4/21/2017

1

College of Veterinary MedicinePoultry Research and Diagnostic Laboratory

Enfermedad de Gumboro en el Radar Sanitario

Alejandro Banda MVZ, MCV, PhD, Dipl. ACPV, Dipl. ACVM

Bolsa de Fabricio

• Organo linfoide primario

• Linfocitos B se diferencian a partir de células madre

• Linfocitos adquieren receptores

• Genera diversidad en células productoras de anticuerpos

• Por presión negativa diversosantígenos llegan al lumen bursal

Folículo linfoide sano Desarrollo de la bolsa

• Fase de crecimiento durante las primeras tres semanas

• Etapa de meseta “plateau” entre la cuarta y octava

• Alcanza maximo desarrollo entre las 8 to 10 semanas

• Inicia una involución y practicamente desaparecealrededor de la madurez sexual

El virus de Gumboro

El virus de la Enfermedad Infecciosa de la Bolsa o de Gumboro…

• Avibirnavirus

• Virus inmunodepresor

• Replicación en la bolsa de Fabricio

• Destrucción de linfocitos• Necrosis• Apoptosis

• Atrofia bursal

• Dos presentaciones clínicas

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2

Partícula Viral del Virus de Gumboro

VP2

VP3

VP1

dsRNA

Existen diferentes tipos de cepas

Serotipo 1ImportanciaClínica

Serotipo 2

Estandar o clásicasEstandar o clásicas

VariantesAntigénicasTipo Delaware

VariantesAntigénicasTipo Delaware

Patogenicidad• Leve• Intermedia• Virulentas• Muy virulentas•Immunodepresión

Enfermedad Subclínicacon inmunodepresión

Otros tipos deVariantesOtros tipos deVariantes

10

B69R63

8

D78Estándar

44A1

Del. EVariante

8

R63

44A1

BK9

67

RS593

8

67

GLSVariante

8

44A1

1057

Antígenos del Virus (Snyder) Organización del Genoma

VP1

VP2

VP5

VP4 VP3

Hypervariable Region

Forma subclínica de Gumboro

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3

Gumboro muy Virulento

4/21/2017

4

ven-6ven-9ven-8ven-7

DV-86 HolandaOKYM Japón89163 Francia

MYGA-97UPM9204 MalasiaHK-46 Hong KongUK-661 Reino UnidoHarbin-1 China

JRa EspañaIpumirim-BR

SM-BRJNeto-BR

BR-3BR-7BR-2BR-6BR-1

BR-4BR-5

DR-2DR-3

DR-1DR-5

N6 NigeriaBD3/99 Bangladesh

Uy-5Uy-3Uy-4Uy-6Uy-1Uy-2

LD9569849VB Bélgica

F52/70 Reino UnidoOhio EUA

VENEZUELA

BRASIL

REP. DOMINICANA

URUGUAY

CUBA

ARGENTINA

Relación Genética entre Cepas Muy Virulentas del Virus de GumboroVirus Latinoamericanos y de Referencia

Serotipo 2

Cepas de Gumboro presentes enColombia

Tipificación por RT-PCR/RFLPLatinoamérica

ColombiaSimilar Delaware E

EcuadorSimilar Delaware E

Sin clasif.

PerúDelaware ADelaware E

Similar Del EPBG‐98

Similar STC

Rep. DominicanaUK‐661Delaware E

VenezuelaGLSLukertEdgarSimilar Delaware E

BrasilUK‐661849 VBEdgar

MéxicoLukertEdgarSTC

CU‐1Sin clasif.

DR3

DR-1DR-5

N6 NigeriaBD/399 Bangladesh

Uy-5Uy-1

Uy-3

Uy-6LD9569

MYGA97

HK46 Hong Kongven-9

ven-6ven-7

UK661 Reino UnidoJRa España

Ipumirim-BRSM-BR

BR-3BR-1

JNeto-BRBR-5

849VB Bélgica52/70 Reino UnidoI241A33

ven-4ven-5

Edgar EUAS001MX7997Lukert EUA

MX7504MorMta

Ven-3GLS EUA

EC-3Var-A EUA

Col143-44

850 Var-E EUA

9865 LD305

Prezoto-BRS002

P30903Candioto-BR

Giacomini-BRMX7499

B4-3MXC-278

Ohio EUA

Rep. Dominicana

Uruguay

Cuba

Venezuela

Argentina

Brasil

Argentina

VenezuelaArgentina

México

Venezuela

Ecuador

Colombia

México

Argentina

Brasil

Clásicas o Estándar

Variantes tipo Delaware

Virus de Alta Virulencia

SinClasificación

Serotipo 2

Virus detectados

No. Muestras

Muy virulentos 15

Variantes 12

Vacunales 2

Negativas 3

Proyecto Universidad de Georgia – FENAVI:  Relación de Muestras analizadas

Muy virulentas

Variantes

4/21/2017

5

Molecular characterization of infectious bursal disease virus in diagnostic cases in Latin America in 2010

TMC Barbosa, E Turpin, R Verdi, M TamayoPublished on: 10/20/2011

646317646417CorDQ916187TDQ916186T646317CorDQ916188T294307Std152724Ces132611561Cun132612021Cons132612017Std

UK661849VB

52702512132612115Boy

Edgar2LukertCC

DQ916181TGLS

VarA1084E

VarE8903

11153JX429995T

DQ916185TDQ916183T

502018HuiDQ916184T

132611797Cons132611798Cun

D78JX429996TDQ916182T

132612112Cun132612194

Ohio96

97

97

99

92

75

90

6975

94

99

454629

68

35

37

56

76

3527

17

13

9795

6580

67

52

0 02

Cepas muy virulentas

Cepas estándar

Cepas Tipo Delaware

Otros subtipos

Cepas de Gumboro presentes enlos Estados Unidos

AR112AR113

11153MS218MS219

9865PMS202

MS203VA269AR84

CA26AR265GA36GA205

NC171AL186

GA19813435

AR280849

625GA213

853GA129

DE104DE190

VA270NC111

AR272MN263

89/03 Vacc

NC1871084E Vacc

Delaware E

GA234619

850SC166

Group6U‐28

16290GA148

GA151NC224

MO195MO196

MO44WI236

WI240Delaware A

9109NC151588616151

LukertAR266GA211

Ohio

Phylogenetic Analysis U.S.  IBD field viruses

Delaware Type

Standard Strains

P09936

P091356P3S6

P091356P1S2

P101235

P101233

P094058Kd

P091355P2D6

P087183

P087184

P086780

P086814

11153

P091706Gb

P091706JS

P10103

9865

P092481P2PV

P094057Kd

P094056Kd

P094059Kd

P094328Kd

P09502

P091707Sm

89/03  Vaccine Strain

850

U28

P091707McG

1084E  Vaccine Strain

P091707Pk

P1014763

P1014764

P1014765A

P101476V6

Delaware  E

GLS

Delaware A

9109

UK661

Bursine 2  Vaccine

Lukert

Ohio

99

0.05

Standard(Classic)Strains

DelawareType

Viruses

Phylogenetic Analysis Mississippi  IBD field viruses(2008 ‐ 2010)

GM KY

JR KY

SF KY

DH KY

PA KY

SD KY

EJH KY

DK KY

PF TN 

JL GA

KO TN

SF GA

GA GA

HF GA

EW GA

CL TN

TL TN

CR GA

GR GA

CC TN

GC TN

RH2 TN

CR TN

RH TN

BW KY

CM KY

TC KY

RS TN

Delaware E (X54858)

Vaccine 89/03 (AF498629)

Vaccine 1084E (AF498628)

LH GA

TF GA

GW FL

HG KY

SH FL 

TW KY

CR KY

JB KY

GLS (AAA52086) 

Delaware A (M64285)

UK661, Very virulent IBDV (X92760)

Edgar (AY095229)

Lukert (AY095230)

Ohio  Serotype 2 (AY095231)

91

99

99

99

55

99

97

87

11

72

6946

62

75

22

81

5369

90

35

32

53

13

42

35

34

45

39

67

34

28

46

31

58

59

19

28

0.05

B

A

C

Variantes Delaware E

Cepas Estandard

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6

Metodologías de Diagnóstico

Análisis Histopatológico

• Evolución de lesiones biencaracterizada

• Provee información acercade cuando ocurrió la infección

4/21/2017

7

Títulos ELISA mediante estuche IBD‐XR y coeficientesde variación

8700

6536 6745

1289913680

14685

11696 11853 11849 11700

12795

10987

11670

0

2000

4000

6000

8000

10000

12000

14000

16000

1d (994 flks)

5‐9w (163 flks)

10‐14 w (204 flks)

15‐19w (312 flks)

20‐24w (229 flks)

25‐29w (339 flks)

30‐34w (234 flks)

35‐39w (158 flks)

40‐44w (233 flks)

45‐49w (177 flks)

50‐54w (323 flks)

55‐59w (189 flks)

60+w (151 flks)

CV           39           52            46           28           24          18           26           26           27       25           22          27            26   

ELISA GMT Titers

397

Sept 2012‐Sept 2014

Titulos ELISA en pollo de engorde mediante estucheIBD‐XR y coeficientes de variación por edad

6431

4952

3213

810 807

4906

6093

7023

9274 9406

0

1000

2000

3000

4000

5000

6000

7000

8000

9000

10000

1d (634 flks)

2‐6d  (4 flks)

7‐13d (29 flks)

14‐20d  (20 flks)

21‐27d (26

 flks)

28‐34d (50

 flks)

35‐41d (142 flks)

42‐48d (151 flks)

49‐55d (37

 flks)

56+d

 (103 flks)

CV           42                  53                 55                  62                  84                 59             52                 46                31                 33

ELISA  G

MT Titers

397

Sept 2012‐Sept 2014

Tarjetas FTA

• Impronta sobre matrix de la tarjeta

• Agentes microbianos son inactivados porquímico y ácidos nucleicos se estabilizan

• Se pueden enviar a temperature ambiente sin clasificación como Patogeno Vivo por la IATA

• Se require de un permiso por el Depto. De Agricultura para su ingreso o envío a los EstadosUnidos

Vacunación…

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8

Vacunas vivas atenuadas

• Son atenuadas por pasaje seriado en cultivo de tejidos, huevosembrionados

• Inducen respuesta immune similar a la inducida pot el virus de campo

• Vacunas con virus estándar o tipo Delaware

• Suaves, intermedias y “caliente“

• Pueden inducir Reacción Postvacunal severa en la bolsa con inmunodepresión

Algunas Cepas Vacunales

Vacuna Tipo Cepa

Bursine Mild Lukert

Bursine 2 Intermediate Lukert

Bursine plus Intermediate “plus” Lukert

Bursa‐ Vac Hot classic Moulthrop

Bursa‐ Vac 3 Mild intermediate Eidson ST‐28

Bursa‐ Vac 4 Delaware  var E Mild 1084E

Univax‐BD Mild intermediate St‐12

PBG‐98                       Mild Classic                        Baxendale

Algunas Cepas Vacunales

Vacuna Tipo Cepa

Univax Plus Intermediate Classic St‐12 + C‐4

Bursa  Blen M Mild Classic 2512

IBD  Blen Intermediate Plus 2512

89 / 03 Inter.  Delaware E 89 / 03 Var E

Clonevac D‐78 Mild intermediate Clone D‐78

Primevac IBD‐3 Inter. Plus + Del  Var Std +  GLS

S‐706 Inter. Classic S‐706

SVS‐510 Inter Del. Var. S‐706 + 1084A Gene VP2

VP2VP5

VP4 VP3

Plásmido con gene

VP2

Plásmidos con genes de HVT Virus de Gumboro

HVT RecombinanteLinea celular

permisible

Como desarrollar una vacuna recombinante

HVT como vector• No sufre interferencia con anticuerpos maternos

• Protección completa contra Gumboro puede tardar de 3 to 4 semanas

• rHVT no se disemina por vía horizontal

• Puede combinarse con SB1 o Rispens (CVI988) en zonas de alto desafío

• Procdimientos de reconstitución y dilución son críticos

• Existe dos tipos de vacunas rHVT• Cepa Faragher• Delaware E

La experiencia colombiana

• Dr. Luis Alberto Botero H.

• Compañía localizada en una area con pollo de engorda, aves de postura y reproductoras

• Presencia de cepas muy virulentas y variantes tipo Delaware

• Otras enfermedades: Newcastle, bronquitis infecciosa, pneumovirus, ILT, fowl pox, mycoplasma, Pasteurella, Bordetella, infectious coriza

• Presencia de títulos elevados por ELISA, sin evidencia clínica de Gumboro y  of elevated ELISA titers, no clinical evidence of IBDV, performance acceptable

4/21/2017

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Experiencia colombiana

Programa de vacunación

• Incubadora:• Marek‐Gumboro – Vacuna viva

• Vacuna inactivada ENC S.C.

• ENC B1B1‐IBV h120 spray

• En campo:• 12 días IBDV 2512 spray

• 14 días ENC VG/GA spray

• 18 días IBDV Moultrop spray

Nuevo programa de vacunación

• Incubadora:• Recombinante Marek‐Gumboro

• Vacuna inacivada ENC S.C.

• ENC B1B1‐IBV h120 spray

• En campo:• 14 days ENC VG/GA spray

Experiencia colombiana

Peso corporal

2.25

2.3

2.35

2.4

2.45

2.5

Dif: 134 g

Before rHVT With rHVT

Ganancia diaria de peso

53

54

55

56

57

58

59

Dif: 4 g

Before rHVT With rHVT

kg gr

Antes rHVT:  43,008,418 pollos, 2,867 parvadasCon rHVT:   128,320,000 pollos, 6,416 parvadas

Experiencia colombiana

Conversión alimenticia

1.74

1.76

1.78

1.8

1.82

1.84

1.86

1.88

1.9

Dif: 0.091 points

Before rHVT With rHVT

Mortalidad

0

1

2

3

4

5

6

7

Dif: 1.47

Before rHVT With rHVT

%

Antes rHVT:  43,008,418 pollos, 2,867 parvadasCon rHVT:   128,320,000 pollos, 6,416 parvadas

Experiencia colombiana

Eficiencia

115

120

125

130

135

140

Dif: 14 points

Before rHVT With rHVT

Edad al mercado

41.4

41.6

41.8

42

42.2

42.4

42.6

42.8

43

Dif: 1 day

Before rHVT With rHVT

Antes rHVT:  43,008,418 pollos, 2,867 parvadasCon rHVT:   128,320,000 pollos, 6,416 parvadas

Experiencia colombiana

Decomisos

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

Dif: 0.16%

Before rHVT With rHVT

Costo por uso antibióticos

0

0.002

0.004

0.006

0.008

0.01

0.012

0.014

0.016

Dif: 4 g

Before rHVT With rHVT

% USD

Antes rHVT:  43,008,418 pollos, 2,867 parvadasCon rHVT:   128,320,000 pollos, 6,416 parvadas College of Veterinary Medicine

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