Inserto Anti-hbs 60453002s

60453002/S12/OR 1 Para diagnóstico in vitro únicamente Uso Previsto El kit ImmunoComb ® II Anti-HBs es una prueba semicuantitativa rápida para la detección de anticuerpos contra el antígeno de superficie de la Hepatitis B en suero o plasma humano. Introducción El vírus de la hepatitis B (HBV) pertenece a una nueva familia de vírus de ADN llamados Hepadnaviridae. Se caracteriza por un marcado hepatotropismo y un singular medio de replicación a través de un mecanismo de transcripción inversa. El virión completo, o partícula Dane, consiste de una molécula de ADN circular protegida por un antígeno nucleocáspide/nuclear (HBcAg) y rodeada por un envoltorio de lipoproteína conocido como antígeno de superficie (HBsAg). El HBsAg también se encuentra en la sangre en forma de partículas incompletas esféricas o filamentosas no infecciosas. Un componente menor del nucleocáspide HBV, el antígeno HBe (HBeAg), también puede detectarse en la sangre durante la fase replicativa del virus. El vírus de la hepatitis B es un vírus ubicuo de distribución global. Las principales rutas de trasmisión viral son horizontales, a través de la contaminación sexual y parenteral, y vertical, a través de la trasmisión prenatal de la madre infectada al feto. Las consecuencias clínicas de la infección de HBV varían entre las totalmente inaparentes (70% de los casos) a la hepatitis ictérica aguda. La mayoría de los pacientes se recuperan completamente seis meses después del comienzo de la enfermedad. Una pequeña proporción de la población infectada (<1.5%) puede desarrollar hepatitis fulminante, a menudo con consecuencias fatales. En una proporción sustancial (hasta 10%) de los pacientes adultos, el HBV puede persistir, progresando eventualmente hasta la hepatitis crónica con desarrollo final de cirrosis y hépatocarcinoma. Los portadores crónicos de hepatitis B (200 millones en todo el mundo) constituyen la principal reserva del virus y contribuyen a la diseminación de la enfermedad. Los anticuerpos contra HBsAg (anti-HBs) son los principales anticuerpos neutralizadores de HBV, que usualmente persisten durante toda la vida y protegen contra la reinfección. El nivel de anti-HBs, por lo tanto, sirve como un indicador para evaluar la recuperación de la infección de HBV, o el éxito de la vacunación utilizando partículas de HBsAg. Concentraciones de anticuerpos de ≥10 IU/L indican inmunidad al HBV. Principio de la Prueba La prueba ImmunoComb ® II Anti-HBs es un inmunoensayo enzimático de fase sólida (EIA), basado en un principio de reconocimiento doble. La fase sólida es un Peine con 12 proyecciones ("dientes"). Cada diente está sensibilizado en dos áreas reactivas: punto superior — albúmina de suero bovino biotinilada (Control Interno) punto inferior — HBsAg recombinante La Bandeja de Desarrollo tiene 6 filas (A-F) de 12 pocillos. Cada fila contiene una solución reactiva lista para ser usada en cada etapa del ensayo. La prueba es realizada en etapas, pasando el Peine de una fila a otra, con un período de incubación en cada etapa. Para comenzar la prueba, las muestras de suero o plasma son agregadas al diluyente en los pocillos de la fila A de la Bandeja de Desarrollo. Luego se inserta el Peine en los pocillos de la fila A. Los anticuerpos anti-HBs , en caso de estar presentes en las muestras, se unirán con el HBsAg en los puntos inferiores del diente del Peine (Figura 1). Los componentes no unidos son lavados en la fila B. En la fila C, los anticuerpos anti-HBs capturados en los puntos inferiores del diente reaccionarán con el HBsAg biotinilado. En la fila D el complejo antígeno biotinilado/anticuerpo en los puntos inferiores del diente, y la albúmina de suero bovino biotinilada de los puntos superiores (Control Interno) reaccionarán con estreptavidina conjugada con fosfatasa alcalina (FA). En la fila E, los componentes no ligados son eliminados mediante un lavado. En la fila F, la fosfatasa alcalina unida reaccionará con un sustrato cromogénico. Los resultados pueden verse como puntos azul grisáceos en la superficie del diente del Peine. anti-HBs sustrato cromogénico HBsAg biotinilado Unión del HBsAg biotinilado; 30 min/37°C Reacción enzimática de color; 10 min/37°C Unión de la estreptavidina-F A; 20 min/37°C estreptavidina (SA) - FA B B B B SA FA B SA FA SA FA Formación del complejo HBsAg-anticuerpo; 120 min/37°C Figura 1. Principio de la Prueba El kit incluye un Control Positivo (anti-HBs) y un Control Negativo, que deben incluirse cada vez que se realiza la prueba. Al término de ésta, el diente utilizado con el Control Positivo debe mostrar dos puntos de color azul grisáceo. El diente usado con el Control Negativo debe mostrar el punto superior y un punto inferior muy ténue o la ausencia del mismo. El punto superior también deberá aparecer en todos los demás dientes para confirmar que el kit funciona apropiadamente y que la prueba fue realizada correctamente. Contenido del Kit Peines El kit contiene 3 Peines de plástico. Cada Peine tiene 12 dientes, uno para cada prueba (Figura 2). Cada diente es sensibilizado en dos areas reactivas: punto superior — albúmina de suero bovino biotinilada (Control Interno) punto inferior — HBsAg recombinante Control Interno 53 53 53 53 53 53 53 53 53 53 53 53 ImmunoComb ® II HBsAg recombinante Figura 2. Peine Los Peines son suministrados en empaques de aluminio que contienen una bolsa desecante. Bandejas de Desarrollo El kit contiene 3 Bandejas de Desarrollo, cubiertas con papel de aluminio. Cada Bandeja de Desarrollo (Figura 3) contiene todos los reactivos necesarios para la prueba. La Bandeja de Desarrollo consiste de 6 filas (A-F) de 12 pocillos cada una. Anti-HBs Formato: 3 x 12 pruebas Código: 60453002 S

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