CUENTA DIFERENCIAL

EQUIPO 9

LÓPEZ SEGURA SANDRA

NERI AZCONA EDER CARLOS

La cuenta diferencial tiene como finalidad obtener información de la distribución relativa de los leucocitos en sangre periférica. El número absoluto de cada célula es de gran utilidad para el diagnóstico de múltiples enfermedades, orienta en la elección del tratamiento a seguir en los pacientes.

Para efectuar este procedimiento se emplean extensiones sanguíneas teñidas sobre cubreobjetos o portaobjetos.

CUENTA DIFERENCIAL

FROTIS SANGUÍNEO

Es de gran importancia en hematología ya que el diagnóstico de muchas enfermedades hematológicas puede realizarse con sólo observar las características morfológicas de las células sanguíneas.

Consiste en la extensión de una gota de sangre sobre un portaobjetos o cubreobjetos por difusión.

Las laminas deben estar limpias y desengrasadas con alcohol al 70%

Punción capilar: inmediato

Extracción venosa con EDTA: 2-3 hrs.

FROTIS SANGUÍNEO

EXTENCIÓN CORRECTA

• Capa delgada, uniforme, de aspecto liso y homogéneo.

• Bordes largos, rectos y que no lleguen a los bordes del portaobjetos.

• Eritrocitos situados en una sola capa.

CARACTERÍSTICAS DE UN FROTIS ADECUADO

EXTENCIÓN DEMASIADO LARGA

PRESENTA VACUOLAS DEBIDO A LA SUCIEDAD DEL PORTAOBJETOS

FROTIS INCORRECTOS

PRESENTA ESTRIAS

DEMASIADO CORTA

FROTIS INCORRECTOS

TÉCNICA DE DOS CUBREOBJETOS

• Punción capilar: dar un ligero masaje en el sitio de la punción para concentrar la sangre. En seguida, se limpia la zona del dedo con alcohol y se hace la punción con una lanceta, realizando un movimiento rápido, firme y profundo.

• Después de puncionar se elimina la primera gota de sangre y la siguiente se coloca en el centro de un cubreobjetos.

• Colocar en un cubreobjetos una pequeña gota de sangre en el centro de este.

• Sujetarlo por los vértices e invertirlo colocándolo sobre el otro

cubre rotándolo 45°.

• Jalar de forma horizontal el segundo cubreobjetos antes de

que se difunda por completo la sangre.

- La ventaja de esta técnica es que se produce una buena distribución de leucocitos, pero a causa del menor tamaño deben contarse 50 leucocitos por cubreobjetos.

- La desventaja radica en la fragilidad de la lámina y requiere de habilidad.

TÉCNICA DE DOS PORTAOBJETOS

• Se realiza la punción capilar y se elimina la primera gota de sangre.

• Colocar una pequeña gota de sangre (2-3 mm) a 1 cm de un extremo del portaobjetos.

•Colocar el portaobjetos sobre una superficie plana con la gota de sangre al lado derecho.

•Coloque un segundo portaobjetos (para realizar la extensión) frente a la gota de sangre.

•El ángulo de esta laminilla debe ser de unos 45°.

• Deslice el portaobjetos de empuje hacia atrás, para que entre en contacto con la gota de sangre. Permita que la gota se extienda en tres cuartas partes del bisel del portaobjetos de empuje.

No permita que la sangre se extienda hasta los bordes.

• Empuje rápidamente el portaobjetos hacia adelante. Este movimiento debe seruniforme y continuo, hasta 1 cm antes del extremo del portaobjetos.

• Permita que el frotis se seque al aire antes de teñirlo.

El frotis se compone de tres partes:

ÁREA DE OBSERVACIÓN

FACTORES QUE AFECTAN LA TINCIÓN

o Falta de filtrado diario del colorante.

o pH inapropiado del amortiguador.

o Tiempos incorrectos de tinción o amortiguador.

o Reactivos deteriorados.

EOSINÓFILONEUTRÓFILO

MONOCITOBASÓFILO

LINFOCITO PLAQUETAS

VALORES ABSOLUTOS

Debido a que el número total de leucocitos por milímetro cúbico puede variar dentro de amplios límites, el recuento diferencial tiene un valor relativo y con frecuencia se presta a errores de interpretación. Esto se evita utilizando valores absolutos. Estos valores se calculan a partir del número total de leucocitos por milímetro cúbico y del porcentaje relativo:

Ejemplo:

- Cuenta total de leucocitos = 7 800/mm3- En frotis: bandas 12%, neutrófilos segmentados 80% y linfocitos 8%

V.A. de neutrófilos segmentados = cuenta total de leucocitos/100 ( % de neutrófilos segmentados)

V.A = (7 800/mm3)/100 (80) = 6 240/mm3 neutrófilos segmentados

VALORES DE REFERENCIA DE LOS TIPOS CELULARES (%)

TIPO DE CÉLULA BAJO NORMAL ALTO

Neutrófilo < 40 40-70 > 70

Bandas - 0-6 (límite de 14) > 14

Eosinófilo - 1-5 5

Basófilo - 0-2 2

Monocito - 1-12 > 12

Linfocito < 20 20-50 > 50

VALOR DE REFERENCIA DE LEUCOCITOS TOTALES: 4 500 - 11 000/milímetro cúbico

VALORES ABSOLUTOS

TIPO DE CÉLULA V.A./milímetro cúbico

Neutrófilo 1 800-7 700

Banda 0-660

Eosinófilo 45-550

Basófilo 0-220

Monocito 45-1320

Linfocito 900-5500

V.A. de neutrófilos segmentados = 6 240/milímetro cúbico

CORRECCIÓN DEL RECUENTO DE LEUCOCITOS EN CASO DE ERITROBLASTOS CIRCULANTES

- Anemias hemolíticas- Síndromes mieloproliferativos

Cuando la concentración en sangre de eritroblastos es superior al 10 % de la cuenta total de leucocitos, el recuento de estos resulta falso, por ello es necesaria una corrección:

1. Se examina la extensión de sangre y se determina el número de eritroblastos por cada 100 leucocitos.

2. Los leucocitos corregidos se calculan por la siguiente fórmula:

Eritroblastos/mm3 = # de eritroblastos/# de eritroblastos + 100 (leucocitos/mm3)

Leucocitos corregidos = leucocitos/mm3 – eritroblastos/mm3

EJEMPLO:

Eritroblastos por 100 leucocitos: 25Cuenta total de leucocitos: 10 000/mm3

Eritroblastos/mm3 = 25/(25+100) (10 000/mm3) = 2 000/mm3

Leucocitos corregidos = 10 000/mm3 – 2 000/mm3 = 8 000/mm3

HEMOGRAMA DE SCHILLING

CUENTA TOTAL DE LEUCOCITOS/milímetro

cúbico

4 500-11 000

Mieloblasto y promielocito

0 %

Mielocito 0 %

Metamielocito 0 %

Neutrófilo en banda 0-5 %

Neutrófilo segmentado 40-60 %

Linfocito 20-40 %

Monocitos, eosinófilos y basófilos

5-10%

BIBLIOGRAFÍA Cartwright, George. El laboratorio en el diagnóstico hematológico. Editorial Científico-Médica. Barcelona González, José M. Tecnología y métodos del laboratorio clínico. Salvat Editores, S.A. Barcelona.

Krupp Marcus. Manual de diagnóstico clínico de laboratorio. Editorial El Manual Moderno. México.

Pérez, José. Hematología. La sangre y sus enfermedades. Editorial McGraw Hill. México. 2005.

Turgeon, Mary L. Hematología clínica. Teoría y procedimientos. Editorial El

Manual Moderno. México. 2006.