Electroforesis en gel

Elena Pacheco

Electroforesis es…

Cuando se aplica una carga eléctrica a una solución:

•Las moléculas con carga positiva se desplazan hacia el electrodo negativo.

•Las moléculas con carga negativa se desplazan hacia el electrodo positivo.

Utilidad

Las moléculas se desplazan según su tamaño

separar DNA/RNA/proteínas

La electroforesis puede ocurrir

Libre en disolución

En un medio de soporte

Papel Gel

Electroforesis en gel

El gel funge como una matriz porosa.

A través del gel migran las moléculas.

Se tiñe con un colorante que se une a los ac. nucleicos o a las proteínas.

Las moléculas (fragmentos) pequeñas migran más que las pesadas pues atraviesan la matriz con mayor facilidad.

Según lo que se desee separar se utilizan dos tipos de gel

Ac. Nucléicos Proteínas

Agarosa Poliacrilamida

Gel de agarosa

Polisacárido de poros pequeños.

Según el tamaño de la molécula a separar se utilizan distintas concentraciones.

Colorante: bromuro de etidio.

Gel de poliacrilamida

Polímero entretejido de poros grandes.

Permite la migración de grandes moléculas.

Colorante: azul de Coomassie.

Aplicaciones

Es una de las herramientas más utilizadas en biología molecular.

Detecta proteínas y ácidos nucleicos según su tamaño.

Ventajas

Sencilla.

Bajo costo.

Efectiva.

Desventajas

Sólo separa por tamaño.

Colorantes carcinogénicos.

Fuentes:

Nelson, D.L., Cox, M.M.(2008) Lehninger. Principles of biochemistry, 5ª ed. USA.

Mathews, C.K., van Holde, K.E., Ahern, K.G. (2002)Bioquímica. 3ª ed. España.