Evaluación de la conservación de leche cruda en distintas regiones del … · 2017-11-14 ·...
Transcript of Evaluación de la conservación de leche cruda en distintas regiones del … · 2017-11-14 ·...
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009
ISSN 0255-0407
Anales científicos 70(4) 2009, pp. 36-8 36
Evaluación de la conservación de leche cruda en distintas regiones del Perú,
mediante la activación del sistema lactoperoxidasa
Roberto Albujar C. 1, Fanny Ludeña U.2, Liliana Castillo S. 3
Resumen
El presente trabajo de investigación tuvo como objetivos determinar el tiempo máximo de conservación de leche
cruda mediante la activación del Sistema Lactoperoxidasa (LPS) de diferentes establos de tres departamentos de alta
producción lechera del Perú (Lima, Arequipa y San Martín), basándose en los límites de la Norma Técnica Peruana
202.001 para leche cruda, referentes a las características fisicoquímicas (pH y acidez láctica) y microbiológicas
(tiempo de reducción del azul de metileno, recuento de coliformes totales y recuento de bacterias aerobias mesófilas
viables). Las muestras de leche de los establos seleccionados en cada zona fueron clasificadas según el recuento
inicial de microrganismos clasificándolos en leche tipo A (recuento de bacterias aerobias mesófilas viables menor a
30x104 ufc/ml), tipo B (recuento de bacterias aerobias mesófilas viables mayor a 30x104 ufc/ml. Los tiempos
máximos de conservación de las muestras de leche provenientes de la zona de Arequipa (temperatura ambiente entre
15 y 20 °C), Lima (temperatura ambiente entre 20 y 25 °C) y San Martín (temperatura ambiente entre 28 y 30 °C)
tuvieron diferencias altamente significativas. En la zona de Arequipa se obtuvo los mayores tiempos de
conservación (4.80 horas) independiente del tratamiento seguido de Lima (3.13 horas) y finalmente San Martín
(0.20 horas). Con el tratamiento los tiempos de conservación fueron para Arequipa 9.89 horas, para Lima 5.03 horas
y para San Martín 1.41 horas. Se realizó una evaluación en leche refrigerada proveniente de ordeño mecánico en
Lima y Arequipa, el tiempo de conservación de las muestras control osciló entre 38.23 (Lima) y 28.73 (Arequipa)
horas a diferencia de la leche tratada que fue entre 65.00 horas (Lima) y 47.95 horas (Arequipa). Se realizó la
evaluación de leche conservada con la activación del LPS mantenida a temperatura ambiente y refrigeración en la
elaboración de yogurt batido y queso fresco en la zona de Lima para determinar si existían diferencias significativas
en el producto final. En el yogurt se evaluó en la etapa de fermentación y en almacenamiento. En la etapa de
fermentación se evaluaron las características de acidez láctica y pH. Los resultados en estas características no
presentaron diferencias significativas entre las muestras con tratamiento y las testigos. Igualmente, en la etapa de
almacenamiento al evaluarse las características de acidez láctica, pH, recuento de mohos y levaduras no se
encontraron diferencias significativas entre las muestras tratadas y testigos respectivos. Para el queso fresco las
evaluaciones se realizaron durante el almacenamiento evaluándose acidez láctica y recuento de mohos y levaduras.
Las muestras con tratamiento y sus respectivos testigos no presentaron diferencias significativas en las
características evaluadas.
Palabras clave: Leche, sistema Lactoperoxidasa.
Abstract
The investigation had as objective to determine the maximum time of preservation of raw milk by using the
Lactoperoxidase System (LPS) in different producers from three Peruvian cities of high milk production (Lima,
Arequipa and San Martín). The parameters for the determination were based on the limits recommended by
Peruvian Practical Standards 202.001 for raw milk, referred to the physical chemical characteristics (pH and lactic
acidity) and microbiological (blue methylene time reduction, count of total coliforms and count of viable mesophilic
aerobic bacteria). The milk samples of the selected producers in each zone were classified according to the initial
count of microorganisms. These were classified in type A milk (count of viable mesophilic aerobic bacteria less than
30x104 ufc/ml) and type B milk (count of viable mesophilic aerobic bacteria greater than 30x104 ufc/ml. The
preservation time of the milk samples from the Arequipa’s zone (room temperature between 15 and 20 °C), Lima
(room temperature between 20 and 25 °C) and San Martín (room temperature between 28 and 30 °C) had significant
differences (p<0.05). In the Arequipa’s zone the preservation time was the greatest (4.80 hours), in Lima the time
was 3.13 hours and San Martín had the least time of preservation (0.20 hours), these times were referred to the milk
samples without treatment. With treatment the preservation time for each zone was: Arequipa 9.89 hours, Lima 5.03
hours and San Martín 1.41 hours. It was also made an evaluation in refrigerated milk samples (4°C) obtained by
mechanical milking from Lima and Arequipa. The preservation time of control samples oscillated between 38.23
hours (Lima) and 28.73 hours (Arequipa) unlike the treated milk samples that was between 65.00 hours (Lima) and
47.95 hours (Arequipa). With the milk preserved by the LPS was carried out another evaluation. The milk samples
were kept at room temperature and in refrigeration to produce shaked yogurt and fresh cheese in the zone of Lima.
The aim was determining significant differences in the final product. In the yogurt was evaluated in the stage of
fermentation and in shelf. In the fermentation stage, the evaluated characteristics was lactic acidity and pH and in
shelf was lactic acidity, pH, count of moulds and yeasts. The results in these characteristics did not display
significant differences between the treatment samples and control samples, in the fermentation stage and in shelf.
For the fresh cheese the evaluations were made during the storage being evaluated the lactic acidity and count of
moulds and yeasts. The samples with treatment and its respective control did not display significant differences in
the evaluated characteristics.
Key words: milk, lactoperoxidase system.
Evaluación de la conservación de leche cruda en distintas regiones del Perú, mediante la activación del sistema
lactoperoxidasa
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 37
1. Introducción
Como en muchos otros países en desarrollo, en el
Perú la recolección de leche cruda y transporte a las
plantas de procesamiento presentan muchos
problemas. Las áreas de producción de leche son
amplias y dispersas, el tiempo de transporte es más de
6 horas y las facilidades de enfriamiento son
inadecuadas. Por eso, la leche generalmente tiene una
calidad higiénica inferior cuando llega al centro de
procesamiento. La adicción de químicos nocivos tales
como carbonato de sodio, hidróxido de sodio y
peróxido de hidrogeno es una práctica común para
retardar el desarrollo de acidez.
En años recientes, el uso del Sistema Lactoperoxidasa
(LPS), un sistema antibacterial en leche cruda, ha
sido recomendado por el comité conjunto FAO/WHO
(1991). El sistema antibacterial es llamado sistema
lactoperoxidasa-tiocianato-peróxido de hidrogeno
(LPS). Este sistema es activado por la adición de
cantidades de tiocianato y peróxido de hidrogeno a la
leche cruda.
El sistema lactoperoxidasa/tiocianato/peróxido de
hidrógeno (LPS) consiste en la oxidación de los iones
tiocianato por la acción de la enzima lactoperoxidasa
en presencia de peróxido de hidrogeno, y la
consecuente acción de dichos iones oxidados sobre
las bacterias presentes en la leche, retardando su
deterioro en 8 – 24 horas, según la temperatura y
calidad inicial de la leche (Bjork et al., 1975 y
Harnulv y Kandasamy, 1982).
Estudios realizados en Cuba por Ponce et al. (1987)
indican que este método podría ser utilizado para
conservar la leche cruda en condiciones de
emergencia, o cuando falta la energía electricidad
para la refrigeración.
Nuestro objetivo fue determinar el tiempo máximo de
conservación de leche cruda con el sistema LPS
activado en tres regiones distintas del Perú usando
evaluaciones físico químico y microbiológico.
2. Materiales y métodos
Evaluaciones Físico Químicas y Microbiológicas
pH en leche y derivados lácteos: método
potenciométrico.
Acidez láctica en leche cruda NTP 202.116
(INDECOPI 1, 1998).
Acidez láctica en queso fresco. NTP 202.151
(INDECOPI 2, 1998).
Tiempo de reducción del azul de metileno en leche
cruda. NTP 202.014 (INDECOPI 3, 1998).
Recuento de bacterias aerobias mesófilas viables
(b.a.m.v.) en leche cruda. Bacteriological Analytical
Manual (2001).
Recuento de coliformes totales en leche cruda.
Bacteriological Analytical Manual (2001).
1 2 Facultad de Industrias Alimentarias, Universidad Nacional
Agraria La Molina. E-mail: [email protected]. 3
Selección de zonas de estudio
Para la selección de las zonas de estudio, se tuvo en
cuenta los departamentos de mayor producción
lechera de cada región geográfica (división clásica de
las regiones naturales) del Perú: Costa, Sierra y
Selva. Se evaluaron las condiciones de temperatura
ambiental de los departamentos seleccionados.
Selección de Establos
Para la selección de los establos en cada zona de
estudio, se recopiló la información de los principales
productores y acopiadores de la zona. Se identificó
las principales variables a considerar de acuerdo al
sistema de ordeño utilizado en cada lugar. En el
Cuadro 1 se detallan las variables de estudio a tomar
en cuenta y que sirvieron para la selección de los
establos.
Se realizó un muestreo de los principales productores
lecheros de la zona y se realizó los análisis
fisicoquímicos y microbiológicos correspondientes.
De todas las variables mencionadas anteriormente
una de las más importantes fue el recuento de
bacterias aerobias mesófilas que sirvió para clasificar
a la leche de los establos como tipo A y B. El límite
planteado para la leche tipo A y B fue tomado en
función de la evaluación de datos preliminares de los
establos muestreados siendo 30x104 ufc/ml el límite
máximo para la leche tipo A. Los recuentos de la
leche tipo A y B se encuentran dentro del límite
recomendado por la NTP 202.001 (INDECOPI,
1998) para leche cruda en el requisito microbiológico
de bacterias aerobias mesófilas viables (b.a.m.v.).
Las muestras de leche fueron tomadas tanto de
ordeño manual como mecánico. En el ordeño manual
se tomaron muestras del horario mañana y tarde y en
el ordeño mecánico se tomaron muestras de los
tanques de almacenamiento (mezcla de horario de
mañana y tarde).
En San Martín, generalmente, no se realiza ordeño
mecánico y el ordeño es manual realizándose una vez
al día.
Luego de realizado todos los análisis respectivos se
seleccionó los establos productores de leche que
presentaban mejor correlación en sus análisis.
Determinación del tiempo máximo de
conservación de la leche cruda con la activación
del Sistema Lactoperoxidasa
Se realizó el muestreo de leche de los establos
previamente seleccionados tomando como referencia
para la aceptación del lote los valores máximos de
acidez láctica especificados por la Norma Técnica
Peruana para leche cruda. A continuación una vez
aceptado el lote se realizó las determinaciones
fisicoquímicas y microbiológicas respectivas.
Una vez que los lotes de leche fueron analizados se
procedió a la activación del Sistema Lactoperoxidasa
tal como se detalla a continuación: Se disolvió 0.7 g
de Tiocianato de Sodio, solución 1 (Stabilak® 1, C-
kure, La Habana, Cuba) en una muestra de 50 litros
de leche y se agitó por 5 min. A continuación se
agregó 1.7 g de Percarbonato de Sodio, solución 2
(Stabilak® 2, C-kure, La Habana, Cuba).
Roberto Albujar C., Fanny Ludeña U., Liliana Castillo S.
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 38
Tabla 1. Variables a considerar para la selección de los establos en cada zona de estudio.
Zona Temperatura Tipo Tipo de leche según Recuento
Inicial
Horario
De Ordeño de Ordeño
Lima – Herbay Alto 20 - 25 °C Manual
Tipo A * Mañana
Tarde
Tipo B ** Mañana
Tarde
Arequipa – Majes 15 - 20 °C Manual
Tipo A Mañana
Tarde
Tipo B Mañana
Tarde
San Martín – Soritor 28 - 32 °C Manual Tipo A Mañana
Tipo B Mañana
Lima - La Molina 4 – 6 °C Mecánica
Tipo A Mezcla
Arequipa – Majes Tipo A Mezcla
* Leche tipo A con recuentos menores de 30x104 ufc/ml
** Leche tipo B con recuentos mayores de 30x104 ufc/ml
Las muestras de leche con el sistema activado se
almacenaron para determinar los tiempos máximos de
conservación. Paralelamente a las muestras con el
LPS activo se realizaron muestras control. La
evaluación se realizó a temperatura ambiente a las
muestras de ordeño manual y a temperatura de
refrigeración a las muestras de ordeño mecánico. Para
la evaluación de los tratamientos a temperatura
ambiente se realizaron los siguientes análisis: acidez,
pH, determinación del tiempo de reducción de azul
de metileno o reductasa (TRAM), recuento de
bacterias aerobias mesófilas viables (b.a.m.v.) y
coliformes totales. Los análisis se realizaron cada 3
horas. Para los tratamientos en refrigeración se
realizaron los siguientes análisis: acidez, pH, tiempo
de reducción de azul de metileno o reductasa
(TRAM), recuento de bacterias psicrófilas y
coliformes totales, los cuales se realizaron cada 24
horas. En ambos casos se consideró el límite de
acidez láctica (18°Dornic) especificado por la
NTP202.001 (INDECOPI, 1998) para indicar el
punto final de la evaluación. Los tiempos máximos
de conservación de las muestras de leche cruda para
cada tratamiento fueron determinados en función de
los valores límite especificados por la Norma Técnica
Peruana 202.001 (INDECOPI, 1998).
Evaluación Estadística
En la evaluación del Sistema Lactoperoxidasa (LPS)
en leche cruda en las tres regiones del Perú, se
planteó un diseño de bloques completos
randomizado, con arreglo factorial. Todos los análisis
fueron fechos en triplicado.En las evaluaciones del
LPS en los derivados lácteos se planteó diseño de
bloques completos randomizados. Los análisis
estadísticos fueron trabajados usando MINITAB
13.30 (2000). Las comparaciones apropiadas fueron
hechas usando la prueba de Tukey. Un p<0.05 fue
considerado estadísticamente significativo.
3. Resultados y discusión
Selección de Zonas de Estudio
En base a la producción de leche por departamento de
la costa, sierra y selva fueron escogidos los
departamentos con mayor producción, resultando así
el departamento de Lima en la Costa, Arequipa en la
Sierra y el de San Martín en la Selva.
Selección de Establos
Zona: Lima
La zona seleccionada en Lima fue Herbay Alto
(Cañete) en donde el principal productor es el establo
de la UNALM (ORDEÑO MANUAL, TIPO A) del
cual se tenía información sobre la producción y
características de la leche, además, en Santo
Domingo (Herbay Alto, Cañete) de los pequeños
productores solo uno de ellos superaba la producción
50 litros/día por eso solo se trabajó con ese establo
(ORDEÑO MANUAL, TIPO B). En La Molina
(Lima) se trabajó con el establo de la UNALM
(ORDEÑO MECANICO, TIPO A) por facilidades y
acceso a la Planta de producción.
Zona: Arequipa
En esta zona se trabajó con los 6 principales
productores de la zona de las Pampas de Irrigación de
Majes (B, C y Santa Rita), provincia Caylloma.
De acuerdo a los resultados obtenidos se observa que
los valores de acidez de las muestras de leche cruda
iniciales no presentan diferencias significativas,
independientemente de la procedencia de la muestra
y están dentro de los límites establecidos por la
NTP202.001 (INDECOPI 4, 1998), que establece una
acidez entre 0,14 y 0,18 % de acidez láctica (14 – 18
°Dornic), del mismo modo el valor de pH se
encuentra dentro del rango que corresponde a una
leche normal entre 6.6 y 6.8 (Porter, 1981). Sin
embargo, en los resultados de los análisis
microbiológicos se observan diferencias en las
muestras de leche evaluadas debido al tipo de ordeño
utilizado. Así uno de los establos que utiliza ordeño
mecánico tiene un recuento de bacterias aerobias
bajo, en comparación con los otros establos que
trabajan con ordeño manual.
Luego de esta evaluación se seleccionó los siguientes
establos: Establo 1 (ORDEÑO MECANICO, TIPO
A), Establo 2 (ORDEÑO MANUAL, TIPO B),
Establo 3 (ORDEÑO MANUAL, TIPO A).
Zona: San Martín
En este lugar se trabajo con la asociación de
productores lecheros del valle (EPLAMSA) en
Soritor, provincia de Moyobamba. Se hicieron
pruebas preliminares a 6 establos de los cuales fueron
escogidos 2 que cumplían con las condiciones del
diseño experimental expuesto en el Cuadro No 1.
Evaluación de la conservación de leche cruda en distintas regiones del Perú, mediante la activación del sistema
lactoperoxidasa
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 39
Se debe precisar, además, que la toma de muestras se
hizo en la Planta de la Asociación de Pequeños
Ganaderos de Soritor (EPLAMSA). La cercanía de
los establos a la planta permitió dar resultados
confiables.
En base a esta evaluación se seleccionaron los
establos: Rodriguez (ORDEÑO MANUAL, BUENA
CALIDAD) y Sanchéz (ORDEÑO MANUAL,
MALA CALIDAD).
Determinación del tiempo máximo de
conservación de la leche cruda con la activación
del Sistema Lactoperoxidasa (LPS).
Zona: Lima
En cuanto a los análisis fisicoquímicos que
corresponden a variación de acidez se observó que la
acidez titulable aumentó durante el almacenamiento a
temperatura ambiente en el tratamiento desde 15.5 a
19.25 °Dornic para leche tipo A y de 16.0 hasta 23.5
°Dornic para muestras de leche tipo B en el período
de 12 horas. Siendo 12 horas un tiempo referencial
para efectos de comparación.
Los TRAM decrecieron a medida que la leche
disminuyó su calidad. Los valores iniciales fueron
desde 8.4 horas decreciendo hasta 2.2 horas en un
período de 12 horas de almacenamiento para las
muestras de leche tipo A. En muestras de leche tipo B
los valores decrecieron desde 8.7 horas hasta 0.8
horas en un período de 12 horas de almacenamiento.
En las muestras con tratamiento los tiempos que se
tardaron en llegar al límite permitido por la norma
superaron a los valores de los testigos en 5.3 horas
para las muestras de leche de buena calidad y en 5.2
horas para las muestras de leche de mala calidad.
Ponce et al. (1992) menciona que a 20 °C la leche
con TRAM superior a 3 h 30 minutos y con
tratamiento (Sistema Lactoperoxidasa) mantiene su
calidad inicial entre 12 y 24 horas, mientras el control
se deteriora totalmente a las 4 horas.
En los análisis de recuento de coliformes totales se
tuvo que la población se incrementó desde 56 ufc/ml
hasta 19x104 ufc/ml en un período de 12 horas para
muestras de leche testigos tipo A. En muestras de
leche testigos tipo B los recuentos fueron desde 420
ufc/ml hasta 36x105 ufc/ml. Cuando se aplicó el
tratamiento en las muestras de leche tipo A y B hubo
incremento del tiempo de conservación de 5.1 horas
en ambos tipos. Siendo la referencia el límite
establecido por la NTP 202.001 (INDECOPI, 1998).
Reiter y Härnulv (1984) dicen que organismos gram
negativo, catalasa positivo tales como pseudomonas,
coliformes, salmonelas y shigella no son solo
inhibidas por el LPS sino que, dependiendo de las
condiciones del medio (pH, temperatura, tiempo de
incubación, densidad de la célula, etc), podría ser
eliminado. Cuando fue activado el Sistema
Lactoperoxidasa en las muestras de leche tipo A,
hubo una mejora en cuanto al tiempo en que
demoraban en llegar al límite establecido por la
norma. En las muestras de leche tipo A como tipo B
mejoró el tiempo en 2 – 7 horas, no hubo diferencias
significativas en la interacción calidad y tratamiento.
En la figura A por ejemplo tenemos el desarrollo de
coliformes totales en muestras de leche de buena
calidad.
Figura A. Variación del recuentro de coliformes Tot. De muestras de leche tipo A proveniente de ordeño manual
(Zona Lima).
El recuento total de bacterias mesófilas viables
(b.a.m.v.) varió en muestras de leche testigo tipo A
desde 18x104 ufc/ml hasta 55x106 ufc/ml en un
período de 12 horas. Y en muestras testigo tipo B
desde 34x104 ufc/ml hasta 49x107 ufc/ml en un
período de 12 horas. Las muestras de leche tipo A y
B con tratamiento mejoraron los tiempos de
conservación de la leche cruda entre 2 a 4 horas, ya
que no había diferencia significativa en esta
interacción (Cuadro No 2). En la figura B tenemos
por ejemplo el desarrollo de bacterias aerobias
mesófilas viables en muestras de leche de buena
calidad y se nota claramente que las muestras tratadas
se multiplican mas lentamente que sus respectivos
testigos.
Roberto Albujar C., Fanny Ludeña U., Liliana Castillo S.
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 40
Figura B. Variación del recuentro de bacterias mesófilas viables (B.a.m.v) de muestras de leche tipo A proveniente
de ordeño manual (Zona Lima).
En el Tabla 2 se muestran los tiempos de
conservación de la leche cruda, obtenida con ordeño
manual para los tratamientos y testigos tomando
como referencia para determinar este tiempo los
límites máximos especificados por la NTP 202.001
(INDECOPI 4, 1998) para leche cruda.
Tabla 2. Tiempo máximo de conservación de la leche cruda (horas) en función de cada análisis en muestras
provenientes de ordeño manual en la zona de Lima. Calidad Buena Mala
Horario Mañana Tarde Mañana Tarde
Análisis Testigo Tratam. Testigo Tratam. Testigo Tratam. Testigo Tratam.
Acidez 10.27 9.23 8.84 14.03 6.88 9.05 4.06 8.03 TRAM a 9.10 13.10 8.37 14.66 6.20 8.36 5.45 9.08
Coliformes Tot 4.82 7.29 3.60 5.66 2.37 3.79 1.72 3.36
B.a.m.v. b 8.38 10.20 6.05 9.50 4.44 8.94 4.22 7.42 a tiempo de reducción de azul de metileno b bacterias aerobias mesófilas viables
En el cuadro 2, los tiempos que están en negritas son
los máximos tiempos de conservación de las muestras
de leche para cada combinación de factores teniendo
en cuenta los requisitos de la NTP 202.001
(INDECOPI, 1998). Se puede observar que los
valores de los tiempos de conservación son muy
similares comparando las muestras de leche tipo A y
B debido que los recuentos iniciales de las muestras
evaluadas eran muy cercanos
En la evaluación de los resultados de la acidez láctica
se determinó que existían diferencias estadísticas
significativas entre las muestras con tratamiento y las
testigos. Además, los resultados de las interacciones
de los factores horarios con calidad, calidad con el
factor tratamiento no presentaron diferencias
significativas.
En el análisis de tiempo de reducción de azul de
metileno (TRAM) el factor tratamiento tuvo
diferencias signficativas entre sus resultados (p<
0.05), es decir, las muestras con tratamiento muestran
diferencias altamente significativas en comparación a
sus testigos respectivos en todos los casos.
En la evaluación de los resultados del recuento de
coliformes totales, la interacción de los factores
calidad y tratamiento sin considerar el horario es
significativa (p<0.05). Las muestras de leche Tipo A
con tratamiento en comparación con su testigo
incrementa su tiempo de conservación 2.26 horas, a
diferencia de las muestras de leche Tipo B con
tratamiento en comparación con su testigo solo
incrementa 1.53 horas independientemente del
horario de ordeño.
En la evaluación de los resultados del recuento de
b.a.m.v., la interacción de los factores calidad con
tratamiento presentó diferencias signifactivas
(p<0.05) obteniéndose en las muestras de leche
testigo Tipo A y B 7.22 y 4.33 horas respectivamente
en los tiempos de conservación, mientras que las
muestras de leche con tratamiento Tipo A y B, 9.85 y
8.18 horas, respectivamente. No hubo diferencias
significativas en la interacción de los factores calidad
con horario de ordeño (p>0.05).
En los resultados del recuento de b.a.m.v. la
interacción horario y tratamiento fue significativa
(p<0.05). Comparando las muestras de leche de la
mañana con tratamiento versus su respectivo testigo
aumentó 3.16 horas el tiempo de conservación, de la
misma manera las muestras de la tarde con
tratamiento versus su respectivo testigo aumentó 3.32
horas. Sin embargo, los tiempos de conservación de
las muestras de leche de la mañana fueron mayores
que las de la tarde.
Evaluación de la conservación de leche cruda en distintas regiones del Perú, mediante la activación del sistema
lactoperoxidasa
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 41
El tiempo de conservación de las muestras de leche a
temperatura ambiente (20 - 25°C)
independientemente de su calidad y del horario de
ordeño sería de 3.13 horas para las muestras testigo y
de 9.02 horas para las que tienen tratamiento teniendo
en cuenta los requisitos establecidos por la NTP
202.001 (INDECOPI, 1998) para leche cruda.
Los datos y evaluación de resultados del ordeño
mecánico para la zona de Lima se reportarán junto
con los resultados de la zona de Arequipa para
efectos de comparación.
Zona: Arequipa
En los resultados del análisis de la acidez láctica para
leche tipo A y B respectivamente se observó que las
muestras de leche testigos tipo A en los establos
seleccionados tenían una acidez inicial de 14.75°
Dornic la cual incrementó hasta valores de 18.25°
Dornic en un período de 18 horas. En el caso de los
establos que tenían muestras de leche testigos tipo B
el valor de la acidez inicial fue de 15.5° Dornic
incrementándose hasta 30.5° Dornic en un período de
18 horas. El período de 18 horas fue tomado
arbitrariamente para ejemplificar las comparaciones
de las variaciones.
En los resultados de las pruebas de tiempo de
reducción de azul de metileno (TRAM) se pudo
observar que los valores iniciales de las muestras de
leche tipo A testigos fueron de 8.8 horas decreciendo
hasta 1.9 horas y las testigos tipo B fueron desde un
valor inicial de TRAM de 8.8 horas decreciendo
hasta menos de 0.25 horas (ó 15 minutos) después de
un periodo de 18 horas de almacenamiento a
temperatura ambiente.
En el recuento de coliformes totales para muestras de
leche tipo A y B se observó que las muestras testigo
de tipo A tuvieron valores iniciales desde menos de
40 ufc/ml incrementándose los recuentos hasta
17x104 ufc/ml en un período de 18 horas. Las
muestras de mala calidad variaron desde recuentos
menores a 40 ufc/ml hasta 16x105 ufc/ml en el mismo
período de tiempo. Ambos valores finales se
encuentran fuera de lo establecido por la NTP
202.001 (INDECOPI, 1998) para leche cruda.
El crecimiento de coliformes en las primeras horas
luego de activado el Sistema Lactoperoxidasa (LPS)
fue lento en todas las muestras de leche llegando a
registrarse tasas de crecimiento de 9 ufc/ml/hora en
las muestras de buena calidad y de 28 ufc/ml/hora en
las de mala calidad (Figura X)
Figura X. Varación del recuentro de califromes totales de muestras de leche tipo A proveniente de ordeño manual
(Zona Arequipa).
En el recuento de bacterias aerobias mesófilas viables
(b.a.m.v.) los recuentos iniciales de las muestras de
leche testigos tipo A fueron de 15x104 ufc/ml
incrementándose hasta 38x106 ufc/ml en 18 horas. Y
para muestras de leche testigos tipo B tuvieron datos
desde 26x104 ufc/ml hasta 62x106 ufc/ml en el mismo
tiempo.
En todas las muestras tratadas se notó que el
crecimiento de bacterias aerobias mesófilas viables
fue mas lento que sus respectivas muestras testigo.
Por ejemplo en las muestras de buena calidad (Figura
Y) se nota que las curvas de crecimiento de las
muestras testigo tiene una pendiente mucho mayor
que las muestras con el tratamiento (LPS activo).
Roberto Albujar C., Fanny Ludeña U., Liliana Castillo S.
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 42
Figura Y. Variación del recuentro de bacterias aerobias mesófilas viables (B.a.m.v) de muestras de leche tipo A
proveniente de ordeño manual (Zona Arequipa).
En el Tabla 3 se muestra los tiempos de conservación
de la leche cruda, obtenida con ordeño manual para
los tratamientos y testigos de la zona de Arequipa
tomando como referencia los límites máximos
especificados por la Norma Técnica Peruana para
leche cruda NTP 202.001 (INDECOPI, 1998).
Tabla 3. Tiempos máximos de conservación de leche cruda (horas) en función de cada análisis en muestras
provenientes de ordeño manual en la zona de Arequipa. Calidad Buena Mala
Horario Mañana Tarde Mañana Tarde
Característica Testigo Tratam. Testigo Tratam. Testigo Tratam. Testigo Tratam.
Acidez 17.76 26.29 14.92 19.23 10.81 18.37 8.38 11.68
TRAMa 12.36 19.74 10.95 19.26 9.89 17.73 6.97 10.39
Coliformes Tot 7.50 12.34 8.04 10.52 6.07 9.55 4.74 8.09
B.a.m.v.b 9.94 15.33 7.88 16.05 3.51 8.61 0.31 9.00 a tiempo de reducción de azul de metileno b bacterias aerobias mesófilas viables.
En el cuadro anterior (Tabla 3) los tiempos que están
en negritas son los máximos tiempos de conservación
de las muestras de leche para cada combinación de
factores teniendo en cuenta los requisitos de la NTP
202.001 (INDECOPI, 1998). En este caso hay
bastante diferencia en horas entre las muestras de
leche testigos y tratamientos de la mañana y de la
tarde tanto del tipo A como del tipo B. Y se debe a
que los recuentos iniciales de tipo A y B tienen gran
diferencia.
De acuerdo a estos resultados se puede decir que el
LPS en una leche con menor carga microbiana (tipo
A) tiene mayor tiempo de conservación que una leche
con mayor carga microbiana (tipo B).
En el análisis de acidez láctica los factores de horario,
calidad y tratamiento son significativos cada uno
(p<0.05). Esto quiere decir que los resultados tanto
del horario de la mañana como de la tarde son
diferentes, así también las muestras del tipo A con las
del tipo B son diferentes y las muestras testigo con
las de tratamiento son diferentes estadísticamente. En
cuanto al horario de ordeño Walstra et.al. (2000)
menciona que algunas propiedades fisicoquímicas
varían: el porcentaje de contenido graso, el balance
Na/K, etc.
En el análisis de acidez láctica, los resultados de la
interacción de calidad con horario tuvieron
diferencias significativas (p<0.05) es decir, que los
valores de la leche tipo A del horario de la mañana
son diferentes significativamente a las tipo A de la
tarde, tipo B de la mañana y tipo B de la tarde.
En esta interacción, calidad con tratamiento, las
muestras de leche tipo A testigo (16.34 horas de
tiempo de conservación) presenta diferencias
altamente significativas con las muestras de leche
tipo A con tratamiento (22.76 horas) y las muestras
de leche tipo B testigo (9.60 horas) como las muestra
con tratamiento (10.03 horas). Se observó que los
tiempos de conservación de las muestras de leche de
la tarde fueron bastante prolongados debido
posiblemente a las bajas temperaturas de la noche en
esta zona.
En cuanto al análisis del TRAM los factores calidad,
horario y tratamiento tuvieron diferencias
significativas (p<0.05). Además, las interacciones
significativas han sido calidad con horario y calidad
con tratamiento (p<0.05).
Evaluación de la conservación de leche cruda en distintas regiones del Perú, mediante la activación del sistema
lactoperoxidasa
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 43
En la interacción de los factores calidad con
tratamiento de los resultados del TRAM tuvieron
diferencias significativas (p<0.05). Las muestras de
leche tipo A con tratamiento versus las testigo se
conservaron dentro del rango permitido por la norma
técnica peruana 7.84 horas más, mientras que las
muestras de leche tipo B con tratamiento versus las
testigo solo conservaron 5.63 horas más.
Para el recuento de los coliformes totales los factores
de calidad, horario y tratamiento explicaban
significativamente los resultados (p<0.05). Las
dobles interacciones calidad con horario, calidad con
tratamiento y horario con tratamiento presentaron
diferencias alta significativas (p<0.05).
El crecimiento de coliformes totales se pudo ver
incrementado por la higiene del ambiente de ordeño.
El polvo, barro, pelos, heces y manos del ordeñador
transfieren microorganismos del tracto intestinal a las
muestras de leche. El LPS es un sistema antibacterial
teniendo un efecto bactericida en organismos gran
negativos, catalasa positivos, esto es, pseudomonas,
coliformes, salmonellae y shigellae, y bacteriostático
para bacterias gram postitivas, catalasa negativa, tal
como estreptococos y lactobacilos (Wolfson, 1993).
Los resultados del factor tratamiento fueron
significativos (p<0.05) corroborando que la
activación del Sistema Lactoperoxidasa (tratamiento)
en comparación con sus respectivos testigos conservó
por más tiempo las muestras de leche según el límite
recomendado por la NTP 202.001 (INDECOPI,
1998).
La interacción de los factores calidad con tratamiento
fue altamente significativa en la evaluación del
recuento de coliformes totales. Se obtuvieron los
tiempos de conservación de leche cruda en función
del límite recomendado por la norma técnica peruana.
En el caso de las muestras de leche tipo A la
comparación de las de tratamiento versus las testigo
resultó en 3.66 horas más de conservación; mientras
que en el caso de las muestras de leche tipo B el
resultado fue casi 3.41 horas más en la comparación
de las de tratamiento versus las de testigo. En este
caso las muestras de leche Tipo B tuvieron menor
tiempo de conservación que las de tipo A debido al
alto recuento inicial
La interacción de los factores horario con tratamiento
en los resultados del recuento de coliformes totales
fueron altamente significativos (p<0.01). Las
muestras de leche testigo del horario de la mañana
tuvieron en promedio 6.79 horas de conservación y
las muestras de leche con tratamiento del horario de
la mañana tuvieron en promedio 10.95 horas. De la
misma manera, las muestras de leche testigo del
horario de la tarde tuvieron en promedio 6.39 horas
de conservación y las muestras de leche con
tratamiento del horario de la tarde tuvieron en
promedio 8.82 horas. Se observó estas diferencias
principalmente por los hábitos de higiene en el
ordeño según la hora del día, fue así que en la tarde
se descuidaba las buenas prácticas de ordeño.
En el recuento de bacterias aerobias mesófilas viables
(b.a.m.v.) los resultados de los factores calidad y
tratamiento presentaron diferencias significativas
(p<0.05). Los resultados de la interacción de los
factores calidad con tratamiento y calidad con horario
presentaron diferencias significativas (p<0.05).
La interacción de los factores calidad con tratamiento
en los resultados de b.a.m.v. presentaron diferencias
altamente significativas (p<0.05). Las muestras de
leche testigo tipo A tuvieron tiempos de conservación
de 8.91 horas y las de testigo tipo B tuvieron valores
de tiempo de conservación de 1.91 horas; las
muestras de leche con tratamiento tipo A presentaron
tiempos de conservación de 15.61 horas mientras que
las muestras de leche con tratamiento tipo B solo de
8.35 horas. Las bajas temperaturas de la zona
permiten tiempos de conservación bastante largos en
las muestras de leche tipo A.
El tiempo de conservación de las muestras de leche a
temperatura ambiente (15-20°C) independientemente
de su calidad y del horario de ordeño sería de 5.41
horas para las muestras testigo y de 12.02 horas para
las que tienen tratamiento teniendo en cuenta los
requisitos establecidos por la NTP 202.001
(INDECOPI, 1998) para leche cruda.
Zona: San Martín
En las evaluaciones fisicoquímicas de las muestras de
leche tipo A y B referentes a acidez láctica, tomamos
arbitrariamente un período de tiempo para efectos de
comparación, se observó que los valores de la acidez
láctica en las muestras de leche testigos se
incrementaron desde 15.0° Dornic hasta 19.5° Dornic
para las tipo A y desde 16.0° Dornic hasta 23.0°
Dornic para las tipo B ambas en un período de 12
horas.
Ponce et al. (1992), menciona que en las experiencias
realizadas ponen de relieve varios elementos de
interés, como el efecto altamente beneficioso de la
activación del Sistema Lactoperoxidasa en leche de
muy mala calidad inicial. En leche ácida o muy
cercana a la acidificación, la activación mejora el
TRAM pero mantiene la alta acidez inicial, ya que en
tales circunstancias es imposible eliminar el ácido
láctico que se ha formado con anterioridad.
En los resultados de los valores de tiempo de
reducción de azul de metileno (TRAM) las muestras
de leche testigos tipo A tuvieron valores iniciales de
6.8 horas decreciendo hasta valores de 1.8 horas. En
las muestras de leche testigos tipo B los valores de
TRAM decrecieron desde 7 horas hasta 0.05 horas (3
minutos), ambas en un período de 12 horas.
En los resultados del recuento de coliformes totales,
las muestras de leche testigo tipo A comenzaron con
una carga de 450 ufc/ml y llegaron hasta una carga
final de 42x104 ufc/ml. También, la carga inicial de
las muestras de leche testigo tipo B iniciaron con una
carga de 14x103 ufc/ml. Este valor inicial excedió
largamente el límite especificado por la Norma
Técnica Peruana NTP 202.001 (INDECOPI, 1998)
que es de 1000 ufc/ml por tal razón el tiempo de
conservación de las muestras de leche testigo tipo B a
temperatura ambiente (28 – 32 °C) fue de 0 horas.
En el recuento de coliformes totales notamos que la
carga inicial de las muestras de leche de mala calidad
Roberto Albujar C., Fanny Ludeña U., Liliana Castillo S.
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 44
parten con una carga de 14x103 ufc/ml, excediendo
largamente el límite especificado por la Norma
Técnica Peruana NTP 202.001 (INDECOPI, 1998)
que es de 1000 ufc/ml. Es por esa razón que el tiempo
de conservación en almacenamiento a temperatura
ambiente en ese caso es 0 horas. La figura P nos
muestra este ejemplo.
Figura P. Variación del recuentro de coliformes totales en muestras de leche tipo A y B proveniente de ordeño
manual (Zona San Martín).
En los resultados del recuento de bacterias aerobias
mesófilas viables (b.a.m.v.) se observó que el valor
inicial de las muestras de leche testigo tipo A se
incrementó desde 56x103 ufc/ml hasta 30x106 ufc/ml
y las muestras de leche testigo tipo B incrementaron
sus recuentos desde 62x103 ufc/ml hasta 90x106
ufc/ml respectivamente, ambas en un período de 12
horas. Las muestras de leche con tratamiento tipo A
incrementaron sus recuentos hasta 22x106 ufc/ml y
las muestras con tratamiento tipo B hasta 42x106
ufc/ml en un tiempo de 12 horas de almacenamiento.
Los elevados recuentos tanto de coliformes como
bacterias aerobias mesófilas viables se deben
principalmente a la deficiente higiene que tiene el
personal encargado del ordeño al realizar esta
operación. En la figura Q observamos el desarrollo de
las bacterias aerobias mesofilas viables
Figura Q. Variación del recuentro de bacterias aerobias mesófilas viables (B.a.m.v) en muestras de leche tipo A y B
provenientes de ordeño manual (Zona San Martín).
En función de los resultados se determinaron los
tiempos de conservación de la leche cruda, obtenida
con ordeño manual para los tratamientos y testigos
de la zona de San Martín tomando como referencia
los límites máximos especificados por la Norma
Técnica Peruana para leche cruda. Estos resultados
son presentados en el Tabla 4.
Evaluación de la conservación de leche cruda en distintas regiones del Perú, mediante la activación del sistema
lactoperoxidasa
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 45
Tabla 4. Tiempos máximos de conservación de leche cruda (horas) para cada análisis en las muestras de leche de
ordeño manual en la zona de San Martín. Calidad Buena Mala
Horario Mañana Mañana
Análisis Testigo Tratamiento Testigo Tratamiento
Acidez 9.26 12.71 4.94 7.95
TRAM a 3.85 10.25 2.74 4.45
Coliformes Tot 0.40 2.81 0.00 0.00
B.a.m.v. b 5.52 9.87 0.92 3.45 a tiempo de reducción de azul de metileno b bacterias aerobias mesófilas viables
En el Tabla 4 los tiempos que están en negritas son
los máximos tiempos de conservación de las muestras
de leche para cada combinación de factores teniendo
en cuenta los requisitos de la NTP 202.001
(INDECOPI, 1998). En este caso hay bastante
diferencia en horas entre las muestras de leche
testigos y tratamientos de la mañana y de la tarde
tanto del tipo A como del tipo B. Y se debe a que los
recuentos iniciales de tipo A y C tienen gran
diferencia (Cuadro 18) sumado a esto, la elevada
temperatura ambiente (28 – 32°C) favorece al rápido
desarrollo de los microorganismos. En consecuencia,
los tiempos de conservación de las muestras de leche
son muy cortos.
En esta zona, la operación del ordeño no se desarrolla
en las mejores condiciones higiénicas. La ICMSF
(1983) dice que en los alimentos frescos o naturales
de origen animal, la mayor parte de la
Enterobacteriaceae proceden de contaminaciones de
origen fecal y su presencia en gran número puede
indicar una manipulación no higiénica y/o una
almacenamiento inadecuado. Corroborándose esta
información con los datos obtenidos en los análisis de
recuento de coliformes totales. Del Tabla No 7 se
observa que incluso una leche de buena calidad
almacenada a temperatura ambiente, no demora más
de media hora en exceder el límite máximo
especificado por la Norma Técnica Peruana para
leche cruda.
El análisis de acidez láctica nos muestra que la
calidad de la leche influye significativamente
(p<0.05) en la acidez láctica, mientras que la
interacción de los factores calidad con tratamiento no
presentó diferencias significativas.
La comparación de los resultados de las muestras
testigo y tratamiento tuvieron diferencias altamente
significativas (p<0.05) independientemente de la
calidad, aunque los resultados de la interacción de la
calidad con el tratamiento no la tuvieron.
Los factores calidad y tratamiento afectan
significativamente a los resultados de la evaluación
del tiempo de reducción de azul de metileno
(TRAM), además, los resultados de la interacción de
la calidad con los testigos y tratamientos también
tuvieron un efecto significativo (p<0.05).
En la característica del TRAM, las muestras de leche
tipo A con tratamiento versus testigo conservaron
6.40 horas más. En el caso de las muestras de leche
tipo B con tratamiento versus testigo conservaron
1.71 horas más.
En el recuento de coliformes totales y recuento de
bacterias aerobias mesófilas viables los factores de
calidad y tratamiento presentaron diferencias
significativas (p<0.05) en los resultados evaluados.
En la evaluación del recuento de coliformes totales y
recuento de bacterias aerobias mesófilas viables las
interacciones de la calidad con tratamiento
presentaron diferencias significativas (p<0.05).
En el caso del recuento de bacterias aerobias
mesófilas viables las muestras de leche testigo
presentaron 0.92 horas de conservación y las
muestras de leche con tratamiento tipo B presentaron
3.45 horas, sin embargo, estos datos no presentaron
diferencias significativas por lo que no se puede
afirmar que el tratamiento aumente el tiempo de
conservación en las muestras de leche alta carga
bacteriana inicial.
El tiempo de conservación de las muestras de leche
testigo tipo A sería de 0.4 horas (24 minutos) y de
2.81 horas para las muestras de leche con tratamiento
tipo A teniendo en cuenta los requisitos establecidos
por la NTP 202.001 (INDECOPI, 1998) para leche
cruda.
El tiempo de conservación de las muestras de leche a
temperatura ambiente (28–32°C) independientemente
de su calidad sería de 0.2 horas para las muestras
testigo y de 1.41 horas para las que tienen tratamiento
teniendo en cuenta los requisitos establecidos por la
NTP 202.001 (INDECOPI, 1998) para leche cruda.
Ordeño Mecánico en Lima y Arequipa
En la acidez láctica inicial de las muestras de leche de
la zona de Lima se incrementaron desde 15.5 °
Dornic hasta 22.5 ° Dornic. En la zona de Arequipa
los valores iniciales aumentaron desde 14.7 ° Dornic
hasta 24.75 ° Dornic, ambas muestras evaluadas en
un período de 120 horas (5 días).
En el tiempo de reducción de azul de metileno
(TRAM) los valores iniciales variaron desde 8.17
horas hasta 0.1 horas (6 minutos) para la zona de
Lima y desde 7.12 horas hasta 0.48 horas (28
minutos) en la zona de Arequipa.
En los resultados del recuento de coliformes totales
se observó que las muestras testigo tipo A van desde
500 hasta 63x104 ufc/ml y las de tipo B desde 14x103
hasta 90x106 ufc/ml en un lapso de 12 horas. En las
muestras tratamiento los valores de las muestras de
leche tipo A se incrementaron desde 400 hasta
21x104 ufc/ml y las muestras tipo B desde 13x103
hasta 96x106 ufc/ml, ambas en un lapso de 12 horas.
En la figura R podemos como se desarrollaron los
coliformes en ambas zonas (Lima y Arequipa).
Roberto Albujar C., Fanny Ludeña U., Liliana Castillo S.
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 46
Figura R. Variación del recuentro de califormes totales en muestras de leche tipo A proveniente de ordeño
mecánico evaluadas en refrigeración (4 0C) de las zonas de Lima y Arequipa.
Los valores iniciales del recuento de bacterias
psicrótrofas totales aumentaron desde 71x103 ufc/ml
hasta 98x107 ufc/ml en un período de 120 horas en la
zona de Lima y desde 31x103 ufc/ml hasta 24x107
ufc/ml en la zona de Arequipa en el mismo período
de tiempo. En la Figura S podemos observar el efecto
del tratamiento en el desarrollo de esta flora
bacteriana.
Figura S. Variación del recuentro de bacterias psicrófilas en muestras de leche tipo A proveniente de ordeño
mecánico evaluadas en refrigeración (4 0C) de las zonas de Lima y Arequipa.
Figura S: Variación del Recuento de Bacterias Psicrófilas
en muestras de leche tipo A proveniente de Ordeño
Mecánico evaluadas en refrigeración (4°C) de las zonas de
Lima y Arequipa
0200400600800
10001200140016001800200022002400
0 12 24 36 48 60 72
Tiempo (horas)
Psi
cro
filas
To
t. (u
fc/m
l)
(x10
3 )
Testigo, Lima Tratamiento, LimaTestigo, Arequipa Tratamiento, Arequipa
Límite Calidad Aceptable
En el Tabla 5, se reportan los tiempos máximos de
conservación de leche cruda en refrigeración
proveniente de establos con ordeño mecánico de la
zona de Lima y Arequipa.
Tabla 5. Tiempos máximos de conservación de leche cruda (horas) para cada análisis en muestras provenientes de
ordeño mecánico evaluadas en refrigeración de las zonas de Lima y Arequipa.
Zonas Lima Arequipa
Análisis Testigo Tratamiento Testigo Tratamiento
Acidez 90.33 120.25 87.05 126.10
TRAMa 58.29 73.74 73.07 96.31
Coliformes Tot 54.41 69.22 35.17 47.95
Psicrotrofos Tot. 38.23 65.00 28.73 63.56 a tiempo de reducción de azul de metileno.
En el Tabla 5 se muestra en negritas los tiempos de
conservación de las muestras de leche en cada
combinación. Se puede observar que tales tiempos de
conservación fueron definidas por los análisis del
recuento de bacterias psicrótrofas.
Evaluación de la conservación de leche cruda en distintas regiones del Perú, mediante la activación del sistema
lactoperoxidasa
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 47
En el análisis acidez láctica nos muestra que el factor
tratamiento presenta diferencias significativas
(p<0.05). Asimismo, los resultados de la interacción
de los factores zona con tratamiento presentaron
diferencias significativas (p<0.05).
En la interacción de los factores zona con tratamiento
los resultados de la acidez láctica presentaron
diferencias significativas (p<0.05). Las muestras de
leche testigo de Lima y Arequipa presentaron
tiempos de conservación muy similares de 90.33 y
87.05 horas respectivamente. Las muestras de leche
de la zona de Lima con tratamiento se conservaron
por 120.05 horas en promedio y las muestras de leche
tratadas de la zona de Arequipa por 126.10 horas.
En la variable del TRAM observamos que la
interacción de los factores zona con tratamiento
presentó diferencias significativas en sus resultados
(p<0.05), lo cual indica que a pesar que las muestras
se han mantenido en la mismas condiciones de
almacenamiento existen otros factores tales como
alimentación, sexo, edad, etc, que influyen en el
tiempo de conservación de las muestras de leche.
Los resultados del recuento de coliformes presentaron
diferencias altamente significativas en la interacción
de los factores de la zona y tratamiento (p<0.05). Las
muestras de leche de la zona de Arequipa, tanto de
las muestras testigo como las que tenían tratamiento
tuvieron tiempos de conservación de 35.17 y 47.95
horas. Las muestras de leche con tratamiento de la
zona de Lima tuvieron tiempos de conservación de
69.22 horas.
Teniendo en cuenta que ambas zonas se evaluó en las
mismas condiciones de temperatura, se deduce que
las diferencias encontradas se pueden deber otros
factores tales como: alimentación de ganado vacuno,
época de lactancia, etc, que no se han considerado en
este trabajo.
Los resultados reportados de las muestras de leche
con tratamiento de la zona de Lima coinciden con los
resultados reportados por Zajac et. al. (1983) que
mencionan que la activación del Sistema
Lactoperoxidasa (LPS) extiende la vida en anaquel de
la leche cruda de vaca a 10 °C por al menos 3 días.
El tiempo de conservación de leche cruda en
refrigeración (4°C) independientemente de la zona de
evaluación sería de 33.48 horas sin tratamiento de
LPS y de 56.48 horas con tratamiento de LPS
teniendo en cuenta los requisitos establecido por a
NTP 202.001 (INDECOPI, 1998) para leche cruda.
Comparación de Ordeño Manual de la Zona de
Lima, Arequipa y San Martín
Los resultados de las evaluaciones del tiempo de
conservación de la leche cruda coinciden con las
observaciones del manejo e importancia que se le da
al ganado lechero en las tres zonas evaluadas.
En la zona de Lima se tiene gran tecnificación en los
establos grandes, sin embargo, los pequeños
ganaderos tienen poco conocimiento de las buenas
prácticas de higiene en el ordeño.
Los ganaderos tanto grandes como pequeños de la
zona de Arequipa son los que tienen mayor
conocimiento y están más concientizados de la
importancia de las buenas prácticas de higiene en el
ordeño así como de la influencia de esta en la calidad
de la leche.
La zona de San Martín tiene una ganadería incipiente
por lo que la mayoría de ganaderos no tiene mayor
cultura de higiene. Tales observaciones coinciden con
los resultados de coliformes totales de las tres zonas
evaluadas. A esto se debe sumar que las temperaturas
ambiente de las tres zonas son diferentes resultando
en un menor tiempo de conservación la zona de San
Martín.
De todas las variables analizadas la prueba de
recuento de coliformes totales fue la que determinaba
el tiempo de conservación pues el tiempo de
conservación calculada en función de esta variable
fue el menor.
Los factores zona, la calidad y tratamiento
presentaron diferencias significativas en sus
resultados (p<0.05) de las pruebas de acidez láctica,
tiempo de reducción de azul de metileno (TRAM),
recuento de coliformes totales y el recuento de las
bacterias aerobias mesófilas viables (b.a.m.v.). La
interacción de los factores zona con tratamiento
presentó efectos altamente significativos en los
resultados de la evaluación del TRAM, recuento de
coliformes totales y b.a.m.v.
En la interacción de los factores zona con tratamiento
los resultados presentaron diferencias altamente
significativas en la evaluación del recuento de
coliformes totales. Los tiempos de conservación en
orden fueron: Arequipa, tratamiento (10.95 horas),
Arequipa, testigo (6.79 horas), Lima, tratamiento
(5.54 horas), Lima, testigo (3.60 horas), San Martín,
tratamiento (1.41 horas) y San Martín, testigo (0.2
horas).
Tales resultados coinciden con las temperaturas
ambientes de cada lugar, Arequipa (10 – 13 ° C),
Lima (15 – 20 ° C) y San Martín (28 – 32 ° C). De tal
manera se deduce que mejores tiempos de
conservación se tuvo en la zona de Arequipa, luego
Lima y San Martín.
4. Conclusiones
Las muestras de leche cruda provenientes de la
zona de Arequipa (temperatura ambiente de 15 a 20
°C), Lima (temperatura ambiente de 20 a 25 °C) y
San Martín (temperatura ambiente entre de 28 a 30
°C) con tratamiento de activación del Sistema
Lactoperoxidasa tuvieron diferencias altamente
significativas en los tiempos de conservación al
compararlas con las muestras sin tratamiento.
En la zona de Lima, el tiempo de conservación a
temperatura ambiente de la leche independientemente
de su calidad inicial y del horario de ordeño es de
3.13 horas para el testigo y de 9.02 horas para el
tratamiento.
De las tres zonas evaluadas, en la zona de
Arequipa se encontró los tiempos más prolongados
de conservación de leche cruda a temperatura
ambiente, independientemente de la calidad inicial y
del horario de ordeño, fueron de 5.41 horas para el
testigo y de 12.02 horas para el tratamiento.
Roberto Albujar C., Fanny Ludeña U., Liliana Castillo S.
Anales científicos UNALM Vol. 70 N° 4, 2009, pp. 36-48 48
En la zona de San Martín, los tiempos de
conservación a temperatura ambiente de las muestras
de leche cruda testigo tipo A fue de 0.4 horas (24
minutos) y de 2.81 horas para el tratamiento.
Los tiempos de conservación en refrigeración
para las muestras de leche tipo A, proveniente de
ordeño mecánico de las zonas de Lima y Arequipa
fueron: Lima 38.23 horas para el testigo y 65 para el
tratamiento; Arequipa 28.73 horas para el testigo y
63.56 horas para el tratamiento, presentando
diferencias significativas (p < 0.05) en el tiempo de
conservación.
5. Referencias bibliográficas
Bacteriological Anlytical Manual 2001. Center for
Food Safety & Applied Nutrition. United States
Food & Drug Administration.
Bjork, L., Claesson, O. y Schulthes, W. 1979. The
lactoperoxidase / thiocyanate / hydrogen
peroxide system as a temporary preservative for
raw milk in developing countries.
Milchwissenschaft, 34(12): 726 – 729.
CAC/GL 13 – 1991. The Codex Alimentarius
approved guideline FAO, 2000.
De la Cruz F. 1991. Determinación de la calidad
sensorial de yogurt natural y/o saborizado
mediante pruebas descriptivas. Tesis Ingeniero
en Industrias Alimentarias. Universidad
Nacional Agraria La Molina. Lima. Perú.
Eck A. 1990. El queso. Ediciones Omega. Barcelona.
España.
FAO / OMS, 1991. Directrices para la conservación
de la leche cruda mediante el sistema
lactoperoxidasa.
FAO. 2000. Manual sobre el uso de la
lactoperoxidasa en la manipulación y la
conservación de la leche. Organización de las
Naciones Unidas para la Agricultura y la
Alimentación. Roma. Italia.
Harnulv, B. G & Kandasamy, V. C. 1982. Increasing
the keeping quality of milk by activation of its
lasctoperoxidase system. Milchwissenschaft,
37:8-15
IDF 1983. Dictionary of dairy terminology. 1 vol.
Elsevier ed. Amsterdam.
INDECOPI 1998. NTP 202.116. LECHE Y
PRODUCTOS LACTEOS. Leche Cruda.
Determinación de acidez de la leche. Método
volumétrico.
INDECOPI 1998. NTP 202.151. LECHE Y
PRODUCTOS LACTEOS. Queso fresco.
Determinación de acidez del queso. Método
volumétrico.
INDECOPI 1998. NTP 202.014. LECHE Y
PRODUCTOS LACTEOS. Leche Cruda.
Ensayo de reductasa o de azul de metileno. 2ª
Edición. Reemplaza a la NTP 202.008:1981
INDECOPI 1998. NTP 202.001. LECHE Y
PRODUCTOS LACTEOS. Leche Cruda.
Requisitos fisicoquímicos y microbiológicos.
INDECOPI 1998. NTP 202.088. LECHE Y
PRODUCTOS LACTEOS. Queso. Ensayos
Microbiológicos. Determinación del número de
coliformes.
International Dairy Federation 1990. International
IDF Standard 94B:1990. Milk Products.
Numeration of Yeasts & Moulds. Colony Count
Technique at 25 °C.
Madrid A. 1996. Curso de industrias lácteas. Mundi
Prensa Libros S. A. Madrid. España.
Pimentel E. 1994. Caracterización de la ganadería
lechera del Proyecto Majes. Tesis Ingeniero
Zootecnista. UNALM. Lima. Perú.
Ponce, P. López, M. G. y Martínez, E. 1987.
Conservación de leche cruda mediante la
activación del sistema lactoperoxidasa
/tiocianato/peróxido de hidrogeno. Rev. Salud
Animal 9:120-128
Porter J. 1983. Leche y productos lácteos. Editorial
Acribia. Zaragoza. España
Robinson R. 1987. Microbiología lactológica.
Editorial Acribia S.A. Zaragoza. España.
Santos A. 1996. Leche y sus derivados. Editorial
Trillas S.A. México. México.
Spreer E. 1975. Lactología industrial. Editorial
Acribia. Zaragoza. España.
Ugarte K. 1995. Efecto del cuajo enzimático
microbiano y genético en la calidad y
conservación del queso fresco. Tesis Ing.
Industrias alimentarias. UNALM. Lima. Perú.
Valenza J. 1991. Caracterización de la ganadería
lechera del sur III Arequipa (Campiña y la
subcuenca del río Majes), Moquegua (Provincia
Gral. Sánchez Cerro). Tesis Ing Zootecnista.
UNALM. Lima. Perú.
Varnam H. y Sutherland J. 1995. Leche y productos
lácteos. Tecnología química y microbiología.
Editorial Acribia. Zaragoza. España.
Veisseyre R. 1972. Lactología Técnica. Editorial
Acribia. Zaragoza. España.
Walstra P., Geurts T., Noomen A., Jellema A. y van
Boekel M. 2000. Ciencia de los productos
lácteos. Editorial Acribia S. A. Zaragoza.
España