para los citlogos el reconocer contaminantes que pueden

    encontrarse rutinariamente en especmenes citolgicos, ya que identificarlos

  • 44

    como la causa de la enfermedad lleva a un diagnstico equivocado, e incluso en

    muchas ocasiones, su apariencia citolgica simula clulas malignas, por lo

    que se puede emitir un diagnstico falso positivo, ms an si la muestra

    citolgica es analizada por personal con poca experiencia. Los contaminantes

    que se encuentran con mayor frecuencia en medicina veterinaria son las siguientes

    (Arquero, 2002).

    a. Uno de los elementos que nos indica que la muestra est contaminada es el

    encontrar plaquetas que estn en relacin estrecha con los eritrocitos

    (Arquero, 2002).

    b. Otros tipos de contaminante son los restos de pelo, causa frecuente de

    problemas diagnsticos al ojo de personal inexperto (Arquero, 2002).

    c. Un contaminante muy frecuente en citologa lo constituyen las partculas de

    talco; stas se encuentran en muestras tomadas por puncin con aguja delgada,

    frtis, raspados e incluso improntas (Arquero, 2002).

    d. Las partculas de talco tienen generalmente forma pentagonal pero su contorno

    puede ser poco visible si el material est mal conservado, son refringentes y con

    bordes acidfilos o basfilos. Es caracterstico que presenten un ncleo

    obscuro en forma estrellada y refringente (Arquero, 2002).

  • 45

    e. El identificar melanina no es indicativo de un tumor con origen en melanocitos.

    Es importante tomar en consideracin que muchas especies presentan

    abundantes melanocitos en su piel, o incluso melanosis en rganos como

    linfonudos, pulmn y encfalo entre otros. Algunas razas caninas en las que es

    comn encontrar este tipo de pigmento Suffolk, Canideos, chow chow, Labrador,

    Schnawzer. Cabe mencionar que en estas razas es comn observar

    pigmento melnico en frtis de piel como contaminante, y ello nos indica que es una

    caracterstica propia de la raza (Arquero, 2002).

    f. En el estudio de muestras obtenidas mediante puncin con aguja delgada se

    observan en algunas ocasiones fibras de msculo estriado esqueltico que

    pueden confundirse con algunos elementos como colgenos o vasos san-

    guneos; sin embargo, con el objetivo de inmersin se aprecian las estriaciones

    musculares (Arquero, 2002).

    g. La gasa y el algodn son contaminantes que frecuentemente provienen del

    material que el citotecnlogo utiliza para retirar el exceso de xilol; stos

    podran simular hifas de hongos, pelo o parsitos como filarias; sin embargo, la

    diferencia reside en que estas fibras no presentan estructuras internas,

    ramificaciones ni esporas (Arquero, 2002).

  • 46

    h. Al enjuagar los especmenes citolgicos con agua corriente se corre el

    riesgo de que se contaminen con hongos o parsitos. Una segunda

    fuente de contaminacin de los frtis son partculas suspendidas en el

    ambiente, que en muchas ocasiones se pueden confundir con huevos

    de parsitos, ms an si en el fondo se observa material inflamatorio (Arquero,

    2002).

  • 47

    3. MATERIALES Y MTODOS

    3.1. MATERIALES

    3.1.2 Materiales del campo.

    - 24 Caninos de la Ciudad de Loja (tumores cutneos)

    - Algodn

    - Cmara digital

    - Cinta maski

    - Fundas plsticas

    - Guantes de examinacin

    - Jeringas de 3 ml y 1ml

    - Ficha clnica

    - Lpiz marcador

    - Maletn

    - Mascarillas

    - Mandil

    - Bozal

    - Alcohol antisptico

    .

    3.1.2. Materiales de laboratorio.

    - Algodn

    - Guantes de examinacin

    - Hojas de laboratorio

    - Mandil, mascarillas

    - Microscopio

    - Placas portaobjetos

  • 48

    - Reloj con minutero o cronmetro

    - Solucin de colorante cida y bsica. Diff-Quick

    - Aceite de inmersin

    3.1.3. Materiales de Escritorio

    - Computador

    - Impresora

    - Esferogrficos

    - Hojas del papel bond

    - Corrector

    3.2. MTODOS

    3.2.1. Mtodos de campo

    3.2.1.1 Localizacin

    El trabajo de campo se realiz en pacientes de las clnicas Veterinarias de la

    ciudad de Loja y Hospital Docente Veterinario Csar Augusto Guerrero de

    la UNL, que presentaron problemas de neoplasias en la piel; siendo

    procesadas las muestras en el Laboratorio de Diagnostico Integral en la

    Carrera de Medicina Veterinaria y Zootecnia del rea Agropecuaria y de

    Recursos Naturales Renovables de la Universidad Nacional de Loja, ubicado

    en la ciudad de Loja.

  • 49

    Las caractersticas meteorolgicas son las siguientes:

    Altitud: 2150 msnm.

    Temperatura promedio: 12 - 18 C.

    Precipitacin anual: 70 mm/ao

    Humedad relativa promedio: 64%

    Luminosidad: 12h/da

    Topografa: Ondulada

    (H. Municipio de Loja, 2000)

    3.2.1.2 Descripcin de las Unidades Experimentales

    La presente investigacin se llev a cabo en un tiempo aproximado de 4 meses.

    Las muestras se tomaron de caninos con masas cutneas, considerando

    las variables: raza, sexo y edad; procedentes de las Clnicas Veterinarias y

    Hospital Docente Veterinario Csar Augusto Guerrero.

    3.2.1.3. Recoleccin de muestras

    Para la recoleccin de muestras se utiliz el siguiente protocolo.

    - Sujecin del animal

    - Identificar y palpar la lesin.

  • 50

    - Desinfectar con alcohol y depilar el rea que se va a realizar la toma de

    muestra.

    - Las manos del operador cubiertas de guantes de examinacin, deben

    delimitar y sostener firmemente la lesin.

    - Introducir la aguja, teniendo cuidado que la jeringa no contenga aire,

    realizando presin negativa y evitando que el material penetre en la jeringa.

    - Depositar una gota del material aspirado en el portaobjeto. .

    - Extendido de material en el frtis y fijacin en seco

    - Identificar la muestra tomada y toma de datos en la hoja de campo.

    - Las muestras fueron tomadas de acuerdo al aspecto y morfologa de la masa

    neoplsica.

    3.2.3 Mtodo de laboratorio

    Las muestras recolectadas se analizaron en el Laboratorio de Diagnstico

    Integral Veterinario de la Universidad Nacional de Loja.

    3.2.2.1. Tincin del material de laboratorio

    Se utiliz un tipo de tincin, dependiendo de las caractersticas de las muestras,

    la cual fue: Tincin de Diff Quick (HEMACOLOR)

  • 51

    Procedimiento:

    Previamente la tincin HEMACOLOR (Diff-Quick) se coloc la solucin

    fijadora (metanol) y el colorante cido en recipientes individuales sealados,

    para luego proceder a la tincin en la placa de las muestras.

    Procedimiento para la citologa con placa (extensin con placa)

    Tincin Hemacolor Solucin 1 por el tiempo de 5 x 1s (sumergir en la

    solucin la placa cinco veces por segundo).

    Tincin Hemacolor Solucin 2 por el tiempo de 3 x 1s (sumergir en la

    solucin la placa tres veces por segundo).

    Tincin Hemacolor Solucin 3 por el tiempo de 6 x 1s (sumergir en la

    solucin la placa seis veces por segundo).

    Cada vez que se termin de teir con cada solucin se coloc la placa en el

    papel absorbente para que recoja el exceso de reactivo, y as continuar con

    la otra tincin hasta el lavado y secado al aire, de la muestra para su

    observacin en el microscopio con el lente de inmersin de 100 aumentos.

  • 52

    3.2.2.2. Identificacin microscpica

    El procedimiento que se utiliz fue el siguiente:

    Con la ayuda de una gua de diagnstico histopatolgico cuyas imgenes

    fueron recopiladas de libros e internet se procedi a identificar cada una de

    las muestras tomadas.

    La mayora de las muestras diagnsticas se dividieron en un inicio en

    patrones inflamatorios o proliferativos o ambos.

    Las muestras inflamatorias se examinaron por los posibles organismos

    causales, los cambios degenerativos en los neutrfilos estimulan una

    bsqueda ms profunda para bacterias.

    Los patrones proliferativos se evaluaron por el tipo celular y evidencia de

    malignidad, luego se hizo un resumen de los resultados.

    - Todas las muestras fueron observadas en el microscopio, con el objetivo

    10X, con el fin de detectar caractersticas anormales como grupos de

    clulas representativas para el estudio.

  • 53

    - Una vez elegida las zonas a estudiar se procedi a observar con el

    objetivo 40X donde se puede distinguir la composicin celular y la

    presencia de microorganismos.

    - El objetivo de 100X se utiliz para observar la morfologa celular y los

    detalles

    3.2.3. Variables en estudio

    - Neoplasias ms comunes

    - Caractersticas y tipos de tumores

    - Clasificacin por comportamiento y ubicacin.

    3.2.4. Toma y registro de datos

    Se realiz durante cuatro meses que dur el ensayo; para lo cual se utiliz

    fichas clnicas y de laboratorio.

    Anlisis e Interpretacin de Resultados

    Primeramente se procedi a ordenar la informacin y se tabul los datos de

    cada una de las variables en estudio. Para la interpretacin y anlisis de los

  • 54

    resultados se empleo la estadstica descriptiva, en donde expresamos sus

    valores en promedios y porcentajes.

  • 55

    4. RESULTADOS

    4.1 PRESENTACION DE NEOPLASIAS CUTANEAS POR

    COMPORTAMIENTO

    Para la determinacin de esta variable se procedi a especificar en cada

    muestra obtenida a las clulas como malignas y benignas. Los resultados

    conseguidos se demuestran en el cuadro uno y se grafican en la figura cinco.

    Cuadro 1. Clasificacin de neoplasias cutneas por comportamiento.

    TIPO DE TUMOR POR

    COMPORTAMIENTO TOTAL %

    Benigno 13 54.87

    Maligno 11 45,83

    Total 24 100

    Fuente: Investigacin Directa

    Elaborado por: El Autor

    De un total de 24 canes examinados, se presentaron 13 casos (54,87%); que

    corresponden a neoplasias benignas, y 11 animales (45,83%) presentaron

    tumores malignos.

  • 56

    Figura 5. Porcentaje de Tumores por comportamiento

    4.2 PRESENTACIN DE NEOPLASIAS CUTNEAS POR ORIGEN DE

    CLULAS TUMORALES

    Para este anlisis se tom en cuenta la morfologa celular de las diferentes

    muestras obtenidas de los pacientes atendidos en las clnicas Veterinarias y

    Hospital Docente Veterinario, sta variable se determin mediante la

    observacin directa de los tumores para lo cual consideramos su dimetro,

    redondos, periformes, solitarios o mltiples, de consistencia dura y ulcerados;

    microscpicamente en la citologa se observ clulas tumorales las cuales

    presentaban: anisocariosis, anisocitosis y anaplasia; los resultados obtenidos

    se los representa en el cuadro dos y se los grafica en las figuras seis y siete.

    40

    42

    44

    46

    48

    50

    52

    54

    56

    Benigno Maligno

    54,17

    45,83

  • 57

    Cuadro 2. Clasificacin de neoplasias cutneas por Origen de clulas

    tumorales.

    Tipo Tumores Total %

    BE

    NIG

    NO

    Mastocitoma 6 46,16

    Histiocitoma 2 15,39

    Lipoma 1 7,69

    Inflamacin Granulomatosa 1 7,69

    Seminoma 1 7,69

    Leiomioma 1 7,69

    Tumor de clulas de Sertoli 1 7,69

    Total 13

    MA

    LIG

    NO

    S

    TVT 4 36,36

    Sarcoma 2 18,18

    Carcinoma 2 18,18

    Adenocarcinoma 2 18,18

    Osteosarcoma 1 9,10

    Total 11

    Total General 24

    Fuente: Investigacin Directa

    Elaborado por: El Autor

  • 58

    En el cuadro dos podemos apreciar los diferentes tipos de tumores cutneos

    benignos y malignos encontrados en todos los caninos que formaron parte

    de la investigacin.

    Dentro de los tumores cutneos benignos, se tuvieron 13 casos; con 7

    etiologas diferentes, las cuales se detallan a continuacin:

    Los tumores observados en orden descendente de frecuencia fueron, el

    mastocitoma, con 6 canes afectados (46.16%); histiocitoma, 2 perros

    afectados (15.39%).

    Con una frecuencia de 5 casos (7.69%); se presentaron: lipoma, inflamacin

    granulomatosa, seminoma, leiomioma y tumor de clulas de sertoli.

    Dentro de la clasificacin de los tumores cutneos malignos, se encontraron

    5 etiologas diferentes afectando a 11 canes: se presentaron 4 casos con

    tumor venreo transmisible (36.36%); 2 casos con sarcoma (18.18%); 2

    canes (18.18%); tuvieron carcinoma, 2 canes con Adenocarcinoma (18.18%).

    Con una frecuencia de 1 caso (9.10%); se observ osteosarcoma.

  • 59

    Figura 6. Porcentaje de neoplasias cutneas por Origen de clulas

    tumorales benignas.

    Figura 7. Porcentaje de neoplasias cutneas por Origen de clulas

    tumorales malignas.

    46,16

    15,39 7,69 7,69 7,69 7,69 7,69

    0,005,00

    10,0015,0020,0025,0030,0035,0040,0045,0050,00

    36,36

    18,18 18,18 18,18

    9,10

    0,00

    5,00

    10,00

    15,00

    20,00

    25,00

    30,00

    35,00

    40,00

  • 60

    4.3 CLASIFICACION DE NEOPLASIAS CUTNEAS DE ACUERDO A LA

    RAZA, SEXO Y EDAD.

    4.3.1 Presencia de neoplasias cutneas de acuerdo a la Raza

    Para determinar la presencia de acuerdo a la raza se tom en cuenta la

    informacin provista de la hoja de pedido que realiz el Medico Tratante de

    las diferentes Clnicas Veterinarias y Hospital Veterinario de la ciudad de Loja

    durante el trabajo de investigacin, los resultados se indican en el cuadro

    tres y se resumen en la figura ocho.

    Cuadro 3. Prevalencia de Neoplasias Cutneas de acuerdo a la raza

    Raza Total %

    Mestiza

    5

    20.83

    Pura 19 79.17

    Total 24 100

    Fuente: Investigacin Directa

    Elaborado por: El Autor

    De 24 canes observados 19 fueron de raza pura (79.17%); y, 5 fueron

    mestizos (20.83%).

  • 61

    Figura 8. Porcentaje de Neoplasias Cutneas de acuerdo a la raza

    4.3.2 Presencia de neoplasias cutneas de acuerdo al Sexo Se logr determinar esta variable gracias a las historias clnicas que se

    realizaron para las diferentes Clnicas Veterinarias y Hospital Veterinario de

    la Universidad Nacional de Loja, las cuales nos indicaban a detalle la

    informacin del paciente, tambin se utiliz la observacin directa en el

    microscopio para observar a detalle la estructura celular encontrada, esto

    nos sirvi para poder establecer la predileccin de los tumores tanto en

    machos como en hembras, todos estos resultados se indican en el cuadro

    cuatro y se representa en la figura nueve.

    0

    10

    20

    30

    40

    50

    60

    70

    80

    Mestiza Pura

    20,83

    79,17

  • 62

    Cuadro 4. Prevalencia de Neoplasias Cutneas de acuerdo al sexo.

    Sexo Total %

    Hembra

    15

    62.5

    Macho 9 37.5

    Total 24 100

    Fuente: Investigacin Directa

    Elaborado por: El Autor

    Del total de 24 canes examinados con neoplasias, segn el sexo: 15 fueron

    hembras (62.5%); y, 9 fueron machos (37.5%).

    Figura 9. Porcentaje de Neoplasias Cutneas de acuerdo al sexo.

    0,00

    10,00

    20,00

    30,00

    40,00

    50,00

    60,00

    70,00

    Hembra Macho

    62,50

    37,50

  • 63

    4.3.3 Clasificacin de neoplasias cutneas de acuerdo a la Edad Para evaluar la siguiente variable se clasific a los caninos en tres categoras

    de edad; jvenes (0-3 aos), adultos (3-6 aos) y seniles (Mayores a 9 aos),

    tomando como referencia las mltiples enfermedades dermatolgicas que

    complica en diferentes edades, los resultados se muestran en el cuadro

    cinco y se representan en la figura 10.

    Cuadro 5. Prevalencia de Neoplasias Cutneas de acuerdo a la edad.

    Edad (aos) Total %

    0 3 3 6 6 9 9

    6 3 6 9

    25.0 12.5 25.0 37.5

    Total 24 100

    Fuente: Investigacin Directa

    Elaborado por: El Autor

    De un total de 24 canes examinados, los tumores cutneos segn la edad,

    en los animales de 0 3 aos se presentaron 6 casos (25.0%); entre 3 6

    aos, con un total de 3 casos (12.5%); 6 9 aos, 6 casos (25.0%); y en los

    mayores de 9 aos, 9 presentaron tumores (37.5%).

  • 64

    Figura 10. Porcentaje de Neoplasias Cutneas de acuerdo a la edad.

    4.3.4 Clasificacin de neoplasias cutneas por comportamiento de

    acuerdo a la Raza

    Para determinar la clasificacin de acuerdo a la raza y comportamiento se

    tom en cuenta la informacin de las historias clnicas del Hospital Docente

    Veterinario y Clnicas Veterinarias de la ciudad de Loja especificando en

    cada muestra obtenida a las clulas como malignas y benignas durante el

    trabajo de investigacin, los resultados se indican en el cuadro seis y se

    resumen en la figura 11.

    25,00

    12,50

    25,00

    37,50

    0,00

    5,00

    10,00

    15,00

    20,00

    25,00

    30,00

    35,00

    40,00

    0 3 3 6 6 9 9

  • 65

    Cuadro 6. Prevalencia de Neoplasias Cutneas de acuerdo a la raza segn

    su comportamiento.

    RAZA TUMORES

    BENIGNO MALIGNO

    NUMERO % NUMERO %

    Mestiza 5 2 40,00 3 60,00

    Labrador 2 2 100,00 - ---

    Pastor A. 1 - --- 1 100,00

    Pointer 1 - --- 1 100,00

    Frensh P. 3 3 100,00 - ---

    Boxer 1 1 100,00 - ---

    Husky Siberiano

    2 1 50,00 1 50,00

    Buldog 1 - --- 1 100,00

    Doberman Pincher

    1 1 100,00 - ---

    Doberman 3 1 33,33 2 66,67

    Cocker S. 2 1 50,00 1 50,00

    Bull Terrier 1 - --- 1 100,00

    Teckel 1 1 100,00 - ---

    TOTAL 24 13 54,17 11 45,83

    Fuente: Investigacin Directa

    Elaborado por: El Autor

    Como se puede apreciar de 24 pacientes analizados en diferentes razas los

    ms susceptibles a adquirir tumores cutneos son los de raza pura dentro de

    los cuales los ms afectados fu