INFORME DE LABORATORIO CLADOCEROS EN ACUICULTURA

IMER GUEVARA PETROJOSE R. ORTEGA BASTIDASMARIA A. FUENTES MONTESSCHNEIDER PABON CORREAFRANKLIN E. OCHOA PEREZMAYERLYS OCHOA TOVAR

PRODUCCION DE ALIMENTO VIVO

DRA. MARTHA J. PRIETO GUEVARA

UNIVERSIDAD DE CORDOBAFACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS ACUICOLASPROGRAMA DE ACUICULTURA

MONTERIA-CORDOBADIC -10- 2014

INTRODUCCION

Los cladóceros son organismos de gran utilidad para la acuicultura ya que representan un aporte nutritivo, diversifican el alimento y son presa fácil para larvas de peces y crustáceos. Entre los organismos del zooplancton, los cladóceros representan un importante renglón en la cadena trófica de muchos cuerpos de agua. La producción exitosa de peces con fines acuícolas depende en gran medida de la disponibilidad de organismos zooplanctónicos de talla apropiada para la alimentación de sus larvas y post-larvas. En este sentido, los cladóceros constituyen una buena herramienta en acuicultura debido a su pequeña talla, rápido desarrollo, temprana reproducción, alta tasa de multiplicación, fácil manejo y considerable valor comercial entre otros aspectos.

Entre los muchos organismos que conforman el zooplancton los cladóceros son más vulnerables a la predación, por tanto son considerados como una presa adecuada para la piscicultura. En general ha sido reportada la preferencia por el consumo de zooplancton de mayor tamaño tales como cladóceros y copépodos esto ha conducido a que se desplieguen varias investigaciones en cuanto a su bioecología, longevidad, crecimiento, características morfológicas, cultivos, reproducción, entre otras.

Dentro de los cladóceros se han seleccionado principalmente los géneros Daphnia y Moina por ser de gran importancia en la piscicultura. Estos organismos son muy estudiados con relación a sus condiciones óptimas de cultivo, debido al alto valor nutritivo y a su facilidad de producción, al igual que otros cladóceros como macrothrix sp que también son una parte importante de la cadena alimentaria por su menor tamaño, sirviendo como suministro de alimentos para los peces juveniles en especial aquellas especies de peces con menor tamaño de boca en sus primeros estadios larvales y considerados presa fácil debido a su forma, movimiento, perfil nutricional y pigmentación. Los cladóceros presentan rico valor nutricional, presentan espectro de enzimas importantes (proteinasas, peptidasas, amilasas, lipasas y celulasas) que sirven como exoenzimas en el intestino de las postlarvas y algunas especies pueden presentar 60 % de proteína de su peso seco y aminoácidos favorables para los requerimientos nutricionales de larvas y alevinos de peces, así como cantidad total de grasa por peso seco de 20% - 27% para las hembras adulto y del 4% - 6% para los juveniles.

OBJETIVOS

Reconocer la importancia de los cladóceros en acuicultura Conocer las técnicas para su manejo con fines acuícolas Caracterizar el crecimiento poblacional de los cladóceros, la longevidad y el

tiempo en que Machrotrix sp alcanza la máxima producción, usando microalga Scenedesmus como alimento.

Aprender el manejo para el aislamiento de organismos y el mantenimiento de cepas

Realizar un cultivo a pequeña esquela Determinar la importancia del control de parámetros físico-químicos para el

óptimo rendimiento del cultivo’’ Desarrollar técnicas de manejo para el conteo y control de aspecto

reproductivo

MATERIALES Y METODOS

Mantenimiento de cepa:

Cultivo de microalgas de agua dulce Agua natural enriquecida Estereoscopio Pipeta pasteur 2 Erlenmeyer y frascos de 250 ml Placa Neubauer

Para el desarrollo de esta actividad empezamos por observar las condiciones con las que recibimos la cepa (T- pH, Densidad de ind) y analizamos el estado de desarrollo. Tomamos unas hembras ovadas para realizar otra actividad de crecimiento poblacional y el resto de los organismos le hallamos la concentración de individuos por ml y de células de microalgas por ml, esto con el fin de determinar cuánto le íbamos a adicionar de alimento para no pasar las 300.000 células/ml, y para llevar una baja densidad de individuos sin superar los 5 organismos/ml. Tras realizar todo estas actividades sometimos el frasco inoculo a las condiciones de laboratorio y ahí cada 2-3 días realizábamos renovación de agua entre un 20 y 50% según lo requiriera, para esto utilizábamos un tamiz de 50 micras que nos permitiera desarrollar la limpieza sin exponer el cultivo. Se realizaba un conteo rutinario de microalgas tanto del cultivo como de la cepa de dónde íbamos a tomar el alimento para establecer cuantitativamente la cantidad a suministrar, y contábamos la cantidad de individuos presentes en 1 ml de la muestra, tomando al azar y homogenizando antes de tomar para tener parcialidad en los datos. La forma de conteo que utilizamos fue por goteo sobre una placa plástica transparente. Con esto decidimos que cantidad de individuos era

necesario retirar del franco en proporción a lo establecido en la guía de trabajo y mantener la cepa en determinado tiempo.

Crecimiento poblacional

Cámara multicelda, 6 y 12 celdas Cultivo de microalgas de agua dulce Estereoscopio Pipetas Pasteur 3 Placa Neubauer Capilar

Para la realización de esta actividad tomamos la cámara multicelda de 6 adicionamos agua y alimento (Scenedemus) para adicionar los organismos previamente seleccionados, adulto ovado y en buen estado sanitario; los trasladamos a las condiciones de laboratorio de alimento vivo. Los procesos siguientes fueron realizados en horas de la tarde, observábamos con ayuda del estereoscopio la presencia de huevos o embriones en la cámara de incubatriz. Los neonatos presentes en esta multicelda de 6 los retiramos y depositamos cada uno por separado en una celda de 12 hasta completar la cámara. A estos individuos se les hizo un seguimiento para establecer la presencia de huevo en relación al tiempo para y retirando los neonatos fueron retirados de la celda, esto se realizó hasta el deceso de los organismo tomando la información pertinente.

Cultivo de cladóceros

Frascos de 3 litros Cámara de Sedgwick-Rafter Microscopio Estereoscopio Pipetas

Para la realización de este cultivo dispusimos de un frasco de 3 litros con 2 litros de agua dulce acondicionada y previamente adicionamos una concentración de alimento (Scenedemus) no mayor a 300.000 cel/ml, inoculamos una cantidad de organismos adultos. Luego observamos diariamente las condiciones de cultivo y contamos la densidad poblacional mediante el uso de la cámara Sedgwick-Rafter para decidir si era pertinente aumentar o abrir el cultivo a un volumen mayor. Fue necesario realizar un recambio de 30% de agua. La alimentación fue suministrada cuando la concentración del cultiva era muy baja.

RESULTADOS Y DISCUSION

Mantenimiento de cepa

FECHA OBSERVACIONESOct 23-14 Recibimos individuos con buena locomoción,

tracto digestivo lleno. Alimentamos 35 ml de scenedesmus para tener una () de 200.000cel/mlDensidad: 1.5 ind/mlTemperatura: 30°C

Oct 24-14 Se observaron buenos resultados no habían muertas.

Oct- 27-14 Se realizó labores de alimentación y sifoneo.Alimentamos: 68 ml de scenedesmus para tener una () de 200.000cel/mlDensidad: 2.5 ind/ml

Oct-29-14 Buena coloración del aguaOct-30-14 Se sifoneo, presencia de mudas.

Alimentamos: 33 ml de scenedesmus para tener una () de 100.000cel/mlDensidad: 4 ind/ml

Oct-31-14 Presencia de mudas. Buen estado de la cepa

Nov-01-14Alimentamos: 50 ml de scenedesmus para tener una () de 200.000cel/mlDensidad: 6 ind/mlEmpleamos 75 ml de la cepa aun frasco de 2 lt

EL mantenimiento reflejo un crecimiento constante del cladócero bajón condiciones ideales de laboratorio, alcanzando un densidad de 6 ind/ml la cual permitió inocular con el 50% para el cultivo en dos litros, así mismo reponemos ese 50% en agua y alimento para seguir manteniendo la cepa hasta final del cultivo.

Crecimiento poblacional

Fecundidad: Promedio 11,4 neonatos/hembra

Fecundidad diaria= 2,5 neonatos/hembra

Tiempo de incubación: 24 a 72 horas.

Frecuencia reproductiva: 3 a 4 días.

Tiempo de generación: 4 a 5 días.

CRECIMIENTO POBLACIONAL Machrotrix sp

FECHA DIA 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Oct 25-14 0 - - - - - - - - - - - -

Oct 27-14 1 + + + + + + + + + + + +

Oct 28-14 2 + + + + + + + + + + + +

Oct 29-14 3 M +3 +2 +4 +5 +3 +2 + +2 +5 +2 +4

Oct 30-14 4 M +4 +4 +3 +6 +4 +4 +6 +3 M +4 +4

Oct 31-14 5 M - +1 - - - - M - M +2 -

Nov- 01-14 6 M - - + + + - M + M - M

Nov-04-14 7 M +11 +9 +12 +14

+13 +13 M +12 M +15 M

Nov-5-14 8 M - M +2 - +1 - M - M - M

Nov-06-14 9 M + M - - - + M + M - M

Nov-07-14 10 M + M + + + + M + M M M

Nov-08-14 11 M +8 M +11 +13

+7 +9 M +10 M M M

Nov-10-14 12 M -3 M -4 -3 - -3 M -2 M M M

Nov-11-14 13 M + M + + + + M + M M M

Nov-12-14 14 M +8 M + +1 M + M +3 M M M

Nov-13-14 15 M +4 M +12 +9 M +14 M +7 M M M

Nov-14-14 16 M - M - - M - M - M M M

Nov-15-14 17 M + M + + M + M - M M M

Nov-18-14 18 M -9 M -11 -8 M -13 M +6 M M M

Nov-19-14 19 M M M + +1 M + M -5 M M M

Nov-20-14 20 M M M +5 +6 M + M - M M M

M= Muertas. += Ovadas. -=Vacías. +#= ovada y numero de neonatos. -#= Vacías con numero de neonatos.

Los datos obtenidos expresan una alta fecundidad a medida que aumenta el número de frecuencia reproductiva, las mortalidades registradas posiblemente están relacionadas con el mal manejo que realizamos al contar, sometiéndolas a estrés. El primer periodo de fecundidad obtuvo un promedio de 9,5 neonatos/hembra, lo cual en comparación con estudios de la Moinodaphnia sp su primera fecundidad registra de 3.78±0.22 nts/hm, fecundidad 3.40±0.18 nts/hm diaria, tiempo generacional fue 4.5±0.76 días, la fecundidad promedio en la, fecundidad promedio diaria se registró en 2.7±0.44 nts/hm por cada uno de los doce cladóceros (Prieto 2001). Esta especie muestra una característica viable

para el cultivo masivo debido a su alta fecundidad, registrando una frecuencia reproductiva promedio de 2 neonatos/hembra/día.

Cultivo de cladóceros

2 litros

FECHADENSIDAD

POBLACIONAL IND/ML

ALIMENTACIONCEL/ML

OBSERVACIONES

Nov 01-14 0,2 ind/ml 513 ml Scenedesmus para unas () de 200.000cel/ml

Se sembró en frasco de 3lt, se adiciono 75 ml del inoculo y 1412 de agua dulce estéril.27°C

Nov 05-14 0,5 ind/ml 46 ml Scenedesmus paraunas () de 200.000cel/ml

Se observaron buenos resultados no habían muertas. Individuos con buena locomoción

Nov 07-14 0,5 ind/ml Buena coloración del agua, presencia de mudas y se hizo sifoneo. Reposición de agua

Nov 10-14 1 ind/ml 60ml Scenedesmus paraunas () de 200.000cel/ml

Presencia de muda, individuos muertosT° 27°C

Nov 13-14 1.5ind/ml Agua con buena coloración, buen estado de los individuos

Nov 15-14 80ml Scenedesmus paraunas () de 200.000cel/ml

Recambio del 25%,

Nov 18-14 1ind/ml Hubo una caída en la densidad de la población, posible causa: Mucho sedimento de MOT° 28C

Nov 21-14 0,4ind/ml

0 5 10 15 20 250

0.20.40.60.8

11.21.41.6

Cultivo de en 2 litros Densidad ind/ml

Densidad ind/ml

Dias de cultivo

indi

vidu

os/m

l

El cultivo realizado de este cladócero no logro alcanzar registros esperados, esto puede ser debido a varios factores que influyeron en la poca densidad obtenida. La calidad y preferencia de alimento puede inducir en estos resultados. la densidad microalgal pudo influir directamente, por defecto o exceso, sobre la tasa de crecimiento, el tiempo de duplicación y el rendimiento de la Macrothrix sp . Durante su manejo en el laboratorio; en cuanto a la cantidad de alimento disponible, el exceso puede ser adverso en la sobrevivencia de los organismos al afectar su proceso de filtración (Espinosa et al 1992), de igual forma el alimento limitado conduce a la disminución en el crecimiento y la fecundidad (Duncan 1989). Los efectos por falta o exceso de alimento no fueron evaluados, sin embargo, la homogeneidad en los patrones reproductivos (fecundidad) reflejan que los niveles suministrados fueron suficientes para suplir sus requerimientos nutricionales en los diferentes procesos metabólicos.

Conclusión

Esta cladócero presenta características de excelente especie para producción masiva, aun así, es necesario el desarrollo de estudios sobre este microcrustáceo que muestra una biología reproductiva llamativa pero que en condiciones de cultivo presenta problemas que aún no se han sido resueltos, es por ello que presume ser una especie exigente y selectiva en los medios de alimento, para ello desarrollo estudios crecimiento poblacional con diferentes tipos de alimentación sería un exposición que puede abrir la puerta para darle paso a la explotación de este organismos de manera masiva, y introducirlo dentro de los principales zooplancton utilizados en alimento vivo para primera alimentación de peces. En comparación con la Daphnia es una especie más pequeña y de rápido crecimiento poblacional lo cual deja sin duda una muestra del potencial que la Macrothrix puede tener.

BIBLIOGRAFIA

Espinosa C.F., F. Martínez y R. Ramírez. Filtration rate and culture of Moina macropopa (Crustacea: Cladocera) fed with Scenedesmus incrassatulus (Chlorophyceae) and digested cow manure. Univ. Nal. Autón. México. An Inst Cienc Del Mar y Limnol. 1992; 19:137-142.

Duncan A. Food limitation and body size in the life cycles of planktonic rotifers and cladocerans. Hydrobiologia, 1989; 186:187:11-28.

Martha Prieto. Aspectos reproductivos del cladócero moinodaphnia sp. en condiciones de laboratorio Revista MVZ Córdoba, vol. 6, núm. 2, 2001, pp. 102-110.