Hemostasia y Trombosis

INSTRUCCIONES PARA EL ENVIO DE MUESTRAS

Recomendaciones para la obtencin, conservacin y transporte de muestras para prcticas deHemostasia y Trombosis.

Consideraciones generales

Extraer sangre venosa o arterial con jeringa de plstico seca, sin anticoagulantes. Cargarrpidamente el o los tubos, teniendo la precaucin de comenzar por el de suero y continuar con elde plasma citratado, luego el resto de los tubos.La derivacin debe ser hecha lo antes posible.En el caso de las muestras que deben ser congeladas a 20 C (freezer), lo ideal es congelarlasdurante 24 horas a esa temperatura y luego enviarlas en un recipiente aislante trmico (poliestirenopor ejemplo) y con hielo seco, o en su defecto con bolsas de gel refrigerante congelado a -20 C.Rotular en el exterior de la caja en forma bien visible:MUESTRAS CONGELADAS GUARDAR CADENA DE FRIO

Muestras

Plasma pobre en plaquetas (plasma citratado):Para obtener el plasma, mezclar cuidadosamente (por inversin varias veces) una parte de solucinde citrato de sodio (0,11 moles / litro) con 9 partes de sangre venosa o arterial, evitando la formacinde espuma.Centrifugar inmediatamente por lo menos 10 minutos a no menos de 1500 g. (depende del radio derotacin de la centrfuga, por lo general corresponde a 3500 r.p.m.).Al retirar el plasma, se debe tener cuidado de no pipetear las plaquetas, ubicadas en la zona deinterfase paquete globular-plasma. Las muestras deben ser rpidamente congeladas a -20 C en unrecipiente plstico hermticamente cerrado con tapn de plstico.El plasma observado a trasluz no debe presentar partculas en suspensin.Rotular: PLASMA CITRATADO

Suero:Obtener el suero de manera usual, cuidando de que la retraccin sea en un recipiente cerrado, deplstico. Luego de que tenga lugar la retraccin, separar el suero por centrifugacin y congelarlorpidamente a -20 C en un recipiente plstico hermticamente cerrado con tapn de plstico.Rotular: SUERO

Sangre entera:Sangre entera anticoagulada con EDTA citrato de sodio (0,11mol/l). No utilizar heparina. Recogerla muestra en tubos nuevos y estriles.Enviar a temperatura ambiente dentro de las 48 horas.Rotular: SANGRE ENTERA EDTA

Plasma con EDTA:Obtener la sangre entera anticoagulada con EDTA, en la proporcin 5 ml de sangre con 50microlitros de EDTA dipotsico. Recoger la muestra en tubos nuevos. Centrifugar inmediatamentepor lo menos 10 minutos a 1500 g.Separar el plasma y congelarlo rpidamente a -20 C en un recipiente plstico hermticamentecerrado con tapn de plstico.Rotular: PLASMA EDTA

Orina:Las muestras deben ser centrifugadas por lo menos 10 minutos a no menos de 1500 g. Separar 8 ml.del sobrenadante y congelarlo a -20 C en un recipiente plstico hermticamente cerrado con tapnde plstico.Rotular: ORINA

Tiempo de Protrombina (TP)

Tipo de Muestra: Plasma citratado

Estabilidad de la muestra: 4 horas entre 15- 25 C; dos semanas a 20C

Tiempo de Tromboplastina parcial activada (aPTT)



Tiempo de Trombina (TT)



Fibringeno (Clauss modificado)



Recuento de Plaquetas

Tipo de Muestra: Sangre entera

Estabilidad de la muestra: 6 horas a 15- 25 C

Observaciones: Enviar frotis de sangre perifrica. No congelar.

Test de correccin con plasma normal


Estabilidad de la muestra: 3 h a 15- 25C; dos semanas a 20C

Heparina Standard (sin fraccionar)



Heparina de bajo peso molecular (anti X activado)


Observaciones: Enviar la marca y dosis de heparina que utiliza el paciente. Obtener la muestra a las 4 horas de la aplicacin de la dosis.


Factores II, V, VII y X (ensayos coagulomtricos)


Estabilidad de la muestra: 3 h a 15- 25C; un mes a 20C

Factores VIII, IX, XI, y XII (ensayos coagulomtricos)



Observaciones: Para el factor VIII la estabilidad de la muestra a 20C es de 2 semanas

Factor von Willebrand funcionalAgregacin con Ristocetina


Estabilidad de la muestra: 6 h a 15- 25C; tres meses a 20C

Observaciones: El nivel de actividad del Factor von Willebrand puede variar en distintas situaciones(stress, ejercicio, embarazo, ingesta de estrgenos, etc.).

Factor von Willebrand antignicoInmunoturbidimtrico


Estabilidad de la muestra: 6 h a 15- 25C; tres meses a 20C

Observaciones: El nivel de actividad del Factor von Willebrand puede variar en distintas situaciones(stress, ejercicio, embarazo, ingesta de estrgenos, etc.).

Resistencia a la Protena C activada debida al Factor V, screening coagulomtrico desegunda generacin


Estabilidad de la muestra: : 4 h a 15- 25C; un mes a 20C

Productos de Degradacin del Fibringeno (PDF) (Aglutinacin macroscpica)


Estabilidad de la muestra: 4 h a 15- 25C, 8 horas a 20-25C; un mes a 20C

Productos de Degradacin del Fibringeno urinarios (PDFu) (Aglutinacinmacroscpica)

Tipo de Muestra: orina


Monmeros de fibrina soluble (FPA)


Estabilidad de la muestra: 4 h a 15- 25C, un mes a 20C

Dmero D (Aglutinacin macroscpica)



Dmero D (mtodo turbidimtrico)



Factor XIII (mtodo cromognico, pptido sinttico)


Estabilidad de la muestra: 8 h a 15- 25C, 24 horas a 2-8C; dos meses a 20C

Observaciones: Junto con la determinacin de factor XIII se realiza adems la de fibringenofuncional (segn Clauss).

Tiempo de lisis de Euglobulinas



Tiempo de lisis de Euglobulinas pre y post isquemia



Observaciones: La muestra post isquemia debe ser obtenida luego de 10 minutos con elesfingomanmetro a una presin ligeramente superior a la presin diastlica del paciente.

a2 antiplasmina (Funcional, cromognico)


Estabilidad de la muestra: 6 h a 15- 25C, dos das a 2-8C; un mes a 20C

Plasmingeno


Estabilidad de la muestra: 4 h a 15- 25C, dos das a 2-8C; un mes a 20C

Inhibidor del Activador del Plasmingeno (PAI)

PAI-1, PAI-2 y PAI-3



Observaciones: Tomar la muestra entre las 08 y 11 horas.

Protena C (mtodo Funcional, coagulomtrico)



Protena C (mtodo Funcional, cromognico)



Protena S (mtodo Funcional, coagulomtrico)



Protena S Libre (mtodo inmunoturbidimtrico)



Resistencia a la protena C activada



Antitrombina III (Funcional)



C1 esterasa Inhibidor



Fragmentos 1+2 de la Protrombina


Estabilidad de la muestra: 4 horas a 2-25C; un mes a 20C

Inhibidores no especficos

Anticuerpos antifosfolpidos

Anticuerpos antifosfatidilserina (Clases IgG, IgM)Anticuerpo anticardiolipina (Clases IgG, IgM, IgA)Anticuerpos anti2glicoprotena I

Tipo de Muestra: suero

Estabilidad de la muestra: 1 semana a 2-8C; un mes a 20C

Anticoagulante LpicoTiempo de coagulacin con veneno de vbora Russell diluido (DRVVT)



Observaciones: debe ser considerado como screening, en caso de ser positivo confirmar con el testde neutralizacin con plaquetas. Junto con esta determinacin se realiza adems el aPTT comocontrol de calidad de muestra.

Test de Neutralizacin con Plaquetas



Ensayo Bethesda



Homocistena

Tipo de Muestra: Suero, plasma con EDTA.


Estudio de Trombofilia

Tipo de Muestra: Plasma citratado, suero, sangre entera y plasma con EDTA.


Observaciones: El estudio incluye: Tiempo de Protrombina, aPTT, Anticoagulante Lpico (screening ,confirmatorio y ratio), Evaluacin del sistema de la protena C, Protenas C y S, Anticuerposanticardiolipina y antifosfatidilserina (clases IgG e IgM) y Homocistena.

rea Citometra de FlujoServicio de HematologaHospital Interzonal General "Dr. Jos Penna"Av. Linez 2401 - Baha Blanca - B8001DDUTEL/FAX 54-0291-4593699

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