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INFORME PRÁCTICA MOSQUERA-CUNDINAMARCA SENA
GIRA EDUCATIVA EN EL CENTRO BIOTECNOLOGIA DE
AGROPECUARIA “C B A”
FRANKLIN CERON LUIS FERNANDO CHICO VARGAS
JAIME CEBALLOS JORGE TRUJILLO
YUDMILER TEJADA
SENA
TECNOLOGÍA EN REPRODUCCIÓN BOVINA
COLECTAR Y PRESERVAR SEMEN DE ACUERDO CON LOS
PROTOCOLOS ESTABLECIDOS.
COLOMBIA 2011
INFORME PRÁCTICA MOSQUERA-CUNDINAMARCA SENA
GIRA EDUCATIVA EN EL CENTRO BIOTECNOLOGIA DE
AGROPECUARIA “C B A”
Presentado Por:
FRANKLIN CERON LUIS FERNANDO CHICO VARGAS
JAIME CEBALLOS JORGE TRUJILLO
YUDMILER TEJADA
Presentado A: FRANCISCO ORTIZ
SENA
TECNOLOGÍA EN REPRODUCCIÓN BOVINA
COLECTAR Y PRESERVAR SEMEN DE ACUERDO CON LOS
PROTOCOLOS ESTABLECIDOS.
COLOMBIA 2011
TABLA DE CONTENIDO
INTRODUCCIÓN. OBJETIVOS.
1. PREPARCION DE DILUYENTE CONTINENTAL DE DOS PASOS
2. PREPARACION DE LA VAGINA ARTIFICIAL
3. COLECTA DE SEMEN
4. EVALUCION DEL SEMEN 5. MARCADO, ENVASADO Y CONSERVACIÓN DEL SEMEN
6. DESCONGELAMIENTO DE LAS PAJILLAS.
7. VISITA CENTRO DE BIOTECNOLOGIA REPRODUCTIVA C.G.R. 8. CONCLUSIONES
INTRODUCCIÓN.
En el presente informe de la Gira educativa al centro de biotecnología
Agropecuaria SENA en la ciudad de Mosquera Cundinamarca; se
observa cómo aplicar los conceptos vistos en la competencia colectar
y preservar semen de acuerdo con los protocolos establecidos; en lo
referente a la colecta y evaluación de semen, elaboración y utilización
del diluyentes para conservación semen, análisis, embasamiento y
congelación para conservar el semen.
OBJETIVOS.
OBJETIVO GENERAL.
Aplicare los conceptos de la competencia colectar y preservar semen de acuerdo con los protocolos establecidos
OBJETIVOS ESPECÍFICOS.
Preparación de diluyentes para la conservación de semen.
Colectar de semen con vagina artificial.
Análisis, Colecta, envasado y congelación de Material Seminal.
INFORME PRÁCTICA PARA COLECTAR Y PRESERVAR SEMEN DE
ACUERDO CON LOS PROTOCOLOS ESTABLECIDOS.
1. PREPARCION DE DILUYENTE CONTINENTAL DE DOS
PASOS
MATERIALES:
Vaso de precipitado
Vaso de biker
Huevos
Toallas desechables
Aguja desechable
Agua destilada
Antibiótico
Agitador Mayer
Imanes para agitador
Diluyente de dos pasos “two-step” continental
Papel parafilm “m”.
En la preparación del diluyente continental de pasos se realiza dos
tipos de mezclas que las llamaremos A y B.
La mezcla A La Mezcla B.
10 ml de antibiótico 100 ml yema de huevo
(proteína animal)
220 ml de agua destilada
170 ml del diluyente continental del 1er paso
(agua destilada, estéril,
buffer tipo tris, acido cítrico y fructosa.)
1 ml de antibiótico 100 ml de yema de
huevo (proteína animal)
229 ml agua destilada
170 ml del diluyente continental del 2sg paso
(agua destilada, estéril,
buffer tipo tris, acido cítrico, fructosa y
GLICEROL.)
La suma de estos
ingredientes suma 500ml de
la mezcla A.
La suma de estos
ingredientes suma 500ml de
la mezcla B.
PROCEDIMIENTO.
Foto No. 1 Separación de la clara de la yema de huevo.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 2 utilización de la toalla de papel desechable para retirar los
residuos de clara de huevo para exponer la membrana vitelina.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 3 Se perfora la membrana vitelina con una aguja estéril
desechable para obtener la yema que contiene (50% agua, 30%
grasa y 20% de proteína) y se deposita en el frasco de vidrio estéril, hasta obtener 100 ml yema de huevo.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 4 y 5 Se agregan los 220 ml de agua destilada, 10 ml de
antibiótico y 170 ml del diluyente del 1er paso y obtenemos 500 ml
de la mezcla
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 6 Obtenida la mezcla en su totalidad se utiliza el agitador
Mayer durante un periodo de 10 minutos para homogenizar el contenido del frasco.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 7 posteriormente se envasa en los tubos rotulados con
tapa.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No 8 Después de llenado todos en los tubos de rotulados se
depositan en una canastilla porta tubos para su almacenamiento en el
refrigerador a una temperatura de 5 centígrados durante dos horas.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Nota: los procedimientos anteriores se utiliza para las mezclas
A y B, solo cambia la cantidad de los ingredientes.
2. PREPARACION DE LA VAGINA ARTIFICIAL
MATERIALES:
Funda Cono colector
Gel lubricante
Termómetro
Agua a temperatura 43ºC – Aire Cuerpo de la vagina
Foto No. 9 Materiales para empezar armar la vagina artificial
primero se pone la funda por dentro del cuerpo de la vagina, hasta
quedar bien ajustada,
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 10 Después se pone el cono por el orificio más cercano a
la válvula del cuerpo de la vagina.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No 11 Procedemos a poner agua caliente, para asimilar la
temperatura de la vagina natural y después aire por la válvula
para la presión.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No 12 Posteriormente se lubrica entrada de la vagina
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 13 y 14 Luego tomamos la temperatura hasta obtener 40ºC
a 43 después de obtener la temperatura ideal, la vagina ya está lista
para proceder a la colecta del semen.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No 15 Luego se tapa los orificios para evitar la entrada de algún
agente contaminante para el semen
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
3. COLECTA DE SEMEN
Foto No. 16 Preparación del toro
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 17 Preparacion del toro limpiando el prepucio y con una
tigera se corta exceso de pelo, y con solucion salina, dentro del prepucio para evitar contaminacion de orina del semen
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 18 Preparación de la vaca o señuelo.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 19 Después de tener los dos animales listos, el recolector
y el cabañero, proceden a la colecta. Se leda unas vueltas al toro. (Preludio)
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 20 Alinean el toro con la vaca para proceder a la colecta.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Foto No. 21 y 22 El que va hacer la colecta va por el lado derecho
del toro y el cabañero por el lado izquierdo, cuando el toro monte la vaca y desenfunde el pene y monte la vaca el colector toma el
prepucio del toro antes de que introduzca el pene en la vagina de la vaca, para introducir el pene en la vagina artificial hasta obtener el golpe riñón del toro y de inmediato el semen colectado se lleva al
laboratorio
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
4. EVALUCION DEL SEMEN
MATERIALES:
Calentador de placas
Microscopio
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Televisor
Baño maría
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Esperma Cue
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
1. MOTILIDAD MASAL
3. MORFOLOGIA
2. MOTILIDAD INDIVIDUAL
4. CONCENTRACION
5. MARCADO, ENVASADO Y CONSERVACIÓN DEL SEMEN
Materiales
1. Marcador de pajillas
2. Tinta de lapicero
3. Pajillas
4. Polvo de polivinilo
5. Agua estéril
7. Bomba de vacio
6. Carrilador de pajillas
8. Termo de congelado
9. Termo de almacenamiento
10. Nitrógeno liquido
MARCADO DE PAJILLAS
Foto No. 41 Utilizamos el marcador de pajillas manual con el siguiente orden raza, nombre, lote número, fecha, nombre del
laboratorio.
Foto No. 42 Pajilla marcada.
LLENADO DE PAJILLAS
Foto No 43 Se coloca el semen diluido en el soporte para llenar las
pajillas con llenado al vacío y luego con un peine encima del
soporte para el exceso de semen.
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
Fuente. Aprendices tecnología en Reproducción Bovina
4. SELLADO se ubica la punta de la pajilla destapada en
el agua estéril (la cantidad del agua no supera los 5 milímetros
de altura) y luego en polivinilo para sellar la pajilla.
PRECONGELADO
Se coloca nitrógeno líquido en el termo, la cantidad de nitrógeno es
de 10 centímetros de altura en el interior del termo.
Luego se tapa por los lados para evitar la salida del vapor del nitrógeno se pone el carrilador de pajillas en el termo y se tapa por
10 minutos para evita una muerte de los espermatozoides por
cambios bruscos de temperatura (-90 c a -110 c) ; las pajillas se
sumergen en el nitrógeno liquido (-196c).
Se procede al almacenamiento de las pajillas ya congeladas, las
cañuelas de semen son almacenadas en canastillas en termos de nitrógeno líquido especialmente diseñado para este propósito.
Cada cañuela metalica es identificada en la parte superior con el
codigo del toro impreso
La pajilla son colocada en la copita (8 pajillas), conteniendo semen
del mismo toro: dos compitas son prensada en una cañuela metálica.
Se depositan las cañuelas en las canastillas correspondientes.
Evite levantar las pajillas sobre la línea de congelación.
6. DESCONGELAMIENTO DE LAS PAJILLAS.
• Saque la canastilla de su posición y levántelo hasta que la parte
superior de las cañuelas esté a dos o tres pulgadas de la boca del
termo. Evite levantar las pajillas sobre la línea de Congelamiento.
• Ubique la cañuela deseada. A las cañuelas nuevas se les debe
doblar la lámina de identificación en un ángulo de 45º.
• Use las pinzas para sacar una pajilla a la vez de la copita superior.
Si se tardara más de 10 segundos para sacar la Pajilla, vuelva a
sumergir la cañuela y déjelo por un mínimo de 30 segundos antes de volver a levantarlo.
• Una vez fuera del termo, agite la pajilla suavemente para quitar el exceso de nitrógeno líquido del tapón de algodón y sumérjalo
rápidamente en agua a 95º F (35º C) por un mínimo de 45 segundos.
• Por regla general, solo se deben descongelar las pajillas que
pueden ser usadas en diez a quince minutos. Si se presentaran problemas, un intervalo de 15 a 20 minutos entre el
descongelamiento y la inseminación no reducirá significativamente la calidad del semen.
Use pinzas para sacar las pajillas.
Cola las pajillas en termo conteniendo agua a 95°f (35°c) por un
mínimo de 45 segundos. Nunca descongele mas pajillas de las puedas
usar en 15 minutos.
7. VISITA CENTRO DE BIOTECNOLOGIA REPRODUCTIVA C.G.R.
VIDEO INSTITUCIONAL.
En el video institucional miramos la visión y la misión de C.G.R sus equipos de trabajo, donde se encuentran ubicados cuantos años
llevan trabajando para mejorar la ganadería en Colombia y quien es
su fundador.
CHARLAS SOBRE LOS PROTOCOLO UTILIZADOS POR LA EMPRESA.
En una manera detalla y simple nos dieron una descripción del
protocolo que manejan actualmente que lo componen productos de
la línea ourofino Sincrogest, Sincrodiol, Sincrocio, e CG, Sincroforte y Sincro CP.
PROTOCOLO BASICOS DE INSEMINACION ARTIFICIAL A TERMINO FIJO “IATF”
8. CONCLUSIONES
La crio preservación de espermatozoides para inseminación artificial
es una tecnología que permite mejorara el hato ganadero a bajos
costos, ya que podemos tener un gran número de semen almacenado en pajillas de un pul de toros seleccionados de acuerdo a la
explotación que la empresa ganadera tenga establecida.