Guia de Practicas Instrumental - II - Ciclo 2012-II 1

PRACTICA N1

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3B 2GUIA DE PRCTICAS

Unidad acadmica: EAP DE FARMACIA Y BIOQUMICAQUMICA ANALTICA E INSTRUMENTACIN IIAUTORES: MSc. Norma Carlos CasasQum. Jos Luis Lpez Gabriel

INTRODUCCINEl Laboratorio de Anlisis Instrumental es el primer contacto que el alumno tiene con las tcnicas instrumentales de anlisis cuya base y metodologa son propias de cada tcnica, pero con aspectos metodolgicos comunes como es la calibracin, preparacin de muestra y determinacin analtica.

Las prcticas se plantean situando en primer lugar a las tcnicas instrumentales en el contexto de la qumica analtica tales como los mtodos espectrofotometra UV-VIS y Espectroscopa Infrarroja. De esta manera, se trata el proceso analtico, las propiedades analticas como base para establecer criterios para la seleccin del mtodo analtico, calibracin, deteccin y correccin de errores y evaluacin de datos analticos. De las diferentes tcnicas pticas y cromatogrficas se han seleccionado las ms utilizadas.

Antes de centrarse en cada una de las tcnicas seleccionadas, se tratan los aspectos bsicos y comunes a ese tipo de tcnicas. Se ha procurado que el tratamiento de cada tcnica tenga una estructura similar, constituido por el fundamento de la tcnica, la instrumentacin requerida, sus peculiaridades, fuentes de error, la metodologa, sus aplicaciones, limitaciones y comparacin con otras tcnicas.

I. PRACTICA N1. USO Y CUIDADO DEL ESPECTROFOTMETRO DE ABSORCIN UV VISIBLE1.1Marco tericoLa ley de Lambert y Beer establece que,

(1)Donde:

I0 = es la intensidad de un haz de luz monocromtico que incide en una solucin diluida

C = concentracin de la sustancia absorbente

I = es la intensidad del haz luminoso despus de atravesar una distancia x a travs de la solucin problema.

= es la constante de proporcionalidad, se denomina coeficiente de absortividad molar y depende de la sustancia absorbente y la longitud de onda de la radiacin incidente utilizada.

A = recibe el nombre de absorbancia.

Segn la ecuacin (1), si se mide la absorbancia de una serie de soluciones de concentraciones conocidas, manteniendo constante el paso de lux (x), la representacin grfica de A en funcin de c ser una lnea recta (denominada curva de calibracin) con pendiente m = (x, e intercepto b = 0. Si se mide la absorbancia de una solucin que contenga una concentracin desconocida de la sustancia problema, es posible determinar dicha concentracin a partir de la curva de calibracin.

Dado que un espectrofotmetro es un aparato muy importante en el anlisis qumico instrumental, a la par que costoso y delicado, la prctica se ha dividido en dos partes. En la primera parte se aprender los aspectos prcticos de carcter bsico y en la segunda se explorar y aprender a utilizar todas las capacidades que puede ofrecer un instrumento determinado. Por esta razn, para la primera parte se manipular una hoja resumida de instrucciones de operacin mientras que en la segunda se trabajar con la versin completa del manual de instrucciones.

1.2. Competencias:

1.Opera correctamente el espectrofotmetro de absorcin ultravioleta visible GENESYS 5 y

adquirir experiencia en la obtencin de espectros de absorcin.

2. Demuestra actitud solidaria y tolerante adecundose al trabajo en equipo y asume el proceso

de aprendizaje con inters y responsabilidad.1.3Equipos, materiales y reactivos:1. Espectrofotmetro UV visible, celdas de vidrio y de cuarzo, manual de instrucciones.

2. Pipetas de 10 y 25 mL.

3. Vasos de precipitados, fiolas de 100 mL.

4. Soluciones de KMnO4 y K2Cr2O71.4.Procedimiento NORMAS GENERALES PARA EL USO DEL ESPECTROFOTMETRO

1. Los espectrofotmetros son aparatos de precisin delicados y deben manejarse con cuidado. Si una palanca, perilla o botn no se mueven con facilidad no hay que forzarlos NUNCA. Hay que detenerse y considerar si lo que se est haciendo es lo apropiado. No golpear nunca con violencia las palancas o botones, sino al contrario, moverlos con suavidad. El tiempo que se pueda ganar con un trato brusco es de una pequea fraccin de segundo; el perjuicio que se ocasione puede acortar en aos la vida del instrumento.

2. Las cubetas de slice (cuarzo) son indispensables para efectuar determinaciones por debajo de 340 nm, que es el lmite de transparencia del vidrio. La slice transmite hasta 200 nm y an menos. Las cubetas de slice son caras y se rompen fcilmente. Sus caras pticas pulidas se rayan con facilidad. Pelculas invisibles de suciedad o de grasa, incluyendo las huellas dactilares, pueden absorber luz ultravioleta. Las cubetas se han de tocar slo por sus caras rugosas, nunca por las pulidas, y se deben mantener escrupulosamente limpias. Despus de llenar una cubeta y antes de colocarlas en el espectrofotmetro se enjuagan las caras lisas exteriores con unas gotas de agua destilada y se secan suavemente con papel blando. No se debe tratar nunca de forzar su colocacin pues se podra romper la cubeta. Tan pronto se haya terminado el trabajo, se lavan las cubetas completamente y se secan interiormente lavando con acetona y dejando escurrir. Cuando estn secas, se vuelven a colocar en su caja. Las cubetas de slice llevan habitualmente marcas para identificarlas, pero si hay cualquier duda acerca de si son de slice o de vidrio, basta colocar una cubeta vaca en el espectrofotmetro y comparar su absorbancia por debajo de 300 nm con la del aire.

Si el instrumento es del tipo de doble haz, la cubeta vaca se coloca en el sitio reservado a la muestra y se deja vaco el sitio de la referencia. Fcilmente se ver se la cubeta transmite luz o no; si la transmite, es de slice.

INSTRUCCIONES DE OPERACIN DEL ESPECTROFOTOMETRO UV/V SPECTRONIC MODELO GENESYS 5

El profesor realizar las instrucciones de operacin extradas del manual de instrucciones que aparecen a continuacin. Tambin har demostraciones de la forma correcta de operar el equipo. Los estudiantes practicarn el uso del equipo, bajo la supervisin directa del profesor.

En la figura siguiente se muestra un esquema del teclado del espectrofotmetro GENESYS 5.

OPERACIN MANUAL SIMPLE1. Verificar que el suministro de energa elctrica estabilizada se encuentra activado. Los interruptores llave general, luz de mdulos y tomacorriente de mesas y mdulos deben estar en posicin superior y el medidor del estabilizador de voltaje deber indicar 220 V.

2. Conectar el instrumento a la red de energa elctrica estabilizada y encenderlo oprimiendo el interruptor principal a la posicin ON. El instrumento realizar un auto diagnstico mostrando los resultados en la pantalla, los sonidos emitidos por el instrumento pueden ser algo molestos pero son parte del funcionamiento normal. La secuencia del autodiagnstico es:

a. Verificacin de la memoria RAM

b. Verificacin de la batera

c. Iniciacin de la rueda de filtros

d. Verificacin de la lmpara de tungsteno

e. Verificacin de la lmpara de deuterio

f. Alineacin de lmparas

g. Calibracin de longitud de onda

h. Calentamiento de lmpara

3. Familiarcese con el teclado de la consola y verifique que comprende la funcin de cada tecla. El profesor le dar instrucciones. NUNCA PRESIONE LAS TECLAS CON LAS UAS PUES LAS DETERIORARA, USE SOLO LAS YEMAS DE LOS DEDOS. NO PRESIONE TECLAS QUE NO HAYAN SIDO AUTORIZADAS POR EL PROFESOR.

4. Si no va a efectuar mediciones en el rango ultravioleta, presione la tecla UTILITY y apague la lmpara de deuterio si es que estuviese encendida. LA LAMPARA DE DEUTERIO ES CARA Y TIENE UNA VIDA LIMITADA, POR LO TANTO NO DEBE ESTAR ENCENDIDA SI NO SE ESTA USANDO. Presione la tecla EXIT hasta volver a la pantalla original.

5. En la pantalla aparecen por defecto una longitud de onda y una lectura de absorbancia. Al pie de la pantalla Ud. Ver funciones definidas para tres de las teclas triangulares (modo: A/%T/CONC, medir y men principal). Seleccione el modo de medicin con la tecla triangular correspondiente, no use el modo de concentracin si el instrumento no ha sido previamente calibrado en concentracin.

6. Verificar que las celdas estn limpias y listas para ser utilizadas.

7. Colocar el blanco y las muestras en celdas respectivas, abrir el compartimiento del instrumento y colocar cuidadosamente las celdas en el portaceldas, EVITE DERRAMAR LOS BLANCOS O MUESTRAS DENTRO DEL INSTRUMENTO, SI ESTO LLEGARA A OCURRIR AVISE DE INMEDIATO AL PROFESOR. Verifique que la celda que contiene el blanco ocupe siempre la posicin 1. Cierre el compartimiento.

8. Seleccione el modo de medicin (Absorbancia, % de transmitancia o concentracin) presionando la tecla triangular correspondiente hasta obtener la opcin deseada.

9. Seleccione la longitud de onda a emplear mediante la siguiente secuencia:

a. Presione la tecla GOTO (b. Escriba el valor de la longitud de onda deseada con las teclas numricas

c. Presione la tecla ENTER

10. Presione las teclas CELL para hacer avanzar o retroceder el porta celdas hasta que el blanco quede insertado en el paso de luz.

11. Lleve a cero el instrumento oprimiendo la tecla AUTO ZERO.

12. Inserte cada muestra en el paso de luz oprimiendo las teclas CELL.

13. Anote el resultado de la medicin que aparece en la pantalla.

14. Luego de realizar las medidas deseadas, salir al men principal, abrir el compartimiento del portaceldas y retirar las celdas cuidadosamente. Cerrar el compartimiento, descartar el contenido de las celdas y lavarlas con jabn lquido enjuagando con abundante agua destilada. Secar las celdas con papel suave y colocarlas en su estuche.

15. Apagar el instrumento y retirar la tarjeta SOFTCARD. Esperar 10 minutos y cubrirlo con su funda.

OBTENCIN DE ESPECTROS.1. Insertar la tarjeta SOFTCARD en el slot correspondiente.

2. Presionar la tecla EXIT hasta llegar al men principal. Aparecern en la pantalla las siguientes opciones:

a. A/%T/CONC

b. Manejo de archivos

c. Manejo de programas

d. Relacin de absorbancias

e. Curva estndar

f. Cintica simple

g. Barrido

3. Seleccionar el modo de barrido.

4. Solo si va a trabajar en el rango ultravioleta (ser necesario utilizar las celdas de cuarzo) encender la lmpara de deuterio entrando al men correspondiente con la tecla UTILITY.

5. Presionar la tecla TEST TYPE y asignar los parmetros del ensayo: nombre, rango de longitudes de onda, velocidad del barrido, etc.

6. Colocar el blanco y las muestras en celdas respectivas, abrir el compartimiento del instrumento y colocar cuidadosamente las celdas en el portaceldas.

7. No provoque derrames, SI ESTO LLEGARA A OCURRIR AVISE DE INMEDIATO AL PROFESOR. Verifique que la celda que contiene el blanco ocupe siempre la posicin 1. Cierre el compartimiento.

8. Insertar el blanco en el paso de luz utilizando las teclas CELL y obtener una lnea de base (presionar la tecla triangular RECOGER LINEA BASE y seguir las instrucciones que aparecern en la pantalla).

9. Obtener el espectro (presionar la tecla triangular NUEVO BARRIDO y seguir las instrucciones que aparecern en la pantalla). Salvar el barrido.

10. Si lo considera necesario, mostrar los valores de los picos y valles por medio de la tecla triangular PROCESO POST.

11. Luego de realizar las medidas deseadas, salir al men principal, abrir el compartimiento del portaceldas y retirar las celdas cuidadosamente. Cerrar el compartimiento, descartar el contenido de las celdas y lavarlas con jabn lquido enjuagando con abundante agua destilada. Secar las celdas con papel suave y colocarlas en su estuche.

12. Apagar el instrumento y retirar la tarjeta SOFTCARD. Esperar 10 minutos y cubrirlo con su funda.

1.5 Resultados 1. Represente en una grfica las lecturas de absorbancia vs longitud de onda de las muestras y comprelas.2. Determine en los espectros obtenidos la longitud de onda mxima y la absorbancia correspondiente.

1.6 Cuestionario1. Explique las diferencias entre los instrumentos de un solo haz y de doble haz para las mediciones de absorbancia.

2. Cul es el propsito del ajuste del 0,000 de absorbancia (100% T) antes de efectuar medidas con un espectrofotmetro?

3. Qu diferencia existe entre una cubeta de cuarzo y una cubeta de vidrio?

4. Qu relacin existe entra la absorbancia (A) y el %T.

5. Indique 05 ejemplos de compuestos qumicos de inters farmacutico que contengan grupos cromforos.

6. Explique porqu son importantes los mximos de absorcin que se observan en los espectros de molculas que contienen cromforos.

1.7 Fuentes de informacin:1. Skoog DA, Leary JJ, Anlisis Instrumental, 2da. Ed. Madrid: Mc. Graw Hill; 1994.2. Wayne RP, Chemical Instrumentation, 1ra. Ed. New York: Oxford University Press; 1994.

3. Harris D. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2da. Ed. Barcelona: Revert; 2001.

4. Harvey D. Qumica Analtica Moderna. 1ra. Ed. Madrid: McGraw-Hill; 2002.

II. PRACTICA N.2 ESPECTROS DE ABSORCION Y CURVAS DE CALIBRACION DEL SULFATO DE QUININA2.1 Marco tericoLas soluciones acuosas de sulfato de quinina absorben radiacin monocromtica cumpliendo con la ley de Beer. En la presente prctica se trabajar con soluciones de sulfato de quinina con la finalidad de obtener sus espectros de absorcin en la regin UV visible y preparar curvas de calibracin para cada sustancia en los intervalos de concentraciones en que se cumple la ley de Beer.

La Quinina es un alcaloide derivado del rbol de la QUINA. Es una sustancia que disminuye la fiebre (antipirtico). Durante mucho tiempo se le utiliz para combatir la Malaria.

2.2 Competencias1. Obtiene espectros de absorcin en la regin UV visible y prepara curvas de calibracin para cada sustancia en los intervalos de concentraciones en que se cumple la ley de Beer.

2. Grafica e interpreta los espectros de absorcin en la regin ultravioleta visible.3. Demuestra actitud solidaria y tolerante adecundose al trabajo en equipo y asume el proceso de aprendizaje con inters y responsabilidad.2.3 Materiales y equipos1. Espectrofotmetro UV visible

2. Celdas de cuarzo de 10 mm de trayecto ptico

3. Pipeta graduada de 5 mL4. Pipeta volumtrica de 25 mL5. 10 Fiolas de 100 mL6. Piceta con agua destilada

7. Papel higinico suave de color blanco

8. Solucin de sulfato de quinina

2.4 ProcedimientoLimpieza del material:

Lavar bien todo el material con detergente y agua de grifo. Luego lavar con porciones de agua destilada y secar en la estufa durante 5 10 minutos entre 65 a 70 C.

Espectro de absorcin del sulfato de quinina.

A. Preparacin de una solucin madre de Sulfato de Quinina (10-4 M)

a) Pesar en una luna de reloj 0,0391 g. de Sulfato de quinina (slido de color blanco de PM = 782,3 g/mol) en la balanza analtica. Este peso equivale aproximadamente a 5x10-4 moles de sulfato de quinina.

b) Agregar la cantidad pesada en un beacker de 100 mL. (limpio y seco) y lavar con agua destilada los residuos de sulfato de quinina que queden en la luna de reloj.

c) Agregar 5 mL. de una solucin de HCl (1 M). Mezclar bien.

d) Trasvasar la solucin a una fiola de 500 mL y enrasar con agua destilada.

e) Tomar 3 mL. de la Solucin Madre con una pipeta graduada y agregarla a una fiola de 100 mL. luego agregar 1 mL. de solucin de HCl (1M) y enrasar.

f) Realizar un barrido con esta solucin en el espectrofotmetro en el rango de 200 a 400 nm (regin UV) y determinar la longitud de onda adecuada para preparar la curva de calibracin.

B. Obtencin de una Curva de calibracin

Se preparan soluciones Estndares (deben aproximarse a la composicin global de las muestras y deben cubrir un intervalo de concentraciones razonable para el analito.

Los resultados de un anlisis no deben basarse nunca en los valores de las absortividades molares de la bibliografa.

a) Preparar 4 fiolas de 100 mL. con tapa limpias y secas.

b) Preparar las siguientes diluciones a partir de la solucin Madre de Sulfato de Quinina de concentracin 1x10-4M :

Solucin A : 2 mL. de Solucin Madre + 1mL. de HCl 1M + H2O destilada en 100 mL.

Solucin B : 4 mL. de Solucin Madre + 1mL. de HCl 1M + H2O destilada en 100 mL.

Solucin C : 6 mL. de Solucin Madre + 1mL. de HCl 1M + H2O destilada en 100 mL.

Solucin D : 8 mL. de Solucin Madre + 1mL. de HCl 1M + H2O destilada en 100 mL.

c) Preparar el espectrofotmetro con una longitud de onda de 250 nm y medir la absorbancia del blanco y llevar el equipo a cero de absorbancia.d) Medir las absorbancias de las soluciones. 2.5 Resultados1. Grafique el espectro de absorcin del sulfato de quinina.

2. Represente en papel milimetrado la Curva de Calibracin del Sulfato de Quinina.

3. Realice los clculos de regresin lineal con ayuda de la calculadora y determine la ecuacin de la recta.

4. Determine el valor del coeficiente de regresin lineal

2.6 Cuestionario1. Por qu no se deben usar las celdas de vidrio para este tipo de prueba?2. El siguiente es el Espectro de Absorcin de un frmaco X, disuelto en alcohol. despus de realizar un barrido desde 230 a 650 nm.

(1 (2 (3 (4

Responder:

a) Qu lmpara se utiliz en el espectrofotmetro?

b) Qu longitud o longitudes de onda se pueden utilizar para la construccin de una curva de calibracin?

c) Es buena la sensibilidad a (1?3. Qu variables experimentales se deben controlar para obtener datos de absorbancia reproducibles?

4. Escriba la frmula qumica desarrollada del sulfato de quinina y explique para qu se utiliza.

5. La absortividad molar para las soluciones acuosas de fenol a 211 nm es de 6.17x103 L cm-3 mol-1. Calcular el intervalo permisible de concentraciones de fenol que se pueden determinar por espectrofotometra de absorcin UV si la transmitancia debe ser menor que 80 % y mayor que 5 %, considerando que las mediciones se efectan en celdas de 1 cm de trayecto ptico.

2.7 Fuentes de informacin1. Harris D. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2da. Ed. Barcelona: Revert; 2001.


III. PRACTICA N.3 DETERMINACION SIMULTANA DELAS FORMAS CIDA Y BSICA DEL ANARANJADO DE METILO3.1 Marco tericoIndicador, en qumica, sustancia natural o sinttica que cambia de color en respuesta a la naturaleza de su medio qumico. Los indicadores se utilizan para obtener informacin sobre el grado de acidez o pH de una sustancia, o sobre el estado de una reaccin qumica en una disolucin que se est valorando o analizando. Uno de los indicadores ms antiguos es el tornasol, un tinte vegetal que adquiere color rojo en las disoluciones cidas y azul en las bsicas. Otros indicadores son la alizarina, el rojo de metilo y la fenolftalena; cada uno de ellos es til en un intervalo particular de acidez o para un cierto tipo de reaccin qumica.

Su uso es amplio: se utilizan sobre todo para valoraciones cido / base en qumica analtica, y para medir el pH de una disolucin, aunque de forma cualitativa.

Los ms conocidos son el naranja de metilo, que vira en el intervalo de pH 3,1 4,4, de color rojo a naranja, y la fenolftalena, que vira desde un pH 8 hasta un pH 10, transformando disoluciones incoloras en disoluciones con colores rosados / violetas.

3.2 Competencias:1. Aplica la ley de Lambert-Beer y la demuestra la propiedad de adicin de las absorbancias al anlisis simultneo de dos componentes en una mezcla.

2. Demuestra actitud solidaria y tolerante adecundose al trabajo en equipo y asume el proceso de aprendizaje con inters y responsabilidad.

3.3 Materiales y equipos1. Espectrofotmetro UV visible con celdas de cuarzo de 10 mm.

2. Pipeta graduada de 5 mL3. Pipeta volumtrica de 25 mL4. 10 Fiolas de 100 mL5. Piseta con agua destilada

6. Papel Tisue suave de color blanco

7. Solucin de Anaranjado de Metilo al 0,002%.8. Solucin de NaOH 2M9. HCl concentrado.10. cido Frmico 0,1M

3.4 Procedimiento1. Espectro de absorcin de la forma cida del indicador.

Preparar sucesivamente las siguientes disoluciones:

Blanco: pipetear 10 mL de agua, aadir 4 gotas de HCl concentrado y aforar a 25 mL. La disolucin se pasa a una clula del espectrofotmetro.

Disolucin de naranja de metilo: pipetear 10 mL de disolucin 0.002 % de naranja de metilo, aadir 4 gotas de HCl concentrado y aforar a 25 mL. El pH de esta disolucin es aproximadamente de 1 y el indicador se encuentra completamente en su forma cida. La disolucin se pasa a una de las clulas del espectrofotmetro.

Registro del espectro. Leer el blanco y realizar un barrido en el rango de 350nm hasta los 600 nm. Identifique la longitud de onda mxima.

2. Espectro de absorcin de la forma bsica del indicador.

Preparar sucesivamente las siguientes disoluciones:

Blanco: pipetear 10 mL de agua, aadir 24 gotas de NaOH 2 M y aforar a 25 mL. La disolucin se pasa a otra clula del espectrofotmetro.

Disolucin de naranja de metilo: pipetear 10 mL de disolucin 0.002% de naranja de metilo, aadir 24 gotas de NaOH 2 M y aforar a 25 mL. El pH de esta disolucin es aproximadamente de 13 y el indicador se encuentra completamente en su forma bsica. La disolucin se pasa a una de las clulas del espectrofotmetro.

Registro del espectro. Proceder como en el registro del espectro de absorcin de la forma cida del indicador.

3. Espectros de absorcin de disoluciones donde estn presentes ambas formas del indicador.

Se procede a registrar el espectro de 1 disolucin tampn de diferente pH mediante el siguiente procedimiento:

Preparacin de la disolucin tampn: En un matraz erlenmeyer agregar 25 ml de cido frmico 0.1 M y luego agregar NaOH 2M hasta que se obtenga un pH alrededor de 3.8.

4. Disolucin de indicador en el tampn Blanco: pipetear 10 mL de agua y enrasar a 25 mL con la disolucin amortiguadora . La disolucin se pasa a una de las clulas del espectrofotmetro.Disolucin de indicador: pipetear 10 mL de naranja de metilo 0.002% y enrasar a 25 mL con la primera disolucin amortiguadora. La disolucin se pasa a una de las clulas del espectrofotmetro.

Registro del espectro. Para cada longitud de onda a la que se vaya a trabajar ajustar el espectrofortmetro al 100% de transmitancia, con el blanco, y medir la absorbancia de la disolucin problema. Se debe registrar la absorbancia de la disolucin para las longitudes de onda antes indicadas.

3.5 Resultados1. Determinar la absortividad molar de la forma cida, bsica a las dos longitudes de onda mxima determinadas.2. Calcular en la muestra problema la concentracin de cada forma (cida y bsica).3.6 Cuestionario1. Explique las principales diferencias entre los espectros de absorcin de las soluciones cida y bsica del anaranjado de metilo.

2. Por qu se agrega NaOH a la solucin de cido frmico?

3. Mencione dos aplicaciones de los indicadores. 3.7 Fuentes de informacin:1. Harris D. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2da. Ed. Barcelona: Revert; 2001.

2. Wayne RP, Chemical Instrumentation, 1ra. Ed. New York: Oxford University Press; 1994.


IV. PRACTICA N.4 DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICADE HIERRO EN COMPLEMENTOS VITAMNICOS4.1Marco tericoEn esta prctica, el hierro de una tableta de complemento vitamnico se disuelve en cido, se reduce a Fe(II) con hidroquinona y se forma el complejo con o-fenantrolina para formar un completo de color rojo intenso. Puede emplearse clorhidrato de hidroxilamina en lugar de hidroquinona.

4.2Competencias:

1. Aplica el mtodo Espectrofotomtrico para la determinacin cuantitativa de metales (Fe) por medio de la formacin de complejos coloreados.


4.3Equipos y materiales:1. Espectrofotmetro UV visible, celdas de vidrio y de cuarzo, manual de instrucciones.

2. Pipetas volumtricas de 10 y 25 mL, vasos de precipitados, fiolas de 100 mL.4.4 ProcedimientoATAQUE DE LA MUESTRA

a) Pesar en una luna de reloj los grnulos contenidos en una cpsula de complemento Vitamnico que contenga Hierro (Fe). Anotar la masa.

b) Colocar los grnulos en un beacker de 100 mL y adicionar 20 mL de HNO3 concentrado y 5 mL de H2O.

c) Calentar suavemente la muestra en una plancha o cocinilla elctrica provista de una rejilla de Asbesto a una temperatura entre 150 y 200 C. Controlar, agitando con una bagueta, para evitar que la ebullicin sea brusca y no salpique muestra fuera del vaso.

d) Terminar el calentamiento cuando quede aproximadamente 3 a 5 mL de muestra lquida.

e) Agregar a la muestra lquida concentrada 10 mL. de H2O destilada y luego 25 mL. de HCl 6M (es posible que la solucin se enturbie un poco).

f) Filtrar luego la muestra acidificada directamente en una fiola de 250 mL. (Se sugiere utilizar papel Wattman # 41 42). Controlar los lavados con agua destilada para asegurar una filtracin cuantitativa.

g) Dejar enfriar la solucin y enrasar con agua destilada. Homogenizar.

h) De esta solucin hacer una dilucin 1/10: Tomar con ayuda de una pipeta volumtrica 10 mL. y agregarlos en una fiola de 100 mL. Enrasar con agua destilada y Homogenizar.

i) Determinar la concentracin de la muestra problema preparada, segn las especificaciones de la cpsula.

Preparacin de la Solucin Patrn de Hierro.

a) Pesar en una luna de reloj 0,052 gramos de FeSO4 (PF = 278) o la cantidad equivalente de Sal de Mohr; Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O (PF = 392) que contenga la misma cantidad de Fe.

b) Agregar a un beacker y disolver con agua destilada de buena calidad.

c) Llevar a una fiola de 250 mL que contenga 1 mL de H2SO4 concentrado. Enrasar y Homogenizar.

d) Calcular la concentracin de hierro (Fe) en la solucin preparada.

Preparacin de los reactivos

Preparacin de la solucin de Citrato de sodio.

a) Pesar 2,5 gramos de citrato de sodio en una luna de reloj.

b) Agregar a un beaker y disolver la sal con agua destilada.

c) Llevar a una fiola de 100 mL., enrasar con agua destilada y homogenizar.

d) Esta solucin servir para mantener las soluciones de Hierro a un pH de 3 a 3,5.

Preparacin de la solucin Clorhidrato de Hidroxlamina.

Nota: Preparar el mismo da del anlisis.a) Pesar 2,01 gramos del reactivo en una luna de reloj.

b) Agregar a un beaker y disolver la sal con agua destilada.

c) Llevar a una fiola de 100 mL., enrasar con agua destilada y homogenizar.

Preparacin de la solucin de o-Fenantrolina.

Nota : Preparar el mismo da del anlisis.a) Pesar 0,2957 gramos de o fenantrolina (aprox. 0,3 g) en una luna de reloj y disolver en 10 mL. de agua destilada.

b) Llevar a una fiola de 100 mL, enrasar y homogenizar.

Preparacin del BUFFER para calibrar el potencimetro.

a) Pesar 1,021 gramos de Biftalato de potasio (PM = 204,2) en una luna de reloj.

b) Disolver con agua destilada en un beaker de 100 mL.

c) Agregar a una fiola de 100 mL. enrasar y homogenizar.

d) Conectar el potencimetro y calibrarlo con la solucin de Biftalato preparada recientemente a un pH = 4.

Preparacin de los Patrones de hierro y de la muestra.

a) En un beacker de 100 mL. agregar (con ayuda de una pipeta volumtrica de 10 mL) 2,5 mL. de solucin patrn de hierro.

b) Adicionar 40 mL. de agua destilada y medir el pH con el potencimetro.

c) Agregar con ayuda de un gotero la solucin de Citrato de sodio para llevar el pH al rango de < 3 3,5 >. Anotar el nmero de gotas adicionadas.

d) Adicionar luego los siguientes reactivos en el orden dado :

2 mL. de Clorhidrato de Hidroxilamina.

3 mL. de O-fenantrolina

La solucin desarrollar color anaranjado.

e) Agregar a una fiola de 100 mL. el contenido del beacker y sus lavados. Luego enrasar con agua destilada y homogenizar. Anotar la concentracin de hierro.

f) REPETIR LOS PASOS (a) hasta (d) CON PORCIONES DE 5,0; 7,5 Y 10 mL de la solucin patrn de Fe. . Anotar las concentraciones de hierro.

g) Repetir la operacin para la muestra problema: Tomar 5 mL. de la muestra problema y agregarlos a un beaker de 100 mL agregar Citrato de sodio hasta pH 3 a 3,5. Agregar 2 mL. de clorhidrato de hidroxilamina y 3 mL de de o Fenantrolina. Llevar a una fiola de 100 mL. y enrasar con agua destilada.

h) Dejar que todas las soluciones (patrones y muestra) reposen 25 minutos para que desarrollen el color.

i) Preparar un blanco.

Medicin en el espectrofotmetro.

a) Una vez que todas las muestras han desarrollado color, medir las absorbancias de los patrones de Fe y luego el de la muestra a 508 nm utilizando las cubetas de cuarzo.

b) Trazar una curva de calibracin en un papel milimetrado y determinar la concentracin de la muestra problema.

c) Hallar el coeficiente de absortividad molar.d) Se utiliza la curva patrn para hallar la cantidad de Fe presentada en la tableta.

4.5 Resultados1. Grafique el espectro de absorcin del Complejo de Hierro.

2. Represente en papel milimetrado la Curva de Calibracin del Complejo de Hierro.

3. Realice los clculos de regresin lineal con ayuda de la calculadora y determine la ecuacin 4. de la recta.

5. Determine el valor del coeficiente de regresin lineal.

4.5 Cuestionario1. Por qu la determinacin de Fe+2 con orto-fenantrolina se realiza a un valor de pH de aproximadamente 3,5?

2. Por qu es necesario aadir hidroquinona o clorhidrato de hidroxilamina en el presente mtodo de anlisis?

3. Mencione tres productos farmacuticos en los cuales se pueda aplicar la determinacin de hierro con orto-fenantrolina.

4.7 Fuentes de informacin:1. Harris D. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2da. Ed. Barcelona: Revert; 2001.

2. Wayne RP, Chemical Instrumentation, 1ra. Ed. New York: Oxford University Press; 1994.


V. PRACTICA N. 5 Espectros de absorcin ultravioletadel cido acetilsaliclico (aspirina) y de su anin5.1 Marco tericoLos compuestos orgnicos que contienen grupos cromforos presentan espectros de absorcin en la regin ultravioleta, que son caractersticos del tipo de sistema cromforo presente en la molcula. Estos espectros son importantes porque dan informacin til respecto a ciertos detalles de la estructura molecular y en especial porque a menudo permiten la determinacin simultnea de dos o tres componentes en mezclas, en mejores condiciones que los espectros de absorcin en la regin visible, debido a que las bandas de absorcin en la regin ultravioleta son usualmente ms agudas, adems muchas molculas no presentan espectros de absorcin en la regin visible.

En esta prctica se podrn observar las diferencias entre el espectro de un cido no disociado y el de su anin. El cido acetilsaliclico (AAS) tiene una constante de ionizacin aproximadamente de 1 x 10-4. En las soluciones muy diluidas que se van a emplear, el AAS est disociado en sus iones en ms de un cincuenta por ciento. Para tener por lo menos un 99% del mismo en la forma cida sin disociar, basta agregar cido clorhdrico en cantidad suficiente para dar una concentracin de ion hidrgeno de 0,05 M.

5.2 Competencias:1. Describe las diferencias entre el espectro de un cido no disociado y el de su base conjugada.

2. Define particularidades tpicas de los espectros de absorcin de compuestos orgnicos en diferentes solventes.

3. Aplica la ley de Beer a la determinacin del cido acetilsaliclico en productos comerciales (tabletas de aspirina).


5.3 Materiales y equipos:1. Acido acetilsaliclico recristalizado.

2. HCl, NaOH, 1 M

3. Hexano.

4. Cloroformo.5. Fiolas de 100 mL.6. Pipetas de 5 mL y de 10 mL.7. 02 cubetas de cuarzo de 1 cm de paso de luz

8. Espectrofotmetro GENESYS 5.

5.4 ProcedimientoA) Espectro de las soluciones acuosas de AAS. a.Se pesan exactamente unos 25 mg de AAS y se pasan a un matraz aforado de 100 mL. Se aade agua, se agita hasta que el cido se haya disuelto, se completa luego con agua hasta el enrase y se mezcla bien. Se marca esta solucin con una A.

b.Si la solucin A es demasiado concentrada para medir su absorbancia directamente, se toman otros dos matraces aforados de 100 mL que se marcan como B y C, en los que se introducen proporciones de 10,0 mL de la solucin A medidos exactamente con pipeta. En el matraz B se adiciona 5 mL de cido clorhdrico 1 M. Se completan ambos con agua hasta 100 mL y se mezcla bien.

c.Representar grficamente los espectros de las soluciones B y C desde 300 nm hasta 215 nm.. Colocar tres cubetas conjuntamente en el portamuestras, una con agua pura, otra con solucin B y otra con solucin C. Se emplea la cubeta con agua para fijar el ajuste del 100% de transmitancia, lo cual hay que repetir cada vez que se modifique la longitud de onda, no olvidando comprobar el ajuste del cero. Algunas absorbancias sern elevadas, mayores que 1 y un pequeo error en el ajuste del cero dara lugar a un error grande en la absorbancia medida. La anchura de la rendija debe ser lo menor posible, por lo cual se trabajar en una posicin de sensibilidad elevada, entre 220 y 240 nm. Las lecturas se efectuarn cada 2 nm.

d.Los espectros de B y C sern diferentes, pero cada uno presenta dos mximos, uno alrededor de 230 nm y el otro a 280 nm o ms. El pico a la longitud de onda menor es el de mayor intensidad y se denomina pico primario. El pico que aparece a la longitud ms larga, o pico secundario, es ms dbil. Si la absorbancia mxima de este pico es menor que 0,2 es conveniente preparar una solucin ms concentrada, tomando una nueva porcin, A y diluyndola en menor proporcin pero manteniendo la misma concentracin de cido (o de base) anterior. Por ejemplo se podra tomar 10,0 mL de A y 1,25 mL de cido clorhdrico 1 M y diluir en agua hasta 25.0 mL. El mismo espectro solucin de sta se determina entre 260 y 300 nm. Las absortividades molares deberan ser las mismas que las de la solucin ms diluida, pero los valores de la solucin ms concentrada resultarn de mayor precisin.

e.El peso frmula del AAS es 180. Con este dato, se convierten las lecturas de absorbancia en absortividades molares. Sobre una misma hoja de papel milimetrado se representarn en funcin de la longitud de onda, las absortividades molares de la forma cida y de la forma bsica.

B) Espectro de una solucin no acuosa.

El AAS es muy soluble en cloroformo. Sin embargo, el cloroformo absorbe fuertemente la luz ultravioleta por debajo de 230 nm y la absorcin del disolvente casi oculta el pico de absorcin del propio AAS. Por este motivo se emplear en este experimento una mezcla de cloroformo y ciclohexano.

a.Se prepara una solucin de AAS en cloroformo puro, de concentracin exactamente conocida, de unos 40 mg en 100 mL. Se toman con una pipeta 5,00 mL de esta solucin, y se pasa a un matraz aforado de 100 mL, completando hasta el enrase con ciclohexano. En otro matraz aforado de 100 mL, se pone 5,00 mL de cloroformo puro, sin AAS, y se agrega ciclohexano hasta el enrase. Esta mezcla de disolvente se emplea en la cubeta de referencia del espectrofotmetro. En la cubeta de la muestra se pone la solucin de AAS. El espectro de absorcin de esta solucin se determina desde 300 nm hasta 230 nm o menos.

b.Si se emplea un espectrofotmetro de un solo haz, se observar que el disolvente empieza a absorber apreciablemente por debajo de 240nm. Habr que abrir la rendija ms y ms para poder fijar la lectura del 100% de transmitancia. Hay que mantener el ajuste de sensibilidad elctrica cerca de su mximo y utilizar el mando de anchura de rendija para realizar dicho ajuste del 100%, anotando la anchura de rendija para cada longitud de onda. Estas anotaciones pondrn de manifiesto el aumento de la absorbancia del disolvente al disminuir la longitud de onda.

La absortividad molar del AAS se representar frente a la longitud de onda, en la misma grfica que se construy para las soluciones acuosas. Se observarn las diferencias entre los espectros. La banda primaria en ciclohexano, es ms estrecha y ms extensa que la observada en agua, poniendo de relieve una interaccin ms dbil entre disolvente y soluto.

5.5 Resultados1. Grafique el Espectro UV del cido acetilsaliclico en medio cido.2. Grafique el Espectro UV del cido acetilsaliclico en medio bsico.

3. Grafique el Espectro UV del cido acetilsaliclico en cloroformo y ciclohexano.

5.6 Cuestionario1. Explique qu efectos tiene el disolvente en el espectro de absorcin UV / visible de una molcula orgnica.

2. Explique las principales diferencias entre los espectros de absorcin UV / visible del AAS y de su anin.

5.7 Fuentes de informacin:1. Skoog DA, Leary JJ, Anlisis Instrumental, 2da. Ed. Madrid: Mc. Graw Hill; 1994.

2. Harris D. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2da. Ed. Barcelona: Revert; 2001.


VI. PRACTICA N 6. ESPECTROSCOPA INFRARROJA6.1 Marco tericoLa energa de radiacin infrarroja cubre una parte del espectro electromagntico entre el visible y la regin micro-onda entre los 4000 cm-1 y los 600 cm-1 (2,5 1,5 um).

El espectro IR es caracterstico de una molcula y los grupos funcionales presentan picos o bandas de absorcin debido a la absorcin de energa por parte de los enlaces que los forman lo que permite obtener informacin parcial acerca de la estructura de la molcula en estudio y se necesitara el uso de otras tcnicas espectroscpicas para determinar la estructura completa de una molcula.

La radiacin infrarroja se encuentra en un rango de 10000 a 100 cm-1 (1 100 um) y corresponde a la energa de vibracin de las molculas, esta absorcin est cuantizada y aparece en forma de picos o bandas, la zona del IR medio donde la absorcin depende de la fuerza de los enlaces y la geometra de los tomos se encuentra entre los 4000 cm-1 y los 600 cm-1 (2,5 1,5 um). La posicin de las bandas en el espectro IR se representa en nmeros de onda (cm-1), la intensidad de las bandas se expresan en unidades de absorbancia o en porcentaje de transmitancia.

Existen dos formas de vibracin de las molculas, una de estiramiento y otra de flexin. La de estiramiento es de movimiento rtmico a lo largo del enlace por incremento o decaimiento de la accin interatmica, la vibracin de flexin consiste en el cambio del ngulo entre el enlace con un tomo comn o un grupo de tomos con respecto a una parte de la molcula.

Cuando dos enlaces que oscilan tienen un tomo comn tendrn frecuencias de oscilacin diferentes, por ejemplo el CO2 tiene dos enlaces C=O con un tomo de carbono en comn, tendr dos vibraciones, una simtrica y otra asimtrica. La simtrica no producir un cambio en el momento bipolar y no absorbe en el IR, en cambio el asimtrico produce un cambio en el momento bipolar y absorbe a 2350 cm-1 dando una absorcin de alta intensidad.

La posicin de los picos o bandas de absorcin de los diferentes grupos funcionales ya es conocida y se presenta generalmente en tablas disponibles en la bibliografa, a continuacin presentamos una tabla resumida de las seales IR de los principales grupos funcionales:

PRINCIPALES BANDAS DE ABSORCION INFRARROJA PARA GRUPOS FUNCIONALES SELECCIONADOS.

EnlaceTipo de compuestoIntervalo de

Frecuencias, cm-1Intensidad

CHAlcanos2850-2970Fuerte

1340-1470Fuerte

CHAlquenos3010-3095

675-995Media

Fuerte

CHAlquinos ( C ( C H)3300Fuerte

CHAnillos aromticos3010-3100Media

690-900Fuerte

OHAlcoholes, fenoles3590-3650Variable

EnlaceTipo de compuestoIntervalo de

Frecuencias, cm-1Intensidad

O-HAlcoholes con puente de hidrgeno, fenoles3200-3600Variable a veces ancha

O-Hcidos carboxlicos3500-3650Media

cidos carboxlicos con puente de hidrgeno2500-2700Ancha

NHAminas, aminas3300-3500Media

C=CAlquenos1610-1680Variable

C=CAnillos aromticos1500-1600Variable

C(NAlquinos2100-2260Variable

CNAminas, aminas1180-1360Fuerte

C(NNitrilos2210-2280Fuerte

COAlcoholes, teres, cidos carboxlicos, steres1050-1300Fuerte

C=OAldehdos, cetonas, cidos carboxilicos, steres1690-1760Fuerte

NO2Nitrocompuestos1500-1570Fuerte

6.2 Competencias1. Analiza los espectros de absorcin en la regin infrarroja.

2. Identifica los grupos funcionales que se encuentran en los espectros problemas.

3. Demuestra actitud solidaria y tolerante adecundose al trabajo en equipo y asume el proceso de aprendizaje con inters y responsabilidad.6.3 Material1. Tablas de bandas de absorcin de grupos funcionales en el infrarrojo.

2. Espectros Infrarrojo de diferentes compuestos orgnicos.

6.4 Procedimiento:

El profesor proporcionar a los estudiantes una serie de espectros infrarrojos, correspondientes a diversas molculas que constituirn muestras problema. El estudiante identificar los grupos funcionales presentes en cada espectro, utilizando la tabla que se present u otras tablas ms extensas y detalladas.

6.5 Resultados Realizar la interpretacin de cada uno de los espectros especificando en una tabla el tipo de enlace, tipo de pico o seal y su ubicacin en el espectro para cada una de las muestras.6.6 Cuestionario1. Mencione dos aplicaciones de la espectrofotometra de absorcin molecular en la regin infrarroja, a la industria farmacutica.

2. En cuntas partes se divide un espectro infrarrojo?

3. Cul es el uso principal de la regin de las huellas digital en un espectro de absorcin molecular en la regin infrarroja?



VII. PRCTICA N.7 CLCULOS Y EVALUACIN DE MTODOS EN ESPECTROFOTOMETRIA UV-VIS (SEMINARIO)7.1 Marco tericoLos clculos relacionados al desarrollo y evaluacin de los mtodos espectrofotomtricos requieren un conocimiento prctico en la aplicacin de la Ley de Lambert-Beer. La expresin matemtica corresponde a la siguiente frmula:

A = .b.C

Donde:

A : Absorbancia

: Coeficiente de Absortividad molar

C : Concentracin. 7.2 Competencias1. Realiza clculos sobre concentraciones, absorbancias y coeficientes de absortividad utilizando la ley de Lambert-Beer. 2. Determina rango de concentraciones para la aplicacin de la Ley de Lambert-Beer para determinacin de compuestos de forma simultnea.

3. Analiza espectros y determina desplazamientos batocrmicos e hipsocrmicos identificando grupos funcionales responsables.

7.3 Material Artculos publicados sobre determinacin de compuestos orgnicos tales como contaminantes en formulados farmacuticos o principios activos por mtodos de cromatografa lquida HPLC o cromatografa de gases.

Tablas de clasificacin de mtodos cromatogrficos y fases estacionarias.

7.4 Procedimiento:1. Los alumnos se agruparn y realizarn los clculos correspondientes a los ejercicios entregados por el profesor.

2. Se realizarn clculos sobre la determinacin de compuestos de forma simultnea utilizando la ley de Lambert-Beer.

3. Se estudiar espectros de absorcin a fin de determinar la diferencia en los desplazamientos para compuestos evaluados en diferentes medios o solventes. 7.5 Resultados1. Los alumnos realizarn un reporte de los ejercicios resueltos. 2. Se presentar un procedimiento para el desarrollo de los mtodos espectrofotomtricos UV-VIS.

3. Se presentar un cuadro comparativo con las diferencias entre los espectros evaluados indicando la ubicacin de la longitud de onda mxima, medio o solvente utilizado, absorbancias.7.6 Cuestionario1. Cul es el fundamento del mtodo de anlisis por espectroscopa UV-VIS?

2. Cul es la importancia del coeficiente de absortividad?

3. Cul es el objetivo de realizar un anlisis por desplazamientos?7.7 Fuentes de informacin:1. Harris D. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2da. Ed. Barcelona: Revert; 2001.


VIII. PRACTICA N8. USO Y CUIDADO DEL POTENCIOMETRO Y DETERMINACION ELECTROMETRICA DEL pH.

8.1 Marco tericoLa determinacin del pH se realiza instrumentalmente mediante la medicin del potencial elctrico de una celda galvnica constituida por un electrodo indicador de membrana de vidrio y un electrodo de referencia sumergidos en la solucin problema. A partir de la ecuacin de Nernst se demuestra fcilmente que

Donde E es el potencial medido en voltios, R la constante universal de los gases cuyo valor es de 8,314 J/(mol K), T la temperatura absoluta en grados Kelvin, F el Faraday de carga elctrica igual a 96487 coul/mol y K una constante cuyo valor se determina al calibrar el instrumento de medida, empleando soluciones de pH conocido.

El cambio en E, sin tener en cuenta el signo, correspondiente a la variacin de una unidad de pH, a 25 C, es igual a

La resistencia interna de una celda galvnica para medir el pH es del orden de 109 ( y se debe casi totalmente a la membrana de vidrio del electrodo indicador. Esto es muy importante ya que segn las ecuaciones la instrumentacin mnima necesaria para efectuar la medicin se reducira a un voltmetro suficientemente sensible, un electrodo de vidrio y un electrodo de referencia. Sin embargo si se trata de hacer la medicin empleando por ejemplo un multmetro digital se obtendra para cualquier pH un valor cercano a cero voltios y la pequea corriente que circulara por la celda sera suficiente para daar al electrodo indicador. Por otra parte un medidor de pH o pH-metro es esencialmente un voltmetro con circuitos electrnicos adecuados para hacer la conversin del voltaje medido a unidades de pH. La diferencia est en la impedancia de entrada de ambos voltmetros que suele ser de solo 10 M( en los multmetros digitales corrientes mientras la impedancia de entrada de un medidor de pH es del orden de 1012 ( o ms.

Puede utilizarse un multmetro digital si se le adiciona un circuito electrnico especial denominado seguidor de voltaje. Se trata de un circuito sencillo y barato constituido por un amplificador operacional de muy alta impedancia de entrada y ganancia unitaria. Ciertamente el seguidor de voltaje debe estar protegido contra el ruido electrnico y poseer conectores apropiados.

8.2 Competencias:1. Determina potenciomtricamente el pH, empleando la lectura del potencial en voltios y la ecuacin de Nernst as como la lectura directa en un instrumento digital moderno.


8.3 Material y equipos pH-metro de lectura directa con escala de milivoltios. Alternativamente puede emplearse un multmetro digital provisto de un seguidor de voltaje.

Electrodos de vidrio y de referencia (Ag/AgCl o calomel saturado). Electrodo combinado para medir el pH.

Soporte porta electrodos de altura regulable.

Termmetro.

Vasos de 100 mL, bagueta, piseta con agua destilada.

Soluciones de biftalato de potasio 0,050 M (solucin estndar de pH = 4,01) y Brax 0,010 M (solucin estndar de pH = 9,18).

Soluciones problemas suministradas por el profesor o por el alumno.

Papel filtro sin cenizas

8.4 ProcedimientoINSTRUCCIONES PARA EL USO DEL POTENCIOMETRO pH METRO HANNA MODELO HI 9321

La figura siguiente muestra la consola de mando del instrumento mencionado.

Para su adecuado uso debe tener presente las siguientes instrucciones:

1. Verificar que el suministro de energa elctrica estabilizada se encuentra activado. Los interruptores llave general, luz de mdulos y tomacorriente de mesas y mdulos deben estar en posicin superior y el medidor del estabilizador de voltaje deber indicar 220 V.

2. Verificar que los electrodos estn limpios y cubiertos con su estuche de seguridad.

3. Si va a realizar mediciones de pH verificar que el sensor de temperatura se encuentre conectado al instrumento.

4. Retire el estuche de seguridad del electrodo y coloque a ste ltimo dentro de la muestra que va a ser medida. Junto al electrodo coloque el sensor para medir la temperatura. Ambos deben mantenerse separados.

5. Encienda el aparato presionando el botn on/off. El aparato determinar automticamente el valor del pH de la muestra, si es que se encuentra calibrado. Espere uno o dos minutos, o hasta que la lectura del instrumento se estabilice, antes de anotar el valor del pH medido. Retire los electrodos de la muestra y enjuaguelos con abundante agua destilada para retirar cualquier contaminante. Cubra el electrodo con su estuche.

6. Si el instrumento no ha sido calibrado, realice la calibracin empleando la siguiente secuencia de instrucciones:

a. Introduzca el electrodo combinado y el sensor de temperatura en una solucin buffer estndar de pH 4,00 (solucin de biftalato de potasio 0,050 M) y agite brevemente. Los electrodos debern estar sumergidos aproximadamente 4 cm en la solucin y el sensor de temperatura deber estar tan cerca del electrodo combinado como sea posible.

b. Presione la tecla CAL, los indicadores CAL y buff aparecern en la pantalla. Tambin aparecer el valor 4,01

c. Espere a que la lectura sea estable, si la lectura no es estable el mensaje NOT READY aparecer en la pantalla en forma intermitente. Un vez que la lectura sea estable los mensajes READY y CON aparecern intermitentemente en la pantalla.

d. Presione la tecla CFM para confirmar la lectura. Si el pH del buffer estndar se aleja demasiado del valor esperado el mensaje WRONG aparecer intermitentemente en la pantalla. Si todo est correcto el valor del buffer aparecer en la parte principal de la pantalla. Presione la tecla CAL y el proceso habr terminado.

Cuidado del electrodo combinado para medir pH:

1. El electrodo deber enjuagarse bien con agua destilada antes y despus de ser usado. Para secarlo acercar un trozo de papel higinico blanco y suave al electrodo mojado de manera que el agua sea absorbida por el papel. EL PAPEL NO DEBE TOCAR EL BULBO DE VIDRIO SENSIBLE AL pH DEL ELECTRODO.

2. Guardar siempre el electrodo dentro de su estuche, el cual deber contener suficiente solucin de KCl 3,5 M para que el bulbo y el puente salino de cermica porosa permanezcan sumergidos en dicha solucin. NUNCA GUARDAR EL ELECTRODO SECO NI EN AGUA DESTILADA.

DETERMINACION ELECTROMETRICA DEL pH

1)Familiarcese con el instrumento a utilizar, siguiendo las instrucciones del profesor y comose indic anteriormente.

2)Mida y anote la temperatura de las soluciones estndar, teniendo cuidado de no contaminar las soluciones con el termmetro. Todas las soluciones a emplear debern estar a la misma temperatura.

3)Lave cuidadosamente los electrodos con agua destilada y squelos delicadamente con un trozo limpio de papel filtro sin cenizas.

4)Introduzca cuidadosamente los electrodos en un vaso limpio conteniendo un volumen apropiado de la solucin buffer de pH 4. Los electrodos no debern tocar las paredes del vaso. Espere el tiempo necesario para obtener una lectura constante y anote el valor.

5)Calcule el valor de la constante K, empleando la ecuacin 1.

6)Repita los pasos 3 y 4, empleando la solucin buffer de pH 9.

7)Calcule la pendiente experimental, m, empleando la ecuacin 3. Compare el valor obtenido con el valor terico que es igual a (- 2,303 RT/F)

8)Repita los pasos 3 y 4, empleando la solucin problema suministrada por el profesor.

9)Calcule el pH de la solucin problema, empleando la ecuacin con los valores determinados de K y m. Anote el valor encontrado en la pizarra.

10) Repita los pasos 3, 4 y 9, empleando como muestra una solucin de HCl 0,1000 N. Compare el valor del pH obtenido con el valor de 1,00 esperado en primera aproximacin.

11) Repita la calibracin y las mediciones del pH pero esta vez siga las instrucciones para el uso del pH metro HANNA modelo HI 9321 que aparecen mas adelante. Siguiendo tal procedimiento Usted obtendr directamente los valores del pH en la pantalla del instrumento. Compare los resultados con los obtenidos mediante el mtodo anterior.

8.5 Resultados:Detalle los resultados experimentales en forma ordenada, empleando el siguiente esquema:

Experimento: Calibracin del medidor de pH

Fecha:

Hora:

Analista:

Instrumento:

Solucin buffert (C)pHE

(Voltios)Constantes K, m

Biftalato de potasio 0,050M

Borax 0,010 MK = M =

8.6 Cuestionario1. Indique los principales tipos de electrodos que se utilizan en Potenciometra.

2. Ejemplo de la determinacin de la constante de acidez por medio de una titilacin potenciomtrica.

8.7. Fuentes de informacin:1. Harris D. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2da. Ed. Barcelona: Revert; 2001.


IX. PRACTICA N. 09 DETERMINACION DEL CONTENIDO DE ACIDO ACTICO EN VINAGRE MEDIANTE TITULACIN POTENCIOMETRICA9.1 Marco terico

El contenido total de cido de un vinagre o de un vino se determina fcilmente por titulacin con una base estndar. Se acostumbra a informar el contenido de cido en el vinagre en trminos de cido actico, el principal constituyente cido, an cuando puedan existir otros cidos. Similarmente, el contenido de cido de un vino se expresa como porcentaje de cido tartrico, an cuando en la muestra haya otros cidos. En la presente prctica se obtiene la curva de valoracin midiendo el pH despus de cada adicin de solucin valorante. El pH se mide con un electrodo de vidrio, un electrodo de referencia y un pH-metro.

9.2 Competencias: 1. Aplica la tcnica de las valoraciones potenciomtricas de neutralizacin a la determinacin de la concentracin total de cido en muestras de vinagre.

9.3 Materiales y equipos pH-metro de lectura directa con escala de milivoltios. Alternativamente puede emplearse un multmetro digital provisto de un seguidor de voltaje.

Electrodo combinado para medir el pH


Termmetro.

Vasos, bagueta, piseta con agua destilada.

Soluciones de hidrgeno ftalato de potasio 0,050 M (solucin estndar de pH = 4,01) y Brax 0,010 M (solucin estndar de pH = 9,18).

Solucin patrn de NaOH 0,1 M;

Muestra de vinagre.

Papel filtro sin cenizas.

9.4 Procedimiento1.Se calibra cuidadosamente el pH-metro (ver prctica No. 8), se introducen los electrodos lavados y secos en la solucin problema. Si la muestra es un vinagre pase mediante pipeta volumtrica 25,00 mL de la muestra a una fiola de 250 mL y enrase hasta la marca con agua destilada. Mezcle bien y use alcuotas de 50 mL de la solucin resultante para realizar los anlisis.

2.Se coloca el NaOH en una bureta y se aaden unos mL, mientras la disolucin se agita cuidadosamente (no debe hacerse muy fuerte ni dejar que el agitador toque los electrodos).

3.Despus de alcanzar el equilibrio, se anota el potencial, se aade ms valorante y se repite el proceso. Al principio deben aadirse incrementos de 1 mL, pero cerca del punto de equivalencia los incrementos deben ser de 0,1 mL.

4.Se grafican los datos, se localiza cuidadosamente la inflexin correspondiente al punto de equivalencia.

6.Los puntos de equivalencia se pueden determinar empleando los mximos de una grfica de la razn de cambio del pH con respecto al volumen de valorante aadido (dpH/dV). Es muy conveniente emplear una computadora personal y una hoja de clculo (p. ej. EXCEL) para el procesamiento de los datos. Se sugiere el procedimiento siguiente:

9.5 Resultados1. Registre sus datos de volumen de valorante y pH en columnas contiguas de la hoja de clculo. Obtenga, por interpolacin, los valores de pH correspondientes a incrementos de 0,10 mL de valorante. Registre los nuevos datos de V y pH.

2. En una columna contigua calcule los valores de la razn de cambio del pH con respecto al volumen de valorante aadido, (dpH/dV ( (pH/(V)

3. labore una grfica de ((pH/(V) en funcin del volumen de valorante aadido y determine los puntos de equivalencia de la titulacin a partir de la misma.

4. Determine el porcentaje de cido actico en la muestra de vinagre.

9.6 Cuestionario:1. Describa tres ejemplos de aplicaciones de las valoraciones potenciomtricas de neutralizacin al anlisis de compuestos de inters farmacutico.

2. Explique cmo se puede determinar el pKa de un cido dbil monoprtico a partir de la curva de neutralizacin obtenida por titulacin potenciomtrica. Explique qu aplicaciones analticas tiene la determinacin del pKa.



X. PRACTICA N. 10 DETERMINACIN DE FOSFATO POR TITULACION POTENCIOMETRICA ACIDO-BASE

10.1 Marco tericoLa determinacin del cido fosfrico mediante valoracin potencio mtrica con una base fuerte es un mtodo muy til para la determinacin de fosfatos en preparaciones que lo contienen. En el caso de materiales de composicin complicada es necesario hacer preparaciones. Por ejemplo, Las levaduras en polvo contienen bicarbonato de sodio ms un cido slido, que en algunos productos comerciales es el fosfato cido de calcio CaHPO4. Contienen tambin almidn para evitar el apelmazamiento del polvo. En este caso el fosfato no se puede valorar directamente; primeramente es preciso separarlo de los iones calcio que lo acompaan, lo cual se realiza por intercambio inico.

10.2 Competencias:1. Aplica la tcnica de las valoraciones potenciomtricas de neutralizacin a la determinacin de la concentracin de un cido poliprtico debil.


10.3 Materiales y equipos pH-metro de lectura directa con escala de milivoltios. Alternativamente puede emplearse un multmetro digital provisto de un seguidor de voltaje.

Electrodos combinado para medir el pH



Soluciones de hidrgeno ftalato de potasio 0,050 M (solucin estndar de pH = 4,01) y Brax 0,010 M (solucin estndar de pH = 9,18).

Solucin patrn de NaOH 0,2 M;

Acido ortofosfrico.

10.4 Procedimiento1. Se calibra cuidadosamente el pH-metro (ver prctica No. 1), se introducen los electrodos lavados y secos en la solucin problema.

2. Se coloca el NaOH en una bureta y se aaden unos mL, mientras la disolucin se agita cuidadosamente (no debe hacerse muy fuerte ni dejar que el agitador toque loselectrodos).3. Despus de alcanzar el equilibrio, se anota el potencial, se aade ms valorante y se repite el proceso. Al principio deben aadirse incrementos de 1 mL, pero cerca del punto de equivalencia los incrementos deben ser de 0,1 mL.4. Se grafican los datos, se localizan cuidadosamente las inflexiones, las cuales aparecen en las proximidades de pH=4,5 y pH=8,5. El volumen de NaOH consumido hasta el primer punto de inflexin no es de inters, pues incluye la base necesaria para neutralizar el exceso de HCl aadido. 5. El volumen significativo es el correspondiente al intervalo entre los dos puntos de inflexin, que da la cantidad de cido fosfrico presente en la solucin.

6. Se determina los puntos de equivalencia del cido ortofosfrico.7. Los puntos de equivalencia se pueden determinar empleando los mximos de una grfica de la razn de cambio del pH con respecto al volumen de valorante aadido (dpH/dV). Es muy conveniente emplear una computadora personal y una hoja de clculo (p. ej. EXCEL) para el procesamiento de los datos. Se sugiere el procedimiento siguiente:


2. En una columna contigua calcule los valores de la razn de cambio del pH con respecto al volumen de valorante aadido, (dpH/dV ( (pH/(V).3. Elabore una grfica de ((pH/(V) en funcin del volumen de valorante aadido y determine los puntos de equivalencia de la titulacin a partir de la misma.

4. Determine la concentracin de la muestra de cido ortofosfrico.

10.6 Cuestionario:1. Explique por qu no sera posible la valoracin cido base del fosfato en presencia de iones calcio.

2. Deduzca las ecuaciones necesarias para calcular las tres constantes de ionizacin del cido fosfrico, a partir de los datos experimentales obtenidos. Calcule las citadas constantes y compare los valores con los de la literatura.



XI. PRACTICA N. 11 DETERMINACION DE SULFANILAMIDA MEDIANTE VALORACION POTENCIOMETRICA REDOX.

11.1Marco tericoLa determinacin potenciomtrica del punto final de una titulacin es una tcnica muy til ya que no existen indicadores adecuados para todas las valoraciones redox y porque las valoraciones potenciomtricas pueden automatizarse con facilidad.

La determinacin de sulfanilamida en tabletas comerciales es un ensayo farmacutico sistemtico. La sulfanilamida reacciona con nitrito de sodio dando una sal de diazonio, y el curso de esta reaccin puede seguirse potenciomtricamente mediante un electrodo indicador de Pt y un electrodo de referencia de calomel saturado.

El electrodo de alambre de platino se muestra en la siguiente figura:

La reaccin entre la sulfanilamida y el NaNO2 (solucin valorante) es la siguiente:

HCl (ac) + NaNO2 (ac) ( HNO2 + NaCl

11.2 Competencias1. Aplica la tcnica de las valoraciones potenciomtricas de xido reduccin, a la determinacin de un componente de inters en el rea farmacutica.


11.3 Materiales y equipos pH-metro de lectura directa con escala de milivoltios. Alternativamente puede emplearse un multmetro digital, provisto de un seguidor de voltaje.

Electrodos de platino y de calomel saturado.


Balanza analtica.

Mortero de vidrio, Vasos de 250 mL, bureta, bagueta, piceta con agua destilada.

Soporte y pinza para bureta.

Solucin de nitrito de sodio 0,1 N.

HCl (c) Sulfanilamida patrn.

Muestra problema suministradas por el profesor.

11.4 Procedimiento Estandarizacin de la solucin de NaNO2

1. Prepare una solucin 0,1 M de NaNO2 (PM = 69 uma) que deber normalizarse frente a una cantidad conocida de sulfanilamida patrn: Pese 1,725 gramos de NaNO2 puro y seco en un beacker de 100 mL. Disuelva la sal y transfiera la solucin a una fiola de 250 mL. Enrase y homogenice.

2. Prepare la solucin patrn de Sulfanilamida: Se disuelven en un vaso de 250 mL, la cantidad de 0,3 gramos (con aproximacin de cuatro cifras decimales) del patrn de sulfanilamida en 50 mL de agua. Agregue gota a gota cido clorhdrico concentrado para disolver completamente la sulfanilamida. Agregue a esta solucin 10 mL de HCl concentrado con una probeta.

3. Se prepara el sistema introduciendo el electrodo en la disolucin de sulfanilamida (El profesor indicar cmo se maneja el instrumento a emplear).

4. Se coloca el valorante en una bureta y se aaden unos mL, mientras la disolucin se agita cuidadosamente (no debe hacerse muy fuerte ni dejar que el agitador toque los electrodos).

5. Despus de alcanzar el equilibrio, se anota el potencial, se aade ms valorante y se repite el proceso. Al principio pueden aadirse incrementos de 3 mL, pero cerca del punto de equivalencia los incrementos deben ser de 0,5; 0,2 0,1 mL.

6. Se repite la valoracin, se grafican los datos y a partir de la grfica se determina el volumen de valorante requerido.

Anlisis de la muestra problema:

1. Para el anlisis de la muestra, se pesan exactamente 20 tabletas, se pulverizan en un mortero y se pesan exactamente unos 0,3 g de este polvo para cada determinacin (El profesor puede proporcionar tabletas o bien una disolucin).

2. Se aaden 50 mL agua y 10 mL de cido clorhdrico y se agita para disolver la muestra. Puede ocurrir que las tabletas no se disuelvan totalmente debido a los dems materiales de la tableta.

3. La cantidad total de sulfanilamida en las 20 tabletas se calcula a partir de los datos. Los resultados se expresan como peso medio de sulfanilamida por tableta y como porcentaje con respecto al contenido indicado en la etiqueta.

11.5 Resultados1. Registre sus datos de volumen de valorante y potencial en columnas contiguas de la hoja de clculo. Obtenga, por interpolacin, los valores de potencial correspondientes a incrementos de 0.10 mL de valorante. Registre los nuevos datos de V y mV.

2. En una columna contigua calcule los valores de la razn de cambio del potencial con respecto al volumen de valorante aadido, (dmV/dV ( (mV/(V)

3. Elabore una grfica de ((mV/(V) en funcin del volumen de valorante aadido y determine los puntos de equivalencia de la titulacin a partir de la misma.

4. Determine la concentracin de la muestra de sulfanilamida.

11.6 Cuestionario:1. Empleando la frmula desarrollada de la sulfanilamida, escriba la ecuacin de su reaccin con nitrito de sodio.

2. Explique qu es una sal de diazonio.

3. Indique qu otros tipos de compuestos de inters farmacutico se podran valorar con solucin de nitrito de sodio, empleando la tcnica utilizada en esta prctica.



XII. PRACTICA N.12 DETERMINACION POTENCIOMTRICA DE CIDO BENZOICOEN SOLVENTE NO ACUOSO

12.1 Marco terico

Las titulaciones potenciomtricas no slo se realizan en medio acuoso sino que tambin se puede realizar en otros solventes. El contenido total de cido benzoico de una muestra se determina mediante titulacin con NaOH utilizando como solvente etanol. El contenido de cido benzoico se expresa como porcentaje de pureza respecto al peso de muestra. En la presente prctica se obtiene la curva de titulacin midiendo el pH despus de cada adicin de solucin valorante. El pH se mide con un electrodo de vidrio, un electrodo de referencia y un pH-metro.

12.2 Competencias:1. Aplica la tcnica de las valoraciones potenciomtricas de neutralizacin a la determinacin de la concentracin total de cido benzoico.12.3 Materiales y equipos pH-metro de lectura directa con escala de milivoltios. Alternativamente puede emplearse un multmetro digital provisto de un seguidor de voltaje.

Electrodo combinado para medir el pH


Termmetro.


Solucin patrn de NaOH 0,1 N

Etanol 96%.

Muestra de cido Benzoico.

12.4 Procedimiento1.Se pesa 0,1800 g de muestra y se coloca en un beaker de 250 mL, se adiciona 80 mL de alcohol al 96%. Se coloca un magneto de agitacin y el electrodo de vidrio para lectura de pH.2.Se coloca el NaOH 0,1 N en una bureta y se aaden inicialmente alcuotas de 1,0 mL, mientras la disolucin se agita cuidadosamente (la agitacin no debe ser muy violenta y no dejar que el agitador toque los electrodos).

3.Despus de alcanzar el equilibrio, se anota el potencial, se aade ms valorante y se repite el proceso. Al principio deben aadirse incrementos de 1 mL, pero cerca del punto de equivalencia los incrementos deben ser de 0,1 mL.

4.Se grafican los datos, se localiza cuidadosamente la inflexin correspondiente al punto de equivalencia.

5.Los puntos de equivalencia se pueden determinar empleando los mximos de una grfica de la razn de cambio del pH con respecto al volumen de valorante aadido (dpH/dV). Es muy conveniente emplear una computadora personal y una hoja de clculo (p. ej. EXCEL, ORIGIN) para el procesamiento de los datos. Se sugiere el procedimiento siguiente:

a.Registre sus datos de volumen de valorante y pH en columnas contiguas de la hoja de clculo. Obtenga, por interpolacin, los valores de pH correspondientes a incrementos de 0,10 mL de valorante. Registre los nuevos datos de V y pH.

b.En una columna contigua calcule los valores de la razn de cambio del pH con respecto al volumen de valorante aadido, (dpH/dV ( (pH/(V)

c.Elabore una grfica de ((pH/(V) en funcin del volumen de valorante aadido y determine los puntos de equivalencia de la titulacin a partir de la misma.

6.Determine el peso de cido benzoico que contiene la muestra y exprese el resultado como porcentaje de pureza respecto al peso de muestra inicial.


2. En una columna contigua calcule los valores de la razn de cambio del pH con respecto al volumen de valorante aadido, (dpH/dV ( (pH/(V)

3. Elabore una grfica de ((pH/(V) en funcin del volumen de valorante aadido y determine los puntos de equivalencia de la titulacin a partir de la misma.

4. Determine el porcentaje de cido benzoico.

12.6 Cuestionario:1. Describa 02 ejemplos de aplicaciones de las valoraciones potenciomtricas en solventes no acuosos.2. Explique cules son los cuidados que se deben tener cuando no se utiliza agua como solvente en una titulacin. 12.7 Fuentes de informacin:1. Harris D. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2da. Ed. Barcelona: Revert; 2001.

2. Harvey D. Qumica Analtica Moderna. 1ra.Ed. Madrid: McGraw-Hill; 2002.

XII. PRCTICA N.13 MTODOS CROMATOGRFICOS: GC y HPLC13.1 Marco tericoLa cromatografa es un mtodo fsico de separacin en el cual los componentes que se van a separar se distribuyen en dos fases, una de estas fases constituye una capa estacionaria de gran rea superficial y la otra es un fluido que eluye a travs o a lo largo de la fase estacionaria.13.2 Competencias1. Interpreta correctamente los diagramas esquemticos generales de los principales tipos de cromatgrafos de gases y de HPLC. Evaluar las ventajas y limitaciones comparativas de cada tipo.

2. Explica correctamente cmo funcionan los principales tipo de detectores empleados en cromatografa de gases, interpretando correctamente sus diagramas esquemticos y evaluando comparativamente sus ventajas y limitaciones.

3. Elige correctamente la fase estacionaria apropiada para la separacin de diferentes tipos de compuestos por cromatografa de gases.13.3 Material Artculos publicados sobre determinacin de compuestos orgnicos tales como contaminantes en formulados farmacuticos o principios activos por mtodos de cromatografa lquida HPLC o cromatografa de gases. Tablas de clasificacin de mtodos cromatogrficos y fases estacionarias. 13.4 Procedimiento:1. Los alumnos se agruparn y analizarn los artculos en estudio y discutirn los objetivos, procedimientos, tcnicas de preparacin de muestras, caractersticas del mtodo cromatogrfico, determinaciones realizadas, clculo de los resultados y conclusiones.

13.5 Resultados1. Los alumnos realizarn una exposicin conjunta detallando cada una de las caractersticas de la publicacin en estudio y respondern las preguntas realizadas por el profesor y por sus compaeros sobre los puntos evaluados y tpicos relacionados.

13.6 Cuestionario1. Cules son las caractersticas del mtodo cromatogrfico evaluado?2. En qu otro tipo de muestras se puede aplicar el mtodo estudiado? 13.7 Fuentes de informacin:1. Harris D. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2da. Ed. Barcelona: Revert; 2001.


XIV. PRCTICA N.14 MTODOS CROMATOGRFICOS: CROMATOGRAFA DE GEL-PERMEACIN, CROMATOGRAFA INICA, ELECTROFORESIS. (EXPOSICIONES)14.1 Marco tericoLos mtodos cromatogrficos se caracterizan por la diferencia de las fases estacionaria y fases mviles que utilizan adems de la naturaleza de las muestras a las cuales se aplican. La cromatografa de Gel-permeacin se aplica para separar compuestos de acuerdo al tamao que poseen y se utiliza para aquellos que tienen un alto peso molecular. La cromatografa Inica se aplica para separar cationes y aniones utilizando el intercambio inico. 14.2 Competencias1. Identifica las caractersticas de cada una de las tcnicas cromatogrficas evaluadas.

2. Define las muestras y las caractersticas que deben cumplir para ser analizadas por medio de estas tcnicas.

3. Determina los parmetros cromatogrficos que tienen relacin directa con la resolucin de los componentes de la muestra.

14.3 Material Artculos publicados sobre determinacin de compuestos orgnicos tales como contaminantes en formulados farmacuticos o principios activos por mtodos de cromatografa de Gel-permeacin, cromatografa inico y electroforesis. Tablas de clasificacin de mtodos cromatogrficos y fases estacionarias.

14.4 Procedimiento:1. Los alumnos se agruparn y analizarn los artculos en estudio y discutirn los objetivos, procedimientos, tcnicas de preparacin de muestras, caractersticas del mtodo cromatogrfico, determinaciones realizadas, clculo de los resultados en cada una de estas tcnicas.

14.5 Resultados1. Los alumnos realizarn una exposicin grupal detallando cada una de las caractersticas de la publicacin en estudio y respondern las preguntas realizadas por el profesor y por sus compaeros sobre los puntos evaluados.

14.6 Cuestionario1. Cules son las caractersticas del mtodo cromatogrfico evaluado?

2. En qu otro tipo de muestras se puede aplicar el mtodo estudiado?



2

,

303

GOTO

(

AUTO

ZERO

SAMPLE

ID

ENTER

EXIT

CLEAR

SETUP

TESTS

TEST

TYPES

ACC

CELL

CELL

1

2

3

4

5

6

7

8

9

0

UTILITY

SPECTRONIC GENESYS

A

0

,

0591

dE

dpH

298

96487

x

x

V

3

EMBED ACD.ChemSketch.20

mx = 508 nm

MEM

CAL

NOT READY

CON WRONG

pH

mV

BATT

HANNA

INSTRUMENTS

CAL

( C

MEM

ON/OFF

CFM

( C

MR

RANGE

pH calibration procedure

Function

RANGE Select pH or ORP measurement

MEM For storing display result

MR Recall previous stored data

CAL Start calibration

( C Select buffer 1 value

CFM Confirm when ready

( C Select buffer 2 value

2

3

4

5

6

7

8

1

KCl 3,5 M en Ag/AgCl

Electrodo de referencia

Ag/AgCl

Puente salino

Electrodo redox de platino

Electrodo indicador de platino

8

,

314

F-CV3-3B-2 Rev. Junio 2007

Guia de Practicas Instrumental - II - Ciclo 2012-II 1

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