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Hyalgen

Tratamiento cosmético para regenerar la

matrix extracelular en dermis.

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ENDOR NANOTECHNOLOGIES

Trabajamos por la vida

En Endor hacemos investigación médica avanzada en oncología y dermatología. Desde 2006,

aplicamos las más innovadoras tecnologías para crear nuevos tratamientos que resuelvan

necesidades médicas no cubiertas en la actualidad. En cáncer hemos desarrollado una de las

primeras inmunoterapias para tratar el cáncer de páncreas. En dermatología, un nuevo sistema de

liberación de activos de uso tópico basado en la nanotecnología consigue efectos en la piel nunca

vistos antes.

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UN NUEVO ACTIVO PARA REGENERAR LA DERMIS

Hyalgen es un sistema de liberación tópico completamente nuevo para el ácido hialurónico

cuya principal ventaja es su capacidad para multi activar los receptores celulares CD44 e

inducir una extraordinaria regeneración de la matriz extracelular en la dermis.

Los cambios más críticos asociados a la edad tienen lugar en la dermis. A medida que

envejecemos, la dermis puede perder hasta un 80% de su anchura y densidad. Esto es debido a

cambios en los fibroblastos que hacen que disminuya su producción de ácido hialurónico, colágeno

y elastina, los tres elementos principales que forman la matriz extracelular. La reducción de la matriz

extracelular da como resultado una desorganización del tejido cutáneo y la aparición de los signos

externos de la edad como arrugas o la pérdida de volumen, elasticidad y firmeza.

CD44 es el receptor celular específico que activa la producción de ácido hialurónico endógeno y

juega un rol esencial en la regeneración del colágeno y la elastina. Más aún, CD44 está involucrado

en los procesos de migración y proliferación celular, siendo uno de los receptores celulares más

importantes para regenerar la matriz extracelular. Para iniciar la cascada de señalización biológica

que llevará a una regeneración única de la matriz extracelular, CD44 requiere de una activación

múltiple. Esto significa que múltiples receptores CD44 deben ser activados al mismo tiempo en una

célula para producir la respuesta biológica deseada. Por lo tanto, es necesario un nuevo sistema de

liberación del ácido hialurónico para multi activar CD44.

Hyalgen (*) es un ingrediente activo completamente nuevo desarrollado mediante el uso de la

nanotecnología. Nanocristales de oro con forma esférica son conjugados a cientos de oligómeros

de ácido hialurónico de bajo peso molecular para construir un innovador ingrediente activo diseñado

para penetrar en la piel, multi activar CD44 y generar una extraordinaria regeneración de colágeno,

ácido hialurónico y elastina endógenos en ambas capas, la epidermis y la dermis.

(*) Patente internacional WO 087254-A1

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Hyalgen da como resultado:

• El aumento de la producción de colágeno, elastina y ácido hialurónico endógenos en la dermis

y epidermis.

• El aumento de la migración y proliferación celular.

Estudios clínicos realizados en 23 voluntarias durante 28 días demuestran los siguientes

efectos:

• Un aumento de la densidad de la matriz extracelular en la dermis del 37%.

• Un aumento de la densidad de la matriz extracelular en la epidermis del 32%.

• Reducción de las arrugas en un 25% de media y un 56% de máxima (p < 0.0001)

• Reducción de la rugosidad en un 27% de media y un 50% de máxima (p < 0.0001)

Reivindicaciones para Hyalgen:

• Reduce visiblemente las arrugas.

• Aumenta el volumen, la elasticidad y la firmeza de la piel.

• Reduce la rugosidad.

Aplicaciones:

• Tratamiento anti edad facial.

Formulaciones con Hyagen:

• Concentración recomendada: 3%

• Presentado en suspensión acuosa. Puede ser formulado en emulsiones (O/W, W/O), todo tipo

de productos basados en aceites y formulaciones secas.

• No es compatible con alcoholes.

Absorción y eliminación:

De acuerdo con las guías standard definidas por la comisión Europea, la célula de Franz fue utilizada

para determinar el grado de penetración de Hyalgen en la piel. El ingrediente activo se concentra

completamente en la epidermis sin que se encontraran trazas en la dermis. Hyalgen es eliminado

por medio de la renovación de la piel.

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Estado regulatorio:

Hyalgen tiene la autorización de la Comisión Europea (CE) para ser comercializado en la Unión

Europea, siendo uno de los 22 ingredientes que la CE ha listado como nanomateriales aptos para

ser usados en aplicaciones cosméticas.

El ácido hialurónico y sus derivados son aptos para su comercialización en China.

Declaración:

Tipo:

Suspensión acuosa de nanopartículas de

oro conjugadas a ácido hialurónico de

5KDa.

Forma de

sumnistro

Liquido rojo de baja viscosidad.

Composición: - H2O

- Sodium citrate

- Gold particles (12 nm)

- Hyaluronic acid (5-10 KDa)

PH: 6 ± 0,5

INCI Gold Thioethylamino Hyaluronic Acid

CAS NUMBER 1360157-34-1

IUPAC Gold, 4-deoxy-4-((2-

mercaptoethyl)amino) hyaluronate

complexes

CPNP

Notification

Number

1000831

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El proceso de envejecimiento en la dermis y epidermis.

Los cambios más críticos asociados a la edad tienen lugar en la dermis. La dermis es la capa

de la piel ubicada justo debajo de la epidermis, tiene entre 2 y 4 mm de anchura y está formada por

una compleja matriz de tejido conectivo formada básicamente por colágeno, elastina y ácido

hialurónico. Los fibroblastos son las células responsables de sintetizar dicha matriz extracelular. El

colágeno es el responsable de dar resistencia y firmeza a la piel, la elastina le confiere elasticidad

y el ácido hialurónico le da hidratación, relleno, tono y un entorno óptimo para que la migración y

proliferación celular tengan lugar.

A medida que envejecemos la dermis puede perder hasta un 80% de su anchura y densidad. Esto

es debido a cambios en los fibroblastos que hacen que su producción de colágeno, elastina y ácido

hialurónico disminuya. Entonces, la dermis experimenta una pérdida de matriz extracelular. Los

fibroblastos se vuelven menos activos y disminuye su número. Una reducción en el número de

fibroblastos lleva a una disminución de la cantidad de polisacáricos como el ácido hialurónico. El

colágeno disminuye un 1% al año de media. La reducción de la cantidad de colágeno y ácido

hialurónico resulta en una desorganización del tejido cutáneo. Las consecuencias son la aparición

de arrugas, la pérdida de densidad de la piel, disminución de la firmeza, elasticidad, hidratación y

volumen. La estructura de la piel se degrada. Los capilares se vuelven más frágiles y la reducción

de la circulación sanguínea lleva a una pérdida del aporte de nutrientes y oxígeno que afecta a la

salud celular.

La epidermis está compuesta por queratinocitos, responsables de la producción de colágeno y ácido

hialurónico en esta capa de la piel. El ácido hialurónico en la epidermis juega un papel esencial en

la absorción de nutrientes. La epidermis no tiene vascularización por lo que los nutrientes son

absorbidos por mecanismos de difusión. Dicha difusión depende de la permeabilidad cutánea. Un

aumento en la cantidad de ácido hialurónico en la epidermis la vuelve más flexible, hidratada y

permeable. Los efectos de la edad en la epidermis se manifiestan mediante una reducción de la

anchura, densidad y ritmo de renovación celular. El tiempo de renovación de la epidermis se reduce

entre un 30% y un 50% a medida que envejecemos.

CD44 es el receptor específico del ácido hialurónico y juega un papel esencial en la

regulación de la producción de ácido hialurónico, colágeno y elastina endógenos. Además,

está involucrado en los procesos de migración y proliferación celular. Por lo tanto, CD44 es un

objetivo decisivo para tratar varios de los cambios biológicos más críticos causados por el

envejecimiento.

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HYALGEN, UN NUEVO SISTEMA DE LIBERACIÓN PARA ACTIVAR CD44.

CD44 es el receptor específico que regula la producción de ácido hialurónico endógeno y uno de

los más importantes para regenerar la matriz extracelular debido a su influencia en la producción

de colágeno y elastina. Su ligando o "activador" es el ácido hialurónico y se precisa de una activación

multi valente para generar la respuesta biológica deseada. Esto significa que un gran número de

receptores CD44 han de ser activados al mismo tiempo en cada célula. Por lo tanto, centenares de

oligómeros de ácido hialurónico deben llegar a la célula al mismo tiempo para activar multitud de

receptores a la vez. Esta es la razón por la que un tratamiento tópico compuesto por oligómeros

aislados de ácido hialurónico de bajo peso molecular no puede ser efectivo para provocar una

regeneración interna de la piel. Es necesario un sistema de liberación para liberar un gran número

de oligómeros en una sola célula al mismo tiempo y así, generar la respuesta biológica deseada no

solo en modelos in vitro sino en aplicaciones reales. Esto es lo que Hyagen es: el único sistema de

liberación que multi activa CD44 e induce una señalización biológica que lleva a las células a

incrementar extraordinariamente su capacidad para producir colágeno, elastina y ácido hialurónico,

mejorando las condiciones de vida celular.

Las nanopartículas de oro son ampliamente utilizadas como sistemas de liberación debido a su

biocompatibilidad, estabilidad y capacidad para transportar centenares de biomoléculas unidas a su

superficie. Por primera vez, esta tecnología se aplica a la dermocosmética para crear un nuevo

infrediente activo. Centenares de oligómeros de bajo peso molecular de ácido hialurónicoson unidos

covalentemente a la superficie de una nanopartícula, obteniendo un nuevo ingrediente activo que

es capaz de penetrar hasta las capas internas de la piel y activar una respuesta biológica única:

hacer que las células de la piel regeneren la matriz extracelular en la dermis y epidermis.

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ESTUDIOS DE EFICACIA IN VITRO. MECANISMO DE ACCIÓN.

La activación múltiple de CD44 por Hyalgen promueve la síntesis de los componentes de la

matriz extracelular como ácido hialurónico, colágeno y elastina. El receptor está directamente

relacionado con los procesos de migración y proliferación celular

Modulación de la síntesis de ácido hialurónico (AH)

Has2 es la principal enzima para la síntesis del HA en la piel. La modulación de dicha enzima

está relacionada con la modulación de la síntesis de HA. La expresión de Has2 mRNA fue

analizada por PCR en human dermal fibroblasts (HDF) y queratinocitos (HDK). Las células

fueron tratadas con Hyalgen al 3% a diferentes tiempos hasta 48h. Los resultados mostraron

que Hyalgen induce un incremento del 87% de la expresión de Has2 en fibroblastos

comparada con el control, después de 8 horas de tratamiento, mientras que el control

utilizando oligómeros de ácido hialurónico de bajo peso molecular aislados mostró un

incremento del 12.9%. Un aumento del 55% fue observado en queratinocitos.

Figura 1: Expresión de Has2 mRNA en human dermal fibroblasts (HDF) analizada por RT-PCR tras 8 horas de

tratamiento con Hyalgen 3% (normalizado con 18S rRNA). Hyalgen fue comparado con ácido hialurónico al 3%.

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Figura 2: Expresión de Has2 mRNA en human dermal keratinocytes (HDK) analizada por RT-PCR tras 8 horas de tratamiento con Hyalgen 3% (normalizado con 18S rRNA). Hyalgen fue comparado

con ácido hialurónico al 3%.

Modulación de la síntesis de colágeno

Se analizó la expresión de colágeno 1 y 3 (Col1 y Col3) mediante real time PCR. HDF fueron

tratados con el 3% de Hyalgen a diferentes tiempos hasta 48 horas. La expresión de Col1

aumentó gradualmente hasta un 132% a las 48 horas, mientras que la expresión de Col3

aumentó un 380% en ese tiempo.

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Figura 3: La expresión de Colágeno 1 (Col1) en human dermal fibroblasts (HDF) fue analizada por RT-PCR tras 48 horas de tratamiento con Hyalgen 3% (normalizado con 18S rRNA). Hyalgen se

comparó con ácido hialurónico al 3%.

Figure 4: La expresión de Colágeno 3 (Col3) en human dermal fibroblasts (HDF) fue analizada por RT-PCR tras 48 horas de tratamiento con Hyalgen 3% (normalizado con 18S rRNA). Hyalgen se comparó con ácido hialurónico al

3%.

Modulación de la síntesis de elastina

La expresión de mRNA de elastina fue analizada por real time PCR. Las células fueron tratadas

con el 3% de Hyalgen a diferentes tiempos hasta las 48 horas. La expresión de elastina

aumenta un 110% tras 8 horas.

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Figura 5: La expresión de mRNA de elastina en human dermal fibroblasts (HDF) fue analizada por RT-PCR tras 8 horas de tratamiento con Hyalgen 3% (normalizado con 18S rRNA). Hyalgen fue

comparado con ácido hialurónico al 3%.

Inducción de la proliferación celular

La proliferación de fibroblastos fue analizada por ensayo de hexosaminidasa. Tras 24 de

tratamiento, se observó un aumento del 24% con Hyalgen 3% mientras que el aumento

con ácido hialurónico (HA) al 3% fue menor del 6%.

Figura 6: Estudio de la proliferación celular en human dermal fibroblasts (HDF) tras el tratamiento con Hyalgen vs HA durante 24 horas. Los resultados son expresados en porcentajes de incremento respecto al control

negativo.

Inducción de la migración celular

Se sembraron fibroblastos durante 24 horas antes de aplicar una separación entre ellos. Las

células fueron tratadas con Hyalgen 3% y se analizó la migración tras 18 horas.

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Figura 7: Estudio de regeneración de heridas en human dermal fibroblasts (HDF) tratados con Hyalgen 3% y

comparados con control negativo de células sin tratar.

ESTUDIOS DE EFCACIA CLÍNICA (*)

Se reclutaron 23 mujeres sanas con edades comprendidas entre los 35 y 50 años, con una media

de edad de 39.6 años. El diseño del estudio requirió que dichas voluntarias se aplicaran el

tratamiento dos veces al día (mañana y noche) sobre todo el rostro y durante un periodo de 28 días.

Al finalizar el estudio se analizó la textura de la piel, la evolución de las arrugas y la densidad de la

dermis y epidermis.

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Densidad de la piel

Para evaluar la regeneración de colágeno, ácido hialurónico y elastina

endógenos se

utilizaron medidas

por ultrasonidos. Se evalúa así la re densificación de la dermis y

epidermis.

La siguiente imagen muestra la regeneración de la matriz extracelular en ambas capas

de la piel. Se obtuvieron extraordinarios resultados, alcanzando el 32% de

aumento en la epidermis y un 37% de aumento en la dermis.

(*) Estudio clínico realizado por el Instituto de Fotomedicina de la clínica Teknon de Barcelona.

Efecto anti arrugas

Se realizaron medidas mediante topometría 3D para evaluar la evolución de las arrugas en el rostro. Los resultados obtenidos evidenciaron una reducción media del 25% (p < 0.0001) con

Epidermis:

+32%

Dermis:

+37%

28 días

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una máxima del 56%, demostrando así una intensa correlación entre la regeneración de la matriz extracelular y la reducción de arrugas.

Efecto anti rugosidad

Se realizó el análisis de la textura mediante imagen 3D para evaluar el efecto de Hyalgen sobre la rugosidad facial. Los resultados mostraron una reducción media de la rugosidad del 27% (p < 0.0001) con un valor máximo del 50%.

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