Material de apoyo de la materia

Procesar Técnicas Bacteriológicas Básicas

JUSTIFICACIÓNJUSTIFICACIÓN

• El contenido de éstas diapositivas es El contenido de éstas diapositivas es sumamente importante para el buen sumamente importante para el buen aprendizaje del alumno; ya que contiene aprendizaje del alumno; ya que contiene las características generales y los datos las características generales y los datos más importantes sobre cada una de las más importantes sobre cada una de las bacterias ya estudiadas en el curso.bacterias ya estudiadas en el curso.

• El contenido incluye tanto material El contenido incluye tanto material visual como escrito para ayudar a la visual como escrito para ayudar a la comprensión del tema.comprensión del tema.

Historia de la microbiologíaHistoria de la microbiología

CREADOR DE LA MICROSCOPÍA BIOLÓGICA

Examinó todos los órganosDel cuerpo; describió en laPiel la capa de células que Llevan su nombre y losGlomérulos renales.

Tallado de lentes perfecto

Amplificaciones de200 veces

Envió sus observaciones en Más de 200 cartas hacia la

Sociedad Real de Londres de1673 a la fecha de su muerte

La lente estaba montada en 2placas de metal. La muestra seColocaba en un cilindro corto.

Repitió los experimentos de NeedhamPero con modificaciones. Selló hermé-

Ticamente a la flama y tapó con corchoImpermeable.

Schulze pasaba aire a través de solucionesÁcidas a matraces donde tenía caldo hervido

Schwann filtraba el aire en tubos al rojo vivoY lo hacía llegar al caldo hervido.

En ninguno de los 2 casosaparecieron microbios.

demostró que el polvo transporta losmicrobios y que si éste está ausente el caldo

nutritivo se mantenía libre decrecimiento microbiano

Demostró que incluso la filtración poralgodón No era necesaria para impedir la contaminación por microorganismos

Teoría microbianaDe la fermentación

Fenómeno del “cuajado” de la leche y la producción de bebidas alcohólicas.

Berzelius, Liebig, Wöhler y otros químicos distinguidos del siglo pasado interpretaron la transformación del azúcar a ácido láctico o a etílico y CO2 como un fenómeno puramente químico.

PASTEUR en 1857 observó la formación de ácido láctico a partir de azúcar, a merced de bacterias.

Pasteur contribuyó a resolver el problema demostrando que era posible eliminar las bacterias calentando las soluciones azucaradas iniciales hasta una temperatura elevada

TEORÍA MICROBIANA DELA ENFERMEDAD

Fracástoro en 1546describió 3 formas de

Transmisión de enfermedad

-Por contacto directo-Por contacto con

objetos contaminados-Contagio a distancia

Bacillus

anthracis

ELEMENTO DE MICROBIOLOGIA GENERALELEMENTO DE MICROBIOLOGIA GENERALL.E.HAWKERL.E.HAWKEREDITORIAL ACRIBIAEDITORIAL ACRIBIAESPAÑA, 1964ESPAÑA, 1964PAG. 512-620PAG. 512-620

MICROBIOLOGIA GENERALMICROBIOLOGIA GENERALWILLIAM G. WALTERWILLIAM G. WALTEREDITORIAL CONTINENTALEDITORIAL CONTINENTALESPAÑA, 1972ESPAÑA, 1972PAG. 36PAG. 36

BIOLOGIA 1BIOLOGIA 1ALEJANDRO LIMONALEJANDRO LIMONSANTILLANASANTILLANAMEXICO, 1999MEXICO, 1999PAG. 7-27PAG. 7-27

BIBLIOTECA SALVAT DE GRANDES TEMASBIBLIOTECA SALVAT DE GRANDES TEMAS La vida microscópica.La vida microscópica.Salvat editores, s.a. Salvat editores, s.a. Barcelona, EspañaBarcelona, EspañaPágs. 48 – 87.Págs. 48 – 87.

http://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADa

1872: Inoculó rebanadas de patata con mezcla de microorganismos. Y observó colonias de color preciso e independiente.

Agregó gelatina a un caldo nutritivo caliente y vació la solución en recipientes aplanados de cristal estéril, en donde se enfriaron y solidificaron.

En 1883 empleó por primera vez el agar.

El agar es un polisacárido extraído de varias algas marinas, que es digerido por pocos microorganismos.

Creó la placa o caja de petri

Método de Coloración en 1884

Tratamiento o prevenciónde la infección.

Las enfermedades sepresentan

una sola vez y despuésPresenta inmunidad.

Jenner, médico inglésdesarrolló un método

de inmunizaciónconocido como

vacunación

Las personas que habían sufrido la reacciónPresentaron inmunidad a la viruela

Pasteur en 1881 elaboró métodosPara inmunización contra el cólera

De las aves y el carbunco

VACUNA ATENUADAVACUNA ATENUADA

Metchnikoff llamó fagocitos a lasCélulas amiboides y propuso que la

Inmunidad a la enfermedad Infecciosa proviene

De la acción deCélulas semejantes

Behring y Kitasato

Demostraron en 1890 la existenciaDe la antitoxina

TRATAMIENTO DE LA SÍFILISTRATAMIENTO DE LA SÍFILIS

Intento de tratar las infecciones por medio de substancias químicas que matan o alteran el crecimiento de los microorganismos patógenos pero que no lesionan o dañan al huésped.

Domagk, aproximadamente 30 años después ensayó la actividad antibacteriana de varias substancias químicas del tipo sulfonamida.

Descubrió que el Prontosil era activo contra los Streptococcus.

Fisiología y Genética de los Fisiología y Genética de los MicrobiosMicrobios

FERMENTACIÓN

Al degradar un sustratocomo el azúcar, se for-man varios productos

terminales

Productos terminales:Alcohol etílico, ácidos

láctico, succínico, acético,Butírico y Bióxido de

Carbono

Beadle yTatum

Informaron que laNeurospora, erainducida rapida-

mente a la mutación

Algunos mutantesMostraron capacidadsintética y metabólica

distinta de su orga-nismo de origen.

Tatum yJoshua Lederberg

Descubrieron métodosde desencadenar

los cambios genéticosde las bacterias

El receptor adquirióciertas características

del donador.

ELEMENTO DE MICROBIOLOGIA GENERALELEMENTO DE MICROBIOLOGIA GENERALL.E.HAWKERL.E.HAWKEREDITORIAL ACRIBIAEDITORIAL ACRIBIAESPAÑA, 1964ESPAÑA, 1964PAG. 512-620PAG. 512-620

MICROBIOLOGIA GENERALMICROBIOLOGIA GENERALWILLIAM G. WALTERWILLIAM G. WALTEREDITORIAL CONTINENTALEDITORIAL CONTINENTALESPAÑA, 1972ESPAÑA, 1972PAG. 36PAG. 36

BIOLOGIA 1BIOLOGIA 1ALEJANDRO LIMONALEJANDRO LIMONSANTILLANASANTILLANAMEXICO, 1999MEXICO, 1999PAG. 7-27PAG. 7-27

BIBLIOTECA SALVAT DE GRANDES TEMASBIBLIOTECA SALVAT DE GRANDES TEMAS La vida microscópica.La vida microscópica.Salvat editores, s.a. Salvat editores, s.a. Barcelona, EspañaBarcelona, EspañaPágs. 48 – 87.Págs. 48 – 87.

http://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADa

TAXONOMÍATAXONOMÍABACTERIANABACTERIANA

CLASIFICACIÓNCLASIFICACIÓN NOMENCLATURANOMENCLATURA IDENTIFICACIÓNIDENTIFICACIÓN

EspecieGéneroFamiliaOrdenClase

DivisiónReino

Nomenclatura BINOMINAL(“Dos nombres”)

Género y especie derivados dellatín o del griego. Por ejemplo:

Streptococcus pneumoniaeS. pyogenes

Características Fenotípicas:Morfología MacroscópicaMorfología Microscópica

Características de TinciónRequerimientos medioambientales

Requerimientos nutricionalesPerfiles de Resistencia

Propiedades AntigénicasPropiedades subcelulares

Características Genotípicas:

Relación de la composición debases del DNA.

Análisis de la secuencia de basesde los ácidos nucleicos

(DNA y RNA)

• CLASIFICACIÓN DE CARLOS LINNEO

REINO MONERA REINO PROTISTA REINO ANIMALIAREINO PLANTASREINO FUNGI

• CELULAS PROCARIOTAS

SIN MEMBRANA CELULAR

• CELULAS EUCARIOTAS

CON MEMBRANACELULAR

• ORGANISMOSCON NUCLEOSEUCARIOTICOSDISPERSOS EN

UNA PARED

• ORGANISMOSMULTICELULARES

CON CELULAS EUCARIOTICASY CON PARED

• ORGANISMOS CONMULTICELULARES

CON CELULASEUCARIOTICASY SIN PARED

CELULAR

La posibilidad que se pueda La posibilidad que se pueda derivar diferencia sobre las derivar diferencia sobre las relaciones filogenitas entre las relaciones filogenitas entre las bacterias se refleja en la bacterias se refleja en la organización de la edición mas organización de la edición mas reciente de bergey´s manual of reciente de bergey´s manual of “systematic bactereogoly” “systematic bactereogoly” publicado en cuatro volúmenes publicado en cuatro volúmenes desde 1984 hasta 1989 desde 1984 hasta 1989 publicado originalmente en publicado originalmente en 1926 este es un esfuerzo por 1926 este es un esfuerzo por calificar a las bacterias calificar a las bacterias conocidas y hacer accesible esta conocidas y hacer accesible esta información bajo la forma de información bajo la forma de una clave.una clave.

En 1980 el “international committee on En 1980 el “international committee on systematic bacteriology” publico una lista systematic bacteriology” publico una lista aprobada de bacterias esta lista remplaza a una aprobada de bacterias esta lista remplaza a una primera que había crecido con mas de 30,000 primera que había crecido con mas de 30,000 nombres desde el 1 de enero de 1980 solo la nombres desde el 1 de enero de 1980 solo la nueva lista se considera valida y los nombres nueva lista se considera valida y los nombres descartados, la edición de nuevos y otros descartados, la edición de nuevos y otros cambios requieren de su publicación en el cambios requieren de su publicación en el “international journal of systematic bacteriogoly”“international journal of systematic bacteriogoly”

Volumen 1. bacterias Gram. negativas de Volumen 1. bacterias Gram. negativas de importancia medica y comercial :Espiroquetas, importancia medica y comercial :Espiroquetas, bacterias espirales y curvas, Bacilos Gram. bacterias espirales y curvas, Bacilos Gram. negativos aeróbicos y facultativos aeróbicos, negativos aeróbicos y facultativos aeróbicos, anaeróbicos obligados Gram. negativos, cocos anaeróbicos obligados Gram. negativos, cocos Gram. negativo aerobios y anaerobios y Gram. negativo aerobios y anaerobios y ricketsia,micoplasmas.ricketsia,micoplasmas.

Volumen 2 .Bacterias Gram. positivas de Volumen 2 .Bacterias Gram. positivas de importancia medica y comercial: Cocos Gram. importancia medica y comercial: Cocos Gram. positivos, bacilos Gram. positivos formadores de positivos, bacilos Gram. positivos formadores de esporas y no esporulados y los atinomicetos no esporas y no esporulados y los atinomicetos no filamentosos.filamentosos.

Volumen 3 .bacterias Gram. negativas Volumen 3 .bacterias Gram. negativas restantes : Bacterias fototroficas, móviles, restantes : Bacterias fototroficas, móviles, encapsuladas y apendiculadas: siano encapsuladas y apendiculadas: siano bacterias, bacterias litotroficas y las bacterias, bacterias litotroficas y las bacterias archebacteria bacterias archebacteria (metanogenas,halófilas extremas y las (metanogenas,halófilas extremas y las termoacidófilas).termoacidófilas).

Volumen 4. Actinomicetos filamentosos y Volumen 4. Actinomicetos filamentosos y bacterias afinesbacterias afines

CLASIFICACIÓN DEL MANUAL DE BACTERIOLOGÍA CLASIFICACIÓN DEL MANUAL DE BACTERIOLOGÍA SISTEMÁTICA DE BERGEYSISTEMÁTICA DE BERGEY

VOLUMEN I VOLUMEN II VOLUMEN III VOLUMEN IV

Bacterias gramnegativas de importancia médica y comercial: espiroquetas, bacterias espirales y curvas, bacilos gram- aeróbicos, anaerobios obligados gram-, cocos gram- aerobios y anaerobios, micoplasmas.

Bacterias grampositivas de importancia médica y comercial: cocos gram+, bacilos gram+ formadores de esporas y no esporulados y los actinomicetos no filamentosos

Bacterias gramnegativas restantes: bacterias fototróficas, móviles, encapsuladas y apendiculadas, cianobacterias, bacterias litotróficas y las bacterias archebacteria (metanógenas, halófilas extremas y las termoacidófilas)

Actinomicetos filamentosos y bacterias afines.

22

• CELULA PROCARIOTA

• CELULA EUCARIOTA

• PLEOMORFISMO BACTERIANO

33

CELULA

CELULA EUCARIOTA

CELULA PROCARIOTA

GRAMPOSITIVAS

GRAM NEGATIVAS

ANIMAL VEGETAL

44 2727

CUERPOS CROMATICOS

RIBOSOMAS

NUCLEOIDE

PELOS

PAREDCELULAR

ESPORAS

FLAGELOS

SUSTANCIALAXA

CAPSULA

MICROCAPSULA

CELULA PROCARIOTA

55

ORGANELOS

PARED CELULAR:

Las bacterias gram negativas presentan pared mas delgada que las gram positivas.

Estructura fuerte y rígida que protege a la célula, tiene un espesor de 10-25 micras.

MICROCAPSULA:

Capa compuesta de proteínas, polisacáridos y lípidos; se localizan en las bacterias gram negativas se le conoce también como AG. SOMATICOS O ENDOTOXINAS.

CAPSULA:

Estructura gruesa viscosa gelatinosa.

Compuesta por polisacáridos y ácidos urónicos.

forman colonias lisas, brillantes y húmedas.

SUSTANCIA LAXA:

Semejante a la capsula.

Gram negativas: polisacáridos.

Gram positiva: polipéptidos.

66

ORGANELOS

FLAGELOS: Son apéndices delgados en espiral se encuentran en casi todas las bacterias en movimiento Su diámetro es de 0.01-0.05 micras y su longitud mayor de 70 micras. Compuestos por Flagelina; su origen es el Blefaroplasto y su crecimiento es de 0.5 micras por minuto.Pueden ser : Monotricos, Multitricos, Lofotricos y Peritricos.

PELOS O PILUS: Compuestos por Pilina, se encuentran en las gram negativas.Diámetro de 0.003-0.007 micras con longitud de 0.5-6 micras.Intervienen en la reproducción sexual bacteriana y presentan de 100-400 pelos.

ESPORAS: Solamente la contiene la familia Bacilacea, producen Eudoesporas. Son resistentes a agentes químicos y físicos.

77

CONCEPTOCONCEPTO GRAM GRAM

POSITIVASPOSITIVAS

GRAM NEGATIVASGRAM NEGATIVAS

AMINOACIDOSAMINOACIDOS 3-43-4 GRAN CANTIDADGRAN CANTIDAD

A. MURAMICOA. MURAMICO PRESENTEPRESENTE PRESENTEPRESENTE

LIPIDOSLIPIDOS 0-2%0-2% 10-20%10-20%

POLISACARIDOSPOLISACARIDOS 35-60%35-60% 15-20%15-20%

ACIDO TEICOICOACIDO TEICOICO PRESENTEPRESENTE AUSENTEAUSENTE

LIPOPOLISACARIDOSLIPOPOLISACARIDOS AUSENTEAUSENTE PRESENTEPRESENTE

FLAGELOFLAGELO AUSENTEAUSENTE PRESENTEPRESENTE

PARED CELULAR

Estructura de las células ProcariotaEstructura de las células Procariota

Un único cromosoma circular, desprotegido. No exíste membrana nuclear.

Se compone de fosfolípidos y proteínas y, no contiene esteroles. No poseen mitocondrias. Las enzimas de transporte se localizan en la membrana. Barrera osmótica, regula el transporte de los productos celulaes.

Estructura rígida protege a la célula. Dependiendo de su resistencia las bacterias se pueden clasificar en Gram+o-

Envoltura polisacárida que interviene de manera decisiva para evitar la fagocitosis bacteriana y contribuye a la adherencia de las bacterias a los tejidos o dispositivos artificiales.

Su formación permite a ciertos microorganismos sobrevivir en condiciones ambientales extraordinariamente duras.

Los pili son estructuras cortas intervienen en la adherencia de las bacterias a las células del huésped o facilitan el intercambio de ADN.Los flagelos ayudan a la movilidad bacteriana

88

NUCLEO

VACUOLA

MEMBRANACITOPLASMICA

LISOSOMAS

MITOCONDRIAS

RETICULOENDOPLASMICO

PAREDCELULAR

CELULAEUCARIOTA

3434

ORGANELOS

NUCLEO: Contiene la información genética (ADN y RNA), cubierto por proteínas (Histonas). Contiene una capa doble externa (Capa Nuclear).

RETICULO ENDOPLASMICO: Retículo endoplasmico liso (Complejo de Golgi). Retículo endoplasmico rugoso: transporta y sintetiza proteínas al complejo de Golgi.

MITOCONDRIAS: Contribuyen al sistema de transporte electrónico respiratorio (fuente principal de la célula). Contiene su propio ADN

LISOSOMAS: Degradan macromoléculas y los microorganismos.

MEMBRANA CITOPLASMICA: Regula el transporte de las macromoléculas dentro y fuera de la célula. Rodea al citoplasma, es una estructura lipoproteína.

PARED CELULAR: Constituye una barrera externa rígida que protege a la célula. Compuesta por polisacáridos.

VACUOLA: Almacena las proteínas.

N

Estructura de las células EucariotaEstructura de las células Eucariota

La información genética de la célula, el ADN, está disperso en numerosos cromosomasSe extiende a través del citoplasma celular y se divide en 2 tipos:Liso y Rugoso. El rugoso participa en la síntesis de proteínas.El complejo de Golgi se encuentra en el REL que se encarga del transporte de proteínas.

Estructuras envueltas por membranas, contienen su propio ADN, representa la fuente principal de energía de la célulaLas enzimas hidrolíticas para la degradación de las macromoléculas y los microorganismos se encuentran dentro de éstas células, envueltas por membranas.

De estructura lipoprotéica, rodea el citoplasma celular y regula el transporte de las macromoléculas dentro y fuera de la bacteria.

Constrituye una barrera externa rígida que, en el caso de las eucariotas, suele estar compuesta por polisacáridos del tipo de la celulosa o de la quitina.

1010

VIBRIO

BACILO COCO

ESPIROQUETA

ESPIRILO

PLEOMORFISMOBACTERIANO

1111

MORFOLOGÍA Y AGRUPACIONESMORFOLOGÍA Y AGRUPACIONES

Bibliografia:Bibliografia:

*Jawetz, Melnick, Aderberg*Jawetz, Melnick, Aderberg ““microbiologia medica”microbiologia medica” Edit. Mainsal Edit. Mainsal modernomoderno pp. 105-108pp. 105-108

Carpenter Philip L.Carpenter Philip L. ““microbiologia”microbiologia” Edit. Interamericana Mexico 1969Edit. Interamericana Mexico 1969 Pp. 46-51Pp. 46-51

www. Mecobiologis medica.com.mxwww. Mecobiologis medica.com.mx

CELULAS INDIVIDUALESCOLONIAS BACTERIANAS

TAMAÑO COLOR FORMA ELEVACION SUPERFICIE

•Puntiforme

•Circular

•Irregular

•Filamentosa

•Rizoide

•Plana

•Elevada

•Convexa

•Pulvinada

•umbonada

•Lisa

•Rugosa

Mm lactosa+ lactosa-

ASPECTO BORDES LUZ REFLEJADA LUZ TRANSMITIDA

•Fusiforme

•Húmedo

•Seco

•Liso

•Ondulado

•Lobulado

•Filamentoso

•Desgastado

•Estriado

•Brillante•Mate

•Opaca•Traslucida o transparente

CONSISTENCIA

•Suave

•Dura

CONSISTENCIA PIGMENTACION HEMOLISIS OLOR

Degradacion de alimentos

Destrucción de eritrocitos

Solamente en colonias

DESARROLLO EN CALDO DESARROLLO EN CALDO NUTRITIVONUTRITIVO

Escaso

Moderado

Abundante

DistribuciónUniformemente distribuido (turbidez)

Desarrollo confinado (nata o pelusa)

Pútrido

A frutas o aromático

Imperceptible

Olor

Desarrollo que se acumula como sedimento

CALDO NUTRITIVO CRECIMIENTO

SUPERFICIAL

DESARROLLO EN AGAR DESARROLLO EN AGAR (INCLINADO) POR ESTRÍAS(INCLINADO) POR ESTRÍAS

Escaso

Moderado

Abundante

Margen o borde de desarrollo

UniformePresentando varias irregularidades

Consistencia de la masa desarrollada

Mantecosa

Mantequilla

Fácilmente removibles con una aguja de siembras

Cromogénesis o pigmentación

ColoreadasSin color

DESARROLLO EN GELATINA DESARROLLO EN GELATINA POR PICADURAPOR PICADURA

Desarrollo (sin licuefacción) Licuefacción de la gelatina

Se puede presentar desde arriba suavemente o adquirir aspectos variados de embudos al licuar la gelatina.

A lo largo de la línea de inoculación. El desarrollo puede estar limitado a la zona de la picadura o puede haberse expandido.

A1 B1 C1 D1 E1

A2 B2 C2 D2 E2

LICUEFACCION

A1.CATRERIFORME

B1.CALCIFORME

C1.INFUNDIBULIFORME

D1.ESTIPILIFORME

E1.ESTRATIFORME

LINEA DE PICADURA

A2.FILIFORME

B2.GRANULOSA

C2.PAPILIFORMA

D2.VELTOSA

E2.ARBORESENTE

Bibliografias:

•Preescott, harley klein; microbiologia ; editorial Mc- Graw- Hill- interamericana ;4ª edicion ; pp. 108- 111

•George a. wistreich y max d. lechtman; practicas de laboratorio en microbiologia; edit. Limusa, mexico, 1978; 2º edicion ; pp. 23-26

•Martn frobisher y robert fuert ; microbiologia medica ; edit. Interamericana ; pp. 174-197

•Jawetz, melnick y adelberg; microbiologia medica ; 14º edicion ; pp. 60-65

•Patrick r. murray, george s. kobayashi y michael a. dfaller; microbiologia medica ; 2º edicion ; editorial harcourt brace; pp. 84- 93

Metabolismo MicrobianoMetabolismo Microbiano

Enzimas quedegradan

la glucosa haciaunidades utilizables.

Enzimas queconstruyenbloques deestructura

celular a partirde estas

unidades.

Enzimas quedisponen losbloques deestructura

organizando losorgánulos

bacterianos

1. La forma la que el organismo obtiene el carbono para la construcción de la masa celular:Autótrofo. El carbono se obtiene del dióxido de carbono (CO2). Heterótrofo. El carbono se obtiene de compuestos orgánicos. Mixótrofo. El carbono se obtiene tanto de compuestos orgánicos como fijando el dióxido de carbono. 2. La forma en la que organismo obtiene los equivalentes reductores para la conservación de energía o en las reacciones biosintéticas:Litotrofo. Los equivalentes reductores se obtienen de compuestos inorgánicos. Organotrofo. Los equivalentes reductores se obtienen de compuestos orgánicos. 3. La forma en la que el organismo obtiene la energía para vivir y crecer:Quimiotrofo. La energía se obtiene de compuestos químicos externos. Fototrofo. La energía se obtiene de la luz.

NUTRICIÓN MICROBIANA

Hidrólisis de Alimentos Complejos

Proteínas, polisacáridos,Grasas y otros componentesEstructurales de gran tamaño

son transformados en suspartes constituyentes

Por IntroducciónDe agua en los

Sitios de desdoblamientoDe las grandes moléculascon lo que se liberan lasMoléculas integrantes.

Hidrólisis de proteínasda origen a:PeptonasProteosas AminoácidosPéptidos

Transporte Activo

Ocurre en la PARED CELULAR

Capacidad del microorganismopara acumular sustancias en el

interior de la célula enconcentración mayor de la queaparece en el medio ambiente.

El fenómeno de transporte necesitaenergía y es catalizado por:

Enzimas:Permeasas

Son producidas sólo cuandohay determinado sustrato.

El microorganismode este tipo sueledescribirse comocríptico respecto

al citrato.

Hay m.o quecarecen

de las enzimasmetabólicas

perotienen el

transporte

Tipos Nutricionales de Bacterias

Heterotróficos Fotosintéticos

Heterotróficos quimiosintéticos

Cuando el fosfato se encuentraa nivel de alta energía, puede

transferirse a difosfato deadenosina (ADP) o adenosi-

monofosfato (AMP) para formar,respectivamente adenosintri-

fosfato (ATP) o ADP.

Para utilizar la glucosa útil de laliberación de energía,se necesitóATP para que la molécula fuera

lo suficientemente reactiva.

Vía de Embden Meyerhof

-Respiración aeróbica y anaeróbica-Aerobios y anaerobios facultativos

Glucosa + 2 ADP + 2P+ 2 NAD+ 2piruvato+ 2 ATP + 2 NADH+ 2H+

Ciclo de PentosafosfatoAporta esqueletos de carbono para los nucleótidos, diversos carbohidratos y energía para generar ATP de la siguiente forma:

5. Además de su utilidadEn el metabolismo energético,El NADPH generado participa

Decisivamente en la síntesis deÁcidos grasos y en la direcciónde numerosos intermediariosdel ciclo hacia la síntesis de

nucleótidos.

4.El ciclo de pentosa-fosfato constituye un

sistema eficaz deobtener energía

3.Este ciclo constituyeun mecanismo esencial

para el aprovecha-miento de las pentosas

como fuentes deCarbono y energía

de las bacterias

2.El ciclo de pentosa-fosfato facilita también

el crecimientoaerobio sin laparticipación

de las enzimasdel ciclo de Krebs.

1.Cubre la demandapara la síntesis de

NADPH ynucleótidos.

VIA DE LA PENTOSA FOSFATO

1.-Opera de forma aeróbica o anaeróbica

3 glucosa 6-fosfato + 6NADP + 3H2O 2 fructosa 6-fosfato gliceraldehido3-fosfato + 3CO2+ 6NADPH + 6H+

El NADPH actúa como fuente de electrones para reducción de moléculas durante la biosíntesis.

-La eritrosa4-fosfato se utiliza para sintetizar aminoácidos aromáticos.-La ribosa 5-fosfato es un componente fundamental de los ácidos nucleicos-La ribulosa1,5-bisfosfatoes el principal aceptor de CO2 en la fotosíntesis

Importancia de la vía de la pentosas fosfato

Vía de Entner-DoudoroffAlgunas bacterias Gram-

emplean ésta Vía en lugar dela glucólisis.

Se trata de una manipulaciónMicrobiana estricta de

Glucosa-6-Fosfato que implicaLa producción de

Ácido 6-fosfoglucónico

Exíste una deshidratasa queElimina el agua en presencia de

Hierro ferroso y forma Ácido2-ceto-3-3desoxi-6-fosfoglucónico

Muchas bacterias utilizan estaVía alternativa para metabolizar

El gluconato, el manonato, elGlucuronato y otros compuestos

Relacionados, pero no para degra-dar las hexosas.

VÍA DE ENTNER-DOUDOROFF

-Esta vía esta presente generalmente en Psaeudomonas, Rhizobium, AzotobacterAgrobacteriumy otros gramnegativos.

-Pocos grampositivos tienen esta vía.

-Se degrada la glucosa a piruvatoproduciendo 1 ATP, 1 NADPH y 1 NADH por molécula de glucosa metabolizada.

Vía de Fosfocetolasa

Mecanismo estrictamente microbiano

Fermentación de la Glucosa

Se produce:

-Lactato-Acetato o etanol

-Anhídrido Carbónico

PENTOSAS Lactato y acetato

CARECEN DE:

Fosfofructoquinasa.

El gliceraldehído se convierte enPiruvato y se reduce a lactato.

La reacción de piruvato haciaLactato consume 2 protones de

NADH quedando otros cuatro queParticipan en las conversiones de

Acetaldehído y etanol.

Ciclo del Ácido Tricarboxílico

Vía Metabólica más importantede los seres vivos que facilita

el consumo de oxígeno.

AportaEnergía

AportaSustratos

IntermediosPara la

biosíntesis.

CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXILICOS (TCA), CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO O CICLO DE KREBS

-El sustrato es el Acetil-CoA(molécula rica en energía)

-Acetil-CoA 2CO2+ 3NADH + 1FADH2+ 1 GTP

1 NADH= 3 ATP

1 FADH2= 2 ATP

1 GTP= 1 ATP

RESPIRACIÓN ANAERÓBICA

Es el proceso anaeróbico productor de energía en el que el aceptor de electrones de la cadena transportadora de electrones es una molécula inorgánica oxidada diferente al O2

Los principales aceptores de electrones son: el nitrato, el sulfato y el CO2

Bibliografías:

http://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria

Romero Cabello Raúl Microbiología y Parasitología HumanaPanamericanaMéxico 1999pág. 214-219

Jawetz, Melnick, Mellor.Microbiología medicaMosbyEspaña 1996Pag.190-202

Curva de crecimiento bacteriano

La curva de Crecimiento es una representación grafica del Análisis de las Fases que presentan las Bacterias al crecer y Desarrollarse en medios adecuados.

Estas curvas son afectadas por distintos factores como la temperatura y el pH.

Curva de crecimiento bacteriano

Fase de Rezago (A) Es el periodo en el cual la bacteria se

adapta al medio, no se incrementa (multiplica), es la fase donde hay mas fase actividad metabólica.

Fase de Aceleración (B) Es la fase donde comienza a nutrirse la

bacteria y a reproducirse de una forma acelerada

Fase Exponencial (C) Es el periodo en el cual las bacterias se

encuentra en un estado de crecimiento (nutrición y reproducción) constante

Fase de Retrazo (D) Es el lapso en el cual los nutrientes

comienzan a agotarse, su reproducción es decreciente pero sin cesar completamente la reproducción.

Fase Estacionaria (E) En esta fase el numero de bacterias se

mantiene estable (sola algunas se reproducen) se empiezan acumular desechos y cada vez se agotan mas los nutrientes

Declinación o Muerte (F) Se produce el agotamiento de nutrientes y

la acumulación de desechos provoca la muerte de las bacterias

CURVA DECRECIMIENTOBACTERIANO

Fase de Rezago:

AdaptaciónAl nuevo

Ambiente.Se formanenzimas y

metabolitos.

FaseEstacionaria

Máxima:

Agotamiento denutrientes y

acumulación deproductos

tóxicos.Equilibriode vida y muerte

Fase deDeclinación(muerte):

Muerte celularSostenida.La tasa deMortalidadAumenta.

FaseExponencial:

Crecimientosostenido.

Éste continuahasta la ago-

tación denutrientes.

Bibliografía Jawetz,

Melnick y Adelberg

Microbiología Medica

Edit: Mainsal Moderno

pp.:57-59

Gerhardt Pet alManual of Methods for General BacteriologyEdit American Society for Microbiology

Koneman

Allen, Dowell, Sommers Diagnostico MicrobiológicoEdit Panamericanapp.:212-213

Control bacteriano

Temperatura de crecimiento MINIMA OPTIMA MAXIMA Pseudomonas gelatica 0 20-25 30-37 Pseudomonas pisi 7 28 37 Bacillus subtilis 8 28-40 50-55 Escherichia coli 8 37 47 Clostridium tetani 14 37 43 Neisseria gonorrheae 30 37 40 Lactobacillus del bruckii 20 50 55 Bacillus stearothermophilus 33-37 50-65 70

FACTORES QUE MODIFICAN

LA MUERTE DE MICROORGANISMOS

POR CALOR

TEMPERATURA NUMERO DE MICROORGANISMOS ESPECIES MEDIO pH

LA TEMPERATURA RIGE:

VELOCIDAD DE CRECIMIENTO

MULTIPLICACION(REPRODUCCION)

MUERTE DELOS

MICROORGANISMOS

CLASIFICACION DE LAS BACTERIAS SEGÚN SU TEMPERATURA DE CRECIMIENTO

CLASIFICACION:

PSICROFILAS MESOFILAS TERMOFILAS

A. Crecimiento adecuadamente B. Temperatura optima de crecimiento C. Temperatura optima a 0ºC (tiempo de generación menor de menor de 45ºC. (Muchas especies de crecimiento mayor 48 horas no crecen a menos de 10ºC o de 45ºC en términos AA. No adecuadamente a 0ºC incluso a 52ºC) generales crecen a 55ºC. (Los termófilos obligatorios no crecen a 37ºC o menos en tanto que los facultativos lo hacen.

PRESION OSMOTICA

SOLUCIONES:

ISOTONICAS HIPERTONICAS HIPOTONICAS

EFECTOS DE TEMPERATURAS BAJAS

LAS TEMPERATURAS BAJAS NO MATAN A LAS BACTERIAS

SINO QUE

SE INTERRUMPE LA MULTIPLICACIONSE CONSERVA EN ESTADO DE

INACTIVIDAD

LA MULTIPLICACION SE REANUDA SI LAS TEMPERATURAS

SE NORMALIZAN

LAS BACTERIAS SOPORTAN LAS TEMPERATURAS MUY BAJAS A LAS

MENORES DE SU MINIMACRECIMIENTO

CONCENTRACION DE HIDROGENO PH EJEMPLOS

N/1 = 10-0 0 JUGO DE LIMON N/10 = 10-1 1 pH 2.3 N/100 = 10-2 2N/1000 = 10-3 3N/10000 = 10-4 4N/100000 = 10-5 5N/1000000 = 10-6 6 ACIDO LECHE: pH 6.6

N/10000000 = 10-7 7 NEUTRO SANGRE: pH 7.3

N/100000000 = 10-8 8 ALCALINO BICARBONATO SODICO (N/10):

N/1000000000 = 10-9 9 pH 8.4

N/10000000000 = 10-10 10 CAMBIO DE COLOR DE LA

N/100000000000 = 10-11 11 FENOLFRATEINA pH 9.2

N/1000000000000 = 10-12 12 N/10000000000000 = 10-13 13 AGUA DE CAL VIVA: pH 12.3

N/100000000000000 = 10-14 14

VIBRACIONESSONORAS

ALTERACIONESDE LAS

CELULAS

ROTURADE

PAREDES

TRANSTORNOSEN EL

CONTENIDOCELULAR

DESINTEGRACIONTOTAL

EFECTOS

O

ATMOSFERA ADECUADA

ES LA PRESENCIAO AUSENCIADE OXIGENO

A) AEROBIOS OBLIGADOS

B) ANAEROBIOSOBLIGADOS

C) ANAEROBIOSFACULTATIVOS

RADIACION

MUERTE MUTACION

ALTERACIONESGENETICAS

CARÁCTERLOGARITMICO

EFECTOS

TIENEN CAUSAN

ESTERILIZACION

AGENTES FISICOS

CALOR SECO(180ºc Y 1H, 2H a160ºC)

-FLAMA DIRECTA-AIRE CALIENTE-HORNO

CALOR HUMEDO(121-132ºC X 15MIN + PRESION)

-EBULLICION-VAPOR FLUENTE-PASTEURIZACION

-ULTRAPASTEURIZACION-AUTOCLAVE, RECIPIENTES

RADIACION IONIZANTE•RAYOS X

•ALFA•GAMA•BETA

RADIACIONES NO IONIZANTESRADIACION ULTRAVIOLETA

ACTUA AL NIVEL DE LA TIMINAFILTRACION

AGENTES QUIMICOS

LIQUIDOSFORMALDEHIDO

(37%)GLUTARALDEHIDO

(2%)ALCOHOLESALDEHIDOSBIGUANIDASBISFENOLES

LIBERADORES DE ALOGENOSDERIVADOS DE METALES

PESADOSPEROXIGENOS

FENOLESCOMPUENTOS DE AMONIO

CUATERNARIO

GASESOXIDO DE ETILENO

(500mg/c 60ºC)

CLASIFICACION DE AGENTES ESTERILIZANTES

CALOR HUMEDO -PASTEURIZACION

-EBULLICION

-VAPOR DE LA PRESION ATMOSFERICA

-VAPOR CON PRESION

CALOR SECO -FLAMEADO

-INCINERACION

-AIRE CALIENTE

FILTRACION -BUJIAS (TIERRA DE DIATOMEAS, PORCELANA)

-LAMINAS DE ASBESTO

-DISCOS DE MEMBRANAS

RADIACION NO IONIZANTE IONIZANTE

-RAYOS -RAYOS GAMMA

ULTRAVIOLETA -ELECTRONES

-RAYOS INFRARROJOS DE ALTA

ENERGIA

AGENTES FISICOS

DEFINICIONES DE ESTERILIZACION Y DESINFECCION Antisepsia: Uso De Agentes Químicos Sobre Piel O Tejido Vivo Para Eliminar Los Microorganismos

Antiséptico: Sustancia Química Utilizada De Forma Tópica En Las Superficies Corporales

Aséptico: Material o sitio anatómico libre de microorganismos

Bactericida: método químico utilizado para anular la capacidad de multiplicación de un microorganismo

Bacteriostático: inhibición temporal del metabolismo de bacterias

Desinfectante: son agentes químicos que destruyen microorganismos patógenos en materiales inertes

Esporicida: acción de destrucción de las esporas de las bacterias

Fungicida: es la acción de matar hongos microscópicos

Germicida: es la acción de matar a los microorganismos o gérmenes

Inefectividad: capacidad que tienen algunos microorganismos de penetrar al huésped

Pasterización: elevación de la temperatura de los líquidos a 60ºC durante 30 seg. Y después bajarla bruscamente

Séptico: contaminación de algún cuerpo vivo o inerte por microorganismos o sus producto. Ultrapasteurización: Elevación de la temperatura a 80° C durante un minuto y después bajarla

bruscamente

Control BacterianoControl BacterianoA. Biocida

inactiva microorganismos

B. BacteriostáticoInhibe temporalmente el

crecimiento de m.o.

J. AntibióticosDestruyen bacterias

selectivamente

C. BactericidaPropiedad para matar

bacterias.

E. DesinfectantesMata bacterias en

superficies u objetos.

I. Conservación

G. AntisépticoElimina los m.o. en

tejidos vivos.

D. EsterilizaciónRemueve todo tipo de

vida microbiana.

H. AsépticoAusencia de m.o.

patógenos

F. SépticoPresencia de m.o.

en tejido vivo

Efectos de los agentes físicos Efectos de los agentes físicos sobre la vida microbiana.sobre la vida microbiana.

CALOR

Método más simplepara esterilizar

material

Tiempo deesterilización:

121ºC15 libras de presión

15 minutos

RADIACIÓN

La luz ultravioleta y las radiaciones ionizantes tienen aplicaciones como esterilizantes

Efecto de la temperatura sobre Efecto de la temperatura sobre los microorganismoslos microorganismos

Temperatura mínimaDe crecimiento

Temperatura óptimaDe crecimiento

Temperatura máximaDe crecimiento

PUNTOS CARDINALES

Clasificación de los microorganismos según Clasificación de los microorganismos según su temperatura de crecimientosu temperatura de crecimiento

Psicrófilas

Termófilas

Mesófilas

Termodúricas

Temp. mínima Temp. máxima Temp. óptima

A 5ºC de lamáxima

35 – 45 ºC

75 - 80ºC

-5 ºC

20 - 35ºC

35 - 45ºC

40 ºC

30 ºC

52 ºC

105 ºCo más

Bacterias de Gran Resistenciaal calor. Los que forman endosporas

Factores que modifican la Factores que modifican la muerte de los microorganismosmuerte de los microorganismos

Inactiva temporalmentea las bacterias y su

crecimiento

Acción mortal del calor:-Naturalización de proteínas

-Inactivación de enzimas esenciales

MATABACTERIAS

Después el creci-miento se reanu-da con rapidez.

Factores que modifican la Factores que modifican la muerte de los microorganismosmuerte de los microorganismos

VibracionesVibracionessonorassonoras

RadiacionesRadiaciones

PresiónPresiónosmóticaosmótica

La luz ultravioleta

tiene eficacia contra bacterias.

Radiaciones Germicidas

Esterilización y desinfecciónEsterilización y desinfección

Proceso Físico o químico que destruye o remueve completamente todo tipo de vida microbiana, incluyendo esporas.

Eliminación de microorganismos en objetos o superficies.

Tipos de EsterilizaciónTipos de Esterilización

CALOR HÚMEDO CALOR SECO FILTRACIÓN AGENTES QUÍMICOS

Tipos de desinfectantes químicosTipos de desinfectantes químicos

Alcoholes

Aldehídos

Biguanidas

Bisfenoles

Liberadores dehalógeno

Derivados de metalespesados

Peroxígenos

Fenoles

Esterilizantes de Fasede vapor

COMPUESTOS DEAMONIO CUATERNARIO

(QAC)

BIBLIOGRAFÍA:BIBLIOGRAFÍA:

**ROMERO CABELLO RAUL.“MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA ROMERO CABELLO RAUL.“MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA HUMANA”.EDIT. PANAMERICANA. MÉXICO 1999.Pp. 216-229HUMANA”.EDIT. PANAMERICANA. MÉXICO 1999.Pp. 216-229

**MURRAY P.R.,LAWRENCE D.W.“MICROBIOLOGÍA MÉDICA”MURRAY P.R.,LAWRENCE D.W.“MICROBIOLOGÍA MÉDICA”

EDIT. MOSBY.ESPAÑA 1996. Pp. 59-73EDIT. MOSBY.ESPAÑA 1996. Pp. 59-73

**CARPENTER PHILIP. “MIROBIOLOGIA”. EDITORIAL “MIROBIOLOGIA”. EDITORIAL INTERAMERICANA. MEKICO 1969. Pp. 80-90INTERAMERICANA. MEKICO 1969. Pp. 80-90

MEDIOS DE CULTIVOMEDIOS DE CULTIVO

Cultivo:Cultivo: Es la propagación artificial

de microorganismos, células o tejidos.

Medio de cultivo: Medio de cultivo: Sustrato o solución de

nutrientes en que se cultivan microorganismos en el

laboratorio.

PROTEÍNASPROTEÍNAS.- Suministro de .- Suministro de peptonas como polipéptidos, peptonas como polipéptidos, dipéptido y aminoácidos.dipéptido y aminoácidos.

CARBOHIDRATOSCARBOHIDRATOS.- Suministro .- Suministro de carbono para la síntesis.de carbono para la síntesis.

FACTORES ACCESORIOS DE FACTORES ACCESORIOS DE CRECIMIENTOCRECIMIENTO.- Entre ellos están las .- Entre ellos están las vitaminas del complejo “B”, suero, vitaminas del complejo “B”, suero, sangre, yema de huevo, etc. sangre, yema de huevo, etc.

SALES MINERALESSALES MINERALES.- Potasio (K), .- Potasio (K), Sodio (Na), Calcio (Ca), etc.Sodio (Na), Calcio (Ca), etc.

ATMOSFERAATMOSFERA.- Con oxígeno (aerobios .- Con oxígeno (aerobios obligados), sin oxígeno (anaerobios obligados), sin oxígeno (anaerobios obligados) , con o sin oxígeno obligados) , con o sin oxígeno (anaerobios facultativos).(anaerobios facultativos).

PRESIÓN OSMÓTICAPRESIÓN OSMÓTICA.- Pueden ocurrir .- Pueden ocurrir plasmoptisis (destrucción de células) plasmoptisis (destrucción de células) o plasmolisis ( en soluciones o plasmolisis ( en soluciones hipertónicas por salida de agua.hipertónicas por salida de agua.

TEMPERATURATEMPERATURA.- Para la mayoría .- Para la mayoría de las bacterias patógenas es de de las bacterias patógenas es de 37ºC , los limites se encuentran 37ºC , los limites se encuentran entre los 15º y 40ºC.entre los 15º y 40ºC.

LUZLUZ.- La mayoría se desarrollan .- La mayoría se desarrollan en ausencia de luz. en ausencia de luz.

REACCIONREACCION.- La mayoría crece en un .- La mayoría crece en un medio ligeramente alcalino (pH = medio ligeramente alcalino (pH = 7.2-7.6). Algunas como 7.2-7.6). Algunas como VibrioVibrio cholerascholeras necesitan un medio mas necesitan un medio mas alcalino (pH =9.6)alcalino (pH =9.6)

INCUBACIONINCUBACION.- Generalmente se .- Generalmente se incuban a 35ºC y se examinan por 1ª incuban a 35ºC y se examinan por 1ª vez después de 18-24 horas. El COvez después de 18-24 horas. El CO2 2 añadido incrementa el crecimiento y añadido incrementa el crecimiento y debe utilizarse siempre que sea debe utilizarse siempre que sea necesario.necesario.

Clasificación de Clasificación de medios de cultivo.medios de cultivo.

Medios simples.Medios simples.

Es aquel donde crece todo tipo de Es aquel donde crece todo tipo de bacterias.bacterias.

•Agar nutritivoAgar nutritivoConsiste en extractos de carne, peptona y agua. Es empleado como Consiste en extractos de carne, peptona y agua. Es empleado como base en la elaboración se medios mas complejos. Adecuado para el base en la elaboración se medios mas complejos. Adecuado para el cultivo de microorganismos poco exigentes. Se emplea en bacteriología cultivo de microorganismos poco exigentes. Se emplea en bacteriología sanitaria, medica e industrial.sanitaria, medica e industrial.

•Agua pectonadaAgua pectonadaCompuesta por proteasas, peptona, polipéptidos y aminoácidos. Compuesta por proteasas, peptona, polipéptidos y aminoácidos. Suministra netabolitos nitrogenados.Suministra netabolitos nitrogenados.

Estimulan el crecimiento de microorganismos especialmente Estimulan el crecimiento de microorganismos especialmente enterobacterias.enterobacterias.

•Caldo NutritivoCaldo NutritivoExtracto acuoso de carne. Las proteínas son remplazadas por peptona al Extracto acuoso de carne. Las proteínas son remplazadas por peptona al 1% y se añade NaCl al 0.5% se usa generalmente para enterobacterias.1% y se añade NaCl al 0.5% se usa generalmente para enterobacterias.

Medios de transporteMedios de transporte

Se utiliza cuando la muestra no va a ser tomada en el laboratorio.

•Solución salina glicerinada amortiguada.Solución salina glicerinada amortiguada.Transporte de muestras de heces por infección por: Salmonella o Transporte de muestras de heces por infección por: Salmonella o Shigella.Shigella.

•Cary Blair.Cary Blair.Es especialmente útil para la búsqueda de Vibrio spp. a partir de Es especialmente útil para la búsqueda de Vibrio spp. a partir de muestras fecales y rectales.muestras fecales y rectales.

•Stuart.Stuart.Presentan la habilidad de los microorganismos de tipo Gonococo y Presentan la habilidad de los microorganismos de tipo Gonococo y enterobacterias hasta por 24 horas.enterobacterias hasta por 24 horas.

•Transgrow. Transgrow. Medio de transporte y crecimiento de Neisseria gonorrhoeae y Neisseria gonorrhoeae y Neisseria meningitidisNeisseria meningitidis

Medios EnriquecidosMedios Enriquecidos

Son medios básicos que han sido complementados con líquidos

corporales como el suero, sangre, vitaminas, amino ácidos, proteínas, etc.

• Agar sangre.Agar sangre. Nos sirve para el aislamiento, cultivo y actividad hemolítica de Nos sirve para el aislamiento, cultivo y actividad hemolítica de

gérmenes difíciles como: gérmenes difíciles como: Streptococcus pyogenes.

• Agar Chocolate.Agar Chocolate.Suministran substratos para el crecimiento de Haemophilus sp.

• Caldo Selenito Cistina.Caldo Selenito Cistina. Medio utilizado para el enriquecimiento selectivo de Salmonella

sp. a partir de muestras de alimentos, productos lácteos y otros

materiales de importancia sanitaria.• Medio de Bordet- Gengou. Medio de Bordet- Gengou. Se emplea en el aislamiento y crecimiento de Bordetella pertussis

• Medio de Loeffler.Medio de Loeffler. Medio rico en nutrientes crecen bacilos diftéricos y gérmenes de Medio rico en nutrientes crecen bacilos diftéricos y gérmenes de

difícil desarrollo como Moraxella Lacunata.difícil desarrollo como Moraxella Lacunata.

• Agua con suero Hiss.Agua con suero Hiss. Se utiliza para microorganismos que prefieren suero como Se utiliza para microorganismos que prefieren suero como

substrato.substrato.

• Medio de Robertson con carne.Medio de Robertson con carne. Para el cultivo de microorganismos anaerobios.Para el cultivo de microorganismos anaerobios.

Medios especiales y/o Medios especiales y/o selectivosselectivos

Deben su importancia al hecho de que Deben su importancia al hecho de que contienen substancias que impiden el contienen substancias que impiden el

desarrollo de cualquier bacteria que no desarrollo de cualquier bacteria que no sea la que esta bajo investigación, se sea la que esta bajo investigación, se

emplean diferentes substancias. emplean diferentes substancias.

Ejemplos de sustancias.Ejemplos de sustancias.

Las sales biliares en un medio impide el Las sales biliares en un medio impide el desarrollo de los m.o. entéricos.desarrollo de los m.o. entéricos.

El verde de Malaquita es inhibidor de los El verde de Malaquita es inhibidor de los m.o. que pertenecen al grupo m.o. que pertenecen al grupo Mycobacteriaceae.Mycobacteriaceae.

El pH ácido permite el desarrollo de El pH ácido permite el desarrollo de hongos, pero inhibe las bacterias.hongos, pero inhibe las bacterias.

Medio de Mac-Conkey.- Se utiliza para Medio de Mac-Conkey.- Se utiliza para aislar e identificar Salmonella, Shigellas y aislar e identificar Salmonella, Shigellas y coliformes, además pseudomonas y coliformes, además pseudomonas y aeromonas, también Streptococcus fecalis aeromonas, también Streptococcus fecalis y Estafilococos.y Estafilococos.

Agar SS.- Cultivo de Salmonella y Agar SS.- Cultivo de Salmonella y Shigellae.Shigellae.

Medio con Telurita.- Identificación de Medio con Telurita.- Identificación de Corynebacterium.Corynebacterium.

Medio de Sabouraud.- Cultivo y desarrollo Medio de Sabouraud.- Cultivo y desarrollo de hongos .de hongos .

Medio de Löwenstein-Jensen.- Medio de Löwenstein-Jensen.- Identificación de microbacteriaceaeIdentificación de microbacteriaceae

Medio de selenita F. – Cultivo y desarrollo Medio de selenita F. – Cultivo y desarrollo de Salmonellae y Shigellae.de Salmonellae y Shigellae.

Medio de TCBS. Aislar y cultivar especies Medio de TCBS. Aislar y cultivar especies diversas de Vibrio especialmente diversas de Vibrio especialmente VibrioVibrio choleraecholerae

Infusión corazón-cerebro.-Permite el Infusión corazón-cerebro.-Permite el desarrollo de m.o. delicados y difíciles, desarrollo de m.o. delicados y difíciles, tales como Estreptococos y tales como Estreptococos y meningococosmeningococos

Agar y caldo de soya con triptona.- Se Agar y caldo de soya con triptona.- Se utilizan en el cultivo de m.o. anaerobios , utilizan en el cultivo de m.o. anaerobios , Vibrios y Bacteroides.Vibrios y Bacteroides.

Medio de Thayer Martin.- Desarrollo de Medio de Thayer Martin.- Desarrollo de Neisseria, Gonococos y Meningococos. Neisseria, Gonococos y Meningococos.

Medios diferenciales

Son aquellos que contienen sustancias nutritivas o inhibidores que permiten poner

en manifiesto algunas actividades metabólicas del microorganismo que es

diferente a otros.

Agar con Citrato.- Se utilizan en la Agar con Citrato.- Se utilizan en la diferenciación de bacterias entericas diferenciación de bacterias entericas Gram. (-) y coliformes aislados de agua.Gram. (-) y coliformes aislados de agua.

Medio SIM.- Diferenciación e identificación Medio SIM.- Diferenciación e identificación de enterobacterias.de enterobacterias.

Rojo de Metileno.- Para indicar la Rojo de Metileno.- Para indicar la presencia y degradación de Peptona-presencia y degradación de Peptona-fosfato de glucosa (reacción acida)fosfato de glucosa (reacción acida)

Medio MIO.- Se observa la producción de Medio MIO.- Se observa la producción de indol, movilidad y ornitina.indol, movilidad y ornitina.

Medio LIA.- Descarboxilación de la Lisina Medio LIA.- Descarboxilación de la Lisina y Ornitina.y Ornitina.

Medio Kligler.- Fermentación de los Hidratos de carbono, H2S y gas.

Caldo Urea.- Producción de Ureasa.Caldo Urea.- Producción de Ureasa.

Medios diferenciales Medios diferenciales ligeramente selectivosligeramente selectivos

Son medios en los cuales se han adicionado Son medios en los cuales se han adicionado en concentraciones definidas en concentraciones definidas (generalmente bajas) sustancias como (generalmente bajas) sustancias como cristal violeta, Fucsina, Azul de metileno, cristal violeta, Fucsina, Azul de metileno, eosina, sales biliares, etc. Que inhiben el eosina, sales biliares, etc. Que inhiben el crecimiento de los m.o. Gram. (+) y crecimiento de los m.o. Gram. (+) y algunos Gram. (-).algunos Gram. (-).

ENDO.- Aislamiento diferencial de ENDO.- Aislamiento diferencial de coliformes y otras entero bacterias.coliformes y otras entero bacterias.

EMB.- Aislamiento y diferenciación de EMB.- Aislamiento y diferenciación de coliformes de otras enterobacterias de coliformes de otras enterobacterias de interés medio y sanitario.interés medio y sanitario.

El Agar McConkey.- Se utiliza para aislar e El Agar McConkey.- Se utiliza para aislar e identificar Salmonella, Shigellas y identificar Salmonella, Shigellas y coliformes a partir de heces fecales, coliformes a partir de heces fecales, orinas, etc.orinas, etc.

Agar Tergitol 7.- Para la detección de Agar Tergitol 7.- Para la detección de organismos coliformesorganismos coliformes

Medios diferenciales altamente Medios diferenciales altamente selectivos.selectivos.

Estos limitan o suprimen el crecimiento de Estos limitan o suprimen el crecimiento de los microorganismos de flora normal.los microorganismos de flora normal.

Base de Agar de Casman.- Cultivo de Base de Agar de Casman.- Cultivo de neisseria gonorrhoeae.neisseria gonorrhoeae.

Agar para Salmonella y Shigella (SS).Agar para Salmonella y Shigella (SS).

Agar Xilosa, Lisina, Desoxicolato (XLD).- Agar Xilosa, Lisina, Desoxicolato (XLD).- Aislar Shigella, Salmonella y Arizona.Aislar Shigella, Salmonella y Arizona.

Agar Verde Brillante.- Aísla SalmonellaAgar Verde Brillante.- Aísla Salmonella

Agar Sulfito de Bismuto.- Agar Sulfito de Bismuto.- SalmonellaSalmonella typhityphi

Agar Sal y Manitol.- Aislamiento de Agar Sal y Manitol.- Aislamiento de EstafilococosEstafilococos

Agar Biggy.- Aislamiento de Agar Biggy.- Aislamiento de CandidaCandida albicans.albicans.

Agar Tech.- Incrementa y promueve la Agar Tech.- Incrementa y promueve la formación de formación de PiocianinaPiocianina por Pseudomonas.por Pseudomonas.

Medios de azúcar y Medios de azúcar y bioquímicas.bioquímicas.

Estos sirven para hacer pruebas Estos sirven para hacer pruebas bioquímicas a base de CHS.bioquímicas a base de CHS.

TSI.- Agar de hierro y triple azúcar para TSI.- Agar de hierro y triple azúcar para enterobacterias.enterobacterias.

MIO.- Triticasa, L-Ornitina e indicador.MIO.- Triticasa, L-Ornitina e indicador.

LIA.- Agar Lisina Fierro.LIA.- Agar Lisina Fierro.

Citrato de Simons.Citrato de Simons.

Caldo de Urea.Caldo de Urea.

Rojo de metilo.Rojo de metilo.

Medio de SIMMedio de SIM

Bibliografia

•http://www.britanialab.com.ar/espanol/catalogo_r.html•Bioxon Medios de cultivo

Técnicas de Técnicas de aislamiento de aislamiento de

cultivocultivoSiembra en estría Siembra en estría

cruzada, masiva, difusión cruzada, masiva, difusión y subcultivo de colonias.y subcultivo de colonias.

Siembra en estría cruzadaSiembra en estría cruzada Lo que haces toma un inoculo con el asa y en un solo extremo de la Lo que haces toma un inoculo con el asa y en un solo extremo de la

caja (petri) empiezas hacer varias "rayas" o estrías sin separar el caja (petri) empiezas hacer varias "rayas" o estrías sin separar el asa, y sin volver a pasar por el lugar ya inoculado, posteriormente asa, y sin volver a pasar por el lugar ya inoculado, posteriormente flameas el asa hasta que de un color rojo incandescente, enfrías la flameas el asa hasta que de un color rojo incandescente, enfrías la asa en un extremo del agar, posteriormente del ultimo extremo de la asa en un extremo del agar, posteriormente del ultimo extremo de la anterior estría, vuelves hacer "rayas" o estrías, repitiendo esto anterior estría, vuelves hacer "rayas" o estrías, repitiendo esto hasta que formes en la caja (petri) en los costados una formación hasta que formes en la caja (petri) en los costados una formación de 4 estrías, para que al ultimo hagas una forma de S en medio de de 4 estrías, para que al ultimo hagas una forma de S en medio de la placa, evitando que toque las demás estrías ya realizadas.la placa, evitando que toque las demás estrías ya realizadas.

siembra masivasiembra masiva siembra masiva o por cuadrantes (agotamiento o siembra masiva o por cuadrantes (agotamiento o

estría cruzada que es la que conoces como estría cruzada que es la que conoces como rombitos).La técnica es muy sencilla solo que hay rombitos).La técnica es muy sencilla solo que hay que tener un poco de practica para no rasgar el agar que tener un poco de practica para no rasgar el agar y que los cultivos no se contaminen. te darás cuenta y que los cultivos no se contaminen. te darás cuenta que tus colonias están aisladas cuando las que tus colonias están aisladas cuando las morfologías coloniales se presentan como bolitas (si morfologías coloniales se presentan como bolitas (si es de un cultivo puro no debe haber diferencias entre es de un cultivo puro no debe haber diferencias entre estas , si es un cultivo mixto deben observase estas , si es un cultivo mixto deben observase diferencias ya sea en color, forma, tamaño, diferencias ya sea en color, forma, tamaño, consistencia, etc.)consistencia, etc.)

Difusión Difusión Difusión: el inoculo lo viertes sobre la placa de agar ya Difusión: el inoculo lo viertes sobre la placa de agar ya

solidificado, y lo único que haces es esparcirlo sobre toda solidificado, y lo único que haces es esparcirlo sobre toda la superficie del agar, lo puedes hacer con ayuda de una la superficie del agar, lo puedes hacer con ayuda de una varillada de vidrio acodada, ésta la flameas antes de varillada de vidrio acodada, ésta la flameas antes de ponerla en contacto con el medio.ponerla en contacto con el medio. Se pasa una porción de Se pasa una porción de la muestra a la superficie de un medio de cultivo hecho a la muestra a la superficie de un medio de cultivo hecho a base de agar y se siembra en el medio ya sea por estrías o base de agar y se siembra en el medio ya sea por estrías o por difusión. Esta operación hace posible adelgazar la por difusión. Esta operación hace posible adelgazar la muestra de tal manera que en la superficie del agar muestra de tal manera que en la superficie del agar quedan las bacterias separadas unas de otrasquedan las bacterias separadas unas de otras

Subcultivos de coloniasSubcultivos de colonias Los subcultivos de colonias son pruebas bioquimicas Los subcultivos de colonias son pruebas bioquimicas

consisten en distintos test químicos aplicados a consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, nos permiten identificar distintos microorganismos nos permiten identificar distintos microorganismos presentes.presentes.

Su sistema de funcionamiento generalmente consiste Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una via metabólica a en determinar la actividad de una via metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no.cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no.

Para realizar las pruebas bioquímicas se dispone de Para realizar las pruebas bioquímicas se dispone de multiples medios, los cuales se deben aplicar de multiples medios, los cuales se deben aplicar de acuerdo a las exigencias del microorganismo en acuerdo a las exigencias del microorganismo en estudio.estudio.

Morfología Morfología bacteriana bacteriana

microscópicamicroscópica

Morfologia:Morfologia:

Disciplina que se encarga del Disciplina que se encarga del estudio de la forma y estructura estudio de la forma y estructura de un organismode un organismo

TAMAÑO

Morfología bacteriana

microscopio

Tinciones

gram

Ziehl- nelssen

(+)-violeta

(-)-rosa

BAAR(+)

BAAR(-)

forma

estructura

tamaño

Tamaño:Tamaño:

1 micra de diámetro y 0.2 a 3.4 micras de 1 micra de diámetro y 0.2 a 3.4 micras de largo.largo.

bacterias

FormaForma

La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos tipos morfológicos, lo que se conoce como La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos tipos morfológicos, lo que se conoce como pleomorfismo.pleomorfismo. Formas básicasFormas básicas

Forma esférica

Por ejemplo:

*neumococos

Forma cilíndrica

Por ejemplo:

*Escherichia coli

Forma espiral

Por ejemplo:

*Treponema

pallidum

OtrosOtros

Estructuras constantesEstructuras constantes

*El citoplasma bacteriano es un gel de alta presión osmótica. Al microscopioelectrónico muestra un aspecto finamente granular.

*El nucleoide se destaca en microfotografías por su aspecto hipolúcido. En el se organiza el material genético de la bacteria.

*La membrana citoplasmática, mejor llamada membrana celular, es la fina membrana que protege el citoplasma.

*La pared celular es el soporte físico de la célula y la estructura más externa cuando no existe cápsula.

°Pared celular en bacterias Gram (+):El péptidoglicano se dispone en varias capas lo que le otorga grosor a la pared.Atraviesan el peptidoglicano polisacáridos ácidos, denominados ácidos teicoicos.

°Pared celular en bacterias Gram (-):Su pared celular es más delgada, pero más compleja que la de los Gram (-).

Estructuras accesoriasEstructuras accesorias

Flagelos: Los flagelos son apéndices filamentosos, helicoidales, que se emplean en la movilidad bacteriana.

Fimbrias: Las fimbrias, también llamadas pili, son microfibrillas parecidas a pelos,que rodean en número de 100-200 .Se observan sólo al microscopio electrónico.Esporas: Son el medio de protección al frío, calor, y otros factores del medio ambiente que pueden dañar su interior

BIBLIOGRAFÍASBIBLIOGRAFÍAS Bacteriología clínica Bacteriología clínica

STRUTHERS,J.K,WESTRAN,R.P.STRUTHERS,J.K,WESTRAN,R.P.1 EDICION 20051 EDICION 2005 BARCELONA .BARCELONA . PP.47-51 PP.47-51 Manual procedimientos bacteriológicos en infecciones Manual procedimientos bacteriológicos en infecciones

intrahospitalariasintrahospitalariasSerie de normas técnicas num.28Serie de normas técnicas num.28Rosa sacsaquispe contrerasRosa sacsaquispe contreraspp.32-46pp.32-46 www.med.uchile.cl/apuntes/archivos/2006/medicina/cap2_

morfologia_y_estructura_bacteriana.pdf

Tinciones microbianasTinciones microbianas

Sin colorantes(Examen en Fresco)

Se utiliza un solo colorante(Con tinta china)

Se utilizan varios colorantes combinados.

Los ejemplos clásicos sería la tinción de GRAM o la de Ziehl-Neelsen

Colorantes.Colorantes.Mecanismos de coloración.Mecanismos de coloración.

Tinción Gram.Tinción Gram.Tinción Negativa.Tinción Negativa.

Tinción Ácido-Resistente.Tinción Ácido-Resistente.Tinción de Esporas.Tinción de Esporas.Tinción de Cápsula.Tinción de Cápsula.

Tinte o colorante = cromóforo + Tinte o colorante = cromóforo + auxócromoauxócromo

CROMÓFORO:CROMÓFORO: grupo que provee las grupo que provee las propiedades de propiedades de

color.color.

AUXÓCROMO:AUXÓCROMO: grupo químico que se grupo químico que se ioniza con el cromóforo y forma sales ioniza con el cromóforo y forma sales que se pegan a las fibras y tejidos.que se pegan a las fibras y tejidos.

BÁSICOSBÁSICOS: : tienen carga tienen carga catiónica.catiónica.

La porción del La porción del cromóforocromóforo tiene carga tiene carga positiva, poseen gran afinidad por lospositiva, poseen gran afinidad por los componentes celulares.componentes celulares. Estos tintes son los más utilizados debido aEstos tintes son los más utilizados debido a que las bacterias tienen una superficie conque las bacterias tienen una superficie con carga negativa.carga negativa.Ejemplo: Ejemplo: AZUL DE METILENOAZUL DE METILENO, , CRISTAL VIOLETACRISTAL VIOLETA Y Y

CARBOL FUCSINACARBOL FUCSINA..

Si la porción coloreada actúa como base, se pueden obtener en forma de cloruros.

Se emplea para colorear material ácido. Ejem: núcleos, algunos gránulos y otras

Sustancias ácidas.

Tienen carga aniónica. Tienen carga aniónica. La porción del cromógeno es La porción del cromógeno es

negativa y tienen gran afinidad negativa y tienen gran afinidad por los componentes celulares por los componentes celulares positivos.positivos.

Las sales de sodio, potasio, calcio Las sales de sodio, potasio, calcio o amoniaco de ácidos con color o amoniaco de ácidos con color son ionizados para producir un son ionizados para producir un cromógeno con carga negativa.cromógeno con carga negativa.

Si la porción coloreada actúa como ácido, se obtiene en forma de sales de sodio. Se emplean para colorear material básico.

Ejemplo: citoplasma.

MECANISMOS DE COLORACIÓN

MÉTODOSMÉTODOS

FÍSICOS QUÍMICOS

ADSORCIÓN ABSORCIÓN CAPILARIDAD OSMOSIS

AFINIDAD DECOLORANTES BÁSICOS. AFINIDAD DE COLORANTESÁCIDOS.

COLORANTES SIMPLESCOLORANTES SIMPLES.- Es una solución del colorante. Por lo regular en alcohol o agua.UTILIDADUTILIDAD.-Para apreciar la forma, disposición y el tamaño relativo de la bacteria.No muestran detalles finos de la estructura interna.

♫ Utilizado para observar el tamaño, Utilizado para observar el tamaño, arreglo y forma.arreglo y forma.

♫ Se utiliza un solo tinte.Se utiliza un solo tinte.♫ Tinción directa: se tiñe a la bacteria.Tinción directa: se tiñe a la bacteria.♫ Tinción negativa: tiñe Tinción negativa: tiñe

el fondo pero no ael fondo pero no a

la bacteria.la bacteria.

Es una gran herramienta para separar yEs una gran herramienta para separar y

clasificar los microorganismos observados clasificar los microorganismos observados dede

acuerdo a sus característicasacuerdo a sus características Es mayormente utilizada para visualizar lasEs mayormente utilizada para visualizar las

estructuras como flagelos, cápsulas yestructuras como flagelos, cápsulas y

esporas.esporas. Para ser clasificado como tinción diferencial Para ser clasificado como tinción diferencial

debe tener un colorante primario y un debe tener un colorante primario y un colorante secundario o de contraste.colorante secundario o de contraste.

Ejemplo:Ejemplo: TINCIÓN GRAMTINCIÓN GRAM

Tinciones diferencialesTinciones diferenciales

Tinción de GramTinción de Gram Ácido-alcohol Ácido-alcohol resistenteresistente

cocos y bacilos cocos y bacilos bacilosbacilos GRAM(+) GRAM(-)GRAM(+) GRAM(-) ÁCIDO ALCOHOL ÁCIDOÁCIDO ALCOHOL ÁCIDO ALCOHOLALCOHOL

RESISTENTES RESISTENTESRESISTENTES RESISTENTES

(+) (-)(+) (-)

PREPARACIÓN DEL FROTISPREPARACIÓN DEL FROTIS Prepara el frotisPrepara el frotis Medio líquidoMedio líquido. Se coloca una . Se coloca una

porción del cultivo con el “loop” en porción del cultivo con el “loop” en la laminilla. (Agitar)la laminilla. (Agitar)

Medio sólidoMedio sólido. Se coloca una . Se coloca una gotitagotita de agua destilada en la laminilla y se de agua destilada en la laminilla y se diluye la porción de cultivo en ella. diluye la porción de cultivo en ella. (Se esparce bien).(Se esparce bien).

Secar a temperatura ambiente.Secar a temperatura ambiente. Fijación por calor.Fijación por calor. Limpiar la laminilla con papel de Limpiar la laminilla con papel de

lentes.lentes.

PREPARACIÓN PREPARACIÓN

DE UN DE UN

FROTIS BACTERIANO…FROTIS BACTERIANO…

FROTIS BACTERIANO

Tinción GRAMTinción GRAM TINTE PRIMARIOTINTE PRIMARIO: : Cristal violetaCristal violeta, tiñe la , tiñe la

bacteria de color violetabacteria de color violeta AGENTE MORDIENTEAGENTE MORDIENTE: : LugolLugol, forma un , forma un

complejo insoluble con cristal violeta. Ayuda a complejo insoluble con cristal violeta. Ayuda a adherir el tiente a la célula. Ayuda a resistir la adherir el tiente a la célula. Ayuda a resistir la decoloración.decoloración.

AGENTE DECOLORIZANTEAGENTE DECOLORIZANTE: : Alcohol acetona o Alcohol acetona o alcoholalcohol, el cual sirve como solvente de lípidos y , el cual sirve como solvente de lípidos y agente deshidratante de proteínas.agente deshidratante de proteínas.

CONTRATINTECONTRATINTE: : SafraninaSafranina que tiñe de rojo a la que tiñe de rojo a la bacteria. bacteria.

Preparación de la tinción GramPreparación de la tinción Gram

Preparación del frotis.Preparación del frotis. Cristal violeta (30 segundos-1 minuto)Cristal violeta (30 segundos-1 minuto) Lavar con agua.Lavar con agua. Lugol (1 minuto).Lugol (1 minuto). Lavar con agua.Lavar con agua. Alcohol acetona.Alcohol acetona. Lavar con agua.Lavar con agua. Safranina (45 segundos).Safranina (45 segundos). Lavar con agua.Lavar con agua. Secar con “bibolous paper”Secar con “bibolous paper”

Tinción de GramTinción de Gram

Frotis Cristal violetaSe enjuaga

YodoSe enjuagaAlcohol acetona

Se enjuaga

Se enjuaga Safranina y se enjuaga

Secar

Se enjuaga

Clasificación de las bacterias Clasificación de las bacterias en base a la tinción de Gramen base a la tinción de Gram

Cocos o Cocos o cocos cocos oo

BacilosBacilos bacilosbacilos

Gram (+)Gram (+) Gram Gram (-)(-)

Tinción Ácido-ResistenteTinción Ácido-Resistente

Las familias Las familias MycobacteriaeMycobacteriae y y

NocardiaceaeNocardiaceae son ácido resistente. son ácido resistente. Los microorganismos ácido-Los microorganismos ácido-

resistentes se caracterizan por tener resistentes se caracterizan por tener una pared celular gruesa de cera una pared celular gruesa de cera (lipoidal) que contiene ácido micólico.(lipoidal) que contiene ácido micólico.

Los organismos que son decolorizados Los organismos que son decolorizados por el alcohol no son ácido resistente.por el alcohol no son ácido resistente.

Tinción Ácido-ResistenteTinción Ácido-Resistente

o Tinte primario: CARBOLFUCSINA tinte (5%). Tinte primario: CARBOLFUCSINA tinte (5%). Puede penetrar la pared.Puede penetrar la pared.

o Agente decolorizante – alcohol ácido Agente decolorizante – alcohol ácido (3% HCl + 95% alcohol etílico)-(3% HCl + 95% alcohol etílico)-

o Contratinte: Azul de metileno – se utiliza Contratinte: Azul de metileno – se utiliza

para teñir de azul las bacterias quepara teñir de azul las bacterias que

quedaron incoloras.quedaron incoloras.

Preparación de la tinción ácido -resistentePreparación de la tinción ácido -resistente Preparar un frotis.Preparar un frotis. Carbol fucsina (3 minutos). Utilizar unCarbol fucsina (3 minutos). Utilizar un papel toalla bien impregnado delpapel toalla bien impregnado del reactivo.reactivo. Lavar con agua.Lavar con agua. Decolorizar con alcohol acido.Decolorizar con alcohol acido. Lavar con agua.Lavar con agua. Azul de metileno por 2 minutos.Azul de metileno por 2 minutos. Lavar con agua.Lavar con agua. Secar con “bibolous paper”Secar con “bibolous paper”

Tinción ácido-alcohol resistenteTinción ácido-alcohol resistente

Frotis Carbol fucsina

Emision de vapores

Se lava con aguaAlcohol acidoSe lava con agua

Azul demetilen

o

Se lava con aguaSe deja secar

Tinción de esporas Tinción de esporas Método de Schaffer-FultonMétodo de Schaffer-Fulton

Célula vegetativa – forma metabólicamenteCélula vegetativa – forma metabólicamente

activa = bacterias.activa = bacterias.

Esporas – forma metabólicamente inactiva yEsporas – forma metabólicamente inactiva y

altamente resistente.altamente resistente.

Los miembros del género anaerobioLos miembros del género anaerobio

Clostridium, Desulfotomaculum y BacillusClostridium, Desulfotomaculum y Bacillus

pueden existir metabólicamente activos opueden existir metabólicamente activos o

inactivos. inactivos.

Tinción de esporas Tinción de esporas Método de Schaffer-FultonMétodo de Schaffer-Fulton

Tinte primario: Verde malaquita.Tinte primario: Verde malaquita.

Requiere calor para la penetraciónRequiere calor para la penetración

de este tinte.de este tinte. Agente decolorizante: Agua-Agente decolorizante: Agua-

remueve el exceso de tinte,remueve el exceso de tinte,

decoloriza la célula.decoloriza la célula. Contratinte: Safranina – TiñeContratinte: Safranina – Tiñe

las células vegetativas.las células vegetativas.

Tinción de esporas Tinción de esporas Método de Schaffer-FultonMétodo de Schaffer-Fulton

o Preparar el frotis.Preparar el frotis.

Verde malaquita (2 – 3 minutos)Verde malaquita (2 – 3 minutos)

en calor.en calor.o Dejar enfriar la laminilla y Dejar enfriar la laminilla y

enjuagar con agua y agregar enjuagar con agua y agregar Safranina (30 segundos).Safranina (30 segundos).

o Lavar con agua.Lavar con agua.o Secar con “bibulous paper”Secar con “bibulous paper”

Tinción de esporas Tinción de esporas Método de Schaffer-Método de Schaffer-

FultonFulton

Frotis Verde de malaquitaSe enjuaga

SafraninaSe enjuagaSecar

Se enjuagaSe enjuagaSe enjuaga

Secar

Verde de malaquita

Método de Bartholomew y Método de Bartholomew y MittwerMittwer

1.1. Fijar la extensión pasándola por una Fijar la extensión pasándola por una llama.llama.

2.2. Teñir durante 10 minutos con verde Teñir durante 10 minutos con verde malaquita saturada en agua sin calor.malaquita saturada en agua sin calor.

3.3. Enjuagar durante 10 segundos debajo Enjuagar durante 10 segundos debajo del grifo.del grifo.

4.4. Agregar el contratinte que es la Agregar el contratinte que es la Safranina acuosa al 0.25% durante 15 Safranina acuosa al 0.25% durante 15 segundos.segundos.

5.5. Enjuagar y secar.Enjuagar y secar.Las esporas se tiñen de verde el resto de Las esporas se tiñen de verde el resto de las células de rojo.las células de rojo.

Método de Bartholomew y MittwerMétodo de Bartholomew y Mittwer

Fijar a calorVerde de malaquita Se enjuaga (10 min)

Safranina acuosaSe enjuagaSecar

Tinción de cápsulaTinción de cápsula

Cápsula – estructura gelatinosa Cápsula – estructura gelatinosa secretada por algunas bacterias.secretada por algunas bacterias.

Las células que tienen cápsula son Las células que tienen cápsula son virulentas y causan enfermedades virulentas y causan enfermedades ya que protegen a la célula de la ya que protegen a la célula de la acción fagocítica del hospedero.acción fagocítica del hospedero.

La mayoría de las cápsulas están La mayoría de las cápsulas están compuestas de polisacáridos, por compuestas de polisacáridos, por lo que son solubles en agua.lo que son solubles en agua.

Método de MuirMétodo de Muir

1.1. Preparar una película delgada y uniforme Preparar una película delgada y uniforme de la bacteria. Cubrir con una tira de papel de la bacteria. Cubrir con una tira de papel de filtrar e inundar con fucsina fenicada de filtrar e inundar con fucsina fenicada de Ziehl-Neelsen. Calentar hasta que se de Ziehl-Neelsen. Calentar hasta que se evapore durante 30 segundos.evapore durante 30 segundos.

2.2. Enjuagar con alcohol, luego con agua.Enjuagar con alcohol, luego con agua.3.3. Añadir el mordiente ac. tanico durante 15 Añadir el mordiente ac. tanico durante 15

ó 30 seg. Y lavar.ó 30 seg. Y lavar.4.4. Decolorar con alcohol hasta que esté de Decolorar con alcohol hasta que esté de

color rosa.color rosa.5.5. Lavar con agua.Lavar con agua.6.6. Agregar el contratinte (azul de metileno) Agregar el contratinte (azul de metileno)

por 30 seg.por 30 seg.7.7. Permitir que se seque al aire y examinar.Permitir que se seque al aire y examinar.

Método de MuirMétodo de Muir Es un método de coloración de la cápsula Es un método de coloración de la cápsula

bacterianabacteriana

Colorante primarioColorante primario: Fucsina Fenicada: Fucsina Fenicada

DecoloranteDecolorante: Agua: Agua

Mordiente: Mordiente: Ácido tánicoÁcido tánico

Contratinte: Contratinte: Azul metilenoAzul metileno

Método de MuirMétodo de Muir

Fucsina fenicadaEmisión de vapores

Se lava con alcohol y luego con aguaMordiente Ac. tánico

Enjuagar

Se decolora hasta

que quede rosa

Contratinte azul de metileno Se deja secar

Tinción de cápsula por Tinción de cápsula por el método de Hissel método de Hiss

Tinte primario – Cristal Violeta 1% - tiñeTinte primario – Cristal Violeta 1% - tiñe todo el frotis color oscuro o fuscina basica.todo el frotis color oscuro o fuscina basica.

Decolorizante y Contratinte – Sulfato de CobreDecolorizante y Contratinte – Sulfato de Cobre 20% - se usa para enjuagar el tinte primario.20% - se usa para enjuagar el tinte primario.

No se enjuaga con agua porque la cápsula esNo se enjuaga con agua porque la cápsula es soluble en agua. – función de decolorizante.soluble en agua. – función de decolorizante.

El CuSOEl CuSO44 es absorbido en el material de la es absorbido en el material de la cápsula que ha sido decolorizada – función decápsula que ha sido decolorizada – función de contratinte.contratinte.

Preparación de Tinción de Preparación de Tinción de Cápsula método de HissCápsula método de Hiss

o Preparación de un frotis cargado.Preparación de un frotis cargado.

o Dejar secar a temperatura ambiente.Dejar secar a temperatura ambiente.

o Cristal violeta 1% (5 – 7 minutos)Cristal violeta 1% (5 – 7 minutos)

o Enjuagar con CuSO4Enjuagar con CuSO4

o Secar con “bibulous paper”Secar con “bibulous paper”

Método de HissMétodo de Hiss1.1. Hacer crecer los organismos en Hacer crecer los organismos en

líquido ascítico o en medio sérico, líquido ascítico o en medio sérico, mezclar con una gota de suero y mezclar con una gota de suero y preparar sus extensiones.preparar sus extensiones.

2.2. Secar las extensiones al aire y fijar Secar las extensiones al aire y fijar por calor.por calor.

3.3. Teñir con cristal violeta o fuscina Teñir con cristal violeta o fuscina basica durante unos segundos, basica durante unos segundos, calentando, hasta que aparezca la calentando, hasta que aparezca la coloración.coloración.

4.4. Lavar con una solución de sulfato de Lavar con una solución de sulfato de cobre al 20%.cobre al 20%.

5.5. Secar con papel secante y examinar.Secar con papel secante y examinar.

Método de HissMétodo de HissSolucionesSoluciones

Fucsina básica (con un 90% Fucsina básica (con un 90% de colorante) de 0.15 a 0.3 gde colorante) de 0.15 a 0.3 g

Violeta cristal (85% de Violeta cristal (85% de colorante) 0.5 a 0.1 gcolorante) 0.5 a 0.1 g

Agua destilada 100mlAgua destilada 100ml

Sulfato de cobre al 20%Sulfato de cobre al 20%

Método de HissMétodo de Hiss

Extensión del frotis

Fijar con calorSulfato de

cobre al 20%

Deja secar

Violeta cristal

BIBLIOGRAFIABIBLIOGRAFIAMICROBIOLOGIAMICROBIOLOGIAPrescott HarleyPrescott HarleyEditorial MC-Graw-HillEditorial MC-Graw-HillInteramericanaInteramericana4edición4edición

MICROBIOLOGIA MEDICAMICROBIOLOGIA MEDICAPatrick R. MuradPatrick R. MuradMichael A. DpallerMichael A. Dpaller2° edición2° ediciónEditorial Harcourt BraceEditorial Harcourt Brace

MICROBIOLOGIAMICROBIOLOGIAMart FrobisherMart FrobisherRobert FuertRobert FuertEditorial PanamericanaEditorial PanamericanaMéxico D.F.México D.F.

Las vías respiratorias Las vías respiratorias altasaltas

El sector alto comprende: la boca, la nariz, El sector alto comprende: la boca, la nariz, fosas nasales, los senos paranasales y la fosas nasales, los senos paranasales y la

faringe junto con las amígdalas, el oído medio faringe junto con las amígdalas, el oído medio y la epiglotis.y la epiglotis.

Flora normal de las vías Flora normal de las vías respiratorias altasrespiratorias altas

En el individuo normal únicamente las vías En el individuo normal únicamente las vías respiratorias altas (fosas nasales y faringe) están respiratorias altas (fosas nasales y faringe) están colonizados por flora normal. Los senos colonizados por flora normal. Los senos paranasales y el oído medio son estériles.paranasales y el oído medio son estériles.

La boca: se localizan La boca: se localizan Streptococcus salivarius,Streptococcus salivarius,

Streptococcus mutans,Streptococcus mutans, PeptostreptococcusPeptostreptococcus y y LactobacillusLactobacillus principalmente. principalmente.

Las fosas nasales: aquí Las fosas nasales: aquí se encuentran se encuentran microorganismos característicos de la piel microorganismos característicos de la piel como como StaphylococcusStaphylococcus epidermidisepidermidis y y especies de especies de Corynebacterium. Corynebacterium.

También están presentes: También están presentes: Peptostreptococcus Peptostreptococcus spp.spp., , Bifidobacterium sppBifidobacterium spp. y . y Actinomyces sppActinomyces spp. . Los bacilos que se encuentran, generalmente Los bacilos que se encuentran, generalmente son son Fusobacterium sppFusobacterium spp. y . y Bacteroides sppBacteroides spp. .

Suelen encontrarse especies no patógenas de Suelen encontrarse especies no patógenas de NeisseriaNeisseria y y StreptococcusStreptococcus β-hemolíticos no β-hemolíticos no pertenecientes al grupo A, y no causan daños pertenecientes al grupo A, y no causan daños en individuos sanos que sólo son portadores.en individuos sanos que sólo son portadores.

La faringe: en la faringe la flora normal está compuesta principalmente por Streptococcus α-hemolíticos o Streptococcus viridans; además diferentes especies de Lactobacillus, Propionibacterium, Corynebacterium y Moraxella catarrhalis.

Flora patógena de las vías Flora patógena de las vías altasaltas

El aparato respiratorio se divide en dos sectores anatómicos : alto yEl aparato respiratorio se divide en dos sectores anatómicos : alto y

Bajo. Las vías respiratorias patógenas superiores se extienden desde Bajo. Las vías respiratorias patógenas superiores se extienden desde los orificios desde los orificios nasales hacia la laringe y comprende la los orificios desde los orificios nasales hacia la laringe y comprende la

nasofaringe, y la orofaringe, a los senos para nasales, trompa de nasofaringe, y la orofaringe, a los senos para nasales, trompa de Eustaquio y el oído medio.Eustaquio y el oído medio.

Bacterias patógenas de las vías Bacterias patógenas de las vías respiratorias altasrespiratorias altas

Los microorganismos que se aíslan con mayor frecuencia de procesos Los microorganismos que se aíslan con mayor frecuencia de procesos infecciosos de vías respiratorias son:infecciosos de vías respiratorias son:

Streptococcus ß- hemolíticos (S. pyogenes, S. agalactiae)Streptococcus ß- hemolíticos (S. pyogenes, S. agalactiae) Staphylococcus aureus.Staphylococcus aureus. Neisseria meningitidis Neisseria meningitidis Pseudomonas aeruginosa. Pseudomonas aeruginosa. Klebsiella pneumoniae.Klebsiella pneumoniae. Haemophilus influenza tipo B.Haemophilus influenza tipo B. Escherichia coliEscherichia coli

Vías respiratorias bajasVías respiratorias bajas

Las vías respiratorias bajas o inferiores Las vías respiratorias bajas o inferiores son: la son: la laringe, la tráquea, los bronquios, laringe, la tráquea, los bronquios, los alvéolos y los pulmones.los alvéolos y los pulmones.

Flora normal de las vías Flora normal de las vías respiratorias bajasrespiratorias bajas

Las vías respiratorias bajas esta constituida por:Las vías respiratorias bajas esta constituida por: bronquios bronquios PulmonesPulmones

El cual se hallan de provistos El cual se hallan de provistos

de flora microbiana estable.de flora microbiana estable.

Vías respiratorias bajas Vías respiratorias bajas (flora normal)(flora normal)

La Flora normal en vías respiratorias bajas con La Flora normal en vías respiratorias bajas con frecuencia esta constituida por bacterias frecuencia esta constituida por bacterias raramente patógenas como;raramente patógenas como;

Estreptococos no hemolíticos.Estreptococos no hemolíticos. Micrococcus Micrococcus CoryunebacteriumCoryunebacterium Staphylococcus coagulasa negativaStaphylococcus coagulasa negativa Lactobacillus Lactobacillus Espiroquetas Espiroquetas

Flora patógena de las vías Flora patógena de las vías respiratorias bajasrespiratorias bajas

Existen microorganismos patógenos que Existen microorganismos patógenos que atacan principalmente los pulmones y son atacan principalmente los pulmones y son causantes de enfermedades graves; algunas causantes de enfermedades graves; algunas bacterias son: bacterias son: Pseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosa, , Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus, , Haemophilus influenzaeHaemophilus influenzae y y Burkholderia cepaciaBurkholderia cepacia. .

Además también Además también S. pneumoniaeS. pneumoniae, , Aspergillus fumigatusAspergillus fumigatus, , A.flavusA.flavus y y Candida Candida albicans albicans son bacterias patógenas, aunque son bacterias patógenas, aunque esta última es un hongo.esta última es un hongo.

Flora normal y patógena del tracto Flora normal y patógena del tracto GenitourinarioGenitourinario

FLORA NORMAL Y FLORA NORMAL Y PATOGENA:PATOGENA:

Se denominaSe denomina flora normal flora normal al conjunto de al conjunto de microorganismos que viven de forma habitual en un microorganismos que viven de forma habitual en un cuerpo sano. Estos se incluyen en la participación de cuerpo sano. Estos se incluyen en la participación de los procesos de digestión de alimentos y de síntesis los procesos de digestión de alimentos y de síntesis de vitaminas en el intestino, la producción del pH de vitaminas en el intestino, la producción del pH ácido de la vagina o la ácido de la vagina o la protección competitiva protección competitiva frente frente a patógenos. a patógenos. ..Los tratamientos con antibióticos de amplio espectro o Los tratamientos con antibióticos de amplio espectro o la acción antiséptica de algunos productos de limpieza la acción antiséptica de algunos productos de limpieza (jabones, por ejemplo) pueden alterar la flora normal (jabones, por ejemplo) pueden alterar la flora normal lo que, en ocasiones, deja la puerta abierta para el lo que, en ocasiones, deja la puerta abierta para el desarrollo de procesos infecciosos oportunistas que desarrollo de procesos infecciosos oportunistas que pueden llegar a ser graves.pueden llegar a ser graves.

FLORA PATOGENA:FLORA PATOGENA:

- Escherichia coli- Proteus- Pseudomonas aeruginosa- Streptococcus pyogenes- Staphylococcus aureus- Enterococos

FLORA PATÓGENA:FLORA PATÓGENA:- Mycobacterium tuberculosis- Salmonella sp- Serratia- Herellea- Klebsiella- Enterobacter- Staphylococcus epidermis-Streptococcus sobre todo alfa hemoliticos- Enterococcus feacalis- Proteus- Staphylococcus saprophyticus- Neisseriae- Haemophylus - Corynebacterium

- Gardenella- Enterobacter- Escherichia coli- Aeruginosa- Streptococcus pyogenes- Staphylococcus aureus- Providencia- Acinetobacter- Pseudomonas- Enterococos- Staphylococos coagulasa negativa- Levaduras- Corinebacterias- Bacilos gramnegativos- En pacientes con sondas permanentespuede aparecer candida en la orina

Enfermedades producidas Enfermedades producidas La infección genitourinaria se La infección genitourinaria se

define como la presencia de define como la presencia de gérmenes en los órganos gérmenes en los órganos reproductores y excretores. reproductores y excretores. Ejemplos:Ejemplos:

CistitisCistitis DismenorreaDismenorrea GonorreaGonorrea ProstatitisProstatitis vulvovaginitis vulvovaginitis

BACTERIAS GRAM BACTERIAS GRAM POSITIVASPOSITIVAS

Se denominan Se denominan bacterias Gram bacterias Gram positivaspositivas a aquellas bacterias que a aquellas bacterias que

se tiñen de azul oscuro o se tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción de gram: de violeta por la tinción de gram: de

aquí el nombre de "Gram positivas"aquí el nombre de "Gram positivas"

Esta característica está íntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular por lo que refleja un tipo natural de organización bacteriana

La envoltura celular de las bacterias Gram positivas comprende la membrana citoplasmática y una pared celular compuesta por una gruesa capa de peptidoglucano , que rodea a la anterior.

Incluyen especies tanto móviles (vía flagelos) como inmóviles con forma de bacilo (bacillus clostridium , corynebacterium ,lactobacillus ,listeria ) o coco (staphylococcus , streptococcus); con gruesas paredes celulares o sin ellas (micoplasma).

La Familia Micrococcaceae comprende cocos Grampositivos, no exigentes, catalasa positivos, conagrupación en racimos, aerobios o anaerobiosfacultativos.

La familia Comprende 3 Géneros:

MicrococcusStaphylococcusPlanococcus

Los micrococos son células esféricas dispuestas en masas irregulares, racimos, tétradas o paquetes. Son Gram Positivas, aerobios, y catalasa Positivos.

Son cocos Gram + se agrupan formando pares o racimos, anaerobias facultativasno presentan esporasla mayoría de las especies no presentan cápsulametabolismo fermentativoinmóvilesCatalasa Positiva

BibliografíasBibliografíasMicrobiología Medica

Romero CabelloEditorial PanamericanaMéxico, 2000

Microbiología Medica Jawetz E. MlnickEditorial El manual moderno1998

MicrobiologíaTay LaraEditorial Mendez1993

Microbiología MedicaMurray P. DrewEditorial Mosby1996

http://www.monografias.com/trabajos15/micrococcaceae/micrococcaceae.shtml

http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp10.pdf

http://www.docencia.izt.uam.mx/smk/233155/material_adicional/bacteria4.ppt.com

ESTAFILOCOCOS

TAXONOMÍA

REINO: PROCARIOTAEDIVISIÓN: FIRMICOTESCLASE: FIRMIBACTERIA

ORDEN: MICROCOCALESFAMILIA: MICROCOCCACEA

GENERO: STAPHYLOCOCCUS Ó MICROCOCCUS

ESPECIE: AUREUS, PYOGENES, EPIDERMIS

ESTAFILOCOCOS

SON PRODUCENSUS CONDICIONES PARA CRECER

SONGRAM(+)

NO MOTILES

CELULAS ESFERICASNO FORMAN ESPORAS

MIDEN 1 um DE DIAMETRO

SE DISTRIBUYEN EN CUMULOS

IRREGULARES:RACIMO DE UVAS

EN CULTIVOS SE ENCUENTRAN:COCOS AISLADOS

PARESTETRADASCADENAS

AL ENVEJECER MUCHAS SE VUELVEN GRAM(-)

AEROBIAS YMICROAEROFILAS

REDONDASLISAS

ELEVADASRESPLANDECIENTES

LAS COLONIAS SON

SAL Y MANITOL

AGAR SANGREMEDIOS BACTERIOFAGOS

S. AUREUSFORMA

COLONIASCOLOR

GRIS A AMARILLO ODORADO INTENSO

SUS COLONIAS SONGRISES A BLANCAS

S.EPIDERMIDIS

CATALASA

ACIDO LACTICOPERO NO

GAS

PRODUCEN

CARBOHIDRATOS

FERMENTAN

CLASIFICACION

S. epidermidis

HAY TRE ESPECIES DE ESTAFILOCOCOS:

S. aureus

S. saprophtrycus

Fibrinolisina

Penicilasa

Nucleasa

Lipasas

Hialurinasa

Catalasa

EnzimasEstafilococócicas

ENZIMAS

CATALASA

COAGULASA

OTRAS ENZIMAS

LOS ESTAFILOCOCOS LA PRODUCEN, CONVIERTENAL PEROXIDO DE HIDROGENO

EN AGUA Y OXIGENO

S.AUREUS LA PRODUCE, COAGULA EL PLASMA OXALATADOO CITRATO EN PRESENCIA DE UN FACTOR CONTENIDO

EN MUCHOS SUEROS

HIALURONIDASA Y ESTAFILOCINASA

TOXINAS

EXOTOXINAS

LEUCOCIDINA

T.EXFOLIATIVA

T. SINDROME DE CHOQUE TOXICO

PRODUCEN NECROSIS DE LA PIEL, CONTIENENHIDROLISINAS SOLUBLES SE SEPARAN POR

ELECTROFORESIS

TOXINA DE S. AUREUS. MATA A LOS LEUCOCITOS

TOXINA DE S. AUREUS CONSTITUIDAPOR DOS PROTEINAS QUE PRODUCEN

DESCAMACION

PRODUCE FIEBRE, CHOQUE Y ERUPCION CUTANEAY DESCAMACION

PATOGENIA

S. AUREUS

MIEMBRO DE

FLORA NORMAL DE LA PIEL, DE VIASRESPIRATORIAS Y GASTROINTESTINALES DEL HOMBRE

SE ENCUENTRAN EN

ROPAS PERSONALES, ROPAS DE CAMA Y OTROS FORMES DE LOS AMBIENTES HUMANOS

LAS CEPAS INVASORAS Y PATOGENAS PRODUCEN

COAGULASA Y PIGMENTO AMARILLO Y

SON HEMOLITICAS

LAS NO INVASORAS Y NO PATOGENAS

TIENDEN A SER NEGATIVOS A LACOAGULASA

Y NO HEMOLITICOS

PATOGENIA DE LAS INFECCIONES

LAS PERSONAS MAS SUCEPTIBLES SON

LOS PORTADORES SON EL DEPOSITOO RESERVORIO

PARA LA DISEMIANCION DE INFECCIONES

NEONATOS

PACIENTESQUIRURGICOS

QUEMADOS

ENFERMEDADGRANULOMATOSA

CRONICA

PRODUCEN

INFECCION CUTANEA

OSTEOMIELITIS Y ENTERITIS

NEUMONIA

EXUDADOSFARNGEOS

MUESTRAS DE SANGRE CULTIVADA

EN AGAR SANGRE

CULTIVOS AISLADOS EN BUSCA DE LA PRODUCCION DE

COAGULASA

DIAGNOSTICO

BIBLIOGRAFIABIBLIOGRAFIA

• MICROBIOLOGIA MEDICAVOLK+BENJAMIN+KADNER+PARSONS3ª EDICIONINTERAMERICANA+Mc Graw- HillMEXICO DFPP 368-389

• DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICOKONEMAN WELMER, ALLEN, DOWELL.SOMMERSARGENTINAEDIT MEDICA PANAMERICANA19851ª EDICIONPP 291-312• WWW.CUATROMEDICOS.COM/TEMAS/COCOS _ POSITIVOS/BACTERILGIA.HTM

Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus

Staphylococcus aureus

ESTRUCTURAMICROBIANBA

CAPSULA PEPTIDOGLUCANO PROTEINA A ACIDO TEICOICO MEMBRANA

CITOPLASMICA

Inhibe la opsonizacion y la fagocitosis.

Protege la destrucción leucocitaria medida

Por C

Estabilidad osmóticaEstimula la producción

De pirogenosEndogenos

Inhibe la fagocitosis y laquimiotaxis

Inhibe la opsonizacionY la fagocitosis.

Quimiotaxis de losLeucocitos.

Efecto

Regula la concentraciónCationica en la

Membrana celular.Receptor de

Bacteriófagos.Lugar de adherencia

para los receptores deLa superficie mucosa

Barrera osmótica.Regula el transporte

dentro y Fuera de la célula.

Lugar donde se encuentran las

Enzimas biosinteticas y Respiratorias.

ESTRUCURA ESTRUCURA MICROBIANA DEL S. MICROBIANA DEL S. aureusaureus

CÁPSULACÁPSULA

PEPTIDOGLUCANOPEPTIDOGLUCANO

PROTEÍNA APROTEÍNA A

ÁCIDO TEICOICOÁCIDO TEICOICO

MEMBRANA MEMBRANA CITOPLASMICACITOPLASMICA

CITOPLASMACITOPLASMA

PRODUCTOS EXTACELULARES O ENZIMAS

CATALASA COAGULASA

HIALURONIDASA FIBRINOLISINA

LIPASAS NUCLEASA

PENICILASAOTROS PRODUCTOS: DE LIMO,CAPSULA Y PARED CELULAR.

ECUACION DE LA ECUACION DE LA CATALASA:CATALASA:

2H2H22OO2 2 2H 2H22O + 0O + 022

Diagnóstico de laboratorioDiagnóstico de laboratorio

Bibliografías Bibliografías Romero Cabello RaúlRomero Cabello Raúl

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Microbiología MédicaMicrobiología Médica

Edit. MosbyEdit. Mosby

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España 1996España 1996

StreptococcusStreptococcus

REINO: PROCARIOTAE

DIVISIÓN: FIRMICOTES

CLASE: FIRMIBACTERIA

ORDEN: MICROCOCALES

FAMILIA: STREPTOCOCCACEAE

GÉNEROS: STREPTOCOCCUS

PEDIOCOCCUS AEROCOCCUS

PLANOCOCCUS

TAXONOMIATAXONOMIA

FORMA E IDENTIFICACION

SON

COCOS INDIVIDUALES

ESFERICOS U OVOIDES

SE DISPONEN EN CADENAS

CELULAS GRAM (+)

NO MOVILES

ANAEROBIOS OBLIGADOS

ANAEROBIOS AEROTOLERANTES

MIDEN 0.5-1.20 um DE DIAMETRO

CRECEN EN

FORMAN

SE CULTIVAN EN

MEDIOS SÓLIDOS

MIDEN DE 1 A 2 MILIMETROS DEDIAMETRO

COLONIAS DISCOIDALES

LAS CEPAS DEL GRUPO ADAN LUGAR A COLONIAS

MUCOIDES

AGAR SANGRE

SU ENERGIA ESOBTENIDA DE

SU CRECIMIENTOES POBRE EN

SU TEMPERATURA PARA CRECER ES

AZUCARES

MEDIOS SÓLIDOSCOMO EN CALDO

ESTREPTOCOCOSHEMOLITICOS

37º C

ENTEROCOCOSGRUPO D15 Y 45º C

ESTRUCTURA ANTIGENICA

ANTIGENO ESPECIFICO PROTEINA M SUBSTANCIA T NUCLEOPROTEINAS

PROPORCIONA

INTERFIERE EN

PRESENTE EN

ES

SU ESPECIFICIDAD ES DETERMINADAPOR

DETERMINA

DIFERENCIA

ES

DENOMINADA

FORMAN

ESTREPTOCOCOS GRUPO B

ESTREPTOCOCOS GRUPO A

AMINOAZUCAR

LA BASE PARA EL AGRUPAMIENTO SEROLOGICO

ESTREPTOCOCOS GRUPO C

ESTREPTOCOCOS GRUPO D

ESTREPTOCOCOS GRUPO F

SUBSTANCIA RELACIONADA CON LA VIRULENCIA DE

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO A

M.O. QUE PRODUCEN COLONIAS ENMARAÑADAS

O COLONIAS MUCOIDES

LA INESTION DE ESTREPTOCOCOSVIRULENTOS

POR CELULAS FAGOCITARIAS

ESPECIFICIDAD DEL TIPO DE ESTREPTOCOCOSDEL GRUPO A

ANTIGENO NO SE RELACIONA

CON LA VIRULENCIA DE LOS

ESTREPTOCOCOS, ES TERMO

Y ACIDO LABIL

ALGUNOS TIPOS DE ESTREPTOCOCOS POR

AGLUTINACION CONANTISUEROSESPECIFICOS

SUBSTANCIA P

LA MAYORIA DEL CUERPO

CELULARDEL

ESTREPTOCOCO

ESTREPTOCOCOS GRUPO B

ESTREPTOCOCOS GRUPO A

AMINOAZUCAR

ESTREPTOCOCOS GRUPO C

ESTREPTOCOCOS GRUPO D

ESTREPTOCOCOS GRUPO F

RAMNOSA N-ACETILGLUCOSAMINA

RAMNOSA N-ACETILGALACTOSAMINA

POLISACARIDO DE GLUCOSAMINA-RAMNOSA

ACIDO TEICOICO GLICEROL

GLUCOPIRANOSIL N-ACETILGALACTOSAMINA

TOXINAS

TOXINAERITROGENA

HEMOLISINASDIFOSFOPIRIDI

NNUCLEOTIDASA

ES

PROVOCA

ELABORADA POR

SOLUBLE Y DESTRUIDAMEDIANTE LA EBULLICION

DURANTE UNA HORA

EL EXANTEMA QUE SE PRESENTA EN LA ESCARLATINA

ESTEPTOCOCOS LISOGENOS

ROMPIMIENTOCOMPLETO

DE ERITROCITOSCON LALIBERACION DE LA

HEMOGLOBINA

LISIS INCOMPLETADE ERITROCITOSCON FORMACIONDE UN PIGMENTO

VERDE

ESTREPTOLISINAS

ALFA HEMOLISISB-HEMOLISIS

GRUPO A PRODUCE

OS

ELABORADA POR

RELACIONADACON

ESTREPTOCOCOS

LA CAPACIDAD DELM.O.

PARA MATARA LOS LEUCOCITOS

HIALURONIDASA ESTREPTODORNASA

ESTEPTOCINASA

ENZIMAS

ES

CONSTITUYENTE DE

FAVORECE

SON

ENZIMA QUE DESDOBLAAL ACIDO HIALURONICO

SUBSTANCIAINTRACELULAR DELTEJIDO CONJUNTIVO

DISEMINACIONDE LOS

M.O.INFECTANTES

ANTIGENICAS YESPECIFICAS PARA

CADA BACTERIAO TEJIDO DEL

CUAL SE OBTENGAN

LLAMADA

DESPOLIMERIZA

SE DETERMINA

DESOXIRRIBONUCLEASAESTREPTOCOCICA

DNA

MIDIENDO LA DISMINUCION

DE LA VISCOCIDAD DE SOLUCIONES

CONOCIDAS DE DNA

LLAMADA

PRODUCIDA POR

PROVOCA

ADMINISTRADA PARA

FIBRINOLISINA

CEPAS DE ESTREPTOCOCOS B-HEMOLITICOS

TRASFORMACIONDEL PLASMINOGENO

EN PLASMINA

TRATAMIENTODE EMBOLIAS PULMONARES

Y DE TROMBOSISVENOSAS

CLASIFICACION

SE BASA EN

MORFOLOGIA COLONIAL Y HEMOLISIS EN LASPLACAS DE AGAR SANGRE

PRUEBAS BIOQUIMICAS Y RESISTENCIA A FACTORES FISICOSY QUIMICOS

ESPECIFICIDAD SEROLOGICA DE SUBSTANCIAESPECIFICA DEL GRUPO Y OTROS ANTIGENOS CAPSULARES O DE

LA PARED CELULAR

CARACTERISTICAS ECOLOGICAS

POR MOTIVOS DE CONVIVENCIA

ESTREPTOCOCOSBETA HEMOLITICOS

ESTREPTOCOCOS NO

BETA HEMOLITICOS

PEPTOESTREPTOCOCOS

ESTREPTOCOCOS BETA HEMOLITICOS

PRODUCENELABORANSE CLASIFICAN

EN

HEMOLISINASCARBOHIDRATOS

ESPECIFICOS DEL GRUPO

GRUPO A GRUPO B GRUPO C Y G GRUPO D GRUPO E,F,H Y

K-U

S.PYOGENESESEL PRINCIPAL

PATOGENOPARA ELHOMBRE

SENCIBLES A BACITRACINA

SE PRESENTA EN LA

FARINGE CAUSANDOSINUSITIS

BACTERIEMIAO ENDOCARDITIS

OCURREN EN ANIMALESS. AGALACTIAE

ES MIEMBRO NORMAL DE

LA FLORANORMAL

DEL APARATOGENITAL

FEMENINO, CAUSASEPSIS

NEONATAL Y MENINGITIS

ENTEROCOCOS:S. FAECALISDIS

S.FACCIUM SE

DESARROLLAN EN MEDIOS

CONCONCENTRACIONES

DE NaCl

NO ENTEROCOCOS:

S.BOVISS.EQUINUSPROVOCAN

INFECCIONESEN VÍAS

URINARIASO ENDOCARDITIS

ABARCA

ESTREPTOCOCOS NO BETA HEMOLITICOS

PRESENTAN

LOS MIEMBROS SON

S. PNEUMONIAENEUMOCOCO

ESTREPTOCOCO VIRIDANS

SOLUBLES EN BILIS

S.SALIVALISS.SANGUIS

S.MITISS.MUTANS

HEMOLISIS ALFA

SONINCLUYE

PEPTOESTREPTOCOCOS

SE DESARROLLAN EN

PRODUCEN

SON PARTE DE

CONDICIONESANAEROBIAS O

MICROAEROFILAS

HEMOLISIS VARIABLES

FLORA NORMALDEL APARATO GENITAL

FEMENINO

PATOGENIA Y DATOS CLINICOS

SON

ENFERMEDAD ATRIBUIBLE A LA

INVASION

ENFERMEDAD ATRIBUIBLE AL

GRUPO Y A SUS PRODUCTOS

ENDOCARDITISINFECCIOSA

ENFERMEDADESPOSETREPTOCOCICAS

S.PYOGENES:LA INFECCIONSE EXTIENDE

A LACIRCULACIONSANGUINEA Y

PRESENTA:ERISIPELA

FIEBRE PUERPERALINFECCION

GENERALIZADA

FARINGITISESTREPTOCOCICA:

LOS ESTREPTOCOCOS VIRULENTOSDEL GRUPO ASE ADHIERENAL EPITELIO

DE LA FARINGEPOR MEDIODEL ACIDO

LIPOTEICOICO

PIODERMAESTREPTOCOCICA:

INFECCION DE LAS CAPAS SUPERFICIALES EN NIÑOS

CONOCIDA COMOIMPETIGO

ENDOCARDITISAGUDA:

NEUMOCOCOS U OTRAS BACTERIAS

SE DEPOSITANSOBRE VALVULAS

CARDIACAS O CON DEFORMACIONES

ENDOCARDITISSUBAGUDA:

AFECTA VALVULASANORMALES

CARACTERIZADA POR FIEBRE

ANEMIABAZO CRECIDO

GLOMERULONEFRITISAGUDA:

SE PRESENTA ENPERSONAS 3 SEMANAS

DESPUES DE LA INFECCION

FIEBRE REUMATICA:ES SECUELA MAS GRAVE

DE INFECCIONESLOS SINTOMAS SON:

FIEBREMALESTAR

POLICARDITIS MIGRATORIA NO

SUPURADA

PUEBAS DIAGNOSTICAS DE LABORATORIO

MUESTRAS FROTIS CULTIVOSPUEBAS

SEROLOGICAS

LAS MUESTRASSE OBTIENEN

DEPENDIENDODE LA INFECCION

FROTIS DE GARGANTA

PUSSANGRE PARA

CULTIVOEL SUERO SIRVE

PARA LA DETERMINACIONDE ANTICUERPOS

COCOS AISLADOSO EN PARES

MAS QUE CADENASDEFINDAS

EXUDADOS PURULENTOS PLACAS DE

AGAR SANGRE

EN OCASIONES SON COCOS GRAM(-)DEBIDO A QUE M.O. YA NO SON

VIABLES Y HAN PERDIDOSU CAPACIDAD DE RETENER COLORANTE

AZUL Y DE SER GRAM(+)

LOS HEMOCULTIVOS DESARROLLAN

ESTREPTOCOCOS HEMOLITICOSDEL GRUPO A

ELISA

METODOS ENZIMATICOS O QUIMICOS

EJEMPLOS

HECHOS A PARTIRDE LAS MUESTRAS

SE CULTIVAN ENHAY

COMO

MUESTRAN

TRATAMIENTO

ESTRREPTOCOCOS BETA HEMOLITICOS GRUPO A

PENICILINA GERITROMOCINATETRACILINAS

ESTREPTOCOCOS ALFA HEMOLITICOSY ENTEROCOCOS

PUEBAS DESENCIBILIDAD

A LOS ANTIBIOTICOS

SON SENCIBLESA

SE DETERMINANPOR

EPIDEMIOLOGIA, PREVENCION Y CONTROL

SE DISEMINANPOR

GOTAS DEL APARATORESPIRATORIO

O DE LA PIEL

SE CONTAMINANPOR

SECRECIONES NASALESEL PAPEL DE LA CAMA

CONTAMINADAUTENCILIOS

O ROPA

SE PREVIENENPOR

LA ADMINSTRACIONDE AGENTES

ANTIMICROBIANOSEN

INTERVENCIONESQUIRURGICAS

SE CONTROLA POR

HALLAZGO Y TERAPEUTICAANTIMICROBIANA INTENSIVA

TEMPRANA DE LAS INFECCIONESRESPIRATORIAS Y CUTANEAS

QUIMIOPROFILAXISANTIESTREpTOCOCICA EN

PERSONAS QUE HAN SUFRIDO UN ATAQUE DE FIEBRE REUMATICA

ERRADICACION DE LOS ESTREOTOCOCOS DEL GRUPO A DE LOS PORTADORES

CONTROL DE POLVO ,VENTILACIONFILTRACION DEL AIRE, LUZ ULTRAVIOLETA

Y PULVERIZACIONESCON AEROSOLES

Bibliografías Bibliografías Romero Cabello RaúlRomero Cabello Raúl

Microbiología y parasitología humanaMicrobiología y parasitología humana

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México 1999México 1999

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Microbiología MédicaMicrobiología Médica

Edit. MosbyEdit. Mosby

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España 1996España 1996

Streptococcus pneumoniaeStreptococcus pneumoniae

Reino: EubacteriaReino: Eubacteria

Phylum: FirmicutesPhylum: Firmicutes

Clase: BacilliClase: Bacilli

Orden: LactobacillalesOrden: Lactobacillales

Familia: SterotococcaceaeFamilia: Sterotococcaceae

Género: Género: StreptococcusStreptococcus

Especie: Especie: pneumoniaepneumoniae

(neumococo)

Streptococcus pneumoniae

STREPTOCOCCUS PNEUMONIAENEUMOCOCO

SON

DIPLOCOCOSGRAM(+)

AGRUPADOSEN CADENAS

UNA CAPSULAFORMADA POR

POLISACARIDOS

LISADOS PORAGENTES

TENSIOACTIVOS

APARATO RESPIRATORIOSUPERIOR

DEL HOMBRE

NEUMONIASINUSITIS

OTITISMENINGITIS

POSEEN CAUSAN

SUELEN SER HABITAN

MORFOLOGIA E IDENTIFICACION

SON FORMANSU ENERGIA LA

OBTINEN DE

TIPICOS DIPLOCOCOSLANCEOLADOS

GRAM(+) COLONIASPEQUEÑAS YREDONDAS

CUPULIFORMES

CULTIVOSJOVENES

PRODUCEN HEMOLISISALFA

NO MOVILES

SE CONSERVAN EN

NO ESPOROGENOS

SENCIBLES A LISIS

CARECENDE CITOCROMOS

Y CATALASA

LA FERMENTACIONDE LA

GLUCOSA

•Gram positiva

•Mide de 1,2-1,8 µm de longitud

•Presenta una forma oval o esférica y el extremo distal lanceolado

•Es inmóvil

•No forma endosporas

•Puede formar una capsula de gran espesor

•No forma esporas ni flagelos

•Generalmente, se presenta en forma de diplococo, por lo que inicialmente fue denominado Diplococcus pneumoniae (aunque pueden inducir la formación de cadenas)

•Se presenta particularmente en ancianos, niños y personas inmunodeprimidas

•El hábitat natural de neumococo es la nasofaringe humana

•La colonización puede tener lugar durante los primeros días de vida

CARACTERISTICAS GENERALES

SinusitisSinusitis

PeritonitisPeritonitis

Neumonía lobar Neumonía lobar agudaaguda

BronconeumoníaBronconeumonía

OtitisOtitis

MeningitisMeningitis

SepticemiasSepticemias

INFECCIONES Y PROCESOS INVASIVOS SEVEROS

Miden 1 mmMiden 1 mm

ElevadasElevadas

LisasLisas

CircularesCirculares

Borde continuoBorde continuo

MucosasMucosas

RugosasRugosas

UmbilicalesUmbilicales

MORFOLOGIA COLONIAL

•Microorganismo microaerófilo

•Son aerobias y anaerobias facultativa

•Temperatura de crecimiento 37ºC

•pH de crecimiento 7.4 a 7.8

•No produce gases

•El ácido láctico inhibe su crecimiento

•Catalasa negativo

•Principal producto resultante de la fermentación de carbohidratos

METABOLISMO

Estructura antigénicaEstructura antigénica

Productos extracelularesProductos extracelulares

Productos ExtracelularesProductos Extracelulares

ACCIÓN PATOGENAACCIÓN PATOGENA

Inhalación de la bacteria.

Colonización de la faringe y la laringe.

Por microaspiracion llega a los pulmones

Al llegar a los pulmones empieza su patología

Inhalación del neumococo Arribo de pulmones Multiplicación en los alvéolos Proceso inflamatorio Exudación Fibrina Eritrocitos Edema Infiltrado celular Consolidación en zonas pulmonares Fagocitosis resolución lenta

DIAGNOSTICO DE LABORATORIODIAGNOSTICO DE LABORATORIO

MUESTRASMUESTRAS

ESPUTOESPUTO PUS PUS SANGRESANGRE PUNCION TRANSTRAQUEAL PUNCION TRANSTRAQUEAL

O TRANSPULMONARO TRANSPULMONAR LIQUIDO SEROSOLIQUIDO SEROSO TEJIDOS CORPORALESTEJIDOS CORPORALES LIQUIDO LIQUIDO

CEFALORRAQUIDEOCEFALORRAQUIDEO

DIAGNOSTICO DEL LABORATORIO

SE EXTRAE SANGRE PARACULTIVO Y SE OBTIENE

ESPUTO,

FROTIS PRUEBA DE HINCHAZON DE LAS CAPSULAS

CULTIVO

HECHOS POR ESPUTO ROJO

HERRUMBROSO,TEÑIDOS

POR TECNICADE GRAM

HECHO POR MEDIO DE ESPUTO

EMULSIONADOY MEZCLADO

CON ANTISUEROY EXUDADOPERITONEAL

SE CULTIVAN EN AGARSANGRE

EL ESPUTO SE EXAMINA POR

FROTISFROTIS

PARES DE COCOSPARES DE COCOS FORMA LANCEONADAFORMA LANCEONADA CADENAS CORTASCADENAS CORTAS GRAM POSITIVOSGRAM POSITIVOS

CULTIVOCULTIVO

AGAR -SANGREAGAR -SANGRE HEMOCULTIVOHEMOCULTIVO INCUBACION EN COINCUBACION EN CO22

CALDO AGAR SOYA TRIPTICASACALDO AGAR SOYA TRIPTICASA SOLUBILIDAD POR BILISSOLUBILIDAD POR BILIS FERMENTACION DE LA INULINAFERMENTACION DE LA INULINA SENSIBILIDAD A LA OPTOQUINASENSIBILIDAD A LA OPTOQUINA

PRUEBAS PARA DETECCION DE ANTIGENOSPRUEBAS PARA DETECCION DE ANTIGENOS

TECNICA DE ELISATECNICA DE ELISA PRUEBAS DE AGLUTINACION PRUEBAS DE AGLUTINACION FAGOCITOSIS O HINCHAMIENTO DE LA CAPSULAFAGOCITOSIS O HINCHAMIENTO DE LA CAPSULA PRUEBA DE QUELLUNGPRUEBA DE QUELLUNG RADIOINMUNOANALISISRADIOINMUNOANALISIS PRUEBAS DE PRECIPITACIONPRUEBAS DE PRECIPITACION PRUEBAS DE SUBCULTIVOPRUEBAS DE SUBCULTIVO

ANTICUERPOS FLUORESCENTESANTICUERPOS FLUORESCENTES PRUEBAS INMUNOSEROLOGICASPRUEBAS INMUNOSEROLOGICAS PRUEBA CUTANEA DE FRANCISPRUEBA CUTANEA DE FRANCIS

VIRULENCIA EN RATONVIRULENCIA EN RATON

MANIFESTACIONES CLINICAS MANIFESTACIONES CLINICAS

Las manifestaciones clínicas de Las manifestaciones clínicas de neumonías varían según la edad, neumonías varían según la edad, extensión de la enfermedad y la extensión de la enfermedad y la incubación será entre 1 y 3 días con un incubación será entre 1 y 3 días con un inicio brusco.inicio brusco.

Manifestaciones clinicasManifestaciones clinicas

VómitosVómitos Decaimiento CefaleaDecaimiento Cefalea

EscalofríosEscalofríos Tos con DolorTos con Dolor expectoración toráxicoexpectoración toráxico

Manifestaciones clínicasManifestaciones clínicas

Fiebre ApneaFiebre Apnea

IrritabilidadIrritabilidad PalidezPalidez

Manifestaciones clínicasManifestaciones clínicas

Cianosis Rechazo alimentarioCianosis Rechazo alimentario

Retracción de músculos AnorexiaRetracción de músculos Anorexia

MECANISMOS DE TRANSMISIONMECANISMOS DE TRANSMISION

Al contacto directo con gotitas de saliva infectadas.Al contacto directo con gotitas de saliva infectadas. Al toser.Al toser. Al estornudar.Al estornudar. A través de besos.A través de besos. Usar objetos contaminados (vasos, cubiertos, botes de agua etc.)Usar objetos contaminados (vasos, cubiertos, botes de agua etc.) Por las manos, cuando el portador no tiene perfecta higiene en ellas.Por las manos, cuando el portador no tiene perfecta higiene en ellas.

FUENTES DE INFECCIONFUENTES DE INFECCION

LLugares donde hay muchos niños.ugares donde hay muchos niños. Guarderías.Guarderías. Jardines infantiles.Jardines infantiles. Escuelas primarias.Escuelas primarias. Hospitales.Hospitales. Casas hogares.Casas hogares. Asilos.Asilos. Lugares de hacinamiento y pobreza.Lugares de hacinamiento y pobreza.

PROFILAXISPROFILAXIS

Enseñe a sus niños a lavarse las manos regularmente con agua y Enseñe a sus niños a lavarse las manos regularmente con agua y jabón. Esto ayuda a evitar la diseminación de la infección.jabón. Esto ayuda a evitar la diseminación de la infección.

Evite el polvo, humo del tabaco y otras sustancias que pueden Evite el polvo, humo del tabaco y otras sustancias que pueden interferir con la respiración y que hacen a los niños más propensos interferir con la respiración y que hacen a los niños más propensos a enfermarse.a enfermarse.

Vacunarse a base de polisacáridos específicos contra el Vacunarse a base de polisacáridos específicos contra el neumococo.neumococo.

BIBLIOGRAFIABIBLIOGRAFIA

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JAWETZ, MELNICK, ADELBERGJAWETZ, MELNICK, ADELBERGMICROBIOLOGA MEDICAMICROBIOLOGA MEDICAEDITORIAL MAINSAL MODERNOEDITORIAL MAINSAL MODERNOMEXICO 2002MEXICO 2002PAG 221PAG 221

DAVIS, DULBECCO, EISEN, GINSBERG, WOODDAVIS, DULBECCO, EISEN, GINSBERG, WOODTRATADO DE MICROBIOLOGIATRATADO DE MICROBIOLOGIAEDITORIAL SALVATEDITORIAL SALVATESPAÑA 1979ESPAÑA 1979PAG 489PAG 489

Familia Bacillaceae

1 318

BACILOS GRAMPOSITIVOS FORMADORES DE ESPORAS: BACILLUS Y CLOSTRIDIUM.

SON

BACILIOS UBICUOS DEBIDO A QUE FORMAN ESPORAS; PUEDEN SOBREVIVIR EN EL AMBIENTE POR MUCHOS AÑOS .

EL GENERO BACILLUS EL GENERO CLOSTRIDIUM

ES

AEROBIO ANAEROBIO OBLIGADO

SUS ESPECIES DE IMPORTANCIA MEDICA

SON

CLOSTRIDIUM TETANICLOSTRIDIUM BOTULINUM

CLOSTRIDIUM PERFRINGENSCLOSTRIDIUM DIFFICILE

BACILLUS ANTHRACTIS BACILLUS CEREUS

CRECEN EN

GELOSA SANGRE AGAR SANGRE

FORMA COLONIAL

SON REDONDAS Y TIENEN FORMA DE VIDRIO DESPULIDO, O BIEN DE PINO INVERTIDO

COLONIAS GRANDES ELEVADAS CON BORDES ENTEROS

Generalidades de la familia bacillaceae

Provienen del suelo, agua, aire y vegetales

Resisten cambios del medio ambiente, calor del suelo, y ciertos desinfectantes químicos

Sobreviven mucho tiempo

Son anaerobias y aerobias facultativos o anaerobios estrictos

Son bacilos gram +

Son bacilos rectos que miden de 0.3-2.2 / 1.2- 7.0 micras

Forman esporas termo resistentes

Pueden ser centrales subterminales o terminales

Son móviles la mayoría

Bacillus anthracis

Género Bacillus

34 Especies

Género Bacillus

1 323

Bacillus anthracis

ENFERMEDAD CAUSANTE

CARBUNCO ES EL PRINCIPAL PATOGENO DEL GENERO

LAS CELULAS MIDEN 1x 3 A 4 NMLAS ESPORAS SE ENCUENTRA EN

EL CENTRO DE ESTOS BACILOS INMOVILES

ESTAN DISPUESTAS EN CADENAS LARGAS

CARACTERISTICASDEL CRECIMIENTO

UTILIZAN FUENTES DE CARBONO E HIDROGENO SENCILLASSOPORTAN EL CALOR Y DIVERSOS DESINFECTANTES QUIMI-

COS DURANTE PERIODOS MODERADOS

PATOGENIA

LOS BACILOS SE PROPAGAN POR VIA LINFATICAA LA SANGRE; MULTIPLICANDO SE LIBREMENTE

LAS BACTERIAS EN LA MISMAOTRO TIPO DE CARBUNCO ES EL PULMONAR QUE

ES POR LA ASPIRACION DE ESPORAS A LOS PUL-MONES O GLANGIOS LINFATICOS

TRAQUEOBRONQUIALES

LAS QUE OCASIONAN:

Ántrax

Bacillus anthracis

Principales antígenos de B.anthracis

B. anthracis B. cereus

Movilidad - +

Liq. de gelatina + +

Hidrólisis del almidón

+ +

Red. De nitrato + +

Reacción de Voges- Proskauer

+ +

Ac. De arabinosa

- -

Ac. De glucosa + +

Características diferenciales

Epidemiología Presente en suelo y en la vegetación Esporas

Sin necesidadde reproducirseÁntraxÁntrax

Inoculación

Inhalación

Ingestión

Patogenia

Virulencia

Presencia de Cápsula Producción de toxinas

Se recoge del líquido edematoso

Compuesta de ácido glutámico

AntifagocíticaCombinación de toxinas:

muerte

Síndromes clínicos

Síndromes Clínicos

Ántrax cutáneo

Síndromes Clínicos Ántrax cutáneo:

1. Desarrolla de una pápula2. Úlcera rodeada por vesículas3. Escara necrótica4. Edema Masivo

MORTALIDAD: 20%

Síndromes Clínicos

Ántrax por inhalación: 1. Imita al principio una enfermedad

respiratoria vírica. 2. Progresa con rapidez hacia la

afectación pulmonar difusa. 3. Insuficiencia respiratoria MORTALIDAD: Mortalidad alta, incluso

en casos con el tratamiento adecuado.

Síndromes Clínicos Ántrax gastrointestinal 1. Adenopatías mesentéricas. 2. Hemorragias 3. Ascitis MORTALIDAD: Elevada. Pero muy poco

frecuente en humanos.

1 334

Bacillus anthracis

Bacillus anthracis

PUS, SANGRE, ESPUTO, PAPULAS O ULCERAS CUTANEAS

MUESTRAS

SE CULTIVAN EN:

GELOSA SANGRECARACTERISTICAS

SON REDONDAS Y TIENEN APARIENCIA DE “VIDRIO DESPULIDO” A LA LUZ TRASMITIDA

LICUAN LA GELATINA Y EL CRECIMIENTO EN GELATINA SEMBRADA POR PICADURA TIENE

LA APARIENCIA DE “PINO INVERTIDO.

DIAGNÓSTICODE LABORATORIO

Examen microscópico

Cultivo de muestras delas pápulas o úlceras

Cutáneas.

Se observan en el tejido:grandes Bacilos gram+

sin esporas.

Tinción medianteAnticuerpos

específicos confluorosceína

Diagnóstico de Laboratorio B. anthracis crece en medios de laboratorio no

selectivos con producción de colonias adherentes que proliferan con rapidez y no son hemolíticas.

La consistencia pegajosa de las colonias y el aspecto microscópico de cadenas serpinginosas de bacilos (“Cabeza de medusa”).Apoya a la distinción de entre B. anthracis y otras especies Bacillus.

Cloranfenicol Tetraciclina

Penicilina

TRATAMIENTO

Tratamiento

PROFILAXIS

VACUNACIÓN DEPERSONAS Y

REBAÑOS

Evitar trabajarCon pieles o lana

Provenientes de paísesEndémicos de Ántrax

DISPOSICIÓN DEANIMALES MUERTOS

POR CARBUNCO

1 339

Bacillus cereus(ENVENENAMIENTO ALIMENTARIO)

TIENE 2 FORMAS DISTINTAS

TIPO EMETICOEnterotoxina termoestable

CAUSADO POR:

PLATILLOS DE ARROZ

COMIENZA

UNA A SEIS HORAS DESPUESDE INGERIR EL ALIMENTO

CONTAMINADO

TIPO DIARREICOEnterotoxina termolábil

PLATILLOS DE CARNE, SALSASO JALEA

TIENE UN PERIODO DE INCUBA-CION DE 1 A 24 HORAS

Bacillus cereus(ENVENENAMIENTO ALIMENTARIO)

Antígenos de virulencia de B. cereus

1 341

Bacillus cereus(ENVENENAMIENTO ALIMENTARIO)

BACILLUS CEREUS(ENVENENAMIENTO ALIMENTARIO)

MATERIAS FECALES

SE INOCULA A PARTIR DE:

RESTOS DE ALIMENTOSCONTAMINADOS.

CRECE EN :

AGAR MANITOL

LAS COLONIAS APARECEN RODEADAS DE UN HALO DE PRECIPITACIÓN BLANCO SOBRE FONDOLAS COLONIAS APARECEN RODEADAS DE UN HALO DE PRECIPITACIÓN BLANCO SOBRE FONDO ROSA-ROJO-VIOLETA, LAS QUE FERMENTAN EL MANITOL DE COLOR AMARILLO, A LAS 24 HORASROSA-ROJO-VIOLETA, LAS QUE FERMENTAN EL MANITOL DE COLOR AMARILLO, A LAS 24 HORAS LAS COLONIAS SON CIRCULARES Y LISAS, A LAS 48 HORAS GRANDES Y RUGOSAS CON ESTRÍA LAS COLONIAS SON CIRCULARES Y LISAS, A LAS 48 HORAS GRANDES Y RUGOSAS CON ESTRÍA

SUS CARACTERISTICAS SON:

Tratamiento

1 343

BIBLIOGRAFIA MICROBIOLOGIA MEDICAErnest Jawetz- Joshep Melnick – Janets Butel

MICROBIOLOGIA MEDICAMurray – Kobayashi – Pfaller - Rosental.Segunda edición, editorial harcourt bracepp 327-329 http:/www.wikipedia.com/bacterias

Género Clostridium

Características

Microorganismo Enfermedad

C. perfringens Bacteriemia, mionecrosis (gangrena gaseosa); infecciones de tejidos blandos (p. ej. Celulitis, fascitis); intoxicacion alimentaria; enteritis necrotizante

C. tetani Tetanos

C. botulinum Botulismo transmitido por alimentos, botulismo infantil, botuilismo en las heridas

Enfermedad

Patogenia

Enfermedad Patología

Gangrena gaseosa Produce una gran infección y una gran intoxicación

Tétanos Produce una mínima infección y una gran intoxicación

Botulismo Produce una gran intoxicación sin producir infección

Clostridium botulinum

Familia bacillaceae

Genero: clostridium

Bacilos grampositivos; formas en huso en palillo de tambor o en raqueta de tenis

Forman esporas; Termorresistentes; localizados central, subterminal o terminalmente: de forma ovalada o redonda

Anaerobios a aerobios facultativos

Catalasa negativa

Formación de capsula variable.

Motivilidad variable

Reducción de nitrato variable

O-F glucosa: fermentativos (F) o inertes (-)

Generalidades

Clostridium botulinum

Antígenos: Termoestables y Termolabiles

Grupos serologicos: A,B,C1,C2,D,E,F,G,

A , B , E Y FCAUSANTES DEL BOTULISMO

EN LOS SERES HUMANOS

1 352

Clostridium botulinumSE DISTINGEN POR:

EL TIPO ANTIGENICO DE LA TOXINA QUE PRODUCENCAUSA:

EL BOTULISMO, ES DE DISTRIBUCION MUNDIAL SE LE ENCUENTRA EN EL SUELO Y OCASIONALMENTE EN HECES DE ANIMALES

TOXINA

SE HAN IDENTIFI-CADO 8 VARIEDA-DES DE LA TOXINA

A-HAB Y E SON LAS

QUE SE RELACIO-NAN CON ENFER-MEDADES EN EL

HUMANO

PATOGENIA

AUNQUE LOS TIPOS A Y B DECLOSTRIDIUM HANSIDO INVOLUCRADOS EN CASOS

RAROS DE HERIDAS INFECTADAS. BOTULISMO NO ES UNA INFECCION SI NO

UNA INTOXICACION

PRUEBAS DIAGNOSTICAS

PUEDE IDENTIFICARSE ELTIPO ANTIGENICO DE LA TOXINA POR NEUTRA-

LIZACION CON ANTITOXINA ESPECIFICAPOLIVALENTE (DE ORIGEN EQUINO) A,

B, E,: UN VIAL INTRAVENOSO Y UN VIAL INTRAMUSCULAR.

SINTOMATOLOGIA

TRANSTORNOS VISUALES INCAPACIDAD PARA DEGLUTIR

DIFICULTAR PARA HABLARLA MUERTE SE PRESENTA

POR PARALISIS RESPIRATIRIA O POR PARO CARDIACO

Las esporas botulínicas se pueden encontrar en el suelo

Por medio de transmisión de los alimentos como el pescado y miel contaminada con esporas

EPIDEMIOLOGIA

GRAM + EN CULTIVOSJOVENES

GRAM – EN CULTIVOS

VIEJOS

PUEDEN RESIDIREN EL INTESTINO

COMO BIOTANORMAL

CLOSTRIDIUM BOTULINUM(BOTULISMO)

CLOSTRIDIUM PERFRINGENS(GANGRENA GASEOSA)

CLOSTRIDIUM TETANI(TETANOS)

PRINCIPAL HABITAT EL

SUELO

ANAEROBIOSESTRICTOS

ESPORAS OVOIDES O ESFERICAS

MAS DE 300ESPECIES

CARACTERISTICASGENERALES

(CLOSTRIDIUM)

CATALASANEGATIVACATALASANEGATIVA

FLAGELOSPERITRICOSFLAGELOS

PERITRICOS

COLONIAS:PEQUEÑAS

TRANSLUCIDASBORDE FILAMENTOSO

COLONIAS:PEQUEÑAS

TRANSLUCIDASBORDE FILAMENTOSO

COLONIAS:CENTRO OPACOCOLOR BLANCO

GRISACEO

COLONIAS:CENTRO OPACOCOLOR BLANCO

GRISACEO

ESPORAS OVALESSUBTERMINALESO TERMINALES

ESPORAS OVALESSUBTERMINALESO TERMINALES

MOVILESMOVILES

AISLADOS EN PAREJASO CADENAS CORTAS

AISLADOS EN PAREJASO CADENAS CORTAS

GRAM POSITIVOSGRAM POSITIVOS

BACILOS4-8 MICRAS

POR 0.8 MICRAS

BACILOS4-8 MICRAS

POR 0.8 MICRAS

CLOSTRIDIUM BOTULINUM

CLOSTRIDIUM BOTULINUM

FERMENTADORESPOSITIVOS

FERMENTADORESPOSITIVOS

TEMPERATURA DECRECIMIENTO

20-30 °C

TEMPERATURA DECRECIMIENTO

20-30 °C

DIGESTION DE CARNE,ALBUMINA DE HUEVO

Y LECHE

DIGESTION DE CARNE,ALBUMINA DE HUEVO

Y LECHE

ACIDO DEGLUCOSAACIDO DEGLUCOSA

PRODUCEN GAS YACIDO SULFHIDRICO

POSITIVOS

PRODUCEN GAS YACIDO SULFHIDRICO

POSITIVOS

ANAEROBIOESTRICTO

ANAEROBIOESTRICTO

LICUAN SUERO COAGULADO

Y GELATINA

LICUAN SUERO COAGULADO

Y GELATINA

pH DE CRECIMIENTO7.2-7.4

pH DE CRECIMIENTO7.2-7.4

METABOLISMOMETABOLISMO

ASPECTOSANTIGENICOS

A Y B:RELACIONADOS CON VARIOS ALIMENTOS.

C:C ALFA Y C BETA.PRODUCE “CUELLO BLANDO” EN AVES.

D:BOTULISMO EN MAMIFEROS.

E:PRODUCTOS DE PESCA.

F:ENFERMEDAD HUMANA.

G:TOXINA TERMOESTABLE.

A, B, E Y F: TOXINAS TERMOLABILES A LAS QUE EL HOMBRE ESSUSCEPTIBLE.

Toxina

Patogenia

PATOGENIA

CLASICO O TRANSMITIDO POR ALIMENTOS

INFANTIL

DE HERIDAS

• Debilidad y mareo después de 1 o 2 días

• Visión borrosa y sequedad

• Dolor oro faríngeo

• Estreñimiento y dolor abdominal

• Estreñimiento

• Muertes

• Falta de desarrollo

• Los síntomas intestinales son menos llamativos

• Debilidad y mareo después de 4 días o más

• Dolor oro faríngeo

SINTOMATOLOGIA

Manifestaciones clínicas

Debilidad Midriasis

Vértigos Dificultad para deglutir

Sequedad de boca y faringe

Dificultad para hablar

Nauseas Retención urinaria

Vomito Debilidad muscular descendente y generalizada

Visión borrosa Parálisis respiratorio

DIAGNOSTICO

• Cultivar C. botulinum en medios anaerobios enriquecidos con nutrientes para permitir la germinación de las esporas termoresistentes

• Las muestras de heces fecales y suero deben analizarse mediante bioensayo en el ratón

• La demostración de la toxina en los alimentos

¤ ANTITOXINA BOTULINICA al aparecer los primeros síntomas

TRATAMIENTO

FUENTES DE INFECCION

SUELO

INSTESTINO DE HERBIVOROS

MECANISMOS DE TRANSMISION

INGESTION DE ALIMENTOS CONTAMINADOS

PROFILAXIS PREPARACION EN ENVASADOS:

ES MUY COMÚN EL USO DE NITRITO DE SODIO (INHIBE LA MULTIPLICACION DE LAS BACTERIAS ANAEROBIAS EN ALIMENTOS).

EVITAR LA GERMINACION DE LAS ESPORAS MANTENIENDO LOS ALIMENTOS A PH ACIDO O ALMACENANDOLOS A 4° C

DESTRUCCION DE LA TOXINA PREFORMADA EN LOS ALIMENTOS CALENTANDOLOS 20 MIN. A 80° C

LA INMUNIZACION CON TOXOIDE POLIVALENTE SOLO ESTÁ INDICADO EN LAS PERSONAS DE ALTO RIESGO.

• JAWETZ, MELNIC ADELBERGMICROBIOLOGIA MEDICA

MANUAL MODERNOMEXICO 2002

PÁGS. 224-230

• MURRAY P. R., LAWRENCE D. W.MICROBIOLOGIA MEDICA

MOSBYESPAÑA 1996

PÁGS. 185, 193-196

• ROMERO CABELLO RAULMICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA

PANAMERICANAMEXICO 1999

PÁGS. 368-371

Bibliografias

Clostridium tetani

Clostridium tetaniReino: Bacteria

División: Firmicutes

Clase: Clostridia

Orden: Clostridiales

Familia: Clostridiaceae

Género: Clostridium

Especie: C. tetani

1 370

CLOSTRIDIUM TETANI(TETANOS)

DATOS CLINICOS

EL PERIODO DE INCUBACION PUEDE VARIAR DESDE 4 A 5

DIAS.LA ENFERMEDAD ESTA

CARACTERIZADAPOR CONTRACCIONES

TONICAS CONVULSIVAS DE LOS MUSCULOS VOLUNTARIOS.

CAUSA:

TETANOS ES DE DISTRIBUCION MUNDIAL EN EL SUELO Y EN LAS HECES DE CABALLO

TOXINA

PRODUCEN LA TETANOSPASMINA Y LA LIBERAN PRINCIPALMENTE CUANDO SE LISAN. ESTA INHIBE

LA LIBERACION DE ACETILCOLINAINTERFIRIENDO CON LA TRANSMI-

SION NEURO MUSCULAR

PATOGENIA

NO ES UN MICROORGANISMO INVASIVO LA INFECCION PERMANECE

ESTRICTAMENTE LOCALIZADA EN EL AREA DE TEJIDO MUERTO EN EL

CUAL SE HAN INTRODUCIDOESPORAS

LA PREVALENCIA DEPENDE

1.-INMUNIZACION ACTVA CON TOXOIDES

2.-TRATAMIENTO ADECUADO DE LAS HERIDAS CONTAMINADAS

CON TIERRA3.-EMPLEO PROFILACTICO

DE ANTITOXINA4.-ADMINISTRACION DE

PENICILINA

DIAGNOSTICO

PUEDE SER AISLADO EN CULTIVO ANAE-ROBIO DE LOS TEJIDOS DE LA HERIDA

CONTAMINADA .LA COMPROBACION DEL AISLAMIENTO SE

BASA EN LA PRODUCCION DE TOXINA Y SU NEUTRALIZACION POR LA ANTI-

TOXINA ESPECIFICA

Características generales

• Bacilos Grampositivos• De 2-5 / 5 micras• Solos, en parejas, o cadenas• Moviles por flagelos peritricos• Producen esporas redondas terminales • Las colonias son de 5 mm de diametro• Brillantes• Traslucidas • Gris amarillas •Bordes iregulares de tipo rizoide

Metabolismo

Aspectos antigenicos

Toxina

Patogenia

Manifestaciones clinicas

Diagnostico

• Examen directo• Cultivo positivo en un 30% de los casos• Pruebas serológicas

Tratamiento

• Antitoxina• Desbridacion• Lavado enérgico de la herida• Penicilina

Fuentes de infección

• Suelo y de heces de animales • Via de entrada:• Heridas•Fracturas • Quemaduras• Cordon umbilical• Utero (posparto)• Mordedura de animales• Ulceras de cubito

Profilaxis

•Toxoide tetánico • DPT a los 2, 4 y 6 meses de edad

• Refuerzo periódico en población de riesgo cada 5 años, población general cada 10 años.

1 381

BIBLIOGRAFIA MICROBIOLOGIA MEDICAErnest Jawetz- Joshep Melnick – Janets Butel

MICROBIOLOGIA MEDICAMurray – Kobayashi – Pfaller - Rosental.Segunda edición, editorial harcourt bracepp 327-329 http:/www.wikipedia.com/bacterias

Clostridium perfringens

383

Características Generales

384

Clostridium perfringens

Bacilo Gram positivo. Puede alcanzar una medida 2.5x8 micras. Es uno de los pocos

clostridios inmóviles.

Se encuentra en los intestinos de los seres

humanos y aves y mamíferos.

Se destruye con temperaturas

superiores a 121°.

Produce toxinas que pueden causar enfermedades como

la enteritis necrótica y Gangrena gaseosa.

Esta n los alimentos (sobre todo en las carnes que no

están bien cocinadas

Se encuentra en el suelo y en el agua

Flagelos peritricos

Producen esporas

ovaladas o

esféric as

Anaerobios estrictos

Algunos facultativamente microaerofilicos (crecen en atmósfera con baja concentración de oxigeno).

Fermentadores positivos

Producen ácido y gas

Acción peptolitica

Temperatura de crecimiento 37ºC

pH de crecimiento 7-7.4

Catalasa negativa

Metabolismo

Aspectos Antigénicos

Antígeno H (flagelar), que es un antígeno proteico, generalmente difásico.

Antígeno capsular, con una única especificidad

antigénica, denominada Vi.

Antígeno O (somático), que es el lipopolisacárido de la pared celular.

Productos ExtracelularesProductos Extracelulares

Toxina mu (DNAaSa)Toxina O (teta)

Colagenaza Proteinaza Hialuronidasa

388

ToxinasToxinas

Toxina Alfa Toxina Beta

Es una lecitinasa o mejor una fosfolipasa C que tiene efecto letal y

necrosante debido a que rompe la lecitina

de la membrana celular.

Rompe la membrana de los eritrocitos, es

hemolítica.

Es producida por el C. perfringens tipo C

solamente es causa de necrosis de tejidos por un mecanismo no muy

claro es causante enteritis necrosante.

389

Puede distinguirse de 3 formas clínicas de esta

infección:

La infección de

tejidos

La inflamación de

tejidos

La necrosis de

tejidos

Es la forma grave del paciente,

además de las manifestacione

s de inflamación,

dolor intenso y secreción

serosa

La herida se encuentra

contaminada por esta

bacteria se observa

inflamación y hay secreción

purulenta.

Se encuentra la bacteria

presente y se puede

observar y cultivar pero

no manifestacione

s de inflamación.

Patogenia

Sintomas

390

• Calambres abdominales• Diarrea •Fiebre intensa• Periodo de 8 a 22 hrs.• Estado totémico• Produce gastroenteritis aguda• Crepitación (gas intratisular)• Descargas sanguinolentas fétidas

Diagnóstico

Tratamiento

392

• Heridas • Fracturas• Abortos •Hernia estrangulada• Obstrucción intestinal

Mecanismos de infección

• Suelo• Heces de animales• Incubación de 1 a 5 días

Fuentes de infección

395

Se realizar limpieza de heridas infectadas con Se realizar limpieza de heridas infectadas con tierra y excremento de vacas.tierra y excremento de vacas.

Cuidado adecuado de las heridasCuidado adecuado de las heridas

Utilización profiláctica y prudente de los Utilización profiláctica y prudente de los antibióticos antibióticos

No ingerir en restaurantes de comidas rápidasNo ingerir en restaurantes de comidas rápidas

Profilaxia

Bibliografía

396

Microbiología MedicaMurray R.P; Drew EW, L.W. KobayashiEDITORIAL The C. V. Mosby Co.USA 1990PAG. 180-184

Manual de microbiología ClínicaTurnbull, P.C.V. & J.M.Kramer.EDITORIAL American SocietyWashinton D.C.,1991PAG. 296-333

MicrobiologíaSwarts, N.M4th ed.D.B. Davis EdiciónUSA PAG. 625-631