IEC SP-420N

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Eluent :(A); 20mM Sodium phosphate buffer (pH7.0) (B);(A) + 0.5M NaCl (pH7.0) Linear gradient:(A) to (B), 10min Flow rate :1.5mL/min. IEC SP-420N. - PowerPoint PPT Presentation

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HIC RFC

APLICACIÓN PROTEINAS PEPTIDOS AMINOÁCIDOS

TAMAÑO

DE LA MUESTRA

SIN RESTRICCION PM MENORES 30KD

ACTIVIDAD

BIOLÓGICA

NO DESNATURALIZA DESNATURALIZA

RESOLUCION ALTA MUY ALTA

LIGANDO C2-----C8 C10-----C18

MAS HIDROFÓBICO

ELUCIÓN Gradiente negativo de sales.

Disminución de temperatura.

Polialcoholes (etilen glicol)

Detergentes (Triton)

Aumentar el pH

Incluir algún solvente orgánico.

GRADIENTES DE SOLVENTES

ORGÁNICOS MISCIBLES EN

AGUA

(0-40% DE METANOL EN AGUA

O BUFFER)

IEC SP-420N

Eluent :(A); 20mM Sodium phosphate buffer (pH7.0)

(B);(A) + 0.5M NaCl (pH7.0)

Linear gradient:(A) to (B), 10min

Flow rate :1.5mL/min

HPLC FPLC

PM MACROMOLÉCULAS

PM

PORO 60-300 A° MAYOR DE 500 A °

TAMAÑO DE PARTICULA

3-15 µm 30-40µm

MUY ALTA PRESIÓN

MAYOR DE 10 atm

4000psi

ALTA PRESION

2-10 atm

1400 psi

ALTO FLUJO BAJO FLUJO