Avances en identificación, Avances en identificación, cuantificación de alergenos cuantificación de alergenos

y tratamientos de y tratamientos de hipo–sensibilización.hipo–sensibilización.

Dr. MarioDr. Mario Soto AguileraSoto AguileraSpectrum Labs USA / ITR Spectrum Labs USA / ITR

ConsultoresConsultores..

Task Force on Canine Atopy DermatitisTask Force on Canine Atopy Dermatitis (2006)(2006)

HipersensibilidadHipersensibilidad: : Conjunto de signos clínicos Conjunto de signos clínicos objetivamente reproducibles, originados por la exposición a objetivamente reproducibles, originados por la exposición a un estímulo definido, en una dosis tolerada por animales un estímulo definido, en una dosis tolerada por animales normales.normales.

Alergia (hipersensibilidad alérgica):Alergia (hipersensibilidad alérgica): Reacción de Reacción de hipersensibilidad, iniciada por el sistema inmunológico en hipersensibilidad, iniciada por el sistema inmunológico en respuesta a un alergeno, mediada por anticuerpos o por respuesta a un alergeno, mediada por anticuerpos o por células. células.

Hipersensibilidad no alérgicaHipersensibilidad no alérgica:: Reacción de Reacción de hipersensibilidad, iniciada por mecanismoshipersensibilidad, iniciada por mecanismos

no inmunológicos.no inmunológicos.

Task Force on Canine Atopy (2006).Task Force on Canine Atopy (2006).

Alergia mediada por linfocitos, en la cual se genera una respuesta de tipo inmunológico, que implica la participación de linfocitos alergenos - específicos que se manifiestan en forma clínica.

Alergia mediada por IgEAlergia mediada por IgE, en la cual se genera una respuesta , en la cual se genera una respuesta inmunitaria que implica la participación de IgE y que se inmunitaria que implica la participación de IgE y que se manifiesta en forma clínica.manifiesta en forma clínica.

Dermatitis Canina Atópica, es una alergia con base genética que predispone a la inflamación de la piel, en la cual las características clínicas se asocian a la participación de anticuerpos IgE producidos en respuesta a alergenos ambientales.

Test para el diagnóstico de alergias

Serum Tests

Intradermal Tests

Test cutáneo- Prick testTest cutáneo- Prick test

Inyección intradérmica de alergenos para Inyección intradérmica de alergenos para medir la reacción entre el alergeno y la medir la reacción entre el alergeno y la

degranulación de las mastcells.degranulación de las mastcells.

El procedimiento requiere depilar al El procedimiento requiere depilar al paciente bajo sedación o anestesia, que paciente bajo sedación o anestesia, que se suspendan los se suspendan los antihistamínicos por antihistamínicos por

10 días,10 días, corticoides orales por trescorticoides orales por tres semanas semanas y corticoides inyectables a lo y corticoides inyectables a lo

menos por 6 semanas.menos por 6 semanas.

La suspensión del tratamiento aumenta La suspensión del tratamiento aumenta las probabilidades que el paciente se las probabilidades que el paciente se

autoinfiera lesiones.autoinfiera lesiones.

Test cutáneoTest cutáneo

Dependiendo del grado de alergia, el testDependiendo del grado de alergia, el testcutáneo puede ser doloroso para el cutáneo puede ser doloroso para el

animal.animal.

No permite testear una cantidad grandeNo permite testear una cantidad grande de alergenos a diferencia de los métodosde alergenos a diferencia de los métodos

basados en suero / plasma.basados en suero / plasma.

No permite testear alergenos alimentarios.No permite testear alergenos alimentarios.

Causas de Falsos negativos y positivos (Didier-Noel-Carlotti, WVC, Vancouver, 2008).

Falsos negativos: Inyección de aire. Volumen inyectado muy

pequeño. Lectura mas allá de los

20 minutos. Extractos alergénicos

vencidos o muy diluidos.

Falsos positivos: Volumen de alergenos

muy grande. Sensibilización debido

a repetidos skin tests. Interpretación

incorrecta. Sarna, Urticaria.

Correlación entre tests cutáneos y serológicos

Stephen D. White, DVM Professor, University of California at Davis:

“There is a great deal of controversy over which is more accurate, intradermal skin testing or serological tests. In 3 studies, at

University of California at Davis, Colorado State University and Gifu University (Japan), involving a combination of over 250 dogs, the number of positive responses to hyposensitization were similar

regardless of whether the hyposensitization solutions were based on Intradermal Skin Testing results or ELISA tests”.

““UPDATE on ATOPIC DERMATITIS and SECONDARY INFECTIONS”UPDATE on ATOPIC DERMATITIS and SECONDARY INFECTIONS” presented at the Ontario (Canada) Veterinary Medical Association, presented at the Ontario (Canada) Veterinary Medical Association,

26 Jan 0626 Jan 06

LA MEJOR SOLUCION…

•En Diciembre 2001, nos trasladamos a nuestro En Diciembre 2001, nos trasladamos a nuestro propio edifico corporativo en Tempe, Arizona.propio edifico corporativo en Tempe, Arizona.•50% de las muestras corresponden al mercado de 50% de las muestras corresponden al mercado de USA y el resto al mercado internacional.USA y el resto al mercado internacional.•Durante 2009, Spectrum testeó Durante 2009, Spectrum testeó 35.00035.000 animales animales provenientes de 42 países.provenientes de 42 países.

Spectrum LabsSpectrum Labs

Spectrum Labs – Atiende al mercado de USA. Spectrum Labs Worldwide – Atiende al mercado

internacional, incluyendo Chile . Spectrum Health Care – Diagnóstico de alergias en

personas. Investigación & Desarrollo – Subcontratado a una

compañía de Portland, Oregon. Laboratorio para realizar el diagnóstico de

alergias con Metodología SPOT. Laboratorio autorizado por USDA para elaborar

tratamientos de hipo - sensiblización.

Test que identifica y cuantifica la fuerza de la reacción, con la cual se une el anticuerpo Ig E - alergeno específico presente en el plasma, con el alergeno en una preparación de laboratorio.

Metodología SPOTMetodología SPOT

Para Para asegurar la asegurar la precisión y exactitud de precisión y exactitud de los resultados,los resultados,

la Metodología SPOT la Metodología SPOT de Spectrum Labs, de Spectrum Labs, emplea procedimientos emplea procedimientos de inmuno absorbancia de inmuno absorbancia con con Proteína A de origen Proteína A de origen estafilocócico para estafilocócico para remover la porción Fc remover la porción Fc de la molécula de IgG, de la molécula de IgG, y un y un inmuno- inmuno- absorbante helmíntico absorbante helmíntico para disminuir la para disminuir la concentración de IgE no concentración de IgE no específicas a alergias.específicas a alergias.

Cuantificación de alergenosCuantificación de alergenos

El problemaEl problema::

“ “No allergen present: false negative results No allergen present: false negative results reported”, ya que reported”, ya que el alergeno que se presenta en el alergeno que se presenta en forma líquida se pierde por derrame durante el test.forma líquida se pierde por derrame durante el test.

La solución propietaria de SPECTRUM LABSLa solución propietaria de SPECTRUM LABS: : Recubrir las micro placas de poliestireno con una Recubrir las micro placas de poliestireno con una

solución adherente de tipo orgánico basada en solución adherente de tipo orgánico basada en carbono, con lo cual se asegura que los alergenos carbono, con lo cual se asegura que los alergenos se encuentren presentes en las micro placas al se encuentren presentes en las micro placas al momento de realizar el test.momento de realizar el test.

Cuantificación de alergenosCuantificación de alergenos

Medición realizada en una placa de poliestireno Medición realizada en una placa de poliestireno recubierta con una solución orgánica propietaria de recubierta con una solución orgánica propietaria de Spectrum, que mide la fuerza de la relación entre Spectrum, que mide la fuerza de la relación entre los anticuerpos IgE presentes en el suero / plasma los anticuerpos IgE presentes en el suero / plasma y el / los alergenos específicos agregados a la y el / los alergenos específicos agregados a la placaplaca..

NegativoNegativo:: Si el score es menor en un 150 % en Si el score es menor en un 150 % en relación con el Control Negativorelación con el Control Negativo. .

Sospechoso (Borderline):Sospechoso (Borderline): Si el score en relación Si el score en relación con el Control Negativo, se sitúa entre el 151 % y el con el Control Negativo, se sitúa entre el 151 % y el 199 %.199 %.

PositivoPositivo cuando el score es mayor que 200 % en cuando el score es mayor que 200 % en relación con el Control Negativo.relación con el Control Negativo.

Chile’s Allergen Panels

Panel de alergenos para ChilePanel de alergenos para Chile

Pastos - 5Pasto ovillo FestucaBallicaChépicaPoa de los prados

Semillas - 8SalviaEnredaderaSemillas AlfalfaLlanténDiente de leónAmarantoOrtigaCenizo

Arboles - 14RobleOlmoCedroPlátano orientalFresnoEucaliptusSauce OlivoAlamoLigustrinaPinoMoraArceCiprés

Hongos – 15AspergillusAlternariaHelminthosporiumCladosporiumPenicilliumRhizopusSmut Mix StemphyliumCurvulariaCandida AlbicansPullulariaFusariumNigrosporaSaccharomycesPhoma

Panel de alergenos para ChilePanel de alergenos para Chile

Epidermales - 5Pelo / caspa de gato. Pelo / caspa de perro.Pelo / caspa de caballo.Mezcla de plumas.Pelo / caspa de ratas.

Polvo del hogar - 4Polvo del hogarAcaros del polvo Acaro de la harinaAcaro del moho

Factores del medio ambiente interno - 8LanaAlgodónCeiboPiretroYute / SisalLirioHumo del tabacoPelo / caspa humano

Panel de alergenos para ChilePanel de alergenos para Chile

Insectos – 5 CucarachaMosquitosMosca comúnAbejasAvispa chaqueta amarilla

Otros - 3PulgaEstafilococoMalazessia

Panel alimentos para Caninos

Carne bovinoConejoMix AvesCerdoVenadoHuevos

Maní Semilla linazaAvenaCebadaPapa blancaLevaduras

Leche SoyaMaízTrigoCorderoArroz

AlgasAlfalfaMix PescadoPatoZanahoriasPorotos

HIPO-SENSIBILIZACION

Umbral y Efecto sumatorio de efectos ( PJ Ihrke, UC Davis, 1982)

Umbral:

Cada individuo puede tolerar una cierta carga alérgica, sin que se manifiesten signos de la enfermedad, pero un pequeño incremento en la carga lleva al individuo sobre el umbral y se desencadena la signología clínica.

Efecto sumatorio: Enfermedades concomitantes que presentan prurito, pueden llevar al animal sobre el umbral alérgico.

Qué es el umbral ?El prurito aparece cuando los niveles de anticuerpo IgE inducidos por los alergenos específicos , sobrepasan el

umbral.

Th

resho

ldT

hresh

old

Itchy!! Not itchy…

Tratamientos de Hiposensiblización

Elaborados para cada paciente en base a los resultados del Spot Test.

Cada set se elabora en el Laboratorio de Spectrum Labs, según estándares y Normas USDA.

El tratamiento inicial de 9 meses de duración, incluye tres frascos con un máximo de 20 alergenos.

Tratamiento de mantención de por vida.

Control de calidad - Normas USDA Control de calidad - Normas USDA empleadas.empleadas.

Tratamiento de Hiposensibilización

Objetivo clínico:

Estimular la producción de anticuerpos IgG específicos, los cuales bloquean la unión del alergeno con la IgE específica, disminuyendo el umbral alérgico y por ende la signología clínica.

Tratamiento hipo - sensibilizaciónTratamiento hipo - sensibilización

Inyección subcutánea de Inyección subcutánea de alergenos conalergenos con dosificación dosificación y concentración que y concentración que aumentan en el tiempoaumentan en el tiempo..

Cada TH contiene 3 frascos Cada TH contiene 3 frascos cuyas concentraciones van cuyas concentraciones van en aumento:en aumento:

Vial A - 1 : 720.Vial A - 1 : 720. Vial B - 1 : 180.Vial B - 1 : 180.Vial C - 1 : 60.Vial C - 1 : 60.

Hipo - sensibilizaciónHipo - sensibilización Las IgG se producen a Las IgG se producen a

medida que la concentración medida que la concentración y la cantidad de las y la cantidad de las inyecciones aumentan.inyecciones aumentan.

El nivel de IgG alcanzado, El nivel de IgG alcanzado, permite vivir al animal en su permite vivir al animal en su ambiente, por cuanto al estar ambiente, por cuanto al estar hipo - sensibilizado, se han hipo - sensibilizado, se han controlado los síntomas por controlado los síntomas por encontrarse bajo el umbral encontrarse bajo el umbral alérgico.alérgico.

Alcanzar este estado,puede Alcanzar este estado,puede durar un mes en algunos durar un mes en algunos animales, 4 a 6 meses en otros animales, 4 a 6 meses en otros y hasta 9 meses en algunos y hasta 9 meses en algunos individuos.individuos.

Importante:Importante:

Para disminuir el umbral alérgico, el animal debe Para disminuir el umbral alérgico, el animal debe ser tratado para todos los alergenos a los cuales ser tratado para todos los alergenos a los cuales

es reactivo.es reactivo.

A medida que se inyectan más alergenos, se A medida que se inyectan más alergenos, se producen mas anticuerpos IgG específicos y producen mas anticuerpos IgG específicos y por lo tanto es mayor la oportunidad para por lo tanto es mayor la oportunidad para tratar los síntomas y llevar al animal bajo su tratar los síntomas y llevar al animal bajo su umbral alérgico .umbral alérgico .

Time/Dosage

Co

nce

ntr

atio

n

IgG

IgE

Threshold

Effects of Hyposensitization on IgE and IgG Concentrations

Efectividad del tratamiento

El tratamiento se considera exitoso cuando: La dependencia a los esteroides y / o drogas

antiinflamatorias se reduce o elimina. Al observar al paciente, tanto el veterinario como

el dueño estiman que existe mejoría.

Hasta el momento, Spectrum ha testeado 380.000 animales, de los cuales el 70 % ha realizado el cambio de dieta recomendado y el tratamiento de hipo - sensibilización .

Efectividad del Tratamiento Durante el 2009, Spectrum contactó a 2,463

veterinarios de USA que realizaron nuestro tratamientos:

* Sólo cambio de dieta: 48% de mejoría.

* Sólo hiposensiblización: 67 % de mejoría

* Cambio de dieta más TH: 85% de mejoría.

Solamente el cambio de dieta, unido al TH puede garantizar una disminución del umbral que permita al animal vivir en forma confortable.

Razones posibles para pobres respuestas al tratamiento

Animales de mayor edad por lo general dan una escasa respuesta inmunitaria.

Fallas en el tratamiento de otras enfermedades antes de iniciar el tratamiento.

Escaso compromiso del dueño con el regimen de hipo - sensibilización y con los cambios de dieta.

Sistema inmunológico deprimido:

Por lo menos en el 50 % de los animales que no responden, la causa radica en un sistema inmunológico deprimido.

Se requiere un inmunoestimulante para destrabar (jump start)el sistema inmune. .

Pomeranian/Poodle mix with severe Feet Licking as well as Atopic dermatitis.

8 ½ months into hyposensitization

“A picture speaks 1000

words”

MUCHAS GRACIAS POR SU TIEMPO…

Mario.soto@itrconsultores.cl

Celular: 09 499 2316