8/16/2019 Microscopía Electrónica - Electron Microscopy

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Microscopía ElectrónicaTransmisión y Barrido

Integrantes: Einar Pétur Jónsson  Patricio Ávila GuerreroProfesora: Dra. María Estela AndresFecha: 21 Junio 2016

Pontificia Universidad Católica de ChileFacultad de Ciencias BiológicasLaboratorio de Bioquímica y Biología Celular

BIO297c-2

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IntroducciónObjetivos:• Defnir Microscopía Electrónica.

• Defnir y caracterizar sus técnicas: De

transmisión (TEM y !e "arri!o (#EM.• $omparar su utilización con otras técnicas

semejantes.

•

Ejemplifcar su uso !e %orma sencilla yenten!ible.

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¿Qué es la MicroscopíaElectrónica?

•  Tipo !e microscopía &ue utiliza un 'az !eelectrones para crear una imaen !e unamuestra.

• )lta resolución.• *ran!es aumentos.

• +ermite ver objetos muy pe&ue,os con

ran !etalle.

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Contexto Histórico• Estu!io inicia!o

!ebi!o a lapublicación !e lateoría !e lonitu! !e

on!a !el movimiento!el electrón- por ouis!e "rolie (/012

• +rimer microscopio

electrónico crea!o porMa3 4noll y Ernst5us6a (/07/

Max Knoll y Ernst Ruska - 1967

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Microscopía Electrónica deBarrido (SEM)

•

+otencial: 8asta 296.• Electrones rebotan en

la muestra.

• +reparación simple.

•

;m

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Microscopía Electrónica deTransmisión (TEM)

• )lto voltaje: 8asta 7996(Mayor veloci!a!.

• Electrones pue!enatravesarparcialmente lamuestra.

• Muestra re&uierepreparación a!ecua!a.

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Característica Barrido (SEM) Transmisión (TEM)

Resolución Baja resolución: Decenas denm (En referencia a TEM)

Alta resolución: 0.2 nm

Imagen obtenida Morfología. Muestra múltiplescaracterísticas de los objetostales como cristalización,morfología, e incluso suholografía.

Preparación de la Muestra Simple Requiere muestras muydelgadas (nm de espesor) y

preparación para condicionesespecíficas.

Costo Monetario Alto (USD $50.000) Alto (USD $150.000)

Tabla 1. Características generales comparativas entre SEM y TEM.

Tipos de Microscopía Electrónica

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Comparaciones a otros tiposde microscopías

Características Electrónica (EM) Óptico

Fuente de radiación Electrones Luz

Resolución 0.2 nm 200 nmAumento 100 x - 1.000.000 x 10 x - 2000 x

Preparación de lamuestra

Requerida para soportarcondiciones

Requerida paracontraste

Costo Monetario Alto Bajo

Otro tipo de microscopia es laMicroscopía de FuerzaAtómica (AFM),cuya mayor y más importantediferencia es que esta últimano utiliza lentes niirradiación de un haz.

Tabla 2. Comparaciones entre Microscopía Electrónica y Óptica.

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Ejemplo de la técnica

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Otolitos en peces TEM

Fig. 2. Transmission electron microscope cross sections of otoliths from  5-day-old fish

13 µm

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Otolitos en peces SEM

Fig. 3. Scanning electron micrograph of awild-type otolith, star-shaped otolith andthe most severe form.

20 µm

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Referencias• #orrivas !e ozano- . (19/2. +rincipios y pr