RESISTENCIA A ANTIBIÓTICOS Y METALES RESISTENCIA A ANTIBIÓTICOS Y METALES PESADOS EN CEPAS DE PESADOS EN CEPAS DE Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus, ,

AISLADAS EN PACIENTES QUE ACUDEN AL AISLADAS EN PACIENTES QUE ACUDEN AL HOSPITAL III ESSALUD JULIACA - 2007HOSPITAL III ESSALUD JULIACA - 2007

Por: CÉSAR JULIO LARICO MAMANIPor: CÉSAR JULIO LARICO MAMANI

INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN

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http://es.wikipedia.org/wiki/Imagen:Plasmid_%28spanish%29.svg

http://images.google.com.pe/imgres?imgurl=http://farm1.static.flickr.com/188/394574430_ad3592e1e1.jpg&imgrefurl=http://enlacenacional.com/2007/11/01/extensas-colas-para-revision-tecnica-vehicular/comment-page-1/&h=375&w=500&sz=153&hl=es&start=8&tbnid=rY6hwE0YRp4GyM:&tbnh=98&tbnw=130&prev=/images%3Fq%3DAUTOS%2BCONTAMINANDO%2BEN%2BJULIACA%26gbv%3D2%26hl%3Des%26sa%3DG

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OBJETIVOSOBJETIVOS OBJETIVO GENERALOBJETIVO GENERAL

Determinar la resistencia a antibióticos y Determinar la resistencia a antibióticos y metales pesados en cepas de metales pesados en cepas de Staphylococcus Staphylococcus aureusaureus, aisladas a pacientes que acuden al , aisladas a pacientes que acuden al Hospital III EsSalud de la ciudad de JuliacaHospital III EsSalud de la ciudad de Juliaca

OBJETIVOS ESPECÍFICOSOBJETIVOS ESPECÍFICOS

Determinar la resistencia de cepas de Determinar la resistencia de cepas de Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus frente a antibióticos.frente a antibióticos.

Determinar la concentración mínima inhibitoria a Determinar la concentración mínima inhibitoria a metales pesados: mercurio, plomo, cromo, metales pesados: mercurio, plomo, cromo, cadmio y arsénico en cepas de cadmio y arsénico en cepas de Staphylococcus Staphylococcus aureus.aureus.

HIPÓTESISHIPÓTESIS

Las cepas de Las cepas de Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus, aisladas a pacientes que acuden al Hospital aisladas a pacientes que acuden al Hospital III de EsSalud de la ciudad de Juliaca, son III de EsSalud de la ciudad de Juliaca, son resistentes a antibióticos.resistentes a antibióticos.

Las cepas de Las cepas de Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus, aisladas a pacientes que acuden al Hospital aisladas a pacientes que acuden al Hospital III EsSalud de la ciudad de Juliaca, son III EsSalud de la ciudad de Juliaca, son resistentes a los metales pesados: mercurio, resistentes a los metales pesados: mercurio, plomo, cromo, cadmio, y arsénico.plomo, cromo, cadmio, y arsénico.

MATERIAL Y MÉTODOSMATERIAL Y MÉTODOS

ÁREA DE ESTUDIOÁREA DE ESTUDIO

MATERIAL BIOLÓGICOMATERIAL BIOLÓGICO

Materiales de vidrioMateriales de vidrio

METODOLOGÍAMETODOLOGÍA

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus

Cultivo Cultivo

Fermentación de manitolFermentación de manitol

Coloración GramColoración Gram

Prueba de catalasaPrueba de catalasa

Prueba de coagulasaPrueba de coagulasa

Determinación de la Determinación de la concentración mínima concentración mínima

inhibitoria a antibióticosinhibitoria a antibióticos

Determinación de la Determinación de la concentración mínima concentración mínima

inhibitoria a metales pesadosinhibitoria a metales pesados

CROMATO: 75 mg/mL (75000 µg/mL)

Volumen adicionado (mL)

(µg/50 mL) (µg/mL)

2 150000 3000

1 75000 1500

0,5 37500 750

0,25 18750 375

0,125 93750 187,5

0,0625 4687,5 93,75

RESULTADOSRESULTADOS

CUADRO 1. CUADRO 1. FRECUENCIA DEL ORIGEN DE CEPAS DE FRECUENCIA DEL ORIGEN DE CEPAS DE Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus AISLADAS A LOS PACIENTES QUE AISLADAS A LOS PACIENTES QUE ACUDIERON AL HOSPITAL III EsSALUD DE LA CIUDAD DE ACUDIERON AL HOSPITAL III EsSALUD DE LA CIUDAD DE

JULIACA (JUNIO- OCTUBRE 2007)JULIACA (JUNIO- OCTUBRE 2007)

ORIGEN DE CEPASORIGEN DE CEPAS CEPAS AISLADASCEPAS AISLADAS

Nº DE CEPASNº DE CEPAS %%

ASPIRADO ASPIRADO BRONQUIALBRONQUIAL

0303 1111

HERIDAHERIDA 0707 2525

OTITISOTITIS 0101 44

S. OROFARINGES. OROFARINGE 1010 3535

S. GENITALS. GENITAL 0606 2121

S. OCULARS. OCULAR 0101 44

TOTALTOTAL 2828 100100

FIGURA 1. Frecuencia del origen de cepas de FIGURA 1. Frecuencia del origen de cepas de Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus aisladas a los pacientes que aisladas a los pacientes que acudieron al Hospital III EsSALUD de la ciudad de Juliaca.acudieron al Hospital III EsSALUD de la ciudad de Juliaca.

11

25

4

35

21

4

0

5

10

15

20

25

30

35

40

1ORIGEN DE CEPAS

PO

RC

EN

TA

JE

ASPIRADOBRONQUIALHERIDA

OTITIS

SECRECIÓNFARÍNGEASECRECIÓNGENITALSECRECIÓNOCULAR

CUADRO 2. CUADRO 2. CEPAS DE CEPAS DE Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus AISLADAS SEGÚN GRUPO ETÁREOAISLADAS SEGÚN GRUPO ETÁREO

GRUPO ETÁREOGRUPO ETÁREO CEPAS AISLADASCEPAS AISLADAS

Nº DE CEPASNº DE CEPAS %%

< 1 AÑO< 1 AÑO 0202 77

1 – 10 AÑOS1 – 10 AÑOS 1010 3535

21 – 30 AÑOS21 – 30 AÑOS 0101 44

31 – 40 AÑOS31 – 40 AÑOS 0707 2525

41 – 50 AÑOS41 – 50 AÑOS 0707 2525

81 – 90 AÑOS81 – 90 AÑOS 0101 44

TOTALTOTAL 2828 100100

FIGURA 2. Cepas de FIGURA 2. Cepas de Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus aisladas aisladas según grupo etáreo.según grupo etáreo.

7

35

4

25 25

4

0

5

10

15

20

25

30

35

40

menor 1año

1 a 10años

21 a 30años

31 a 40años

41 a 50años

81 a 90años

GRUPO ETÁREO

PO

RC

EN

TA

JE

Serie1

CUADRO 3. CUADRO 3. RESISTENCIA A ANTIBIÓTICOS EN CEPAS RESISTENCIA A ANTIBIÓTICOS EN CEPAS DE DE Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus AISLADAS A LOS PACIENTES AISLADAS A LOS PACIENTES

QUE ACUDIERON AL HOSPITAL III EsSALUD DE LA QUE ACUDIERON AL HOSPITAL III EsSALUD DE LA CIUDAD DE JULIACA.CIUDAD DE JULIACA.

ANTIBIÓTICOSANTIBIÓTICOS CEPAS RESISTENTESCEPAS RESISTENTES

Nº DE CEPAS Nº DE CEPAS RESISTENTERESISTENTE

SS

%% Nº DE CEPAS Nº DE CEPAS INTERMEDIASINTERMEDIAS

%%

PENICILINAPENICILINA 2727 9696 00 00

OXACILINAOXACILINA 2222 7979 00 00

CLINDAMICINACLINDAMICINA 1919 6868 0303 1111

ERITROMICINAERITROMICINA 1818 6464 0202 77

CEFALOTINACEFALOTINA 1616 5757 00 00

CIPROFLOXACINACIPROFLOXACINA 1515 5353 0505 1818

GENTAMICINAGENTAMICINA 1313 4747 0404 1414

TRIMETROPRIN/ TRIMETROPRIN/ SULFAMETOXAZOLSULFAMETOXAZOL

99 3232 00 00

FIGURA 3. Resistencia a antibióticos en cepas de FIGURA 3. Resistencia a antibióticos en cepas de Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus aisladas en pacientes que aisladas en pacientes que acudieron al Hospital III EsSALUD de la ciudad de Juliaca.acudieron al Hospital III EsSALUD de la ciudad de Juliaca.

96

79

64 68

5347

32

57

0 07 11

18 140 0

0

20

40

60

80

100

PE OX E CD CIP GEN SXT CF

ANTIBIÓTICOS

PO

RC

EN

TA

JE

RESISTENTE INTERMEDIO

CUADRO 4. CUADRO 4. CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA A CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA A PLOMO EN CEPAS DE PLOMO EN CEPAS DE Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus AISLADAS AISLADAS A LOS PACIENTES QUE ACUDIERON AL HOSPITAL III A LOS PACIENTES QUE ACUDIERON AL HOSPITAL III

EsSALUD DE LA CIUDAD DE JULIACA.EsSALUD DE LA CIUDAD DE JULIACA.CONCENTRACIÓN CONCENTRACIÓN

MÍNIMA INHIBITORIA MÍNIMA INHIBITORIA ((µg/mLµg/mL ))

CEPAS RESISTENTES A PLOMOCEPAS RESISTENTES A PLOMO

Nº DE CEPASNº DE CEPAS %%

CMI = 800CMI = 800 1111 3939

CMI = 1600CMI = 1600 0808 2929

CMI = 3200 CMI = 3200 0909 3232

TOTALTOTAL 2828 100100

FIGURA 4.FIGURA 4. Concentración Concentración mínima inhibitoria a plomo en mínima inhibitoria a plomo en

cepas de cepas de Staphylococcus Staphylococcus aureus.aureus.

0 0 0 0 0 0

11

8

9

0

2

4

6

8

10

12

12.5ug/ml

25 ug/ml 50 ug/ml 100 ug/ml 200 ug/ml 400 ug/ml 800 ug/ml 1600ug/ml

3200ug/ml

CEPAS

CUADRO 5. CUADRO 5. CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA A CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA A CROMO EN CEPAS DE CROMO EN CEPAS DE Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus

AISLADAS A LOS PACIENTES QUE ACUDIERON AL AISLADAS A LOS PACIENTES QUE ACUDIERON AL HOSPITAL III EsSALUD DE LA CIUDAD DE JULIACA.HOSPITAL III EsSALUD DE LA CIUDAD DE JULIACA.CONCENTRACIÓN CONCENTRACIÓN

MÍNIMA INHIBITORIA MÍNIMA INHIBITORIA ((µg/mLµg/mL))

CEPAS RESISTENTES A CROMOCEPAS RESISTENTES A CROMO

Nº DE CEPASNº DE CEPAS %%

CMI = 3000CMI = 3000 2828 100100

TOTALTOTAL 2828 100100

FIGURA 5.FIGURA 5. Concentración mínima inhibitoria Concentración mínima inhibitoria

a cromo en cepas de a cromo en cepas de Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus

0 0 0 0 0

28

0

5

10

15

20

25

30

93.75 ug/ml 187.5 ug/ml 375 ug/ml 750 ug/ml 1500 ug/ml 3000 ug/ml

CEPAS

CUADRO 6. CUADRO 6. CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA A CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA A MERCURIO EN CEPAS DE MERCURIO EN CEPAS DE Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus

AISLADAS A LOS PACIENTES QUE ACUDIERON AL AISLADAS A LOS PACIENTES QUE ACUDIERON AL HOSPITAL III EsSALUD DE LA CIUDAD DE JULIACA.HOSPITAL III EsSALUD DE LA CIUDAD DE JULIACA.

CONCENTRACIÓN CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA MÍNIMA INHIBITORIA

((µg/mLµg/mL))

CEPAS RESISTENTES A MERCURIOCEPAS RESISTENTES A MERCURIO

Nº DE CEPASNº DE CEPAS %%

CMI = 160CMI = 160 2828 100100

TOTALTOTAL 2828 100100

FIGURA 6. FIGURA 6. Concentración mínima Concentración mínima inhibitoria a mercurio en cepas deinhibitoria a mercurio en cepas de

Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus

0 0 0

28

00

5

10

15

20

25

30

20 ug/ml 40 ug/ml 80 ug/ml 160 ug/ml 320 ug/ml

CUADRO 7. CUADRO 7. CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA A CADMIO EN CEPAS DE A CADMIO EN CEPAS DE Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus

AISLADAS A LOS PACIENTES QUE ACUDIERON AL AISLADAS A LOS PACIENTES QUE ACUDIERON AL HOSPITAL III EsSALUD DE LA CIUDAD DE JULIACA.HOSPITAL III EsSALUD DE LA CIUDAD DE JULIACA.

CONCENTRACIÓN CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA MÍNIMA INHIBITORIA

((µg/mLµg/mL))

CEPAS RESISTENTES A CADMIOCEPAS RESISTENTES A CADMIO

Nº DE CEPAS Nº DE CEPAS %%

CMI = 100CMI = 100 0303 1111

CMI = 200CMI = 200 2525 8989

TOTALTOTAL 2828 100100

FIGURA 7. FIGURA 7. Concentración mínima Concentración mínima inhibitoria a cadmio en cepas de inhibitoria a cadmio en cepas de

Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus

0 0

3

25

00

5

10

15

20

25

30

25 ug/ml 50 ug/ml 100 ug/ml 200 ug/ml 400 ug/ml

CEPAS

CUADRO 8. CUADRO 8. CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA A CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA A ARSÉNICO EN CEPAS DE ARSÉNICO EN CEPAS DE Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus

AISLADAS A LOS PACIENTES QUE ACUDIERON AL AISLADAS A LOS PACIENTES QUE ACUDIERON AL HOSPITAL III EsSALUD DE LA CIUDAD DE JULIACA.HOSPITAL III EsSALUD DE LA CIUDAD DE JULIACA.

CONCENTRACIÓN CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA MÍNIMA INHIBITORIA

((µg/mLµg/mL))

CEPAS RESISTENTES A ARSÉNICOCEPAS RESISTENTES A ARSÉNICO

Nº DE CEPAS Nº DE CEPAS %%

CMI = 1600CMI = 1600 2121 7575

CMI = 3200CMI = 3200 0707 2525

TOTALTOTAL 2828 100100

FIGURA 8.FIGURA 8. Concentración mínima inhibitoria a Concentración mínima inhibitoria a

arsénicoarsénico en cepas de en cepas de Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus..

0 0 0 0 0 0

21

7

0

5

10

15

20

25

25 ug/ml 50 ug/ml 100 ug/ml 200 ug/ml 400 ug/ml 800 ug/ml 1600 ug/ml 3200 ug/ml

CEPAS

CONCLUSIONESCONCLUSIONES

CONCLUSIONESCONCLUSIONESLas cepas de Las cepas de Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus, , presentan resistencia a antibióticos de presentan resistencia a antibióticos de primera elección como sigue: El 96% primera elección como sigue: El 96% de las cepas fue resistente a de las cepas fue resistente a penicilina, 79% a oxacilina, 68% a penicilina, 79% a oxacilina, 68% a Clindamicina, 64% a eritromicina, 57% Clindamicina, 64% a eritromicina, 57% a cefalotina, 53% a ciprofloxacino, a cefalotina, 53% a ciprofloxacino, 47% a gentamicina, 32% a 47% a gentamicina, 32% a trimetoprim con sulfametoxazol.trimetoprim con sulfametoxazol.

1.1.

El 100% de las cepas de El 100% de las cepas de Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus, aisladas a , aisladas a pacientes que acudieron al Hospital III EsSalud - Juliaca, pacientes que acudieron al Hospital III EsSalud - Juliaca, presenta resistencia a los metales pesados: plomo, cromo, presenta resistencia a los metales pesados: plomo, cromo, mercurio, cadmio y arsénico.mercurio, cadmio y arsénico.

EEl 100% de las cepas de l 100% de las cepas de S. aureusS. aureus fue resistente a plomo, las fue resistente a plomo, las cepas tuvieron una concentración mínima inhibitoria, de los cepas tuvieron una concentración mínima inhibitoria, de los cuales, el 39% (11 cepas) tuvo (CMI = 800 µg/mL), 29% (8 cuales, el 39% (11 cepas) tuvo (CMI = 800 µg/mL), 29% (8 cepas) (CMI =1600 µg/mL) y 32%(9 cepas) (CMI = 3200 cepas) (CMI =1600 µg/mL) y 32%(9 cepas) (CMI = 3200 µg/mL).µg/mL).

El 100% de las cepas de El 100% de las cepas de S. aureusS. aureus fue resistente al cromo, las fue resistente al cromo, las cepas tuvieron una concentración mínima inhibitoria (CMI = cepas tuvieron una concentración mínima inhibitoria (CMI = 3000 µg/mL).3000 µg/mL).

El 100% de las cepas de El 100% de las cepas de Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus fue resistente fue resistente a mercurio, las cepas tuvieron una concentración mínima a mercurio, las cepas tuvieron una concentración mínima inhibitoria, promedio (CMI = 160 µg/mL).inhibitoria, promedio (CMI = 160 µg/mL).

El 100% de las cepas de El 100% de las cepas de S. aureus S. aureus fue resistente a cadmio, de fue resistente a cadmio, de las cuales el 11% (3 cepas) tuvo (CMI = 100 µg/mL) y el 89% las cuales el 11% (3 cepas) tuvo (CMI = 100 µg/mL) y el 89% (25 cepas) (CMI =200 µg/mL).(25 cepas) (CMI =200 µg/mL).

El 100% de las cepas de El 100% de las cepas de S. aureusS. aureus fue resistente al arsenito, fue resistente al arsenito, el 75% (21 cepas) de las cepas aisladas tuvo una el 75% (21 cepas) de las cepas aisladas tuvo una concentración mínima inhibitoria (CMI = 1600 µg/mL) y 25% concentración mínima inhibitoria (CMI = 1600 µg/mL) y 25% (7 cepas) de las cepas aisladas tuvo una concentración (7 cepas) de las cepas aisladas tuvo una concentración mínima inhibitoria (CMI = 3200 µg/mL). mínima inhibitoria (CMI = 3200 µg/mL).

RECOMENDACIONESRECOMENDACIONES

Realizar trabajos de investigación similares, con Realizar trabajos de investigación similares, con cepas de cepas de Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus, aisladas de , aisladas de áreas contaminadas con metales pesados como: áreas contaminadas con metales pesados como: la mina la Rinconada, CIEMSA, etc.la mina la Rinconada, CIEMSA, etc.

Implementar sistemas de biorremediación Implementar sistemas de biorremediación ambiental con cepas de ambiental con cepas de Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus resistentes a mercurio, por ser una problemática resistentes a mercurio, por ser una problemática de contaminación ambiental en la Región Puno.de contaminación ambiental en la Región Puno.

Investigar si las cepas de Investigar si las cepas de Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus se pueden utilizar como bioindicadores de se pueden utilizar como bioindicadores de contaminación ambientalcontaminación ambiental

Se recomienda a las empresas mineras dar apoyo Se recomienda a las empresas mineras dar apoyo e incentivo a proyectos de investigación que e incentivo a proyectos de investigación que permitan una mejor explotación minera y la permitan una mejor explotación minera y la conservación del medio ambiente.conservación del medio ambiente.

Se recomienda a la Universidad a impulsar Se recomienda a la Universidad a impulsar trabajos de investigación relacionados con la trabajos de investigación relacionados con la problemática de la contaminación por metales problemática de la contaminación por metales pesados en nuestra región.pesados en nuestra región.

RECOMENDACIONESRECOMENDACIONES1.1. Realizar trabajos de investigación similares, Realizar trabajos de investigación similares,

con diferentes cepas, para el monitoreo de con diferentes cepas, para el monitoreo de contaminación por metales pesados.contaminación por metales pesados.

2.2. Implementar sistemas de biorremediación Implementar sistemas de biorremediación Ambiental con Bacterias/ microorganismos Ambiental con Bacterias/ microorganismos resistentes a metales pesados.resistentes a metales pesados.

3.3. Realizar controles periódicos sobre resistencia Realizar controles periódicos sobre resistencia intrahospitalaria a antibióticos en cepas de intrahospitalaria a antibióticos en cepas de Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus, con la finalidad de con la finalidad de prevenir el uso y abuso de los antibióticos.prevenir el uso y abuso de los antibióticos.

4.4. Se recomienda a las empresas mineras en Se recomienda a las empresas mineras en aplicar Sistemas de biorremediación ambiental aplicar Sistemas de biorremediación ambiental con cepas de con cepas de Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus..