UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

CÁTEDRA DE TÉCNICAS HISTOLÓGICAS

GRUPO N° 5

TEMA:

Reconocimiento del área física de un Laboratorio de Anatomía

Patológica

DOCENTE:

LIC. IVÁN PEÑAFIEL

INTEGRANTES:

IRENE LARA

MARÍA GUAMÁN

SANDY MORALES

NIVEL: TERCER SEMESTRE

PERIODO ACADÉMICO: ABRIL 2016 – AGOSTO 2016

FECHA DE ENTREGA: XX DE ABRIL DEL 2016

Reconocimiento del área física de un Laboratorio de Anatomía Patológica

ÁREA DE RECEPCIÓN DE MUESTRAS

Es el área donde serán recibidas las muestras con sus respectivas solicitudes de estudio

histopatológico, registradas e identificadas con el número interno correspondiente; y,

además, ahí deben ser entregados los informes finales de las muestras.

Deberá contar con una mesa de trabajo (escritorio), un contenedor o área especial para

la colocación transitoria de las muestras, el material de papelería y cómputo necesarios

(impresora) para el registro de ingresos de las piezas y de informes finales entregados,

además de un archivero para los informes finales (resultados) pendientes de entrega.

En quirófanos o en la consulta, se dispondrá de recipientes de diferentes tamaños,

plásticos con tapa hermética y fijador (formol buferado al 10%) cuando la pieza

quirúrgica requiere de fotografías, esta debe preservarse en refrigeración a 4°C, para

evitar de esta manera los cambios histológicos y no alterar los tejidos.

Comprobación de datos: Consiste en comprobar que los datos del informe del

paciente y del envase donde viene la biopsia coinciden. El líquido fijador en el

que habitualmente vienen fijadas las biopsias es formol al 10%.

Registro de la muestra: Realizada por el personal administrativo, dándole un

número de identificación al informe, que deberá coincidir con el envase de la

biopsia.

-Numeración y registro de la muestra: Cuando las muestras llegan al laboratorio de

Anatomía Patológica, estas son matriculadas, procedimiento que consiste en verificar y

registrar (en forma manual y/o en el sistema informático si lo hubiere) la siguiente

información:

Número de orden correspondiente.

Nombre del paciente.

Edad.

Género.

Número de cédula de identidad.

Número de afiliación.

Número de historia clínica.

Servicio Médico.

Datos de orientación diagnóstica.

Nombre y sello del médico solicitante.

Fecha de recepción de la muestra.

Examen transoperatorio, y

Observaciones, si las hubiere.

Los datos deberán ser ingresados en el computador y en el libro de registro, y ser

impresos por duplicado en etiquetas -idealmente con código de barras-, que se adhieren

al formulario de solicitud del examen y al recipiente de la muestra.

La numeración respetará un orden secuencial. Un sistema que se recomienda es

comenzar la numeración con 001 desde el 1 de enero, y añadir un guión seguido de los

últimos dígitos del año en curso.

Este número será la identificación para los bloques de parafina, laminillas, informes,

fotografías, archivo y almacenamiento de datos para todos los exámenes. Para el caso de

pruebas especiales se podrán anteponer las siguientes siglas:

H Histoquímica

IQ Inmunohistoquímica

ICQ Inmunocitoquímica

IF Inmunofluorescencia

ME Microscopía Electrónica, o las siglas propias del laboratorio.

Modo de envío de muestra

Las muestras que se reciben en el Laboratorio de Anatomía - Patológica, deben

remitirse en envases o recipientes de plástico de boca ancha y tapa a rosca o en bolsas

especiales plásticas con un sistema de cierre inviolable, en solución fijadora (solución

de formol al 10%), la cual debe ser aproximadamente 10 veces el volumen del material

remitido a temperatura ambiente, pudiendo conservarse de esta manera, por tiempo

indefinido. Nunca se debe guardar en frío (heladera +4°C o freezer) el material que ya

contiene formol, debido que el mismo congelado forma cristales que alteran las

estructuras hísticas impidiendo, de esta manera, el ulterior estudio microscópico.

Los líquidos corporales (pleurales, pericárdicos, peritoneales), estos deben ser

remitidos antes de las 24hs en envases de plásticos, con tapa a rosca y

conservados en frío (heladera +4°C) o bien con el agregado al material de

alcohol 96° o formol a temperatura ambiente.

Para el estudio de plancton, el mismo se puede llevar a cabo en muestras de

sangre obtenidas por punción de las cavidades cardíacas izquierdas, de la médula

ósea y en el agua del lugar del hecho, debiendo ser colocadas en envases limpios

y secos. La remisión del material se debe hacer respetando la cadena de frío

(heladera +4°C).

Los pelos deben ser remitidos en sobres o bolsas de papel a temperatura

ambiente.

En lo que respecta a preparados histológicos y tacos de parafina, deben ser

remitidos en cajas y embalados a temperatura ambiente. (VIVAR, 2010)

ÁREA DE MACROSCOPÍA

Sitio en donde, al llegar la muestra codificada, se realiza el procesado de muestras e

intraoperatorias, incluyendo zonas diferenciadas.

Cuando se efectúa la interpretación de una lesión macroscópica, se debe eliminar la

tendencia subjetiva en la observación, es decir, se debe ver el material que se estudia tal

como es y no como se lo quiere ver.

Para ello es necesario prestar la mayor atención a la totalidad de la pieza y a los detalles

de la misma, efectuando una observación sistemática y detallada para no pasar por alto

datos importantes.

El análisis de las imágenes permitirá interpretarlas.

Se sugiere la revisión de conceptos anatómicos normales y fisiológicos vinculado con

las piezas en estudio.

Pautas generales de procedimiento:

1-Definir con qué tipo de material está trabajando.

Para ello, se observa si el frasco contiene:

Uno o más órganos completos o partes de ellos o si trata de piezas complejas

que incluyan varias vísceras o fragmentos de vísceras.

Reconocer el (los) órgano (s), identificando sus caracteres morfológicos

normales.

Podrá tratarse de:

-Órganos macizos, como bazo, hígado y riñones.

-Órganos huecos, como intestinos.

-Órganos macizos con cavidades, como encéfalo.

-Órganos esponjosos, como pulmones.

En todos los casos se observa la superficie externa para reconocer si se trata de una

serosa: pleura o peritoneo visceral, que normalmente es lisa, brillante (debido a la

humedad de su superficie) y transparente (lo que permite apreciar algunas características

del tejido subyacente). La serosa está íntimamente adherida al órgano y no puede ser

separada de él sin desgarrarlo.

Algunos órganos carecen de serosa, como por ejemplo el esófago, el cual se halla

externamente recubierto por tejido fibroadiposo laxo, que constituye una adventicia.

En otras oportunidades los órganos están revestidos por una cápsula de aspecto

fibroso, laminar y firme. Tratándose del riñón, se le verá fina y será, en condiciones

normales, fácilmente decolable.

o Observar si existe hilio y/o pedículo vascular.

Tener en cuenta la forma del órgano y su tamaño (tomar las medidas de longitud,

ancho y espesor en cm).

o Analizar la configuración de la superficie de corte, reconociendo estructuras

vasculares, canaliculares, etc.

o Si se trata de fragmentos de órganos, interpretar el plano de sección efectuado,

el cual puede ser:

*Según el eje mayor del órgano:

Longitudinal (paralelo a él)

*Según el eje corporal:

Posterior.(a la izquierda).

Transversal (perpendicular a él).

Frontal (plano longitudinal que separa la mitad anterior de la Sagital)

2- Descripción de hallazgos patológicos.

-Alteración del tamaño y forma, que afecta a parte o la totalidad de la pieza.

-Color. Suelen poseer color gris- blanquecino, debido a la conservación en formol al

10%.

El contenido de sangre de una víscera juega un papel importante en la determinación

de su color: la escasa vascularización le confiere tonalidad grisácea y los focos

de hemorragia adquieren coloración pardo-azulada. La presencia de pigmentos,

supuración, depósito de fibrina o calcificación modifica asimismo la coloración.

-Superficie externa. Puede ser irregular: mamelonada, lobulada, con protusiones,

depresiones.

La superficie serosa que la reviste puede ser: translúcida (grado menor de

transparencia) u opaca. Puede además la serosa presentarse despulida con adherencias

firmes o laxas.

-Superficie de corte. Puede verse deprimida o sobreelevada sobre el plano de

sección, ser lisa o tener relieves. Puede presentar pérdida de tejidos, impregnación

hemorrágica, etc.

En el estudio de las lesiones se deberá tener el cuenta:

-Número: En este caso si existe una sola, la lesión será focal.

Si existen varias, con tejido sano que las separa, será multifocal.

Si afecta todo el tejido, sin respetar áreas conservadas, será difusa.

Aspecto: - Lesión maciza nodular es de forma oval o esférica.

-Lesión maciza cuneiforme o piramidal.

-Lesión cavitada.

-Lesión ulcerada.

-Tamaño. Medidas en cm. Tomando en cuenta la mayor y menor, en caso que sean

múltiples y de tamaño diferentes.

-Límites

Netos (separación franca entre zona sana y afectada). Estos pueden ser rectilíneos,

geográficos, policíclicos.

Indefinidos. Se confunde el tejido lesionado con el sano.

-Localización topográfica en el órgano.

-Friabilidad. Resistencia del tejido a ser destruído por la presión ejercida por el dedo

índice y pulgar.

-Consistencia. (Evaluada, en el caso de piezas contenidas en frascos, sólo a través de la

inferencia).

Esta puede ser:

Duro-pétrea.

Blando-elástica.

-Relación con estructuras normales adyacentes y modificaciones que puede imprimirle:

compresión, desplazamiento, infiltración, distorsión, destrucción, etc.

~Órganos huecos

En ellos se describe:

1- Superficie externa.

2- Pared (superficie de corte)

3- Superficie interna.

4- Cavidad

1-Superficie externa

Puede presentar, según el órgano una serosa visceral o una adventicia (la descripción

de ambas ya fue considerada)

2- Pared.

Se debe medir su espesor y reconocer las distintas capas que la conforman.

Un ejemplo especial a destacar es el corazón. La medición debe considerar la pared libre

de cada una de sus cámaras, teniendo especial cuidado, en que aquella se realice en una

zona donde el corte sea perfectamente transversal.

Se incluye en esta medida, el espesor del miocardio, que se extiende desde la zona

inmediatamente subyacente al pericardio visceral hasta la base de los

músculos papilares.

Los distintos procesos patológicos que afectan a la pared de un órgano, pueden

adelgazarla o engrosarla. En ambos casos se debe determinar, si ello ocurre en forma

difusa, focal o multifocal, su localización topográfica y a expensas de qué capa o capas

ha ocurrido.

Es necesario reconocer la causa de dicha afectación.

Si se halla adelgazada analizar cuidadosamente a qué puede deberse.

En caso de engrosamiento, observar si éste ocurre debido al aumento de tejidos propios

del órgano o a la presencia de tejidos o sustancias extrañas.

Para todo esto es importante tener en cuenta el aspecto, distribución, color, consistencia

y friabilidad de los tejidos y reconocer si los límites son netos o se confunden

imperceptiblemente con el tejido normal.

3- Superficie interna.

Es imprescindible reconocer las características normales de la superficie interna de

los distintos órganos huecos para luego poder observar sus modificaciones, por ej la

íntima de los vasos es lisa, rosada y brillante. La mucosa del tubo digestivo presenta

pliegues de dirección y espesor variables, según el segmento considerado.

Las lesiones de la superficie interna pueden ser:

a) Lesiones que protruyen, es decir que se proyectan hacia la luz.

b) Lesiones excavadas.

c) Lesiones a nivel de la superficie.

a) Lesiones que protruyen. Según su conformación pueden encontrarse:

Placa.

Masa vegetante (fungiforme, en forma de coliflor).

Pólipo: sésil (sin tallo o pedículo) o pediculado.

En todos estos casos se deberá mencionar: número, localización topográfica,

distribución (siguiendo algún patrón o al azar), color, consistencia, friabilidad.

b) Lesiones excavadas.

Erosión: pérdida superficial del tejido. Por ejemplo en el tubo digestivo se refiere a

pérdida de sustancia que se extiende hasta la muscular de la mucosa (muscularis

mucosae).

Úlcera: cuando la lesión es de mayor profundidad.

Además, en estos casos: características de bordes, paredes y fondo.

Bordes: Pueden estar a nivel de la superficie o ser prominentes. Ser lisos (en

sacabocado) o mamelonados.

Paredes: Pueden ser lisas, rectas u oblicuas.

Fondo: Limpio o “sucio” (ocupado por sangre, pus, restos necróticos, etc) Además

puede ser liso o mamelonado.

c) Lesiones a nivel de la superficie: En ocasiones, el proceso patológico no modifica el

relieve de la superficie interna, quedando la lesión a nivel de aquella.

4- Cavidad.

Se debe considerar:

Tamaño.

Forma

a) Tamaño: la cavidad puede estar aumentada (dilatada), disminuída o ausente.

b) Forma: conservada o deformada.

c) Contenido: vacía u ocupada en forma parcial o completa. Por ejemplo cálculos,

exudados, coágulos, trombos, parásitos, según el órgano y el proceso patológico en

cuestión.

Órganos macizos En ellos se describe:

Superficie exterior.

Superficie de corte

-Superficie exterior: según el órgano que se considere puede presentar una serosa

visceral y/o una cápsula.

-Superficie de corte: Es importante recordar las características macroscópicas normales

de cada órgano, la configuración del hilio y del pedículo vascular, que podrán

contribuir a la identificación de la pieza.

Las lesiones pueden disponerse en forma focal, multifocal, o difusa y estar

representadas por una modificación de la arquitectura y/o coloración del tejido.

Dichas lesiones pueden ser sólidas y tener distinta configuración morfológica, afectando

a mayor o menor superficie del tejido y adoptando el aspecto de nódulos (de 1cm. o más

de diámetro) o nodulillos (menores de 1cm. de diámetro).

Pueden ser cavitadas, presentando una pared (propia o no) de espesor variable, cuya

superficie interna puede adoptar distintas características, por ejemplo lisa, granular,

anfractuosa, etc. La luz puede estar ocupada total o parcialmente por un contenido de

aspecto variable según la patología que represente.

En todos los casos se debe consignar el número, tamaño, localización topográfica,

distribución (por ej confluente, lobulillar, al azar) coloración y características de los

límites con el tejido sano adyacente.

ÁREA DE PROCESAMIENTO DE TEJIDOS

Es en donde se realiza el proceso de los tejidos; la inclusión; el corte; la desparafinación

de los cortes; la coloración y el montaje de los preparados. Debe contar además con

criostato si el laboratorio ofrece el servicio de consultas intraoperatorias (biopsias por

congelación).

Métodos diagnóstico utilizados en Anatomía Patológica.

La palabra Biopsia, proviene del griego Bios: Vida, Opsis: Ver, es decir la visualización

de un tejido extraído de un organismo vivo, e implica no solo su obtención sino su

análisis microscópico. El origen de la palabra "Biopsie" se sitúa en el año de 1879, al

ser sugerida por el dermatólogo francés Ernest Hemri Besnier; existen antecedentes de

que Virchow, habló sobre los fundamentos de la biopsia y su valor diagnóstico de los

tumores malignos.

Aplicación de las Biopsias

El objetivo fundamental de cualquier biopsia es obtener un diagnóstico

anatomopatológico, que apoye o

corrobore un diagnóstico realizado clínicamente. Pero este no es la única utilidad de

una biopsia, ya que como veremos a continuación, existe una amplia variedad de

aplicaciones de las mismas:

Diagnóstico de lesiones patológicas.

Valoración de la malignidad de tumores, no solo con fines diagnósticos, sino

también para poder realizar un pronóstico y la elección adecuada del

tratamiento.

Reconocimiento o exclusión de metástasis tumorales en cualquier tejido.

Evaluación del resultado de diversas terapias para procesos malignos y no

malignos.

Evaluación del estado de funciones corporales, como lo es el estudio de los

efectos hormonales en el epitelio vaginal.

Tipos de biopsias

La diversidad de técnicas para obtener tejidos para su estudio, mismas que crecen

conforme avanza la ciencia, hacen que las clasificaciones sean artificiosas. Las biopsias

se pueden clasificar basándose en la forma en que se obtuvieron y también según el

instrumento que se utilizó para su obtención. A continuación se presenta, más que una

clasificación, una revisión de las formas de biopsia más comunes que se utilizan en la

actualidad.

Incisional: Es el tipo de biopsia en la que solo se extrae solo uno o varios

fragmentos de la lesión, Solo permitiéndonos realizar el diagnóstico.

Escisional: En este tipo de biopsia, la lesión es removida por completo, con un

anillo periférico de tejido sano y con ello, no solo es un procedimiento

diagnóstico sino terapéutico. La decisión para realizar una u otra, depende del

tamaño de la lesión principalmente y de su accesibilidad.

Biopsia con Sacabocados: En esta se utiliza una pinza para obtener el tejido,

como en el caso de las biopsias de cuello uterino, recto, etc.

Biopsia por Aspiración: Es la extracción o aspiración con una jeringa de

líquidos de cavidades corporales (derrames pleurales, ascitis) o cavidades

tumorales, para el estudio de su contenido celular.

Biopsia por Trepanación: Se utiliza para obtener una porción de hueso o

cartílago, por ejemplo un condroma. Una biopsia por trepanación también es

aquella en la que se realiza un trepano en la bóveda craneal para obtener tejido

cerebral.

Biopsia por Raspado: Cuando se realiza la remoción de elementos superficiales

de un tumor, ya que estos por su proliferación, desprenden fácilmente elementos

celulares.

Biopsia Transoperatoria: Esta es la que se realiza durante una cirugía y es

enviada en forma inmediata al patólogo para su estudio y emitiendo este un

diagnóstico, que permitirá al cirujano tomar una decisión con relación a cómo

continuar con la cirugía. Estos tejidos, son procesados por congelación, por ello

deben enviarse solo cubiertos en un medio húmedo, no se fijan.

Obtención

Aunque cada caso en particular exige lineamientos específicos, es posible marcar reglas

generales para la obtención óptima de un tejido, con la finalidad de lograr un

diagnóstico correcto. En primer término se exponen los lineamientos inherentes a la

técnica misma y en segundo término, a los puntos que es necesario tomar en cuenta

respecto al tejido del que se obtendrá la biopsia.

Con relación a la técnica, en primer lugar, hay que apegarse estrictamente a las

indicaciones para la realización de una biopsia en cada caso en particular. El estrecho

seguimiento de las indicaciones y los objetivos de la muestra misma (diagnóstico,

pronóstico, seguimiento, etc.) hará menor el número de biopsias inadecuadas. Es

fundamental contar con el instrumental adecuado y en buen estado, para poder obtener

una muestra de tejido adecuado para su estudio.

Por más pequeña que vaya a ser la biopsia, no se deben de relajar las medidas de

asepsia, ya que es muy lamentable que un procedimiento menor se complique con una

infección. Además, siempre que la extensión de la lesión extraída lo necesite, hay que

suturar la herida, ya que así cicatrizará mejor.

Se debe hacer una buena exposición de la región de donde se obtendrá la muestra, de tal

forma que se tenga una visión directa del procedimiento para poder hacerlo en forma

adecuada. Nunca hay que olvidar, que el médico no puede estimar, que se causará poco

o mucho dolor al paciente, por lo que siempre hay que ofrecerle una anestesia adecuada

antes de realizar el procedimiento.

Al obtener el tejido, este debe manipularse lo menos posible. Cuando se trata de

tumores, el procedimiento mismo puede desprender émbolos tumorales si es mal

efectuado. Por otra parte, la manipulación excesiva de un tejido, puede dejar a este

inutilizable para su estudio o causar tal distorsión, que los artefactos causen un

diagnóstico incorrecto.

En lo que respecta al tejido en sí, existen reglas

básicas que hay que seguir para obtener una buena biopsia. Algunas de estas

resultan tan obvias, que son frecuentemente ignoradas.

Mientras mayor sea la lesión, hay que considerar si es necesario tomar mayor número

de muestras, debido a la variabilidad de patrones que puede tener el tejido.

En los casos de lesiones ulceradas, la obtención de tejido del centro de la úlcera sólo

mostrará necrosis e inflamación, siendo más ilustrativa aquella biopsia que contiene

tanto tejido patológico como sano, sin embargo no debe ser tan periférica que solo

muestre áreas normales.

La biopsia debe ser lo suficientemente profunda como para que

pueda ser valorada correctamente la relación entre tumor y estroma.

Algunas lesiones profundas se acompañan de intensas reacciones tisulares periféricas

como inflamación, fibrosis, calcificación, formación metaplásica de hueso, etc. de tal

forma que si la biopsia no es lo suficientemente profunda, solo se observará dicha

reacción.

Cuando se obtienen numerosos fragmentos de tejido, todos ellos deben ser enviados

para su estudio microscópico, de preferencia separados e indicando el sitio del que se

obtuvo cada uno. Ya que en el menor y más insignificante de estos pueden encontrarse

los elementos para hacer el diagnóstico.

Preservación

Es frecuente, que el médico al tomar una biopsia, tenga la necesidad de revisar por sí

mismo el aspecto macroscópico del espécimen, en un esfuerzo de encontrar evidencia

que apoye su diagnóstico, llegando

incluso a seccionarlo para observar su estado. Si se decide hacer lo anterior, hay

que realizarlo de tal forma que no se deje inutilizable la muestra para su procesamiento

y su estudio. Esto coincide con el accionar del patólogo, pues hay que recordar que una

parte del diagnóstico de éste, es el análisis macroscópico de la pieza, y en ocasiones la

información de la observación macroscópica de la misma es muy útil para el

diagnóstico. Hay que evitar el excederse en la manipulación del tejido durante su

obtención, su análisis macroscópico y su procesamiento, ya que se puede modificar su

arquitectura macro y microscópica.

En pocas ocasiones, cuando el médico obtiene un tejido, no está preparado con alguna

solución para preservarlo en forma adecuada, enviando el tejido al patólogo solo

sumergido en solución fisiológica y en el peor de los casos en seco en una bolsa

de plástico.

Todos los tejidos que sean obtenidos (con excepción de las biopsias transoperatorias,

que serán sometidas a cortes por congelación), aún cuando vayan a ser enviados de

inmediato para su estudio histopatológico, debe de ser colocados en alguna solución

fijadora.

En forma general, se utiliza como solución fijadora al

Formol al 10%, ya que es barato, de fácil manejo y preparación. La proporción

entre la solución fijadora y el

tejido a preservar, debe ser en forma ideal de 10:1, es decir que debe haber 10 partes de

volumen de la solución para cada parte de volumen del tejido aproximadamente.

Si no es posible respetar esta proporción, cuando menos, hay que buscar que el tejido

permanezca completamente sumergido en la solución fijadora. Aunque el uso de

soluciones fijadoras como el formol, modifica la morfología macroscópica de los tejidos

(cambios en la coloración y consistencia) y excluye la posibilidad de cultivar el tejido

en caso de ser necesario (antes de fijar los tejidos, tomar muestras para cultivo si son

requeridas), pero de cualquier forma es preferible, ya que el no realizar esto, modificará

la morfología del tejido en mayor grado, sometiéndolo además a los procesos de

descomposición, lo que dificultará finalmente el correcto procesamiento e identificación

de la muestra.

Cuando no se cuente con formol para fijar las biopsias, es posible recurrir a otro

tipo de soluciones fijadoras. Entre ellas podemos utilizar una solución alcohólica para

preservar los tejidos. En los casos de biopsias de tejidos delicados como las

de hígado, se utiliza la solución de Bowin.

Cuando la biopsia es una transoperatoria, no hay que olvidar, que se envía al patólogo

solo cubierta de una gasa húmeda, sin ningún tipo de solución fijadora.

Errores y omisiones frecuentes

Muestra Inadecuada: La biopsia puede ser inadecuada para su estudio por

diversas razones: tamaño inadecuado; ser

demasiado periférica a la lesión y contener solo piel, grasa, tejido de

granulación o fibrosis; haber sido tomado en un solo sitio en caso de lesiones

extensas y solo contener tejido normal.

Extravío de la Muestra: Una de las situaciones clínicas más molestas para el

paciente que se ha sometido a un procedimiento

diagnóstico como una biopsia, es el saber que dicha biopsia ha sido perdida.

Por ello el médico debe seguir una conducta bien establecida y formal. La muestra debe

ser enviada inmediatamente al servicio de Anatomía Patológica para su procesamiento.

Rotulación Errónea de la Muestra: Otro error frecuente es, que al rotular la

muestra, se le ponga el nombre de otro paciente, o que se señala que el

tejido proviene de otro sitio del que realmente proviene. Los frascos que

contendrán las biopsias se deben de rotular en forma previa a que se obtengan

las mismas, para evitar este tipo de error.

Mala Fijación de la Muestra: Los tejidos que no son fijados, sufren un proceso

de autólisis y descomposición, procesos que pueden distorsionar la muestra

demasiado y hacer más difícil su estudio. Los líquidos obtenidos de cavidades o

aquellos obtenidos de lavados como los bronquiales, si no es

posible fijarlos, deben de ser enviados lo más pronto posible para su estudio.

Deformaciones de la Muestra: Para evitar esto, no hay que tomar con pinzas

la muestra que se ha obtenido, ni cauterizarla en exceso, como sucede con los

conos cervicales obtenidos con asa diatérmica con voltaje excesivo. El buen

manejo de la muestra, redundará en un estudio microscópico más fácil y

acertado.

CITOLOGÍA EXFOLIATIVA

Aunque con frecuencia muchos médicos olvidan que este es otro tipo de biopsia,

constituye uno de los tipos más utilizados. En ella, se realiza un raspado sobre una

superficie epitelial con la finalidad de obtener elementos celulares del mismo, los que se

extienden en un portaobjetos y son teñidos con la técnica de Papanicolaou para su

estudio. Este es el método de obtención más frecuente y su amplia utilización en el

mundo es principalmente en el tracto genital femenino con el fin de hacer diagnóstico

temprano de cáncer de cérvix.

Extendidos citológicos obtenidos por expresión: La realización de este tipo, requiere

de la aplicación de un masaje, para lograr que el tejido libere material para su estudio.

El mejor ejemplo es la obtención de material de los conductos mamarios a través del

pezón después de un masaje.

Aspirado de líquidos corporales: Este método de obtención de células descamadas de

superficies corporales es muy útil cuando las condiciones del paciente no permiten

realizar un procedimiento quirúrgico, la obtención de líquidos de cavidades

corporales tales como peritoneo, pleura y pericardio se llevan a cabo a través de

aspirado directo de dicho líquido a través de procedimientos como la Paracentesis

(Abdomen); toracocentesis (tórax) y la pericardiocentesis (pericardio).

Extendidos citológicos por examen Directo: Tal es el caso del estudio al que se

someten el esputo y secreciones, siendo teñidas con la técnica de Papanicolaou.

Método de la Esponja: Se pasa o se comprime sobre la lesión una esponja, luego se

enjuaga la esponja con solución y este líquido se centrifuga y se estudia el sedimento

en busca de elementos celulares.

Cepillados y/o raspados endoscópicos: En los tiempos recientes y gracias a los

avances en la tecnología de fibra óptica flexible, ha sido posible acceder al interior de

cavidades corporales que eran de difícil acceso, tales como el árbol bronquial o el tubo

digestivo, sin tener que hacer un procedimiento quirúrgico extenso y mórbido. Con el

perfeccionamiento del endoscopio flexible, se puede con el mismo instrumento

inspeccionar las mucosas y con aditamentos especiales realizar un lavado, cepillado y

aspiración de células exfoliadas de los sitios sospechosos de procesos patológico para su

diagnóstico.

La autopsia, Necropsia o estudio post mortem

Desde la época de los grandes anatomistas, el estudio del cuerpo humano desarrollo los

grandes avances de la Medicina, sin embargo, no es preciso cuando los anatomistas

dejaron de estudiar la Anatomía Normal y se enfocaron más en la Anatomía Patológica.

El término autopsia surge del griego: autos que significa “uno mismo” y opsis: “ver u

observar”, así, una de las frases clásicas de Andreas Vesalius “ver por mi mismo” es

adoptada posteriormente por los Anatomistas para describir el estudio del Cadáver con

fines diagnósticos y para determinar las causas de la muerte.

El estudio Post Mortem también llamado obducción, en la actualidad sufre diferentes

retos en todo el mundo. Ya que con los avances en el diagnóstico clínico,

perfeccionamiento en la tecnología de imágenes y sistemas analíticos, la utilización de

la autopsia ha decaído en número durante los últimos años, respecto de su auge en la

época organicista.

Entonces es así que definimos Autopsia: como el procedimiento médico que emplea la

disección, con el fin de obtener información anatómica sobre la causa, naturaleza,

extensión y complicaciones de la enfermedad que sufrió en vida el sujeto autopsiado.

La palabra necropsia proviene de las voces griegas νεκρóς /nekrós/ 'cadáver' y ὂψις

/òpsis/ 'observar', que significa 'observar un cadáver'.

Es el procedimiento técnico y científico de disección anatómica sistemática de un

animal después de su muerte para dilucidar la causa de la misma. Es igual a un examen

post mórtem (en humanos se le llama autopsia).

La diferencia entre los dos términos es que la necropsia se realiza para confirmar las

causas de la defunción en un Hospital y la autopsia para averiguar las causas cuando

fallecen de forma súbita y sin enfermedad aparente. La palabra necropsia es, en un

sentido mejor aceptada por algunos de los estudiosos porque ésta, etimológicamente

es el estudio de la muerte en un término general; no sólo en animales.

Las razones por las que se realiza una necropsia o autopsia (en humanos) es para saber

causas exactas de muerte del sujeto; desde posibles envenenamientos, padecimientos

que lo aquejaban u otras causas.

Tipos de Autopsia:

Autopsia clínica. Se realiza con fines científicos, para corregir diagnósticos clínicos o

esclarecer casos dudosos, este tipo de autopsia es el que se hace en pacientes

hospitalizados y bajo tratamiento médico.

Autopsia Médico-legal. Se realiza por ley y con fines judiciales, para determinar

responsabilidades. En sujetos cuyas causa de muerte no son claras o precisas, y aún en

pacientes hospitalizados cuyas circunstancias de fallecimiento implique una

responsabilidad jurídica.

Autopsia psicológica: Es la reconstrucción de la vida de la persona fallecida,

enfatizando aspectos como estilo de vida, personalidad, estrés reciente, enfermedad

mental y comunicación de ideas de muerte, a través de información recogida mediante

la entrevista a personas allegadas y la revisión de documentos

Autopsia histórica: Es la investigación médico-legal de las causas y las circunstancias

de una muerte con interés histórico, que se sustenta en la interpretación crítica,

armónica, jerarquizada y objetiva del conjunto de la información aportada por

documentos y testimonios, cuando no se tuvo acceso directo al cadáver o a los restos

óseos

LA TÉCNICA HISTOLÓGICA

Con el perfeccionamiento de los instrumentos de microscopía en el siglo XVI y el

apogeo de la época tisular como herramienta para el diagnóstico de las enfermedades, se

hizo presente también la necesidad de perfeccionar la técnica en la preservación y

proceso de los tejidos a examinar.

En este apunte se revisaran en forma breve cuales son los principales pasos que

conforman el proceso histológico para el corte de tejidos y su tinción para ser

observables al microscopio. La técnica que usualmente se utiliza es la de cortes por

parafina y que a continuación se describe.

FIJACIÓN

Uno de los pasos más importantes de la técnica histológica lo es sin duda el de la

fijación de los tejidos, el cual lleva como principal objetivo el evitar la descomposición

natural de los mismos.

El formaldehído, también conocido como Formol, o ácido fórmico, es el agente fijador

por excelencia, ya que sus características los sitúan como la primera elección dentro de

los reactivos de su género. El formol actúa sobre los tejidos básicamente evitando la

desnaturalización de las proteínas, además de un poder indurante sobre los tejidos.

Siempre se utiliza a una concentración baja a diluciones que van del 5% hasta el 20%

dependiendo de las necesidades y características de los tejidos a fijar, la dilución más

utilizada y estándar es al 10%.

El procedimiento es por demás simple, el tejido debe de colocarse en un frasco,

preferentemente de vidrio y de boca ancha, ya que en algunas ocasiones, se utilizan

frascos de boca angosta , que cuando se deposita el tejido este entra con facilidad pero

una vez fijado, este endurece y no puede salir, lo que obliga a romper el mismo,

corriéndose el riesgo de accidentes para el patólogo y maltrato para la muestra, incluso

alguno de los fragmentos de vidrio roto pueden quedar entremezclados con el tejido y al

momento de ser cortados al micrótomo estos pueden dañar la cuchilla y artefactar al

tejido, dañando su observación.

El alcohol es otra agente fijador de uso común, sin embargo comparado contra formol,

este agente fijador endurece los tejidos Existen además otros agentes que se preparan

con distintas sustancias incluido el formol y se les denominan fijadores compuestos

tales como Fijador de Zenker, Bowin y el líquido de Carnoy. Cuando se realiza técnica

para microscopía electrónica se fijan en tetraóxido de osmio glutaraldehído. Y para

realizar técnicas de inmunofluorescencia el tejido no se fija usualmente ya que se hacen

cortes por congelación.

Otra de las excepciones de usar agentes fijadores es el estudio transoperatorio, ya que el

tejido tendrá que ser cortado por congelación y deberá de ser enviado al laboratorio de

patología en fresco para poder ser procesado con esta técnica.

DESHIDRATACIÓN

Para poder comprender el porqué de este paso es necesario recordar que el 70% de la

célula es agua, por lo que es preciso sustituir esta con una agente deshidratante

Una vez fijados los tejidos estos inician su procesamiento con la deshidratación del tejido, este

procedimiento se realiza con varios cambios del tejido en alcoholes de distintas concentraciones

que van desde diluciones al 80% hasta llegar al alcohol absoluto o anhidro de 100° GL

(grados Gay Lussac) usualmente este proceso se lleva entre 4 y 6 horas. Además del

alcohol se utiliza en algunas ocasiones acetona como agente deshidratante, con la

desventaja que la utilización de la misma hace que el tejido se torne quebradizo o que

deforme la arquitectura tisular por contracción violenta de las células sometidas a este

tipo de deshidratación

ACLARAMIENTO

Este paso del proceso de tejidos implica que una vez que hemos sustituido el agua

intracelular con alcohol este a su vez deberá de ser substituido por un solvente orgánico,

con el objeto de que posteriormente pueda ser impregnado con parafina.

Los agentes que se utilizan son principalmente tres el benceno, el xileno y el tolueno,

los cuales tienen dos propiedades fundamentales, sustituir el alcohol intracelular y

aclarar el tejido, esto es, que durante este paso el tejido se torna transparente en su

totalidad, lo que indica que el tejido estará listo para ser impregnado con parafina. El

tiempo usual de este paso es de 2 a 3 horas.

Otro agente aclarador además de los mencionados es el cloroformo, el cual ha caído en

desuso debido a su toxicidad.

IMPREGNACIÓN

Una vez que el tejido ha sido aclarado deberá entrar en las etapas finales del proceso, y

es cuando el contenido intra y extracelular es impregnado con parafina, la cual deberá

de permanecer en su punto de fusión que comprende el rango de entre 58 a 65 grados

centígrados, y debe de impregnarse aproximadamente entre1 a 3 horas.

En la actualidad también suelen usarse algunas parafinas plásticas y polímeros, que

mejoran en mucho la calidad en el corte de los tejidos.

INCLUSIÓN

Para poder hacer manejable el tejido este debe de ser incluido en un bloque de parafina

para poder ser cortado con el micrótomo, para ello se utilizan por lo general moldes de

aluminio o acero en donde se orienta la posición del tejido para ser cortado de acuerdo a

las necesidades diagnósticas, tratando de abarcar la mayor cantidad de tejidos en dicha

orientación.

CORTE

La microtomía es uno de los pasos importantes en el proceso, ya que de su precisión

depende que las imágenes obtenidas del espécimen examinado.

El grosor de las secciones histológicas van desde 1 hasta 50 micras, siendo el grosor

estándar utilizado en microscopía de luz 5 micras.

En el caso de la técnica para microscopía electrónica se utiliza la llamada

ultramicrotomía, en donde el grosor de los tejidos se corta en Amstrongs. Y el proceso

de inclusión en lugar de hacer en parafina se hace en resina epoxica.

Una vez que se realiza el corte con el micrótomo, de ahí se obtiene una fina banda

continua que contiene los cortes, los cuales para evitar que permanezcan con arrugas, se

flotan en un baño de agua tibia y se extienden cuidadosamente, además de que ahí se

selección visualmente las mejores muestras y se descartan las que han sido

artefactadas o están mal cortadas. Una vez hecha la selección del corte se toma un

portaobjetos y cuidadosamente se “pescan” y se auto adhieren al mismo. Se colocan en

una canastilla porta especímenes y se dejan secar por unos minutos.

En algunas ocasiones para garantizar que el tejido no se vaya a desprender del

portaobjetos se le agrega a este una fina película de albúmina de Meyer como adhesivo.

Para los casos de cortes por congelación se cuenta con el Criostato, que

fundamentalmente es un micrótomo convencional dentro de una cámara congelada, que

alcanza temperaturas de corte de menos 30 grados centígrados, a fin de poder congelar

en un par de minutos un tejido en fresco y así posibilitar un corte rápido.

TINCIÓN

Una vez que los cortes se han adherido perfectamente al portaobjetos, se deben de teñir,

a fin de contrastar las distintas estructuras propias de los tejidos como los son los

núcleos, los citoplasmas, las substancia intercelular, las fibras de la matriz extracelular

entre otras estructuras.

La técnica estándar utilizada para la tinción de tejidos es la de Hematoxilina y Eosina, la

cual se encuentra ampliamente difundida en todo el mundo. Los resultados de este método

son los siguientes, los citoplasmas de las células se tiñen usualmente de un color rosa en varias

tonalidades que se denominan como eosinófilas, mientras que los núcleos y algunas fibras se

tiñen de tonalidades moradas o púrpuras, incluso alguna de color azul oscuro, denominándose

basófilas por esta característica.

Finalmente una vez teñido el tejido, para mejorar sus índices de refracción se debe de

hacer un montaje del espécimen, utilizándose para ello un cubreobjetos y como

medio de refracción una resina sintética o también bálsamo del Canadá.

Es importante señalar que es prudente esperar un tiempo perentorio de cuando menos

una hora para que esta resina seque y así no derramar resina sobre la platina del

microscopio y así evitar arruinar los carros de deslizamiento de la platina.

(Castañeda, 2015)

FUENTE DE CONSULTA:

~ALBACETE, U; Obtenido de:

http://www.chospab.es/publicaciones/protocolosEnfermeria/documentos/5cad810c4f84

9a5f3c62e56635f32c01.pdf

~CASTAÑEDA, a. (30 de 07 de 2015). DocSlide. Recuperado el 19 de 04 de 2018, de

DocSlide:

http://myslide.es/documents/metodos-de-estudio-de-la-patologia.html

ANEXO:

INFORME DEL JEFE DE GRUPO

ESTUDIANTE % TRABAJO REALIZADO

María Guamán 100%

Irene Lara 100%

Nuestro grupo está integrado por la srta. Estudiante Sandy Morales, quien al no haber

solucionado la legalización de la matrícula no realizó el presente trabajo, aportando el

0% de ayuda.

El trabajo se logró culminar con eficacia al haber dispuesto el empeño necesario por

parte de las dos integrantes restantes del grupo.