Tener y mantener los mtodos necesarios para el diagnostico microbiolgico en infecciones urinarias.Conocer las condiciones adecuadas para la toma y transporte de la muestra de orina.Sembrado adecuado. ( segn mtodos)Cuantificar la carga bacteriana.Identificacin de los microorganismos aislados.Sensibilidad o susceptibilidad al antibitico segn el germen aislado.Analizar y reportar los resultados.

Son de las enfermedades ms frecuentes, en particular en mujeres. Su prevalencia es dependiente de la edad y el gnero. Se calcula que 20% o ms de la poblacin femenina sufre alguna forma de ITU en su vida.La infeccin en la poblacin masculina (crecimiento de la prstata)

La orina se forma bsicamente a travs de tres procesos que se desarrollan en losnefronas. Los tres procesos bsicos de formacin de orina son:

FiltracinEs un proceso que permite el paso de lquido desde el glomrulo hacia la cpsula de Bowman por la diferencia de presin sangunea que hay entre ambas zonas.ReabsorcinMuchos de los componentes del plasma que son filtrados en el glomrulo, regresan de nuevo a la sangre. Es el proceso mediante el cual las sustancias pasan desde el interior del tbulo renal hacia los capilares peritubulares, es decir, hacia la sangre. SecrecinUna vez formada la orina en los glomrulos, discurre por los tbulos hasta llegar a la pelvis renal, desde donde pasa al urter y llega a la vejiga, lugar donde es almacenada. Cuando el volumen supera los 250-500 cm, sentimos la necesidad de orinar debido a las contracciones y relajaciones del esfnter, que despierta el reflejo de la miccin.

El diagnstico de laboratorio para una ITU se realiza a travs del UROCULTIVO, para determinar la presencia y cantidad de causantes de la infeccin. Para lo cual debemos tener encuenta:

FLORA NORMAL: Escherichia sp., Proteus sp., Klebsiella sp., Enterobacter sp. Micobacterias saprofticas, (Mycobacterium smegmatis,)Streptococcus sp Levaduras

Salvo la uretra anterior, el aparato urinario es estril. La orina contribuye a mantener la va urinaria libre de grmenes, debido al arrastre, al pH cido y a su elevada osmolaridad.El sector anterior de la uretra se coloniza con grmenes que provienen del perineo. En la mujer, la menor longitud de la uretra, as como la proximidad del ano explican, al menos en parte, la mayor incidencia de infeccin urinaria.La infeccin del aparato urinario en general es causada por grmenes que colonizan primero la zona circundante y que por va ascendente llegan a la vejiga o hasta el rin. Las causas que favorecen esta enfermedad, son todas las que alteran los mecanismos de defensa:obstruccin a la circulacin de la orina (clculos, hipertrofia prosttica) malformaciones de la vaexcretora, sondas vesicales y el coito.

La muestra ideal es la de la maana debido a que la cuenta bacteriana es mayor.Se requiere de 3 a 5ml de orina en un frasco estril, tambin se puede obtener mediante una sonda uretral, suprapbica o permanencia.La muestras para urocultivo no se toman de bolsas recolectoras de orina que forman parte de un sistema de drenaje a travs de una sonda. Se lleva la muestra al laboratorio y se examina lo ms pronto posible, de no ser as, la orina se puede refrigerar hasta dos horas antes de someterla a cultivo.Para establecer bacteriuria, se toman 2 muestras de chorro medio.Las muestras deben de obtenerse antes de la administracin de cualquier antibitico.El personal de salud debe instruir al paciente respecto a la tcnica adecuada para recolectar la muestra.

Hombres: se debe retraer el prepucio e higienizar el glande y surco balanoprepucial (no usar antispticos). Se elimina el primer chorro de orina y luego serecolecta en un envase estril la fraccin siguiente.Mujeres :Higienizar la zona genital con agua, de adelante haciaatrs, secarse con toalla limpia, se deben colocar un tapn vaginal (torunda de gasa o algodn) y se recomienda orinar separando los labios mayores

Las muestras deben venir acompaadas de su respectiva orden medica donde deben llenarse todos los datos solicitados por el laboratorio:Nombre y Apellido completo N de Historia Clnicaedadsexoservicio y camatipo de muestra: catter, suprapbica, etc.recibi antibiticos en los ltimos 7 das, si es as anotar nombre del ATB y dosiscontrol o sospecha de algn germen anterior

Examen directo y Gram 1. Examen macroscpico: olor, color, aspecto, pH, densidad.2. Examen microscpico: estudio del sedimento (en fresco) se centrifuga y el sedimento obtenido se coloca a una lamina porta/cubre objeto , se observa al microscopio con objetivo de 40XTcnica de GramSe toma una gota de orina,se coloca sobre una lmina portaobjeto y se deja secar sin extender, luego se fija y colorea. Cuando se sospecha de tuberculosis renal, la orina se centrifuga y se toma una gota del sedimento,extender, se fija y se colorea con la tcnica de Zielh Neelsen,para la bsqueda de bacilos cidos resistentes.

Usar el asa calibrada, flamear, dejar enfriar, mantener en posicin vertical introducir solo el aro debajo del nivel de la orina previa mezcla de la orina sin centrifugar.

Estriar en la placas de cultivo de la siguiente manera:Estriar de arriba hacia el centro de la placa y estriar la orina en una serie de pasos de ngulo de 90 a travs del inculoIncubacin Una vez sembradas las placas deben incubarse durante 24 horas a 35 - 37 C.

Organismos que son uropatgenos reconocidos y crecen bien en medios de rutina en 24 hrs: Estos incluyen E.coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, y Pseudomona aeruginosa. Estos patgenos constituyen la causa del 80% de los bacilos gram negativos aislados. Enterobacter y Citrobacter son tambin comnmente aislados. Enterococcus, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus aureus y Streptococcus agalactiae son los gram positivos ms frecuentemente aislados.Organismos que son uropatgenos reconocidos y no crecen en medios de rutina: Mycobacterium tuberculosis, Chlamidia trachomatis, Neisseriae gonorrhoeae se desarrollla. Organismos que pueden ser uropatgenos, pueden requerir medios especiales y ms de 24 hrs: Corynebacterium urealyticum, Corynebacterium seminale stos se desarrollan en A.Sangre CNA.; Haemophylus influenzae, H. parainfluenzae, estos de desarrollan en A. chocolate Gardenella vaginalis en altos recuentos se ha asociado a UTI ste se desarrolla en Human Blood Agar. Todos estos medios especiales deben incubarse por 48 hrs. En CO2.Organismos que no son uropatgenos pero pueden aislarse de uretra y orina: Gran variedad de grmenes colonizan la uretra y el rea genitourinaria, estos incluyen anaerobios, Actinomyces spp, Lactobacillus, Streptococcos alfa-hemolticos, Staphylococcos coag-negativa, y pequeos nmeros de gram negativos.

Mtodo de conteo en placa o recuento de colonias (Mtodo de Kass):

Se homogeniza la muestra mediante agitacin.Se diluye la muestra al 1:100, colocando 0.1ml de orina en 9.9ml de caldo tripticasa o de suero fisiolgico estril.Se preparan diluciones de 1:1000 y 1:10 000 a partir de la dilucin 1:100.Se deposita 1ml de cada dilucin en placas petri estriles que contienen agar Tripticasa o medio CLED, Mediante rotacin suave se favorece la distribucin homognea de la siembra.Se incuban todas las muestras a 370C de 24 a 48 horas.Para calcular el nmero de colonias se eligen las placas que contengan de 30 a 300 colonias. Contadas estas basta multiplicar su nmero por la dilucin respectiva para obtener la cuenta total.

Mtodo del asa calibrada: Esta estimacin cuantitativa consiste en sembrar una placa con medio de agar sangre o medio CLED en una muestra de orina, sin centrifugar, empleando un asa de platino calibrada (4mm. De dimetro). Despus de incubar las muestras a 370C durante 24 a 48 horas, se cuenta el nmero de colonias desarrolladas y el resultado se multiplica por 100, ya que el asa de platino contiene 0.01ml de orina.

Los resultados del estudio cuantitativo se reportan de la siguiente manera:

No hubo desarrollo bacteriano.Menos de 10 000 colonias por ml.Entre 10 000 y 100 000 colonias por ml.Ms de 100 000 colonias por ml.

Cuando se obtienen dos recuentos sucesivos con ms de 100 000 colonias por ml., la probabilidad de infeccin es del 80%, cifra que se eleva a 95% si el mismo resultado se obtiene en 3 recuentos sucesivos.

Por lo general las muestran contaminadas tienden a mostrar cuentas inferiores a 10 000 colonias por ml, cuando el recuento revela valores intermedios, entre 10 000 y 100 000 colonias por ml, el examen debe repetirse.

Se usan para identificar que microorganismo es el causante de la enfermedad. Se usan medios de cultivo tanto enriquecidos como selectivos.

PRIMER PERIODOSEGUNDO PERIODO TERCER PERIODO

Es el estudio de las caractersticas microscpicas de las colonias y la utilizacin de los sustratos del medio y la identificacin final a travs de pruebas fisiolgicas diferenciales como la prueba de la oxidasa, accin sobre los azucares.

contar el numero de colonias y multiplicar por el factor 1000 100 deacuerdo a la capacidad del asa utilizada , determinar las unidades formadoras de colonia por mililitro del a orina. UFC/ml

Generalmente se usa el metodo de KIRVY BAUER, tomando en cuanta para la eleccion de los antibioticos el agente aislado y auqellos q se utilizan mas en el tratamiento de las itu.