Genética Bacteriana y Mecanismos de la Transferencia ... · Genética Bacteriana y Mecanismos de...
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Genética Bacteriana y Mecanismos de la
Transferencia Horizontal Genética
Dra Daniela CentrónDepartamento de Microbiología, Parasitología e Inmunología, Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires.
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PARTE 1
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Objetivos
• Conocer los elementos del genoma bacteriano
• Comprender la dinámica de los Mecanismosinvolucrados en la Transferencia HorizontalGenética y la Pato-adaptación
Qué son las bacterias? Como es el genoma bacteriano? Como se reproducen las bacterias?
Cómo comparten la información genética?
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http://www.bren.ucsb.edu/academics/courses/253/Lectures/ESM253_Bacteria.pdf
¿Cómo definimos a las
bacterias?
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Historia de la vida sobre la Tierra
Primeras
formaciones
rocosas
Primeros
procariotas
El oxígeno libre empieza
a acumularse
Primeros
eucariotas
Primeros
organismos
multicelulares
Primeros
animales
Invasión de
plantas
Primeras flores
Primeros
humanos
(11:59::40 PM)
FORMACIÓN DE
LA TIERRA
Billone
s de
años
atrás
Primeras
formaciones
rocosas
Primeros
procariotas
El oxígeno libre empieza
a acumularse
Primeros
eucariotas
Primeros
organismos
multicelulares
Primeros
animales
Invasión de
plantas
Primeras flores
Primeros
humanos
(11:59::40 PM)
FORMACIÓN DE
LA TIERRAMicrobiota: Nuevo órgano
metabólico
• nutrición,
• desarrollo y crecimiento,
• regulación de la inmunidad,
del sistema endocrino y de
la inflamación sistémica.
• Ej:Producción de Vitamina K
y algunas del Complejo B.
• 10 veces más bacterias
que células propias.
• viven 100 billones de
bacterias en el intestino.
• 1000 tipos distintos de
especies.
• más de 7.000 cepas
diferentes.
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Evolución de las formas de vida: los tres dominios propuestos por Karl Woese. Árbol filogenético obtenido
por secuenciación de ARN ribosomal.
Bacteria EukaryaArchea
Hongos
Plantas
Bacteriasverdes nosulfurosas
Cianobacterias
Thermotogales
Flavobacterias
BacteriasGram
Positivas
DiplomónadasMicrosporidios
Tricomónadas
Flagelados
Ciliados
Hongosmucosos
Animales
Halófilas
Entamebas
MethanosarcinaMethanobacterium
Methanococcus Thermoproteus
PyrodictiumProteobacterias
Thermococcus
LUCA(Last Universal Common Ancestor)
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ELEMENTOS DEL GENOMA BACTERIANO
• Cromosoma/s • Plásmidos• Bacteriófagos• Elementos móviles
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I-Cromosoma Bacteriano
• ADN doble cadena (1mm long), 1 cromosoma• Circular • Condensado (“supercoiled” o superenrollado)• Haploide• De 1000 a 6000 kilobases. La bacteria más pequeña tiene
140.000 pares de bases (Carsonella ruddii)
ESTRUCTURA TERCIARIA
Las principales funciones del cromosoma bacteriano son: la replicación y la expresión de los genes.
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Algunas especies tienen dos y tres cromosomas
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REGIONREGULATORIA
Codón de iniciación Codón de terminación
La unidad funcional del cromosoma es el gen
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Es un segmento de ADN/ARN que codificadirectamente moléculas de productos funcionales,ya sea ARN o proteína. En ausencia de una funcióndemostrable, un gen puede ser caracterizado porsecuencia, transcripción u homología.
Human Gene Nomenclature Committee
¿Qué es un gen?
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En Procariotas.....
Los genes se hallan ordenados en Operones. La transcripción es policistrónica (ARNm de varios genes).
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II-Plásmidos
Portan información que ayuda a la bacteria a adaptarse al medio circundante y a su evolución. Forman
parte del “moviloma”.
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Funciones de los plásmidos
Confieren una característica que la bacteria receptora NO poseía.
E. coli enteropatógena
E. coli enterotoxigénica
E. coli enteroinvasiva
E. coli comensal
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Plásmidos de relevanciaasociados a virulencia
operón gerX relacionado con el proceso de germinación
de las esporas.
182 kb
cápsula
Factor edema
Factor letal
Antígenoprotectivo
Factores de Virulencia
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Plásmidos de relevanciaasociados a virulencia
operón gerX relacionado con el proceso de germinación
de las esporas.
182 kb
cápsula
Factor edema
Factor letal
Antígenoprotectivo
Factores de Virulencia
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III-Bacteriófagos
Son los virus que infectan a las bacterias, y cumplen
un ciclo de multiplicación dentro de la célula bacteriana
pudiendo conducir a la lisis de la misma.
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Ciclo Lítico
El fago se considera que está en estado
de “profago”.
Ciclo Lisogénico
El fago se replicay produce la
lisis bacteriana.
Bacteriófagos
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Algún gen del bacteriófago puede expresarse y dar una característica especial a la
célula hospedadora.
Ej.: Fago T12 que lisogeniza cepas de S. pyogenes y produce la escarlatina
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Bacteria Fago Gen/es Fenotipo
Vibrio cholerae Fago CTX toxina colérica Cólera
Escherichia coli Fago lambda toxina shigalikeSíndrome Urémico Hemolítico-Diarrea
Clostridium botulinum Fago clostridial toxina botulínica Botulismo
Corynebacteriumdiphtheriae
Fago Beta toxina diftérica Difteria
Streptococcus pyogenes Fago T12toxinas
eritrogénicasEscarlatina
En la bacteria lisogenizada, algún gen del profago puede expresarse y dar una
característica especial a la célula hospedadora.
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IV-Elementos Móviles Del Genoma Bacteriano
• Secuencias de Inserción o Elementos IS • Transposones simples • Transposones compuestos • Transposones conjugativos• Islas genómicas• Sistema Integrón/cassettes
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Transposones
1er Transposón identificado en el maíz
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Transposones bacterianos
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Los transposones son los
elementos más abundantes
en la naturaleza
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Funciones del ADN Móvil• expresión de genes
• sobre-expresión de genes
• deleción de genes
• disrupción de genes
• modulación de la expresión
duplicación/acumulación de genes
• movilización de genes
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Qué es un transposón?
TransposónTransposón
Transposón
Blanco
Dador
Transposición
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Qué es un transposón?
TransposónTransposón
Transposón
Blanco
Dador
Transposición
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ADN BlancoTransposición
Secuencias de Inserción o Elementos IS
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intI2 dfrA1 sat2 aadA1 orfX tnsE tnsD tnsC tnsB tnsA
RUTAS DE TRANSPOSICIÓN
PLÁSMIDOS CROMOSOMA
Transposones simples
Tn7
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FRAGMENTO DE ADN RODEADO DE
DOS SECUENCIAS DE INSERCIÓN (ISs)
aac(3)-IIa
Transposones compuestos
IS140IS140Resistencia a
gentamicina IS140IS140 IS140
IR tnpA IR IR tnpA IR
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Transposones conjugativos
Se transfieren de una bacteria a otra y se insertan en el cromosoma. Son el paradigma de las llamadas islas genómicas
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Islas genómicas o alienígenas, localizadas en cromosoma o plásmidos
Poseen un porcentaje G+C diferente al resto del genoma bacteriano
Isla Genómica
(Hacker and Carniel, 2001)
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Isla de Patogenicidad de Escherichiacoli enteropatógena, produce borrado de microvellosidades
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Isla de Patogenicidad de Clostridiumdifficile, producen la colitis
pseudomebranosa
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Ingeniería genética in vivo
Pc
attI
(Stokes and Hall, 1989)
Sistema Integrón/Cassettes
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Sistema Integrón/Cassettes
Pc
attI
intI
Pc
attI
intI
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Sistema Integrón/Cassettes
17% de los genomas poseen un gen de integrasa
(de un total de 1189 genomas, 2010)
Pc
attIintI
2343 cassettes diferentes en 50 m2 de superficie de suelo
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Sistema Integrón/Cassettes
Vibrio cholerae
SI
La mayoría como gen ubicuo, dentro de una especie
Integrones ubicados en elementos móviles yde relevancia clínica
intI2 dfrA1 sat2 aadA1 orfX ybfA ybfB ybgA tnsE tnsD tnsC tnsB tnsA
attI2
intI1 aac(6´)-Ib blaOXA-2 orfD qacEΔ1 sul1 orf5
attI1
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Resistencia a ß-lactámicos 34 cassettesResistencia a aminoglicósidos 38 cassettesResistencia a cloranfenicol 12 cassettesResistencia a trimetoprima 13 cassettesResistencia a estreptotricina 2 cassettesResistencia a rifampicina 3 cassettesResistencia a eritromicina 2 cassettesResistencia a fluoroquinolonas 2 cassettesResistencia a antisépticos 5 cassettes
Más de 130 diferentes cassettesde resistencia a antibióticos
(Partridge y col., 2009)
Cantidad de genes cassettes de resistencia a antibióticos identificados a lo largo del tiempo
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Dónde se localizan los integrones?
TRANSPOSONES
Tn21
Tn21IRtnp
tnpA tnpR res merD merA merP merR
merE merC merTTn21
IRmer
intI1
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“El MOVILOMA”ELEMENTO TAMAÑO ENZIMA CARACTERÍSTICAS
Islas de patogenicidad
y de resistencia
Profagos
Transposonesconjugativos
Superintegrones
Transposonesen mosaico
Transposonescompuestos
Secuencias de Inserción
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FIN PARTE 1