Contiene I, Bi y K; el bismuto forma compuestos de coordinación con el nitrógeno de los alcaloides, los complejos formados precipitan.

∙Concentrar a presión reducida.∙Disolver el extracto con 30 mL de CH2Cl2

Fase OrgánicaFase Acuosa

Agregar NH4OH concentrado, llevar a

pH= 10

Proceso de Reparto3x100 mL CH2Cl2

Fase Acuosa

Fase Orgánica

Juntar las fases orgánicas

Desechar

DesecharSecar con Na2SO4

Concentrar a Presión Reducida

Crudo Alcaloideo

Identificación Cromatográfica del Crudo

Alcaloide

Proceso de Reparto3x30 mL HCl 1 N

Material VegetalTratado previamente con KOH

Cromatografía en Capa Fina con soporte de gel de Sílice, usando como referencias Atropina y Escopolamina y eluído con CHCl3-MeOH-NH4OH (9:1:1)

Revelar conReactivo de Dragendorff

UNAM, FQ, FarmacognosiaEquipo 1

OBTENCIÓN DEL CRUDO ALCALOIDEO A PARTIR DE LA ESPECIE Datura stramonium

Residuo Sólido Residuo Líquido

∙ Triturar∙Macerar en 500 mL de CH2Cl2 por 7 días∙Decantar

Se trató el material vegetal con potasa porque los alcaloides en el vegetal no están en forma neutra, sino como sales de ácido, haciendo solubles los alcaloides en fase orgánica

Usando HCl para el proceso de reparto, los alcaloides se protonan y son solubles en agua.

Al usar NH4OH se desprotona el alcaloide, haciéndolo de naturaleza neutra y soluble en solventes orgánicos.

El método de extracción usado en la práctica fue la maceración. La maceración consiste en dejar en contacto el material vegetal con un disolvente por un tiempo determinado y a temperatura ambiente, para que el disolvente penetre bien la estructura celular y disuelva los principios solubles. La operación debe repetirse hasta agotar principios solubles. El procedimiento es muy usado para extraer aquellas materias primas que posean poca estructura celular. El método tiene como desventaja que se prolonga el tiempo de extracción y requiere grandes cantidades de disolvente. En la experimentación se usaron 500 mL de diclorometano como disolvente y la extracción tardó 7 días.El toloache es conocido entre las etnias que habitan el territorio mexicano como una especie peligrosa; debe aclararse que el término “toloache” es usado indistintamente en las diferentes especies del género Datura, las más conocidas son: Datura stramonium, Datura inoxia y Datura lanosa.El uso etnobotánico en México es para tratamiento de dolor de huesos, reumas, artritis (en solución hidroalcohólica o en ungüentos) y sirve también para mitigar dolores en vísperas del parto.

En la práctica el objetivo fue obtener el crudo de alcaloides a partir del extracto orgánico de las partes aéreas de Datura stramonium, aplicando un proceso de reparto ácido-base. También se estableció la identidad de los componentes mayoritarios presentes en el crudo alcaloideo (atropina y escopolamina) mediante la prueba de de Vitali Morin y por comparación de propiedades cromatográficas.

ANÁLISIS DE RESULTADOS

DATOSEl peso de frutos, semillas, hojas y tallos de Datura stramonium utilizado para la obtención del crudo alcaloide fue de 100.061 g.

Se realizó un ensayo de identidad de la planta, mediante la reacción de Vitali Morin, que identifica alcaloides del tipo atropina. La reacción consiste en la nitración de los alcaloides con ácido nítrico fumante, se forma una coloración en presencia de hidróxido de potasio con los derivados nitrados en solución alcohólica, la presencia de acetona estabiliza la coloración. Para el experimento se usó 1 g de muestra vegetal (500 mg tallo y hojas y 500 mg de semillas), la muestra fue tratada con H2SO4 0.1 N, se filtró y se agregó NH4OH concentrado y agua, también se adicionó éter y se llevó a agitación. Se evaporó la fase etérea, al residuo obtenido se le agregó HNO3 fumante y se evaporó a sequedad. Se agregó acetona e KOH al 3%. Hubo coloración violeta, ya que hubo formación de azaoxonol, siendo la prueba a alcaloide de tipo tropánico positiva.

El mecanismo general de la reacción de Vitali Morin es:

En la identificación del extracto alcaloideo obtenido, se contrastó por medio de una cromatografía en capa fina el contenido de los principales alcaloides producidos por Datura stramonium (Atropina y Escopolamina). El sistema cromatográfico se eluyó con la mezcla CHCl3-MeOH-NH4OH (9:1:1), terminada la elución se llevó la placa a luz UV y se procedió a revelar con reactivo de Dragendorff, que es un revelador específico en compuestos nitrogenados. La cromatoplaca obtenida después del revelado fue:

del= 4.2 cm

des= 0.8 cm

dat= 0.3 cm

El Factor de Retención (Rf) la atropina se calculó con los datos de la distancia recorrida por la muestra (dat) y la distancia recorrida por el eluyente (del):

Factor de Retenciónat=Distancia recorrida por lamuestra [cm ]Distanciarecorrida por el eluyente [cm ]

=0.3cm4.2cm

=0.07

El Factor de Retención (Rf) de escopolamina se calculó con los datos de la distancia recorrida por la muestra (des) y la distancia recorrida por el eluyente (del):

Factor de Retenciónes=Distancia recorrida por lamuestra [cm ]Distanciarecorrida por el eluyente [cm ]

=0.8cm4.2cm

=0.19

Con los datos anteriores se entiende que la atropina es más polar quela escopolamina, puesto que posee menor valor de retención. En la zona de franjas del extracto alcaloideo las marcas de las franjas estuvieron a la altura de los estándares de escopolamina y atropina, es decir que el material vegetal con el cual se trabajó en laboratorio contenía estos compuestos alcaloideos mayoritarios. Existieron otras franjas que no coinciden con los componentes mayoritarios, puesto que son compuestos de tipo alcaloideo diferentes a los dos estándares utilizados, por su acomodo en la placa se intuye que son menos polares que la atropina y algunos otros más polares que la escopolamina.

CONCLUSIÓN

Mediante la maceración se elaboró un extracto de la parte aérea de Datura stramonium, del cual se obtuvo un crudo alcaloideo mediante un proceso de partición ácido-base. Se pudo establecer la identidad del material vegetal mediante el resultado positivo a la Reacción de Vitali Morin, usando también la cromatografía en capa delgada con los estándares alcaloideos derivados del tropano: atropina y escopolamina.

REFERENCIAS

http://enes.unam.mx/?lang=es_MX&cat=medicina&pl=toloache-planta-poco-conocida-en-mexico 04 OCT 2013

http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=toloache 04 OCT 2013