Lodos Activos

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UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS FACULTAD DE INGENIERÍA Y ARQUITECTURA ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL PERFIL DE PROYECTO DE INVESTIGACIÓN “AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS A PARTIR DE LIXIVIADOS DEL BOTADERO MUNICIPAL PARA LA FORMACION DE LODOS ACTIVOS CON FINES DE MITIGACION AMBIENTAL – TARAPOTO 2014” ALUMNOS: Álvarez Rengifo Mark Eduardo, Caparachín Murrieta Carol Yohana, Del Aguila Paredes Eduardo, Flores Lozano Ethel, Flores Ramirez Jesica Mishel, Huamán Linarez Baressa, Medina Linares Bryan, Robalino Garcia Ledinn, Sanchez Lazo Sandra Veronica, CURSO: BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL CICLO: VIII PROFESOR: 1
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    16-Sep-2015
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El presente trabajo se trata sobre la formacion de lodos activos a partir de lixiviados del botadero municipal yacucatina - Juan Guerra

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UNIVERSIDAD ALAS PERUANASFACULTAD DE INGENIERA Y ARQUITECTURAESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE INGENIERA AMBIENTAL

PERFIL DE PROYECTO DE INVESTIGACIN

AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS A PARTIR DE LIXIVIADOS DEL BOTADERO MUNICIPAL PARA LA FORMACION DE LODOS ACTIVOS CON FINES DE MITIGACION AMBIENTAL TARAPOTO 2014

ALUMNOS:lvarez Rengifo Mark Eduardo, Caparachn Murrieta Carol Yohana, Del Aguila Paredes Eduardo, Flores Lozano Ethel, Flores Ramirez Jesica Mishel, Huamn Linarez Baressa, Medina Linares Bryan, Robalino Garcia Ledinn, Sanchez Lazo Sandra Veronica,

CURSO:BIOTECNOLOGIA AMBIENTALCICLO:VIII PROFESOR:Blgo. Mblgo. Henry Giovani Jave Concepcin

TARAPOTO PER2014

NDICECAPITULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA41.1.Descripcin de la realidad problemtica41.2.Delimitacin de la investigacin41.2.1.Social41.2.2.Espacial51.2.3.Temporal71.3.Formulacin del problema de investigacin71.3.1.Problema general71.3.2.Problemas especficos71.4.Objetivos71.4.1.Objetivo general71.4.2.Objetivo especifico71.5.Justificacin de la investigacin81.6.Limitaciones de la investigacin8CAPITULO II: MARCO TERICO92.1.Antecedentes del estudio de investigacin92.2.Bases tericas112.3.Bases legales152.4.Definicin de trminos bsicos15CAPITULO III: HIPTESIS Y VARIABLES183.1.Hiptesis general183.2.Hiptesis especficas183.3.Variables183.3.1.Operacionalizacin de las variables19CAPITULO IV: METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN204.1.Diseo de investigacin204.2.Tipo y Nivel de investigacion204.3.Enfoque de la investigacin204.4.Mtodo de la investigacin214.5.Poblacin y muestra224.6.Tcnicas e instrumentos de recoleccin de datos224.6.1.Tcnicas224.6.2.Instrumentos224.6.3.Criterios de validez y confiabilidad de los instrumentos22

CAPITULO V:ANALISIS E INTERPRETACION DE RESULTADOS235.1.Anlisis de datos235.2.Prueba de la hiptesis235.3.Discusin de resultados25

CAPITULO VI: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES..5.4. Conclusiones..5.5. Recomendaciones.

FUENTES DE INFORMACIN26ANEXOS27

CAPITULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA1.1. Descripcin de la realidad problemticaEl aumento de la poblacin trae consigo ciertos problemas ambientales como la inadecuada disposicin de las aguas residuales, stas son vertidas en los ros sin previo tratamiento, y representa un grave problema existente en los pases en vas de desarrollo; generando la contaminacin directa de nuestros ros. Las aguas residuales cada ao se encuentran en aumento producto de este problema, y la incorrecta gestin de nuestras autoridades para la disposicin final de estas implica un alto ndice de problemas ambientales, puesto que son vertidos directamente y de manera irracional hacia nuestros principales ecosistemas.

A nivel mundial existen muchos tratamientos para las aguas residuales, en especial los de uso comn son los tratamiento qumicos, pero trae consigo muchos inconvenientes debido a las propiedades agresivas de los productos qumicos que son utilizados, donde los procedimientos de seguridad son ms estrictos para su aplicacin, sumado a esto est la generacin de efluentes contaminantes.

Nuestra ciudad no es ajena a este problema, siendo una ciudad que se encuentra en vas de desarrollo por lo cual existe el deterioro de los ecosistemas, debido a que las aguas residuales son vertidas en conjunto con las aguas residuales urbanas, quienes poseen altas concentraciones de protenas, lpidos, carbohidratos y metales pesados, y que al pretender ser tratados de manera conjunta presentan una mayor dificultad; generando un mayor impacto ambiental negativo en el rea de influencia directa e indirecta.

1.2. Delimitacin de la investigacin1.2.1. SocialEl presente proyecto de investigacin involucra a toda la poblacin con acceso al servicio bsico de desage adems de la poblacin asentada en las riveras, al sector agrcola e industrial quienes reutilizarn estas aguas mediante el abastecimiento de sistemas de captacin, siendo los principales beneficiados tras la aplicacin del tratamiento de las aguas residuales mediante la accin de los lodos activos.

1.2.2. EspacialPara el presente proyecto de investigacin se pretende extraer la muestra del botadero Municipal Yacucatina cuya ubicacin geogrfica correspondiente es UTM 355542 mE; 9264179 mN; a una altitud de 326 m.s.n.m. sector Yacucatina.

34 MAPA 01. Ubicacin geogrfica del laboratorio del ICT

FUENTE: Elaboracin propia 2014

1.2.3. TemporalEl presente proyecto se desarrollar en un periodo estimado de dos (02) meses. Que comprenden Noviembre a Diciembre del 2014, de los cuales en el primer mes se desarrollar la etapa de laboratorio y el mes siguiente la etapa de gabinete hasta la presentacin del informe final.

1.3. Formulacin del problema de investigacin1.3.1. Problema general Sera factible aislar microorganismos a partir del lixiviado del botadero municipal para la formacin de lodos activos con fines de mitigacin ambiental?

1.3.2. Problemas especficos Facilitarn los inductores el aislamiento de microorganismos a partir del lixiviado del botadero municipal? Cmo probar el funcionamiento del lodo activo conformado por microorganismos a partir del lixiviado del botadero municipal?

1.4. Objetivos 1.4.1. Objetivo general Aislar microorganismos a partir del lixiviado del botadero municipal para la formacin de lodos activos.

1.4.2. Objetivo especifico Evaluar los inductores para el aislamiento de microorganismos a partir del lixiviado del botadero municipal. Probar el funcionamiento del lodo activo en la mitigacin ambiental.

1.5. Justificacin de la investigacin Motivado por la vocacin profesional y de servicio, siendo consciente de la importancia del desarrollo del proyecto de investigacin formacin de lodos activos en condiciones de laboratorio para tratamiento de aguas residuales industriales con fines de mitigacin ambiental como parte de la solucin a un problema ambiental que aqueja a nuestra ciudad. Los aportes de este proyecto de investigacin es para mejorar la eficacia en la degradacin y transformacin de ciertos contaminantes presentes en las aguas residuales generados por la poblacin con el fin de reducir su impacto hacia el medio ambiente.

1.6. Limitaciones de la investigacinEntre las limitaciones de la investigacin podemos encontrar a las siguientes: Falta de laboratorio implementados con equipos apropiados. Costo elevado del proyecto. Escases de materiales a utilizar. Espacio de los laboratorios. Tiempo de ejecucin.

CAPITULO II: MARCO TERICO

2.1. Antecedentes del estudio de investigacin Segn la investigacin realizado por ALCARAZ JUAREZ A. (2008). Aislamiento E Identificacin De Microorganismos En Lodos Activados. Que tuvo como objetivo general aislar e identificar bacterias con capacidad de degradacin de derivados del petrleo.

Y dicha investigacin concluyo con: se pudo asilar bacterias (Microbacterium) y hongos capaces de degradar el petrleo.

Segn la investigacin realizada por LOAIZA NAVIA J. (2010). Modelacin el proceso de lodos activados en la Planta de tratamiento de Aguas Residuales Noreste, Apodaca, N.L. El objetivo principal fue modelar el proceso de lodos activos de la planta Noreste con el ASM 1, para reproducir su comportamiento en cuanto a remocin de materia orgnica, nitrgeno y produccin de lodo, con el fin de que el modelo sirva como herramienta de toma de decisiones. Al finalizar su investigacin concluyo que el modelo calibrado fue capaz de describir de forma adecuada la calidad del efluente (carbono y nitrgeno) y la produccin del lodo, en especial en estado estacionario. Porque que considero exitosa la secuencia de calibracin desarrollada y puesta en prctica.

Segn la publicacin realizada por LPEZ TORRES M., VELIZ E., FERNNDEZ GARCA LA et al. Tratamiento de lodos. Una etapa necesaria dentro del proceso tecnolgico. Revista CENIC. 2010; vol. 41: pp. 1-6.El objetivo general fue la caracterizacin de la digestin anaerbia puede ser una opcin atractiva, como una va de evacuacin y como fuente de energa alternativa.

Al trmino de su poblacin concluy, que los resultados demuestran que la digestin anaerobia de los lodos es una opcin tecnolgica adecuada y ms an para cerrar el ciclo del proceso de tratamiento para el reuso de las aguas residuales municipales, con la potencialidad de la obtencin de biogs y la posible valorizacin del lodo para reus en la agricultura.

Segn la investigacin realizada por SALAZAR L., CRESPI M., SALAZAR R. (2009) Tratamiento de aguas residuales textiles mediante un biorreactor de membrana. El objetivo de la investigacin fue obtener mejores rendimientos de depuracin, reduccin de costos de operacin y mantenimiento en la generacin de procesos que posean una elevada flexibilidad para soportar las variaciones en el afluente, que generen una mnima produccin de lodos y que sean diseados en condiciones mnimas de rea.

Llegaron a la conclusin de que el tratamiento de aguas residuales textiles mediante un BRM resulta atractivo, ya que durante el desarrollo de la parte experimental presenta una mayor estabilidad del proceso, una remocin de la materia orgnica promedio de 89%, de slidos suspendidos totales de 95% y de color del 69%.

Segn la investigacin realizada por PABN S.; SUREZ J. Arranque y operacin a escala real de un sistema de tratamiento de lodos activos para aguas residuales de matadero revista ingeniera e investigacin vol. 29 no. 2, agosto de 2009; pg. (53-58) El estudio tuvo como objetivo realizar el seguimiento al arranque y operacin de un sistema de tratamiento de lodos activos, mediante la aplicacin de una tcnica de arranque utilizando contenido rumial y el monitoreo peridico de parmetros fsicos qumicos y microbiolgicos a las variedades corrientes del proceso y anlisis de los parmetros de control de lodo reactivo.

El resultado fue que es viable utilizar como inoculo contenido ruminal, adaptndolo con variaciones de carga con variadas proporciones de sustrato (agua ruminaza- aguasangre).

2.2. Bases tericasAISLAMIENTO DE MICROORGANISMOSEl aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales de realiza, en la mayora de los casos, mediante la produccin de colonias aisladas en cultivos slido. El crecimiento explosivo de las bacterias permite producir un gran nmero de ellas a partir de una nica clula inicial de forma, tras un periodo de incubacin en las condiciones ambientales adecuadas, se produce una colonia observable a simple vista y formada por individuas iguales.

Sin embargo, no todos los microorganismos presentes en las muestras ambientales so cultivables. Esta es debido a dificultades intrnsecas en el cultivo, al desconocimiento de los requerimientos especficos de cultivo, y a laa existencia de grupos de microorganismos que deben mantenerse en equilibrio para poder sobrevivir. BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA: Cap. 1 de la octava edicin de Brock: Biologia de los microorganismos.

Existen procedimientos de enriquecimientos del nmero de bacterias de ambientes naturales para facilitar su aislamiento. Uno de ellas es la columna de Winogradski que crea un microcosmos para enriquecer el nmero de ciertos tipos de microorganismos presentes en ambientes naturales con objeto de facilitar su aislamiento.

CARACTERSTICAS FSICAS, QUMICAS y BIOLGICAS DEL AGUA RESIDUAL.A continuacin se describen brevemente los constituyentes fsicos y qumicos de las aguas residuales, los contaminantes importantes de cara al tratamiento de las aguas, los mtodos de anlisis, y las unidades que se emplean para caracterizar la presencia de cada uno de los contaminantes en el agua residual.

Las aguas residuales se caracterizan por su composicin fsica y qumica. Las principales propiedades fsicas de agua residual as como sus principales constituyentes qumicos.

Es conveniente observar que muchos de los parmetros que aparecen en la tabla estn relacionados entre ellos. Por ejemplo, una propiedad fsica como la temperatura afecta tanto a la actividad biolgica como a la cantidad de gases disueltos en el agua residual.

Propiedades fsicas: Color Aguas residuales domsticas e industriales. Olor Agua residual en descomposicin, residuos industriales

Constituyentes qumicos: Orgnicos carbohidratos Aguas residuales domsticas, industriales y comerciales. Grasas animales, aceites Aguas residuales domsticas, industriales y comerciales y grasa. Pesticidas Residuos agrcolas. Fenoles Vertidos industriales. Protenas Aguas residuales domsticas, industriales y comerciales. Contaminantes prioritarios Aguas residuales domsticas, Industriales y comerciales. Agentes tenso activos Aguas residuales domsticas, industriales y comerciales. Compuestos orgnicos voltiles Aguas residuales domsticas, industriales y comerciales.

Otros Degradacin natural de materia orgnica Inorgnicos: Alcalinidad Aguas residuales domsticas, agua de suministro, infiltracin de agua subterrnea. Cloruros Aguas residuales domsticas, agua de suministro, infiltracin de agua subterrnea. Metales pesados Vertidos industriales. Nitrgeno Residuos agrcolas y aguas residuales domsticas. PH Aguas residuales domsticas, industriales y comerciales. Fsforo Aguas residuales domsticas, industriales y comerciales; aguas de Escorrenta. Contaminantes prioritarios Aguas residuales domsticas, industriales y comerciales. Azufre Agua de suministro; aguas residuales domsticas, comerciales e industriales.

Gases: Sulfuro de hidrgeno Descomposicin de residuos domsticos. Metano Descomposicin de residuos domsticos. Oxgeno Agua de suministro; infiltracin de agua superficial. Disponible en: http://cidta.usal.es/cursos/ETAP/modulos/libros/Caracteristicas.PDF

Funcionamiento de los lodos activos.El tratamiento de las aguas residuales implica una serie de procesos y operaciones unitarias, comunes en la Ingeniera Qumica, y que son empleadas frecuentemente en el tratamiento y acondicionamiento de aguas naturales. Estas operaciones unitarias son la sedimentacin, filtracin, cribado, etc. Adicionalmente a estos procesos es necesario un tratamiento biolgico, a travs del cual el material orgnico.

Presente en el agua residual es convertido parcialmente a material celular o biomasa, y el resto se oxida a metano y productos inorgnicos como: agua, carbonatos, bixido de carbono, amoniaco, nitratos, etc. Quienes llevan a cabo este proceso, son una gran masa de microorganismos de especies muy variadas, y que cumplen funciones especficas en el proceso de depuracin de material orgnico en las aguas residuales. Estos microorganismos pueden ser: aerobios, anaerobios o facultativos.

En presencia de oxgeno, los aerobios y facultativos son los que crecen y se desarrollan, mientras que en ausencia de oxgeno los anaerobios y facultativos predominan. Los procesos aerobios son los ms convenientes para la conversin del material orgnico en las aguas residuales, y el proceso anaerobio es el ms adecuado para la conversin del material orgnico que se tiene en los lodos biolgicos producidos en el proceso de tratamiento de las aguas residuales.

Durante el proceso de digestin del material orgnico por procesos aerobios, se forman productos intermedios que no son de carcter agresivo o repulsivo, lo cual si ocurre en un proceso anaerobio, por lo tanto la digestin aerobia se lleva a efecto en espacios abiertos, con grandes suministros de oxgeno y buena ventilacin. Por el contrario, la digestin anaerobia se realiza en un recipiente cerrado, y solo es abierto una vez que el material orgnico se ha convertido a productos terminales, que ya no son objetables y pueden manejarse los residuos adecuadamente.

Por estas razones, los procesos de tratamiento de aguas residuales en digestores o reactores biolgicos aireados (reactor aerobio), son los ms convenientes y los ms frecuentemente empleados. Uno de los procesos aerobios ms empleados es el proceso de lodos activados.

No hay un solo proceso de lodos activados, y existen muchas variaciones de dicho proceso para darle tratamiento a diferentes tipos y calidades de agua, o para obtener un agua tratada con ciertos parmetros de calidad. Disponible en:http://filtrosyequipos.com/GUEST/residuales/lodosactivados5.pdf

CARACTERSTICAS DE LOS LIXIVIADOS QUE AFECTAN SU TRATAMIENTOExisten numerosas caracterizaciones de los lixiviados en donde se hace nfasis en su alto poder contaminante. Se dice que los lixiviados usualmente tienen un alto contenido de nitrgeno y fosforo, presencia abundante de patgenos e igualmente de sustancias toxicas como metales pesados y constituyentes orgnicos. (GIRALDO E. 2010).

2.3. Bases legales Segn la ley de recursos hdricos, Ley N 29338; en el artculo 79.- Vertimiento de agua residual: hace mencin que la autoridad nacional del Agua autoriza el vertimiento del agua residual tratada a un cuerpo natural. Segn la ley de recursos hdricos, Ley N 29338; Artculo 82.- Reutilizacin de agua residual: menciona que la Autoridad Nacional, a travs del Consejo de Cuenca, autoriza el reso del agua residual tratada, segn el fin para el que se destine la misma. D.S. N 003-2010-MINAM (Aprueba Lmites Mximos Permisibles para los efluentes de Plantas de Tratamiento de Aguas Residuales Domsticas o Municipales): establece los Lmites mximos permisibles en plantas de tratamiento de las aguas residuales. Segn la Ley General Del Ambiente - Ley N 28611, Artculo 121.- Del vertimiento de aguas residuales: El Estado emite en base a la capacidad de carga de los cuerpos receptores, una autorizacin previa para el vertimiento de aguas residuales domsticas, industriales.2.4. Definicin de trminos bsicos Lodos activos: Residuo semislido que contiene microorganismos y sus productos, de cualquier sistema de tratamiento de aguas, Un proceso de lodos activados, no es otra cosa que un tratamiento biolgico. (GONZALES CRUZ, M 2010).

Aerobio: proceso que ocurre en presencia de oxigeno molecular. (GONZALES CRUZ, M 2010).

Aguas residuales: agua deseca por una casa, una comunidad, una granja o una industria que contiene materia orgnica disuelta o suspendida. . (GONZALES CRUZ, M 2010).

Agua residual domestica: agua proveniente de los desechos de una comunidad. . (GONZALES CRUZ, M 2010).

Agua residual industrial: agua descargada resultante de un proceso industrial y que no tiene ningn valor para est. (GONZALES CRUZ, M 2010).

Digestion anaerobica: la digestion anaerobia es una de los procesos mas antiguos empleados en la estabilizacion de lodos. Este proceso se propicia de la degradacion de la materia organica contenida en el en ausencia de oxigeno molecular. (GONZALES CRUZ, M. 2010).

Digestion aerobia: la digestion aerobia se emplea generalmente en plantas de tratamiento con capacidad minima sin embargo en algunas ocasiones se ah empleado en plantas con mayor capacidad. (GONZALES CRUZ, M. 2010).

Consorcios: Un ConsorcioMicrobianoes una asociacin natural de dos o ms poblaciones microbianas, de diferentes especies, que actan conjuntamente como una comunidad en un sistema complejo, donde todos se benefician de las actividades de los dems. (LPEZ, DOMNGUEZ & GARCA, 2007).

Inductores: sustancia, normalmente un sustrato molecular de una enzima especfica, que se combina con el represor activo producido por el gen regulador y lo desactiva.

Muestra: La muestra es un subconjunto de la Poblacin Blanco de la Inferencia. Los objetivos de la extraccin de una muestra de la poblacin. (Cristina Ludewig).

Muestreo por atributos: En lossistemas de muestreopara aceptacin se emplean mucho los trminos defectivo y defecto. Unaunidad defectuosaeslaque no cumple con las especificaciones en algn aspecto, o sea tiene uno o ms defectos

CAPITULO III: HIPTESIS Y VARIABLES

3.1. Hiptesis generalMediante la utilizacin de inductores en medios especficos se aislarn e identificarn microorganismos degradadores y transformadores de compuestos contaminantes.

3.2. Hiptesis especficas En medios bsicos con la adicin de compuestos lipdicos (lecitina), proteicos (lactosa), carbohidratos (Almidn) y metales pesados (cloruro de mercurio o hidrocarburo) como inductores se ensayar el aislamiento de microorganismos con caractersticas de inters. Mediante el principio de la prueba del granulo anaerbicos ser factible evaluar y probar la funcionalidad del lodo activo conformado.

3.3. VariablesVariables independientes Inductores (Lecitina, almidn, casena y cloruro de mercurio e hidrocarburo).

Variable dependiente Aislamiento de organismos degradadores y transformadores de lpidos, carbohidratos, protenas y metales pesados.

3.3.1. Operacionalizacin de las variables

Cuadro 01: Operacionalizacin de las variablesVARIABLE

DEFINICION CONCEPTUALDIFINICION OPERACIONALDIMENSIONESINDICADORESESCALA DE MEDICION

INDEPENDIENTE:Inductores (Lecitina, almidn, casena y fluor).

DEPENDIENTE:Aislamiento de organismos degradadores y transformadores de lpidos, carbohidratos, protenas y metales pesados.

- Elinductorsuele ser el sustrato de una ruta catablica, o una molcula muy semejante al sustrato natural.

-Son colonias bacterianas pertenecientes a una misma especie, con capacidad degradadora y especficas. Produccin de enzimas.

Presencia de colonias.

Formacin de halos.

Degradacin y transformacin de inductores.

Capacidad para estimular la produccin de enzimas especficas.

Crecimiento en medios especficos.

Tolerancia a compuestos especficos.

Endo-enzimas.

Exo-enzimas.

-Dimetro del halo -Reduccin del sustrato.-Formacin mltiple de colonias.

Ordinal/Nominal: Abundante o mnimo

Nominal: Grande, mediano y pequeo.

Fuente: Elaboracin propia 2014CAPITULO IV: METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN

4.1. Diseo de investigacinSegn el propsito del estudio y la naturaleza de la investigacin, corresponde a un diseo de tipo Investigacin de laboratorio o experimental.Segn ESS FERRER.(2010).Operacionalizacin de variables, hace mencin que sta investigacin se presenta mediante la manipulacin de una variable no comprobada, en condiciones rigurosamente controladas, con el fin de escribir de qu modo y por qu causa se produce una situacin o acontecimiento particular.

4.2. Tipo y nivel de la investigacinLa presente investigacin es de tipo correlacional, porque persigue medir el grado de relacin existente entre variablesSegn ESS FERRER. (2010).Operacionalizacin de variables, menciona que dicho nivel de investigacin Estudia las relaciones entre variables dependientes e independientes, es decir, la correlacin entre dos variables.

Nivel de investigacin:Segn lo establecido por SNCHEZ CARLESSI H. y REYES MEZA C. (2006), nuestro nivel de investigacin cientfica es del tipo explicativa o de comprobacin de hiptesis causales, porque busca explicar fenmenos y el estudiar sus relaciones para conocer su estructura y los aspectos que intervienen en la dinmica de aqullos. Hay predominio de explicacin, descripcin y correlacin. Es aquella que tiene relacin causal, no solo persigue describir o acercarse a un problema, sino que intenta encontrar las causas del mismo.

4.3. Enfoque de la investigacinSegn el enfoque de investigacin es cuantitativo; HERNNDEZ SAMPIERI R. (2010). Metodologa de la investigacin. Lo define como una investigacin que utiliza diseos para analizar la certeza de las hiptesis formuladas en un contexto en particular o para aportar evidencia respecto de los lineamientos de la investigacin, se encuentra relacionada con el grado en que apliquemos el diseo tal como fue preconcebido (particularmente en el caso de los experimentos).

4.4. Mtodo de la investigacinPara el trabajo de investigacin se desarrollara 11 etapas:

ETAPA 01: COORDINACION CON LOS LABORATORIOS Se coordin con los laboratorios para la esterilizacin de los materiales e insumos, mediante documentacin.

ETAPA 02: ADQUISICION DE INSUMOS E INSTRUMENTOS DE LABORATORIOSe compr todos los instrumentos e insumos que se necesit para el desarrollo del presente proyecto de investigacin.

ETAPA 03: FORRADO DE LOS MATERIALES PARA LA ESTIRILIZACION El forrado se realiz con el papel kraft, la forma de forrado vari de acuerdo a la forma de los materiales. En el caso del almidn se necesit pesar 1.56 gr y fue forrado con papel aluminio para su posterior esterilizacin en el horno. En el caso de los matraces, primero se prepar el agar nutritivo para hidratar a una concentracin de 1.84 de agar / 80ml de agua destilada. En este proceso con el papel kraft se cubri los materiales de vidrio como los Matraces, vasos de precipitacin, pipetas, varillas de agitacin, probetas y cajas Petri. Los tubos de ensayos fueron llenados con 18.8 ml de solucin salina y luego se procedi a la esterilizacin.

ETAPA 04: ESTERILIZACIO DE LOS MATERIALES Las placas Petri y el almidn fueron esterilizados en horno a 160 C por 2 horas. Los dems insumos e instrumentos fueron esterilizado en autoclave a 121 C por 20 minutos.

ETAPA 05: OBTENCION DE LA MUESTRA DE LIXIVIADO

Para poder obtener la muestra se construy un muestreador artesanal, mediante el uso de un cucharon de aluminio, un listn de madera, jebes de llanta, lata y alambre. La tcnica de muestreo seleccionado fue al azar y por atributo, debido a la ubicacin geogrfica y a la inaccesibilidad del lixiviado. Se ubic los puntos de muestreo. Luego con el muestreador artesanal, se procedi a sacar las muestra de la parte superficial, media y baja de cada punto de muestreo del lixiviado, el cual cada extraccin de muestras fueron colocadas en un recipiente y mezcladas, para ir obteniendo una mezcla homognea de las muestras. Una vez obtenida la muestra se procedi a colocarlo en una bolsa ziploc y se transport para su refrigeracin.

ETAPA 06: PRACTICA EN LABORATORIO Preparacin del alcohol yodadoSe prepar 240 ml de alcohol yodado, con proporcin de 3 a 1 (alcohol y agua destilada), y se desinfecto la mesa.

Licuacin del agar nutritivo para hidratarSe calent al agar hasta su punto de ebullicin, evitando su solidificacin.

Incorporacin de los inductores a los medios de cultivo. Inductor lecitina

Se desinfect el huevo con alcohol yodado y se rompi una pequea capa del huevo dejando libre la membrana que cubre la clula. Luego con el asa bacteriolgica se perfor la membrana y se vaco la clara en un vaso de precipitacin, luego se procedi a vaciar la yema en un vaso de precipitacin esterilizado. Y se agreg 1 ml de solucin salina, para su extraccin.

Se extrajo 2.1 ml de yema para incorporarlo en el matraz con el agar que debe encontrarse aproximadamente a 37C.

Inductor almidnEn ste proceso se extrajo 0.96 gr de almidn esterilizado y se agreg al medio de cultivo el cual luego fue agitado para la homogenizacin.

Inductor casenaSe esteriliz el tarro de leche con alcohol yodado, luego con un cuchillo tambin esterilizado se procedi a perforar el tarro de leche.Se vaci la leche en un vaso de precipitacin esterilizado y con una pipeta se procedi a extraer 1.8 ml de leche, el cual fue agregado al matraz con el medio de cultivo.

Inductor cloruro de mercurioSe pes 1.76 gr de cloruro de mercurio (Hg Cl2) y se procedi a colocarlo en un papel aluminio el cual posteriormente se agreg al agar, con el uso de EPP.

Los medios de cultivos fueron agitados hasta su hominizacin.

Incorporacin de las muestras con el mtodo de MacFarland.Se agreg 2 ml de lixiviado en un tubo de ensayo con solucin salina de 18,8 ml esterilizado obteniendo como muestra 10-1.

Luego para realizar la muestra 10-2 se extrajo 2ml de la muestra 10-1 y se agreg al siguiente tubo de ensayo, y as sucesivamente hasta obtener las muestras de 10-3, 10-4, 10-5, 10-6.

Sembrado de la muestra en el medio de cultivo.Para este proceso se realiz primero la separacin de las pipetas por nmero de muestra, en este caso tomamos las muestras 10-3, 10-4, 10-5, 10-6.El siguiente procedimiento se agreg el agar con inductor en las cajas petri observando que se cubra toda la superficie de sta, logrando una concentracin aproximadamente de 12.5 a 13.5 ml, luego se deja que este se solidifique. Con el agar sobrante se coloc en tubos de ensayo inclinados a 45. El siguiente procedimiento fue realizar el sembrado de cada una de las muestra, siendo duplicados las muestras 10-4, 10-5.

El sembrado const del uso del asa de drigalski esterilizado, con la pipeta se extrajo 0.5 ml de muestra de cada uno de los tubos de ensayos y se coloc en las cajas petri con los inductores, y se procedi al extendido con el asa de drigalski.

Incubacin de los medios de cultivo a temperatura ambiente.Se incubo las cajas Petri a temperatura ambiente, por 5 das.

ETAPA 07: EJECUCION DEL PROYECTOEn la ejecucin del presente proyecto de investigacin, se sigui los mismos pasos descritos en la ETAPA 06, con la variacin en las disoluciones, la variacin del inductor de metal pesado y no se aisl del inductor de carbohidratos.

1. Se prepar el alcohol yodado.2. Se licu el agar nutritivo para hidratar (156 ml), para los 3 inductores que se realiz.3. Se extrajo los inductores:4. Para cada inductor se agreg las siguientes concentraciones:Leche: 1.8 ml en 52 ml de agar. Huevo: 2.1 ml en 52 ml de agar.Hidrocarburo: 0.52 ml en 52 ml de agar.5. Se vaci los inductores con el agar en cuatro (04) placas Petri para cada inductor (a excepcin del hidrocarburo).6. Se realiz el mtodo de MacFarland, y se sembr con las disoluciones de 10-5 y 10-6, cada una con su duplicado y todo por superficie.7. Para la mezcla del inductor de hidrocarburo, las placas Petri tenan que estar heladas; se calent el agar con el inductor del hidrocarburo y rpidamente se lo vaci sobre la placa helada; y se sembr en superficie con la disolucin de 10-6 (para una sola placa). 8. Todas las placas sembradas fueron envueltas con su papel kraft estril e incubados a temperatura ambiente por 5 das, los monitoreos se realizaron cada 24 horas.

ETAPA 08: MEDICION DE LOS HALOSPara la medicin de los halos de degradacin se us de un escalmetro se aplic la siguiente formula:HN = HT - HCDnde:HN: Halo netoHT: Halo totalHC: Halo de colonia

Para la medicin de los halos de compuestos carbohidratados, se agreg una gota de solucin de yodo para poder diferenciar el halo formado.

ETAPA 09: AISLAMIENTO DE LOS ORGANISMOSSe determin mediante la observacin las colonias con mayor dimetro de halo neto, luego se esteriliz al asa bacteriolgica con el mechero, posteriormente con el asa en punta se procedi a extraer una pequea cantidad de la colonia de inters para luego ser aislado en los tubos de ensayo con el agar sin inductor, todo este proceso se realiz con el debido cuidado.

ETAPA 10: POSIBLE IDENTIFICACION DE LOS ORGANISMOS MEDIANTE TINCION GRAM Para la identificacin, se extrajo con el asa bacteriolgica una pequea muestra de las colonias presentes en los tubos y se los extendi en presencia de mechero, posterior a eso se procedi a la tincin:1. Se agreg cristal violeta sobre la muestra, por un periodo de 1 minuto y 30 segundos. Y luego se lav.2. Seguido, se agreg lugol por un periodo de 30 segundos; y luego se lav. 3. Posteriormente se agreg alcohol (96) por un periodo de 1 minuto y 30 segundos, y se lo lav. 4. Luego se agreg safranina por un periodo de 4 minutos, luego se lav y se lo seco al mechero.

Para su posible identificacin se observ en el microscopio a 100x, mediante la aplicacin del aceite de inmersin.

ETAPA 11: SISTEMATIZACIN DE LOS RESULTADOS EN EL INFORME FINALDespus de concluir con el proyecto de investigacin, se procedi con la sistematizacin de los datos en el informe final que ser expuesto y presentado al docente del curso.

4.5. Poblacin y muestra PoblacinTodos los microorganismos presentes en los lixiviados.

Muestra Todos los microorganismos factibles hacer aislados.

4.6. Tcnicas e instrumentos de recoleccin de datos4.6.1. Tcnicas Anlisis cualitativo de los lixiviados. Anlisis de libros virtuales referente al tema de investigacin Observacin directa de la zona de estudio. Uso de los software ArcGIS y Google Earth Uso del internet como herramienta para bsqueda de informacin referente al tema de investigacin.

4.6.2. InstrumentosSe utilizaran los siguientes instrumentos para la obtencin de los datos: Balanza analtica Libreta de campo Cmara fotogrfica Microscopio Escalmetro

4.6.3. Criterios de validez y confiabilidad de los instrumentos Validez de los Instrumentos: sern evaluados mediante la revisin de sus mrgenes de error (ajuste tcnico y calibracin), tambin se har una observacin minuciosa de la parte externa e interna de los instrumentos. Confiabilidad de los instrumentos: en caso de los instrumentos de laboratorio que sern usados, se solicitar el certificado de verificacin para la obtencin de datos confiables y seguros.

CAPITULO V: ANALISIS E INTERPRETACION DE RESULTADOS5.1.Anlisis de datos

PARA LA PRACTICA EN LABORATORIO

COMPUESTOS LIPDICOS Tabla 01: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10-3PLACA CON DISOLUCIN 10-3

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

011,9 1,2 0.7

021,9 0,3 1.6

031,90,21.7

041,9 0,91

052,9 2,70.2

060,80,4 0.4

070,5 0,3 0.2

080,7 0,4 0.3

090,7 0,30.4

101,1 0,2 0.9

111,1 0,8 0.3

120,7 0,3 0.4

Fuente: elaboracin Propia 2014Tabla 02: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10-4

PLACA DE DISOLUCION 10 -4

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

000.60.20.4

012.80.931.87

02-0.20.2

03Fue absorbido0.830.83

3.12.90.352.55

043.22.161.04

05-Moho-

060.830.350.48

07-Moho-

08-Moho-

092.41.730.67

100.80.30.5

Fuente: Elaboracin Propia 2014

Tabla 03: Medicin de los halos de la placa con Disolucin 10-4 duplicado

PLACA DE DISOLUCION 10 -4 DUPLICADO

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

01-0.320.32

02-0.40.4

03-0.40.4

041.20.051.15

053.12.11

061.61.030.57

Fuente: Elaboracin Propia 2014

Tabla 04: Medicin de los halos de la placa de disolucin 10 -5PLACA DE DISOLUCION 10-5

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

012.3 0.7 1.6

021.30.9 0.4

032.6 2.3 0.3

041.4 1.30.1

052.61.61

Fuente: elaboracin propia 2014

Tabla 05: Medicin de los halos de la placa de Disolucin 10-5 duplicado

PLACA DE DISOLUCION 10-5 DUPLICADO

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

010.6 0.4 0.2

020.8 0.10.7

032.81.6 1.2

Fuente: elaboracin propia 2014

Tabla 06: Medicin de los halos de la placa de disolucin 10-6PLACA DE DISOLUCION 10-6

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

010.50.3 0.2

02-0.9 0.9

031.20.21

Fuente: elaboracin propia 2014

COMPUESTO CARBOHIDRATADOS

Tabla 07: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10-3

PLACA CON DISOLUCIN 10-3

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

0110.620.38

020.90.680.22

030.50.340.16

Fuente: elaboracin propia 2014

Tabla 08: Medicin de los halos de la placa de disolucin 10 -3 duplicado

PLACA DE DISOLUCION 10-3

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

011266

0214113

031055

Fuente: elaboracin propia 2014

COMPUESTOS PROTEICOS

Tabla 09: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10 -4PLACA DE DISOLUCION 10 -4

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

000.70.30.4

010.650.440.21

021.51.360.14

Fuente: elaboracin propia 2014

Tabla 10: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10 -4

PLACA DE DISOLUCION 10 -4 DUPLICADO

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

0110.640.36

021.41.220.18

031.351.20.15

Fuente: elaboracin propia 2014

Tabla 11: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10 -5

PLACA DE DISOLUCION 10-5

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

012.291.30.99

020.930.70.23

031.71.50.20

Fuente: elaboracin propia 2014

Tabla 12: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10 -5

PLACA DE DISOLUCION 10-5 DUPLICADO

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

011.91.50.4

Fuente: elaboracin propia 2014

Tabla 13: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10 -6PLACA DE DISOLUCION 10-6

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

012.621.80.82

021.81.690.11

030.26

Fuente: elaboracin propia 2014

METAL PESADO

No se form ninguna colonia en los das de monitoreo.

PARA LA EJECUCION DEL PROYECTO

PARA COMPUESTOS LIPDICOS Tabla 14: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10 -5PLACA DE DISOLUCION 10-5

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

011.831.160.67

020.60.2730.327

Fuente: elaboracin propia 2014

Tabla 15: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10 -6PLACA DE DISOLUCION 10-6

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

011.1560.340.816

021.240.30.94

031.20.470.73

Fuente: elaboracin propia 2014

PARA COMPUESTOS PROTEICOSTabla 16: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10 -5PLACA DE DISOLUCION 10-5

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

01817

Fuente: elaboracin propia 2014

Tabla 17: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10 -6PLACA DE DISOLUCION 10-6

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

01MohoMohoMoho

Fuente: elaboracin propia 2014

PARA METALES PESADOS

Tabla 18: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10 -6

PLACA DE DISOLUCION 10-6

N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto (cm)

010.40.20.2

020.50.20.3

Fuente: elaboracin propia 2014

INDUCTORCOLONIAS FORMADASHALOS FORMADOSPOSIBLE ORGANISMO

Huevo (lpido)AbundanteGrandePseudomona

Leche (protena)MnimaMedianoBacillus

Almidn (carbohidrato)MnimaMedianoBacillus

Hidrocarburo (Metal pesado)MnimaMedianoPseudomona

Cuadro 02: Cuadro resumen

Fuente: elaboracin propia 2014

5.2.Prueba de la hiptesis5.2.1. Hiptesis general

Mediante la utilizacion de inductores en medios especificos se logro aislar e indentificar microorganismos capaces de degradar y transformar compuestos contaminantes.

5.2.2. Hiptesis especifica

En medios bsicos con la adicin de compuestos lipdicos (lecitina), proteicos (casena), carbohidratos (Almidn) y metales pesados (cloruro de mercurio o hidrocarburo) como inductores se logr ensayar el aislamiento de microorganismos con caractersticas de inters. Por factores de tiempo y falta de equipos de laboratorio no se logr evaluar y probar la funcionalidad del lodo activo conformado.

5.3.Discusin de resultados

Para compuestos lipdicosPara la identificacin de los organismos presentes en el huevo, se encontr una cierta dificultad, pero segn los descrito por VANDEVENNE C y ESCOLA M, menciona que el Bacillus cereus produce lecitinasa, de manera que degrada lecitina de la yema de huevo formando un halo de precipitado alrededor de sus colonias, siendo los microorganismo mas comunes en la degradacin de compuestos lopidicos y el manitol como medio nos permite la diferenciacin de bacillus cereus, que es un microorganismo manitol negativo, frente a la flora acompaante manitol positiva, que hace que el rojo fenol del medio vire de rojo a amarillo.Asimismo, el crecimiento de la flora acompaante se ve inhibido por la polimixina, que no afecta al crecimiento bacillus cereus.

Para compuestos carbohidratosPara la medicin de los halos formados por la degradacin de compuestos carbohidratos se aplic el revelador lugol, se observ los diferentes tonos de colores; FLORES CH; hace mencin que el almidn en contacto con el reactivo de Lugol (disolucin de yodo y yoduro potsico) toma un color azul-violeta caracterstico. Esa coloracin producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de almidn. Por lo tanto, no es una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul violeta.

BOLAOS N tambin hace mencin que ste proceso es usado para determinar la presencia o alteracin de almidn u otros polisacridos. La amilosa, el componente del almidn de cadena lineal, forma hlices donde se juntan las molculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro. La amilopectina, el componente del almidn de cadena ramificada, forma hlices mucho ms cortas, y las molculas de yodo son incapaces de juntarse, obtenindose un color entre naranja y amarillo.

Para compuestos proteicosDurante el primer da de monitoreo, en la placa que contena inductor de leche (10-6) se encontr una colonia de microorganismos, que problablemente sea un moho, segn la investigacin realizada en la Universidad Nacional Abierta y a Distancia, cuyo tema fue acerca de los mohos y levaduras, hace mencin que los mohos realmente no se presentan en la leche cruda y en algunos productos lcteos solo atacan la parte superficial que est en contacto con el aire. Siendo esto una de las principales causas de la existencia de dicho microorganismos en la placa.

Para metales pesados Despus de los cuatro das de muestreo, no se observ la formacin de ningn halo, imposibilitando su medicin, Snchez L, Senz E, hace mencin en su trabajo de investigacin titulado Antispticos y Desinfectantes, al cloruro de mercurio, era usado como desinfectante potente, siendo muy txico, y no se puede usar en reas extensas de la piel, debido a su accin esencialmente bacteriosttica y fungisttica.

Mediante el uso del hidrocarburo como inductor, se logr la formacin de colonias de microrganismo capaces de transformar metales pesados, segn la investigacin realizada por la Universidad de Antofagasta. 2005. Contaminacin por hidrocarburo en la zona costera de la ciudad de Antofagasta, hace mencin que los productos derivados del Petrleo, en general son mezclas complejas de hidrocarburos (HBC) tipo n-alcanos, alcanos ramificados, ciclo alcanos e hidrocarburos aromticos (mono y polibencnicos), y pueden contener metales pesados como Pb, V, Ni, Co, Fe.

CAPITULO VI: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

5.4. Conclusiones

Se concluye que si fue factible aislar microorganismos a aprtir del lixiviado del botadero, capaces de degradar los diferentes compuestos de interes como lipidos, proteinas, carbhidratos y metales pesados, obteniendo como posibles identificaciones de microorganismos mediante la coloracion gram los siguientes:- Para lipidos: Pseudomona- Para proteinas: Bacillus- Para metal pesado: Pseudomona- Carbohidrato: Bacillus

Repecto a los inductores estos fueron muy efectivos permitiendonos obtener buenos resultados de acuerdo a la formacion de colonias y la capacidad degradadora de estas, siendo el hidrocarburo un buen inductor para el aislamiento de microorganismos capaces de transformar metales pesados.

Ya una vez lograda el aislamiento, no se pudo probar la accion de los microorganismos, ya que nos falto el tiempo y la accesibilidad de ciertos insumos y materiales, no cumpliendo asi con uno de los objetivos especificos.

5.5. Recomendaciones

Se recomienda la utilizacin de hidrocarburo como inductor de metales pesados y no el cloruro de mercurio. Para la mejor obtencin de resultados se implementara equipos modernos e insumos presentes en el laboratorio. Para el aislamiento de microorganismos se debe trabajar con materiales esterilizados, evitando as el desarrollo de microrganismos ajenos a los de inters. Para la identificacin de microorganismos se debera usar un microscan.

FUENTES DE INFORMACIN

LOAIZA NAVIA J. (2010). Modelacin el proceso de lodos activados en la Planta de tratamiento de Aguas Residuales Noreste, Apodaca, N.L.

LPEZ TORRES M, VELIZ E, FERNNDEZ GARCA LA et al. Tratamiento de lodos. Una etapa necesaria dentro del proceso tecnolgico. Revista CENIC. 2010; vol. 41: pp. 1-6.

SALAZAR L., CRESPI M., SALAZAR R. (2009) Tratamiento de aguas residuales textiles mediante un biorreactor de membrana.

PABN S.; SUREZ J. Arranque y operacin a escala real de un sistema de tratamiento de lodos activos para aguas residuales de matadero revista ingeniera e investigacin vol. 29 no. 2, agosto de 2009; pg. (53-58).

GONZALES CRUZ, M 2010. Definicin de trminos bsicos.

Ley de recursos hidricos, Ley N 29338.

D.S. N 003-2010-MINAM

Ley General Del Ambiente - Ley N 28611, Artculo 121.- Del vertimiento de aguas residuales.

BARAY A.(2006). Introduccin a la metodologa de la investigacin. Edicin electrnica.

VAN DALEN DB y MEYER WJ. (1944). Manual de tcnica de investigacin.

SNCHEZ CARLESSI H. y REYES MEZA C. (2006)

ALCARAZ JUAREZ A. (2008). Aislamiento E Identificacin De Microorganismos En Lodos Activados.

BROCK. (2010). Biologa de los microorganismos.

ANEXOSAnexo 01: Matriz de Consistencia.

TITULOAISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS A PARTIR DE LIXIVIADOS DEL BOTADERO MUNICIPAL PARA LA FORMACION DE LODOS ACTIVOS CON FINES DE MITIGACION AMBIENTAL TARAPOTO 2014

PROBLEMAGENERALSera factible aislar microorganismos a partir del lixiviado del botadero municipal para la formacin de lodos activos con fines de mitigacin ambiental?

ESPECFICOSFacilitarn los inductores el aislamiento de microorganismos a partir del lixiviado del botadero municipal?

Cmo probar el funcionamiento del lodo activo conformado por microorganismos a partir del lixiviado del botadero municipal?

OBJETIVOSGENERALMediante la utilizacin de inductores en medios especficos se aislaran e identificara microorganismos degradadores y transformadores de compuestos contaminantes.

ESPECFICOSEvaluar los inductores para el aislamiento de microorganismos a partir del lixiviado del botadero municipal.Probar el funcionamiento del lodo activo en la mitigacin ambiental.

HIPTESISH. GENERAL:

-Mediante la utilizacin de inductores en medios especficos se aislaran e identificara microorganismos degradadores y transformadores de compuestos contaminantes.H. ESPECFICA: -En medios bsicos con la adicin de compuestos lipdicos (lecitina), proteicos (lactosa), carbohidratos (Almidn) y metales pesados (flor) como inductores se ensayara el aislamiento de microorganismos con caractersticas de inters.-Mediante el principio de la prueba del granulo anaerbicos ser factible evaluar y probar la funcionalidad del lodo activo conformado.

VARIABLESINDEPENDIENTEInductores (Lecitina, almidn, lactosa y cloruro de mercurio e hidrocarburo).DEFINICIN CONCEPTUALElinductorsuele ser el sustrato de una ruta catablica, o una molcula muy semejante al sustrato natural.DIMENSIONESCapacidad para estimular la produccin de enzimas especficas.

INDICADORESEndo-enzimas.

Exo-enzimas.

DEPENDIENTEAislamiento de organismos degradadores y transformadores de lpidos, carbohidratos, protenas y metales pesados.Son colonias bacterianas perteneciente a una misma especie, con capacidad degradadora y especficas. Crecimiento en medios especficos.

Tolerancia a compuestos especficos.

-Dimetro del halo -Reduccin del sustrato.-Formacin mltiple de colonias.

METODOLOGAEtapa 01: coordinacin con los laboratorios Etapa 02: adquisicin de insumos e instrumentos de laboratorioEtapa 03: forrado de los materiales para la esterilizacinEtapa 04: esterilizacin de los materialesEtapa 05: obtencin de la muestra de lixiviadoEtapa 06: practica en laboratorioEtapa 07: ejecucin del proyectoEtapa 08: medicin de los halosEtapa 09: aislamiento de los organismosEtapa 10: posible identificacin de los organismos mediante tincin Gram Etapa 11: sistematizacin de los resultados en el informe final

Fuente: Elaboracin propia 2014.

Anexo 02: Adquisicin de materiales de laboratorio

Materiales comprados por el grupo para la realizacin del presente proyecto de investigacin.

Anexo 03: Monitoreo del halo formado Colonias formadas en el agar con inductor de huevo (lesitina)

Anexo 04: Microorganismos gram aislados

Microorganismos encontrados en el inductor de huevo.

Microorganismos encontrados en el inductor de leche

Microorganismo rugoso encontrado en el inductor de metal pesado (Hidrocarburo)

Microorganismo liso encontrado en el inductor de metal pesado (Hidrocarburo)