Informe de validación del método analítico para la determinación del ensayo (contenido) de Cloruros en

producto cárnico según AOAC método volumétrico 935.47, en un rango entre

0.58 y 3.51 % NaCl.

Mol Labs Ltda. – Febrero de 2011 Calle 75 No. 85 - 36, Bogotá D. C

Tabla de Contenido

Contenido 1 Resumen .................................................................................................................................. 3

2 Introducción .............................................................................................................................. 4

2.1 Descripción del procedimiento analítico a validar .............................................................. 4

3 Materiales, equipos, reactivos y procedimiento de validación ................................................. 4

4 Verificación experimental del sistema analítico ........................................................................ 5

4.1 Veracidad .......................................................................................................................... 5

4.2 Repetibilidad ..................................................................................................................... 6

5 Precisión intermedia ................................................................................................................. 6

5.1 Medida de la precisión intermedia ..................................................................................... 6

5.2 Grafico de control. Verificación y aceptación de resultados ............................................... 7

5.3 Competencia de analistas ................................................................................................. 8

6 Conclusiones ............................................................................................................................ 8

7 Bibliografía ............................................................................................................................... 9

8 Archivos ................................................................................................................................... 9

Productos y servicios para laboratorios · Validación de métodos analíticos · Ejercicios interlaboratorios

1 Resumen

2 Introducción Este informe presenta la validación del método analítico para Cloruros en producto cárnico: ensayo (contenido) según AOAC 935.47, realizado en Mol Labs Ltda. Al efecto, se utilizó el concepto de validar con rectas, desarrollado por Mol Labs Ltda. (1), respetando las indicaciones de la AOAC. A continuación se describe como se confirma, en el orden del índice y mediante experimentos, que el laboratorio es competente para la ejecución del análisis propuesto.

2.1 Descripción del procedimiento analítico a validar

De acuerdo con la AOAC, el ensayo (contenido) de cloruros en producto cárnico. El método analítico 935.47 corresponde a una volumetría. Las condiciones fundamentales definidas son:

Método

AOAC 935.47 para determinar cloruros en producto cárnico

Equipo

Bureta digital

Titulante Tiocianato de amonio 0,1 N Indicador Indicador férrico

El procedimiento se traduce de la AOAC, con la mayor fidelidad posible, así: Pesar entre 2,5 - 3,0 g de muestra en un erlenmeyer de 250 mL y colocar un exceso de AgNO3 0,1 N (25 mL). Agregar 10 mL de HNO3 y colocar a ebullición hasta que la carne se disuelva. Adicionar Solución de KMnO4 al 5% en pequeñas porciones (Aprox. 1 mL). Colocar en ebullición después de cada adición hasta que el color del KMnO4 desaparezca. Adicionar 25 mL de agua y colocar a ebullición por 5 min. Enfriar y titular con NH4SCN 0,1 N hasta que en la solución persista un color café claro.

% NaCl =

[(mL AgNO3 x N AgNO3) - (mL NH4SCN x NNH4SCN )]x 5,844

Peso de muestra (g)

3 Materiales, equipos, reactivos y procedimiento de validación Bajo la consideración que los materiales, equipos, reactivos y procedimiento de validación hacen parte de los experimentos, las correspondientes descripciones se incorporaron en un libro de trabajo en hojas de cálculo de Excel anexo: LTVPrCloruros, que llega hasta la simulación de los experimentos y los cálculos mediante formulas relacionadas. Para asegurar la trazabilidad analítica se utilizó un material de Mol IMLA0405, y para la trazabilidad experimental se incluye la identificación de materiales y equipos, cuyos archivos propios incluyen los datos de calibración, que se declaran actuales. El libro de trabajo, a cargo del analista líder, fue revisado, verificadas las trazabilidades y los cálculos, hasta ser aprobado por la química residente del laboratorio. Tras la

aprobación se hizo una copia del libro, a ser utilizada para registrar los datos reales de los experimentos y el libro del procedimiento fue protegido contra modificaciones y archivado con firma electrónica de ambos analistas.

4 Verificación experimental del sistema analítico

En la verificación del sistema se construyo un protocolo de trabajo establecido, que se inicio definiendo la normatividad, las variables volumétricas, las condiciones para la realización del análisis y efectuando un presupuesto de los resultados esperados, incluyendo la concentración de las soluciones, la veracidad, la repetibilidad y la precisión intermedia. En un segundo paso es ejecutado la veracidad por parte de un analista, utilizando un rango de siete puntos en concentraciones de 0.5 % a 3.5 %, empleando material de referencia de cloruros. Posteriormente se procede a realizar la determinación de la repetibilidad con base en los datos de la curva de veracidad. Para finalizar, se procede a asignar a dos analistas diferentes de forma aleatoria dos concentraciones para replicar en dos días, con el fin de determinar la precisión intermedia. Lo anterior aceptado y protegido por el químico residente, quien cierra el archivo anexo LTVPr Cloruros.xlsx

4.1 Veracidad

Bajo las siguientes condiciones,

Método

AOAC 935.47 para determinar cloruros en producto cárnico

Equipo

Bureta digital

Titulante Tiocianato de amonio 0,1 N Indicador Indicador férrico

Los registros de la secuencia experimental y gráficos hacen parte de los archivos LTVEx Cloruros.xlsx anexo a éste informe. El grafico de residuales índica la relación que existe ente los datos teóricos y los experimentales. Se evidencia una distribución de error al azar con una población positiva de 3 datos y una negativa de 4 datos, en los cuales no se percibe una tendencia marcada permitiendo entrever que la curva es constante para el rango de concentraciones estimado.

El porcentaje medio determinado de concentración utilizando relaciones entre los valores teóricos y los experimentales, los cuales también permiten obtener una desviación estándar de las medidas en todo el rango y por consiguiente convirtiéndose en una medida de la incertidumbre en la determinación. El correspondiente valor obtenido de 2.02 +/- 0.02 % debe interpretarse como la propiedad que define por completo la veracidad del método.

4.2 Repetibilidad Bajo las siguientes condiciones,

Método

AOAC 935.47 para determinar cloruros en producto cárnico

Equipo

Bureta digital

Titulante Tiocianato de amonio 0,1 N Indicador Indicador férrico

Los registros de la secuencia experimental y gráficos hacen parte de los archivos LTVExCloruros.xlsx anexo a éste informe. El grafico de residuales índica la relación que existe ente los datos teóricos y los experimentales. Se evidencia una distribución de error al azar con una población positiva de 4 datos y una negativa de 3 datos, en los cuales no se percibe una tendencia marcada permitiendo entrever que la curva es constante para el rango de concentraciones estimado.

5 Precisión intermedia En la determinación de la precisión intermedia se conto con la participación de un analista experimentado y un analista en formación, a los cuales se les asigno, utilizando la formula aleatoria de Excel, dos concentraciones distintas en el rango estimado de Repetibilidad para duplicar en dos días diferentes. Lo anterior procurando asociar que tan estable es el comportamiento del método de un analista a otro, bajo las condiciones estimadas de trabajo y utilizando los recursos tanto volumétricos como gravimétricos con los que se contaban.

5.1 Medida de la precisión intermedia Bajo las siguientes condiciones,

Método

AOAC 935.47 para determinar cloruros en producto cárnico

Equipo

Bureta digital

Titulante Tiocianato de amonio 0,1 N Indicador Indicador férrico

Los registros de la secuencia experimental y gráficos hacen parte de los archivos LTVExCloruros.xlsx anexo a éste informe. El grafico de residuales índica la relación que existe ente los datos teóricos y los experimentales. Se evidencia una distribución de error al azar con una población positiva de 2 datos y una negativa de 6 datos en el primer y segundo días de análisis en los cuales no se percibe una tendencia marcada permitiendo entrever que la curva es constante para el rango de concentraciones estimado.

El porcentaje medio determinado de concentración utilizando relaciones entre los valores teóricos y los experimentales, los cuales también permiten obtener una desviación estándar de las medidas en todo el rango y por consiguiente convirtiéndose en una medida de la incertidumbre en la determinación. El correspondiente valor obtenido de 0.5 a 3.5 % +/- 0.05 % debe interpretarse como la propiedad que define por completo la reproducibilidad del método.

5.2 Grafico de control. Verificación y aceptación de resultados Los datos obtenidos a lo largo del procedimiento de validación permiten un gráfico de control construido con los residuales de todos los datos respecto de la ecuación de la recta resultado de la precisión intermedia.

En el primer grupo de datos, los de veracidad, indican que el sistema analítico es el correcto para la determinación según la referencia AOAC 935.47. El segundo grupo, los datos de repetibilidad, que indican, tal como se espera, que la medida del analista líder en un único día tiene menor variabilidad que la de la precisión intermedia. A continuación, los datos de precisión intermedia, con los cuales se construye el gráfico de control, permiten asumir que a esos datos corresponde la mayor dispersión, tal como en efecto se aprecia en la figura. El gráfico de control verifica que todos los datos obtenidos caen dentro de la variabilidad máxima prevista para la precisión intermedia, y permite la aceptación integral de los datos de validación.

5.3 Competencia de analistas En la figura se puede apreciar que los datos de precisión intermedia caen todos dentro de las tres desviaciones estándar respecto del analista líder. Este resultado permite declarar la competencia para el análisis por parte de Milena Rodriguez y Mauricio Caicedo.

6 Conclusiones Validación del ensayo (contenido) de Cloruros en producto cárnico según AOAC método 935.47. Las conclusiones responden al informe completo, los libros de trabajo LTVPrCloruros y LTVExCloruros. Metodología: Validación con rectas

7 Bibliografía (1) Mol Labs, “Validar con rectas”, 2010. (2) AOAC, Method volumetric 935.47. (3) VAM calibration curves

8 Archivos

Los archivos que integran este informe, protegidos cada uno mediante código, se encuentran en la carpeta LT Validaciones, a su vez protegida con código, bajo la responsabilidad de Milena Rodriguez. Son los siguientes: 1. Info Cloruros.docx (éste documento) 2. LTVPr Cloruros.xlsx 3. LTVEx Cloruros.xlsx