Mutaciones Raras de EGFR: ¿qué son y qué significan?

Fernando López-Ríos

Laboratorio de Dianas Terapéuticas Centro Integral Oncológico Clara Campal Hospital Universitario Sanchinarro Madrid www.laboratoriodedianasterapeuticas.com

INDICE

• Introducción: métodología analítica

• Guías americanas y europeas

• ¿Cuáles son las mutaciones raras de EGFR?

• ¿Qué significan?

• Conclusiones

Técnicas

Sensibilidad

(%DNA

mutado)

Mutaciones

identificadas

Detección precisa de

deleciones e

inserciones

Secuenciación directa Método de Sanger 25 Conocidas y nuevas Sí

Pirosecuenciación 5-10 Conocidas y nuevas Sí

PCR cuantitativa en tiempo real 5 Sólo conocidas No

Técnicas de enriquecimiento del alelo mutado

PNA-LNA PCR clamp 1 Sólo conocidas No

Digestión con enzimas de restricción 0.2 Sólo conocidas No

Smart 0.1 Sólo conocidas No

COLD-PCR 1 Conocidas y nuevas Sí

PCR-RFLP (análisis de polimorfismos de fragmentos de

restricción) 5 Sólo conocidas Sí

dHPLC 1 Conocidas y nuevas Sí

Inmunohistoquímica (IHQ) * Sólo conocidas Sí

* Sensibilidad biológica pendiente de establecer

Tabla modificada de Clin Cancer Res 2007; 13: 4954-5

INTRODUCCIÓN

EGFR

Estudio mutacional de EGFR: fase analítica

Angulo et al. PLoS ONE 2012

EGFR

Estudio mutacional de EGFR: fase analítica

Angulo et al. PLoS ONE 2012

Sensibilidad Límite de detección (LOD)

Nuevas tecnologías

Kerr et al. Ann Oncol 2014

10

Next generation sequencing

• EGFR, PIK3CA, KRAS, HRAS, NRAS, BRAF, CKIT, TP53

11

INDICE

• Introducción: métodología analítica

• Guías americanas y europeas

• ¿Cuáles son las mutaciones raras de EGFR?

• ¿Qué significan?

• Conclusiones

MUTACIONES DE EGFR: Fase pre-analítica

http://www.cap.org/apps/docs/membership/transformation/new/lung_public_comment_supporting_materials.pdf

INDICE

• Introducción: métodología analítica

• Guías americanas y europeas

• ¿Cuáles son las mutaciones raras de EGFR?

• ¿Qué significan?

• Conclusiones

Yashuda et al.

Lancet Oncol 2011

Arcila et al. Mol Cancer Ther 2013

INDICE

• Introducción: métodología analítica

• Guías americanas y europeas

• ¿Cuáles son las mutaciones raras de EGFR?

• ¿Qué significan?

• Conclusiones

Resistencia

Esquema modificado de Yasuda et al, (Lancet Oncol 2011)

según la revisión de Arcila et al. (Mol Cancer Ther 2013)

Mejor

Peor

INDICE

• Introducción: métodología analítica

• Guías americanas y europeas

• ¿Cuáles son las mutaciones raras de EGFR?

• ¿Qué significan?

• Conclusiones

Kerr et al. Ann Oncol 2014

Conclusiones

Buscarlas más (en los pan-negativos)

Atención al método, nomenclatura e informe

Inserciones del exón 19 (1%): respuesta

Inserciones del exón 20 (10%): respuesta?

Datos de respuesta a afatinib

Nuevos diseños de ensayos

www.laboratoriodedianasterapeuticas.com