Mitosis

TABLA DE CONTENIDO

MEDICINAV0- Marzo 2011

COMPLEJO MULTIFUNCIONAL AVANZADO DE PRACTICAS Y SIMULACINCICLO CELULAR MITOSIS

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TABLA DE CONTENIDOGUA DE PRCTICA COMPLEJO MULTIFUNCIONAL AVANZADO DE PRACTICAS Y SIMULACIN LABORATORIO CLINICO 2

TITULO DE LA GUAPROBLEMAJUSTIFICACINOBJETIVO PRINCIPAL3.1 OBJETIVOS ESPECFICOSPRECAUCIONESMATERIAL NECESARIOPROCEDIMIENTOACTIVIDADES DE APRENDIZAJECUESTIONARIOBIBLIOGRAFA22333344778

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GUA DE PRCTICA COMPLEJO MULTIFUNCIONAL AVANZADO DE PRCTICAS Y SIMULACIN

LABORATORIO CLINICO

TITULO DE LA GUACICLO CELULAR MITOSIS CARIOTIPO

1. PROBLEMA

Un estudiante de medicina en el primer da de prcticas clnicas encuentra la siguiente HC y le llama de gran forma la atencin: Paciente de sexo masculino,2 meses de edad, con un peso de 2.300gr, talla de 35cm y circunferencia ceflica de 32,5cm cuyos padres consultan en pediatra a causa de las mltiples malformaciones congnitas que presenta. Nacido en un parto por cesrea, con un peso de 1.900 gr y talla de 32 cm, producto del cuarto embarazo. Los 2 primeros terminaron en abortos espontneos pero tena una hermana normal de 2 aos. Madre de 38 y padre de 35 aos respectivamente, no consanguneos. Sin antecedentes familiares positivos, ni de patologas o ingestin de medicamentos durante el embarazo. La madre refiere movimientos fetales dbiles. Durante un examen ecogrfico llevado a cabo a las 24 semanas de embarazo, se observ acortamiento de huesos largos y se hizo el diagnstico presuntivo de sndrome de Roberts, informacin que fue comunicada a los padres. Al examen fsico el nio present microbraquicefalia, hipertelorismo, hemangioma facial, proptosis, cataratas y glaucoma, esclerticas azules, labio y paladar hendidos bilateral, micrognatia, orejas con lbulos hipoplsicos, acortamiento mesomlico de los cuatro miembros, aplasia de radio bilateral, ambas manos con tres dedos, miembros inferiores con ausencia de fmur y presencia de cinco ortejos con sindactilia de partes blandas y pie valgo bilateral.

Se realiz estudio citogentico en sangre perifrica. Se analizaron 50 metafases con tcnicas de coloracin convencional, encontrndose un nmero normal de46 cromosomas y una separacin prematura de la heterocromatina centromrica de los cromosomas en el 80% (40/50) de ellas. La identificacin cromosmica se llev a cabo a travs de las Bandas G y C, no observndose anomalas estructurales: Cariotipo: 46, XY.



El estudiante se pregunta Cules seran los procesos celulares comprometidos en el paciente para que dicho Fenotipo pueda haberse llevado a acabo? En donde sera el dao o alteracin gentica, siendo que tiene un cariotipo Normal?

2. JUSTIFICACIN

DEFINICIN

La regulacin del ciclo celular, es decisiva para el desarrollo normal de los organismos multicelulares y la prdida del control lleva en ltima instancia al cncer. La replicacin de las clulas es controlada principalmente por la regulacin cronomtrica, de dos acontecimientos decisivos en el ciclo celular: la replicacin del DNA nuclear y la mitosis. Los controladores maestros de estos acontecimientos son unas pocas protenas quinasas (o quinasas) heterodimercas, que contienen una subunidad reguladora y una subunidad cataltica. Estas quinasas regulan las actividades de mltiples protenas que participan en la replicacin del DNA y la mitosis, mediante la fosforilacin de estas ltimas en sitios reguladores especficos, con la activacin de algunas y la inhibicin de otras para coordinar sus actividades. Evidentemente, los diferentes complejos de ciclinas con quinasas constituyen los puntos de control a lo largo del ciclo celular. Sobre ellos recae la responsabilidad primaria de activar las diferentes etapas del ciclo y son los receptores de otras protenas que ejercen sobre ellos procesos de modificacin, secuestro, destruccin o activacin, que permitirn el avance del ciclo, o su alargamiento o detencin si las condiciones no son propicias para que se establezca la proliferacin.

3. OBJETIVO PRINCIPAL

Identificar y entender cada una de las fases mitticas de la clula y la implicacin de dicho proceso dentro del complejo llamado Ciclo Celular. Lo anterior valindose del reconocimiento de los numerosos eventos y particulares caractersticas que se muestran a medida que el ciclo celular cursa.

3.1 OBJETIVOS ESPECFICOS

Valorar la importancia de la divisin celular dentro del ciclo celular y su participacin en el desarrollo, crecimiento y reposicin celular en tejidos desgastados. Diferenciar las fases del ciclo celular y sus caractersticas como parte de un proceso secuencial irreversible.



Determinar e identificar la ocurrencia de la divisin mittica en tejido meristemtico de plantas superiores. Describir las diferencias entre los procesos mitticos de una clula animal y vegetal. Identificar mediante observacin microscpica las diferentes fases de la mitosis en la raz de cebolla. Conocer, identificar y organizar un cariotipo humano.

4. PRECAUCIONES

Aplicar debidamente las pautas y normas de bioseguridad antes, durante y despus de cada uno de los procedimientos a realizar en el laboratorio.

5. MATERIAL NECESARIO

Por el estudiante: Elementos de proteccin personal (guantes de manejo, gafas y tapabocas). Races de cebolla frescas o Cebolla con las races en crecimiento. Gua de laboratorio.

Por el Laboratorio: Metanol cido Actico Giemsa Agua destilada Estereoscopio y Microscopio compuesto Cajas de Petri o frascos plsticos Lminas Porta objetos Laminillas Cubre objetos Pinzas, Bistur, cuchilla o Agujas de diseccin, tijeras cido Clorhdrico al 10%. Aceite de Inmersin Cinta adhesiva

6. PROCEDIMIENTOa. Visualizacin de Fases del Ciclo Celular:1. Cinco o seis das antes de comenzar los experimentos, escoja un bulbo de cebolla fresca y elimine mediante un raspado con una cuchilla, las races secas que se hallan en la base del bulbo. En un frasco boca ancha o un vaso desechable coloque la cebolla como aparece en la figura. Vierta agua en el



frasco, hasta tocar la base de la cebolla. Mantenga la base de la cebolla hmeda y cambie el agua diariamente.

2. Cuando las races nuevas alcancen alrededor de 3 cm. de longitud, extraiga la cebolla del recipiente y corte el ltimo centmetro de la punta.

3. Deposite estas races en la solucin fijadora Carnoy (Metanol: cido actico, 3:1) durante 20 minutos.

4. Traslade las races a un recipiente que contiene cido Clorhdrico al 10% durante 10 minutos. Este tiempo vara segn el tipo de clula.

5. Coloque las races en un recipiente con agua y lvela por cinco minutos.

6. Traslade las races a un recipiente con Giemsa. Este colorante las debe cubrir totalmente durante 5-20 minutos.

7. Saque la raz del recipiente que contiene Giemsa y pngala en porta objeto. Intente seccionarla longitudinalmente para lograr un tejido ms delgado. Coloque una gota de Giemsa sobre la raz.

8. Coloque en ngulo recto el cubre objeto, bjelo lentamente hasta que se pose en el preparado hmedo, y luego haga una leve presin con el dedo hasta conseguir una extensin del preparado.



9. Observe con el objetivo de menor aumento para localizar las figuras mitticas, y posteriormente con el objetivo de mayor aumento para discriminar detalles.

10. Guindose por las figuras de la galera de imgenes, identifique las diferentes fases de la mitosis y dibjelas.

GALERA DE IMGENES:

b. Organizacin de Cariotipo Humano:1. PrestarcompletayenteraatencinalaexplicacindelExpertoen Citogentica, especialidad responsable de dicho proceso.



2. Con ayuda de las tijeras, cortar individualmente cada cromosoma de las fotos aportadas por el Experto. Ante cualquier inquietud sin dudarlo consulte con el mismo.

3. Organizar cada par cromosmico sobre la plantilla con ayuda de la foto gua. Atencin a cada observacin aportada por el Experto.

4. Luego del visto bueno por el Experto, fijar lenta y correctamente los cromosomas a la plantilla con ayuda de la cinta adhesiva.

5. Anlisis de los resultados y resolucin de inquietudes.

7. ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

Evaluacin: Al iniciar la prctica el estudiante debe resolver un pre-test de 1 a 3 preguntas mximo, con el fin medir y estimular la preparacin conceptual del tema de la prctica. Equivale al 30% de la nota del laboratorio.

Desarrollo del Laboratorio: El facilitador en conjunto con los estudiantes revisar los temas pertinentes para la prctica aclarando las dudas encontradas por el estudiante durante la preparacin del laboratorio. Con base en el procedimiento descrito en la gua, en grupo, los estudiantes llevarn a cabo el laboratorio. Equivale al 30% de la nota del laboratorio.

Sustentacin: Segn programacin, el facilitador se encontrar con el estudiante con el fin de realizar la retroalimentacin del tema visto en laboratorio. Equivale al 40% de la nota del laboratorio.

8. CUESTIONARIOPermite al estudiante reflexionar sobrelos contenidosnecesarios para la realizacin de la prctica y ayuda a profundizar el aprendizaje.

1. Esquemticamente represente la mitosis como parte del ciclo celular.2. En el procedimiento realizado, Cul es la funcin de la solucin fijadora y del cido clorhdrico?.3. Esquematice la ruta o sinopsis de los diferentes procesos a realizar en el laboratorio de citogentica para la obtencin y entrega de cariotipos.4. CuntoscromosomastienenlasclulasHumanas?,Cmoessu ordenamiento y clasificacin?.5. Qu diferencias existen entre la mitosis de una clula vegetal y una animal?.



6. Enqufasedelamitosis,loscromosomaslleganasumxima condensacin? y En qu fase de la mitosis se separan las cromtidas?.

9. BIBLIOGRAFA Lodish H, Berk A, Matsudaira P, Kaiser CA, Krieger M, Scott MP, Zipursky SL, Darnell J. (2005). Biologa Celular y Molecular. WH Freeman: New York, NY. 5th ed. Pag. 17-18, 881-886.

Cooper G.M. La Clula. Segunda Edicin. 2.004; pag: 571-581, 587-594.

Fases del Ciclo Celular: http://en.wikipedia.org/wiki/Cell_cycle#Phases_of_the_cell_cycle

http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000024/lecciones/cap03/03_ 01_01.htm

ELABORADO POR

Nubia Ponce Zapata y Orlando Gualdrn Lpez - Docentes Laboratorio Clnico.

APROBADO POR

FIN DE GUA PRCTICA CLNICA

CONTROL ACTUALIZACIONES

VERSIN QUE SE MODIFICATEMA MODIFICADO

BREVE DESCRIPCIN DEL CAMBIOCOMUNICACIN

FECHASOLICITADA PORAPROBADA POR



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