Inf. Escherichia Coli

of 9 /9
 INTRODUCCION El consumo de F&H frescas es parte integral de una dieta sana. Estas se encuentran expuestas a contaminación por microorganismos patógenos antes, durante y después de su cosecha. En la precosecha son de interés la tierra, el agua de riego, la presencia de materia fecal animal o humana, el tipo de abono utilizado, el aire y las personas que cuidan de la tierra de cultivo. En la poscosecha destacan la maquinaria y equipo, los recipientes, animales domésticos o silvestres, los trabajadores, el polvo de la atmósfera y los vehículos1. En los países en vías de desarrollo el avance económico para aliviar la pobreza se apoya muchas veces en el sector agrícola. Este a su vez necesita garantizar que los productos sean de alta calidad sanitaria para su consumo. De ahí la necesidad de capacitación especializada y generación de información relevante sobre los peligros microbiológicos como condición para ajustarse a las normas que establecen organismos internacionales [Codex Alimentarius de la Organización para la Agricultura y la Alimentación y la Organización Mundial de la Salud (FAO/WHO)].

Embed Size (px)

Transcript of Inf. Escherichia Coli

  • 8/12/2019 Inf. Escherichia Coli

    1/9

    INTRODUCCION

    El consumo de F&H frescas es parte integral de una dieta sana. Estas se encuentran

    expuestas a contaminacin por microorganismos patgenos antes, durante y despus de

    su cosecha. En la precosecha son de inters la tierra, el agua de riego, la presencia de

    materia fecal animal o humana, el tipo de abono utilizado, el aire y las personas que

    cuidan de la tierra de cultivo. En la poscosecha destacan la maquinaria y equipo, los

    recipientes, animales domsticos o silvestres, los trabajadores, el polvo de la atmsfera ylos vehculos1. En los pases en vas de desarrollo el avance econmico para aliviar la

    pobreza se apoya muchas veces en el sector agrcola. Este a su vez necesita garantizar que

    los productos sean de alta calidad sanitaria para su consumo. De ah la necesidad de

    capacitacin especializada y generacin de informacin relevante sobre los peligros

    microbiolgicos como condicin para ajustarse a las normas que establecen organismos

    internacionales [Codex Alimentarius de la Organizacin para la Agricultura y la

    Alimentacin y la Organizacin Mundial de la Salud (FAO/WHO)].

  • 8/12/2019 Inf. Escherichia Coli

    2/9

    I. OBJETIVOS1. Determinar la bacteria Escherichia Coli en una muestra de apio.2. Comprobar si esta muestra est en el lmite permisible de acuerdo a la

    Resolucin Ministerial.

    II. FUNDAMENTO TEORICO

    ESCHERICHIA COLI

    La Escherichia coli tambin conocida por laabreviacin de su nombre, E. coli, es quizs elorganismoprocariota ms estudiado por el ser humano. Se trata de unentero

    bacteria que se encuentra generalmente en los intestinos animales, y por ende en

    lasaguas negras,pero se lo puede encontrar en todos lados, dado que es un organismo

    ubicuo.

    Esta y otras bacterias son necesarias para el funcionamiento correcto del proceso

    digestivo, adems de producir lasvitaminasByK. Es un bacilo que reacciona

    negativamente a latincin de Gram (gramnegativo), esanaerobio facultativo, mvil

    porflagelos periticos (que rodean su cuerpo), no formaesporas, es capaz

    defermentar laglucosa y lalactosa.

    http://es.wikipedia.org/wiki/Nomenclatura_binomial#Convenciones_sobre_la_nomenclaturahttp://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lula_procariotahttp://es.wikipedia.org/wiki/Enterobacteriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Enterobacteriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Agua_negrahttp://es.wikipedia.org/wiki/Digesti%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Digesti%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Vitaminahttp://es.wikipedia.org/wiki/Vitamina_Bhttp://es.wikipedia.org/wiki/Vitamina_Khttp://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Gramhttp://es.wikipedia.org/wiki/Gramnegativohttp://es.wikipedia.org/wiki/Anaerobio_facultativohttp://es.wikipedia.org/wiki/Flagelo_bacterianohttp://es.wikipedia.org/wiki/Endosporahttp://es.wikipedia.org/wiki/Fermentaci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Glucosahttp://es.wikipedia.org/wiki/Lactosahttp://es.wikipedia.org/wiki/Lactosahttp://es.wikipedia.org/wiki/Glucosahttp://es.wikipedia.org/wiki/Fermentaci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Endosporahttp://es.wikipedia.org/wiki/Flagelo_bacterianohttp://es.wikipedia.org/wiki/Anaerobio_facultativohttp://es.wikipedia.org/wiki/Gramnegativohttp://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Gramhttp://es.wikipedia.org/wiki/Vitamina_Khttp://es.wikipedia.org/wiki/Vitamina_Bhttp://es.wikipedia.org/wiki/Vitaminahttp://es.wikipedia.org/wiki/Digesti%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Digesti%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Agua_negrahttp://es.wikipedia.org/wiki/Enterobacteriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Enterobacteriahttp://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lula_procariotahttp://es.wikipedia.org/wiki/Nomenclatura_binomial#Convenciones_sobre_la_nomenclatura
  • 8/12/2019 Inf. Escherichia Coli

    3/9

    AGAR MULLER HILTON

    Este medio de cultivo ha sido recomendado universalmente para la prueba de sensibilidad

    a los antimicrobianos. Adems es til con el agregado de sangre para el cultivo y

    aislamiento de microorganismos nutricionalmente exigentes.

    El Clinical and LaboratoryStandardsInstitute (CLSI), ex

    NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards (NCCLS), recomend su uso en forma

    rutinaria para la realizacin del antibiograma en medio slido, debido a una serie de

    factores que se detallan a continuacin: presenta buena reproducibilidad lote a lote en las

    pruebas de sensibilidad, su contenido en inhibidores de sulfonamidas, trimetoprima y

    tetraciclina es bajo, la mayora de los patgenos crece satisfactoriamente y una gran

    cantidad de datos han sido evaluados y avalados usando este medio de cultivo.

    Cuando se suplementa con sangre de carnero al 5%, es til para realizar las pruebas desensibilidad a los antimicrobianos en especies de estreptococos.

    Resultados

    Consultar en la seccin prueba de sensibilidad a los antimicrobianos, la metodologa

    apropiada.

    Notas:

    1-Los lotes de agar MuellerHinton Britania cumplen con las normas descriptas en el

    documento M6 - P del NCCLS: Evaluatingproductionlots of dehydratedMuellerHinton

    agar. Esto es muy importante pues algunos lotes pueden variar significativamente y si las

    bacterias no crecen adecuadamente, las zonas de inhibicin en las pruebas de difusin son

    generalmente ms grandes, quedan fuera de los lmites de control de calidad y pueden

    dar resultados errneos.

    2-Los medios que contienen cantidades excesivas de timidina o timina pueden revertir el

    efecto inhibitorio de las sulfonamidas y trimetoprima, produciendo as zonas de inhibicin

    ms pequeas y por lo tanto informes de falsa resistencia. Para evaluar el contenido de

    timidina del lote de agar MuellerHinton, se prueba la cepa de control de calidad:

    Enterococcusfaecalis ATCC 29212 frente a discos de TMS. En un medio satisfactorio, se

    produce una zona clara de inhibicin de 20 mm o ms.

    3-Otro aspecto de cuidado en el control de calidad en el agar MuellerHinton es que las

  • 8/12/2019 Inf. Escherichia Coli

    4/9

    variaciones en cationes divalentes principalmente calcio y magnesio pueden afectar los

    resultados con tetraciclina, polimixina y aminoglucsidos cuando se ensayan cepas de

    Pseudomonasspp. Por tal motivo, se deben cumplir los lmites de control de calidad

    publicados por el NCCLS.

    4-Los resultados deben ser cuidadosamente observados con todos los organismos de

    control para evitar datos aberrantes debido al medio de cultivo. Para aquellas cepas que

    fallan de crecer satisfactoriamente sobre Agar MuellerHinton no suplementado, se agrega

    sangre desfibrinada de carnero al agar fundido y enfriado, a una concentracin final al 5%

    (v/v).

    Para el control de precisin y exactitud del agar de MuellerHinton se usan las siguientes

    cepas control:

    S. aureus ATCC 25923

    E. coli ATCC 25922

    P. aeruginosa ATCC 27853

    E. faecalis ATCC 29212

    Para evaluar el desempeo de inhibidores de beta lactamasa, se utiliza la cepa control:

    E. coli ATCC 35218

  • 8/12/2019 Inf. Escherichia Coli

    5/9

  • 8/12/2019 Inf. Escherichia Coli

    6/9

    IV. PARTE EXPERIMENTAL1. Preparar 500ml de una solucin salina 0.7 %2. Pesar 10g de la muestra de apio. Colocar en una bolsa ziploc y adicionar 90ml de la

    solucin salina.3. Reducir la concentracin de la muestra, llevando 1ml de esta en 9ml de solucin

    salina.

    4. Nuevamente reducir la concentracin levando 0.1 ml en 1 ml de solucin salina.

    5. Calentar en bao Mara el agar CITRATO en 250 ml de agua hasta fusin.

    6. Colocar 1ml del inocuo (muestra) en una placa Petri e inmediatamente adicionarentre 15- 20 ml del agar fundido.

  • 8/12/2019 Inf. Escherichia Coli

    7/9

    7. Homogenizar y dejar enfriar

    8. Colocar en el incubador a 37C por 48 horas y observar los resultados.9. Hacer el experimento por duplicado y colocar la segunda incubacin a 25C.

    V. RESULTADOSNo se detect Salmonella ni E. coli en la muestra de apio, sin embargo E. coli estuvo

    presente en un porcentaje de los materiales asociados, principalmente en guantes.

  • 8/12/2019 Inf. Escherichia Coli

    8/9

    XIV. FRUTAS, HORTALIZAS, FRUTOS SECOS Y OTROS VEGETALES

    XIV.3.Frutas y hortalizas frescas semiprocesadas (lavadas, desinfectadas, peladas

    y/o cortadas) refrigeradas y/o congeladas.

    Agente Microbiano Lmite por g

    m M

    Escherichia Coli 10 102

    INFORME DE ENSAYO

    ANALISIS: MICROBIOLGICO DE APIO

    LUGAR: LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

    FECHA DE MUESTREO: 20/05/14

    FECHA DE EJECUCIN: 23/05/14

    RESULTADOS MICROBIOLGICOS

    ENSAYOS / MANIPULADORAPIO

    (Hortalizas frescas)LIMITE PERMISIBLE

    (*)DECTECIN

    Escherichia Coli - 10102

    (*)RM 591-2008 MINSA, Criterios Microbiolgicos de Calidad Sanitaria e Inocuidad de los Alimentos y

    Bebidas de Consumo Humanos

  • 8/12/2019 Inf. Escherichia Coli

    9/9

    VI. CONCLUSIONES

    1. No se lleg a determinar colonias en la muestra de apio por el agar incorrectoque trajo el grupo N 1

    VII. RECOMENDACIONES

    1. Se recomienda al grupo responsable de traer el agar incorrecto (GRUPO N1)investigar con profundidad, para no tener percances en la identificacin de

    bacterias que es el objetivo principal.

    2.

    Se recomienda usar el Agar MuellerHinton para la identificacin de E. Coli.

    3. Trabajar en un ambiente lo ms estril posible, flameando el rea de trabajo.

    4. Operar en la siembra y lectura con las implementaciones de seguridad (gorro,guantes y mascarillas).

    5. Desechar como residuo slido todo lo que se haya utilizado en la siembra ylectura del agente microbiano (bolsa ziploc y los implementos de seguridad);esterilizar todo el material de vidrio utilizado.

    VIII. FUENTES REFERENCIALES1. http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/muellerhintonagar.htm2. http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/embagar.htm3. http://es.wikipedia.org/wiki/escherichia-coli