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Huella genética del ADN

Introducción e instruciones de trabajo sobre el proceso

del experimento

Huella Genética

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Contenido

1. Introducción de la huella de ADN

1.1 Areas de aplicación

1.2 Comparación clásica y procedimiento moderno

1.3 Origen del marcador de ADN

1.4 Enzimas de restricción

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1.1 Areas de aplicación

• Marcadores para la identificación forense ej: sangre / células de la piel, pelo, esperma..• Comprobación de genes extraños: - en organismos (¿son transgénicos?) - en alimentos (¿verdaderamente están hechas las hamburguesas de carne de vaca?• Descubrimiento de una madre o padre biológico• Comprobar si los gemelos son genéticamente idénticos

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1.2 ComparaciónProcedim. Clásico Procedim. Moderno

Intrones Minisatellites VNTRs 15 - 300 bp

Restricción Electroforesis en gel de agarosa Blotting

Hibridacion con VNTR (número variable de repeticiones en tándem)

Intrones Microsatellites

STR 4 - 6 bp

PCR Electroforesis en gel de agarosa

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Las áreas de AND son más cortas con un máximo de

5000 bp (vs. 20 000 bp)

La técnica de PCR es más barata y rápida (1 día)

Ventajas del procedimiento moderno

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Secciones de ADN investigadas

Las secuencias repetidas en los intrones son diferentes individualmente.

Las secuencias polimórficas aparecen a través de diferencias en un par de bases una secuencia de reconocimiento se pierde diferente patrón de bandas en el gel

Intrón 1CCTATTA5 veces repetido

Intrón 3CCTATTA10 veces repetido

Exón Intrón 2sinCCTATTA

Exón

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1.3 Origen del marcador de ADN: Lambda-Phage

cabeza

cola

Organizada por E. coli Genoma 48502 Bp

(secuenciado en 1982)

El Genoma es cortado por la encima de restricción Eco RI

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EcoR1 G A A T T CCorta las terminaciones C T T A A G

Pst1 C T G C A G(Providencia stuartii) G A C G T C

- HaeIII G G C C Corta los extremos romos C C G G

1.4 Enzimas de restricción

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