EXAMEN N˚1

1. Explique la necesidad y la conformación de los análisis clínicos.

La necesidad y la conformación de los análisis clínicos que se realizan en un

laboratorio clínico; nos ayudan a establecer, descartar un diagnóstico y controlar un

tratamiento del paciente mediante un análisis cualitativo y cuantitativo.

2. Indique el empleo de la heparina en la obtención de una muestra.

El empleo de heparina es importante en la obtención de una muestra porque es un

anticoagulante natural y excelente ya que contiene un carbohidrato ácido complejo

que busca reducir al mínimo la hemólisis. Se emplea a razón de 0.1 a 0.2 mg por

mL de sangre.

3. Defina el concepto de hematología.

La hematología es el estudio de las células sanguíneas y de la coagulación;

cumpliendo funciones de transporte, mecanismos de equilibrio ácido – base y

reacciones inmunológicas. Los cambios en uno o más de estos componentes pueden

producir enfermedad.

4. Mencione las ventajas de las mezclas de oxalatos en un análisis hematológico.

Ventajas de las mezclas de oxalatos:

Es barato.

Fácil de preparar.

No requiere dilución.

Suministra adecuadas muestras de sangre para la medición de hemoglobina,

recuento de glóbulos blancos y rojos y de hematocrito.

5. Exponga los componentes y las propiedades de la sangre humana.

Los componentes de la sangre son los siguientes:

- Plasma; líquido amarillento claro, representa alrededor del 5 % del volumen

sanguíneo y está constituido por: agua (90%) y sólidos disueltos (6 al 8%),

productos celulares, productos de desecho y gases disueltos.

- Corpúsculos celulares: entre ellos leucocitos o glóbulos blancos, hematíes,

plaquetas o trombocitos.

Las propiedades de la sangre son:

- La densidad de la sangre entre 1.054 y 1.060 g/ mL.

- Densidad del plasma entre 1.024 y 1.028 g/mL.

- El pH de la sangre es de 7.4 con variaciones entre 7.35 y 7.45.

- La presión osmótica sanguínea que se debe fundamentalmente a distintas sales,

productos de desecho, azúcares y otros minerales.

- Soluciones de NaCl que son isotónicas o fisiológicas necesarios para el

funcionamiento de la célula.

6. Señale el ciclo vital del linfocito y la formación de los monocitos en la médula

ósea humana.

El ciclo vital de los linfocitos es la siguiente: su localización anatómica es el órgano

generador (médula ósea o timo) y conforme avanza contiene varios estadios de

maduración, primero tiene una maduración precoz y de expansión mediada por

factores de crecimiento; primero es célula madre, de ahí pasa como prolinfocito,

luego prelinfocito a linfocito inmaduro, donde adquieren competencia funcional,

después linfocito maduro y por ultimo linfocito efector diferenciado; estos dos

últimos se localizan en el órgano o tejido linfoide periférico ( células plasmáticas).

El ciclo vital de los monocitos es la siguiente: Tiene varios estadíos como el

monoblasto que contiene citoplasma gris, presenta vacuolas y contener gránulos

azules muy finos. Luego evoluciona a promonocito, donde se ve más citoplasma.

Por último pasa a Monocito que es una célula más grande, con núcleo grande,

grande muescas o en forma de herradura.

7. Analice los casos donde se recomiendan la punción cutánea o venosa en la

obtención de muestras sanguíneas.

En una punción cutánea se recomiendan pequeñas cantidades de sangre para una

determinación de hemoglobina, recuento de glóbulos rojos o blancos y plaquetas, en

frotis de sangre también. En caso de neonatos o en niños también se utiliza punción

cutánea y en quemaduras extensas. En cambio en una punción venosa se necesita

mayor cantidad de sangre para realizar gran números de pruebas, se puede repetir o

confirmar un resultado. Es un método adecuado y más fácil.

8. Cite las condiciones para efectuar la preparación y tinción de frotis de sangre o

médula ósea.

Las condiciones para efectuar una adecuada preparación y tinción de frotis de

sangre son:

- Utilizar portaobjetos limpios y sin grasa.

- Para extender la sangre se utiliza otro portaobjeto con un borde liso y regular.

cuyas esquinas deben estar redondeadas.

- Se forma un ángulo de 30˚ con el portaobjeto extendido horizontalmente y el

otro portaobjeto a extender.

- Mientras más lentamente se hace el frotis más delgada se hace la muestra.

- Los frotis de sangre se debe secar al ambiente, para luego teñirlos.

- Se debe seguir al pie de la letra los pasos para la coloración de Wright para

obtener un buen coloreado.

- Las láminas teñidas se dejan secar al ambiente para luego examinarse con el

objetivo de inmersión.

9. Comente la conjugación sanguínea y los factores de coagulación.

La coagulación sanguínea actúa como una secuencia de reacciones que circulan

como precursores enzimáticos convirtiéndose en enzimas activas, donde actúa cada

factor primero como substrato y luego como enzima. Y pequeñas cantidades de

enzima son capaces de activar grandes cantidades de substrato en cada paso

sucesivo. Consta de 12 factores de coagulación, cada uno de ellos se expresa en

número romanos y cada uno contiene un nombre habitual que le caracteriza y

cumpliendo varias funciones, pueden disminuir o aumentar su concentración en

plasma ocasionando enfermedades.

10. Detalle las características de los factores I, V y VIII y los cuadros clínicos que

se presentan en una coagulación.

Características del factor I:

Conocido como fibrinógeno que es Globulina grande, más larga que ancha.

Pertenece al grupo de proteínas fibrilares.

Cifras normales: 200 a 500 mg / 100 mL.

Producido por el hígado.

Contiene un reforzamiento que estabiliza la fibrina debiéndose al factor XIII,

creando enlaces covalentes dentro del polímero de fibrina.

Cuadro clínico del factor I:

Aumento en sangre Disminución en sangre

- Inflamación

- Mieloma

múltiple

- Nefrosis

- Embarazo

- Obstétricos

- Consecutivos a intervención de pulmón

- Transfusiones de sangre incompatible.

- Quemaduras extensas

- Cáncer de próstata

- Síndromes trombohemolíticos microangiopáticos.

Características del factor V:

Conocido como proacelerina que es Globulina intermedia entre la globulina beta

y gamma.

Durante el proceso de coagulación, ésta se agota, por lo que no se encuentra en

suero. Producida al parecer por el hígado.

Indispensable para las últimas fases de tromboplastina.

Reaccionan en presencia de los iones Ca+.

No se absorbe sobre BaSO4 ni con Al (OH)3.

Cuadro clínico del factor V:

- Se presenta en enfermedades hepáticas graves o cuando existen anticoagulantes

en sangre.

- Su transmisión se da a través de un gen autosómico recesivo, los sujetos

afectados son homocigotos.

- Los enfermos que sangran deben recibir transfusiones de sangre completa fresca

o plasma fresco.

Características del factor VIII:

Conocido como antihemolítico; globulina que no se ha podido aislar, consumida

durante la coagulación y no existe en suero.

Indispensable para el mecanismo intrínseco de producción de tromboplastina

(existe menos del 40% de la concentración normal que se forme un coágulo).

Cuadro clínico del factor VIII:

- Su deficiencia produce hemofilia.

- El sangrado repetido en articulaciones, mucosa, riñones y otros órganos

produce invalidez o la muerte.

- En hemofílicos el nivel de globulina es inferior a 15 o 20 % de cifras normales.

- En mujeres hemofílicas para detener el sangrado es necesaria transfusión de

sangre fresca completa concentrados de factor VIII, plasma fresco.

11. Indique la importancia de los iones de calcio y la tromboplastina del plasma

durante la coagulación.

La importancia de los iones de calcio son los siguientes:

- Son necesarios en el mecanismo de la coagulación por lo que actúa en la

producción o activación final de la tromboplastina, en la transformación

enzimática de protrombina en trombina y en la formación de fibrina.

- Se necesitan muy pocos iones durante el mecanismo de coagulación por lo que

no presenta trastornos por insuficiencia.

La importancia de la tromboplastina es la siguiente:

Transforma la protrombina en trombina.

En la coagulación de la sangre intervienen mecanismos: extrínseco y intrínseco,

los cuales transforman el fibrinógeno en fibrina.

En el mecanismo extrínseco participan substancias complejo tipo lipoproteínicas

que se comportan como enzimas y se activan por factores plasmáticos,

principalmente por el factor VII.

Intervienen cuando menos 5 factores en el mecanismo intrínseco de producción

de tromboplastina: factor plaquetas, IX, VIII, XI y XII.

12. En que consiste la insuficiencia del factor IX?

Consiste en una enfermedad congénita que desempeña el mismo papel de la

hemofilia clásica (trastorno ligada al sexo), que da una producción tardía de

tromboplastina, la cual se puede corregir con pequeñas cantidades de plasma o

suero normales.

Las enfermedades que produce son:

- Coagulación intravascular diseminada.

- Malabsorción de grasa.

- Enfermedad hepática.

- Deficiencia de vitamina K.

- Uso de warfarina.

13. Comente la hemostasia y sus fases sucesivas.

La hemostasia es un conjunto de fenómenos que combaten y detienen el sangrado

de un vaso sanguíneo lesionado, acompañado de modificaciones físicas y

bioquímicas que son desencadenan por lesiones en tejidos y vasos sanguíneos, y

termina por la transformación de la sangre líquida en un trombo o coagulo sólido

que tapa los vasos rotos.

La hemostasia comprende un proceso de fenómenos:

Fenómenos extravasculares; tiene efectos físicos (tienden a cerrar y ocluir la

abertura de los vasos sanguíneos lesionados) y bioquímicos que reaccionan con

el plasma y los factores de las plaquetas.

Fenómenos vasculares: donde el vaso sanguíneo lesionado se cierra casi

instantáneamente, proceso llamado vasoconstricción, teniendo como sustancia a

la serotonina.

Fenómenos intravasculares: comprende reacciones fisicoquímicas que

transforman la sangre liquida en coágulo sólido de fibrina. Participan los iones

de calcio.

Las fases son sucesiones normales que inicia cuando se sufre una lesión y inicia el

sangrado, luego desencadena una serie procesos tantos físicos como bioquímicos

donde actúan varias sustancias para detener la sangre, actuando las plaquetas como

tapones para sellar la abertura vascular, la trombina producida, transforma el

fibrinógeno en fibrina, y ésta se transforma en colágeno donde queda reducida a una

pequeña cicatriz

14. Exponga las cualidades de los anticoagulantes.

Oxalato de amonio y potasio: No requiere dilución, es fácil de preparar y su precio

es cómodo.

Citrato de sodio y potasio: se emplea para estudiar los trastornos de coagulación.

ACD: se utiliza como anticoagulante para transfusiones sanguíneas y para

hematología (preserva los antígenos de glóbulos rojos).

Heparina: anticoagulante excelente y natural. Reduce al mínimo la hemólisis.

15. ¿Cuándo es conveniente utilizar la heparina en hematología?

Es conveniente utilizar la heparina en una determinación de electrolitos séricos o

estudios de fragilidad de glóbulos rojos.

16. Mencione las características de una persona inmune y explique las diferencias

entre la inmunidad natural y adquirida.

Características de una persona inmune:

No desarrolla la enfermedad después de la exposición a la misma.

Tiene anticuerpos de inmunidad específicos en la sangre considerada eficaz

contra microorganismos invasores.

Diferencias:

Inmunidad natural Inmunidad adquirida

- Lo adquiere el individuo cuando nace

con el individuo y lo capacita para

resistir una infección sin haber tenido

antes una enfermedad.

- Puede ser de raza; característico de

una especie dentro de una raza, de

especie; característica de una especie

en particular. de individuo; esta

- Lo adquiere el individuo en el

transcurso de la vida.

- Puede ser pasiva; cuando es de

corta duración y lo anticuerpos son

producidos en otro animal y se

inyecta a otra persona y la activa;

es de larga duración, donde los

anticuerpos se forman dentro del

inmunidad se da por ataques previos,

leves, no reconocidos de la

enfermedad. y congénita; se debe a la

transferencia pasiva de anticuerpos de

la madre al feto.

individuo como resultado del

contacto de los microorganismos.

- Aquí las células del cuerpo de los

individuos tratados no forman parte

de este tipo de inmunidad.

17. Analice las funciones de los antígenos y macrófagos en el sistema inmune de las

personas.

Los antígenos son sustancias extrañas, que cuando ingresan al organismo estimulan

la formación de anticuerpos específicos. Son responsables de la especificidad y de

la estimulación. La especificidad se debe a que son capaces de unirse con las

estructuras químicas relacionados con los anticuerpos.

Los macrófagos ingieren y destruyen toda la materia en partícula por el proceso de

endocitosis. Estas células eliminan y destruyen ciertas bacterias, células lesionadas

o desgastadas. Durante el proceso fagocítico a veces es facilitado por anticuerpos, y

interviene el complemento como amplificador. El sistema de macrófagos es

importante para el reconocimiento inicial y la elaboración de antígenos, necesarias

para inducir la respuesta inmunitaria específica.

18. ¿En qué consiste una prueba cruzada en hematología?

Una prueba cruzada consiste en utilizar dos pruebas una mayor y una menor, donde

si la mayor da compatible, el receptor puede recibirlo concentrado de eritrocitos y

si la menor da compatible entonces el receptor puede recibir el plasma y si ambas

dan compatibles entonces el receptor podrá recibir la sangre completa del donador.

EXAMEN N˚2

1. Defina el concepto de selección del donante y señale sus objetivos.

Se define al proceso que comprende interrogatorio clínico, examen físico y prueba

de laboratorio para determinar la citometría hemática o hematocrito, la cual decide

si la donación puede ser perjudicial para el donante o la transfusión puede ser

riesgoso.

Los objetivos son:

- Obtener información de los hábitos, antecedentes epidemiológicos y patológicos

del donante de sangre.

- Garantizar una selección apropiada que no perjudique la salud del donante y

aporte beneficios al receptor.

- Proporcionar confianza y seguridad al individuo como donador y receptor del

componente sanguíneo.

2. Exponga los aspectos para interrogar al donante sobre temas epidemiológicos y

patológicos de la diabetes, el paludismo y el sida.

Diabetes:

- Es usted diabético?

- ¿Qué medicamento consume?

- Se aceptan con tratamientos hipoglucemiantes orales que no se presenten

complicaciones vasculares derivadas de la enfermedad.

- Se descartan los de insulino dependiente.

Paludismo:

- Son diferidos pacientes por seis meses y tres años, dependiendo si han padecido

paludismo, si son asintomáticos, que no reciben drogas antimaláricas, personas

por vivir en áreas endémicas, si están sin tratamiento y no hay evidencia de la

enfermedad.

- Son descartadas personas que han sufrido paludismo y presentan recaída de su

enfermedad o reinfección y personas que se demuestra que padecen paludismo.

- Se interrogan: ¿Ha sufrido paludismo?, ¿Ha vivido en el interior del país?

¿Dónde? ¿Qué sitios ha visitado? ¿Ha viajado al exterior los últimos seis meses?

¿Hacia dónde? ¿Ha recibido algún medicamento contra el paludismo? ¿Cuál?

¿Cuándo? ¿Ha estado fuera del país los últimos tres años?

Sida:

- Son descartados automáticamente como donantes

- Se interrogan lo siguiente: ¿Alguna vez en su vida ha tenido relaciones sexuales

con un hombre que usted cree sea homosexual o bisexual? ¿Alguna vez en su

vida ha tenido relaciones sexuales con alguien que tenga prueba de SIDA

positiva? ¿ha tenido usted relaciones sexuales con prostitutas en el último año?

¿Se ha inyectado alguna droga con agujas o jeringas que han utilizado otras

personas? ¿usted ha tenido relaciones sexuales últimamente?

- Tiene sudoraciones nocturnas

- Fiebre sin causa aparente

- Pérdida de peso sin razón alguna, cuándo y por qué?

- Diarrea persistente

- Manchas persistentes o irritaciones no comunes en la boca.

- ¿Su pareja sexual ha presentado alguno de los problemas que se le ha

preguntado?

- ¿Su esposo es hemofílico?

- ¿Usted se ha realizado la prueba de VIH?

- ¿Cuál fue el resultado?

3. Mencione las normas de carácter específico en la selección del donante de

sangre.

Las normas específicas de selección del donante de sangre son:

Utilizar material desechable y estéril.

Mantener comunicación efectiva y eficaz

Utilizar un lenguaje adecuado con el nivel educativo del donante.

Mantener privacidad durante la entrevista.

Registrar la información en forma veraz y exacta en el formato correspondiente.

Referir al primer nivel de atención primaria si el caso lo amerita.

Archivar historia del donante de acuerdo a la normativa establecida, guardando

información de donaciones sucesivas en estadística e informática.

Efectuar controles de calidad periódicos en los equipos utilizados en el examen

físico.

4. Detalle el procedimiento para la extracción de sangre e indique el equipo y

material que se emplea.

Para la extracción de sangre necesitamos lo siguiente:

Material y Equipo:

- Pinza hemostática y Tijera quirúrgica

- Porta pinza con solución antiséptica.

- Bolsa de recolección de sangre simple, doble, triple y cuádruple.

- Sellador eléctrico

- Torundas de algodón y Gasas

- Alcohol yodado, Alcohol acetona

- Jabón germicida

- Adhesivo

- Gradilla con tubos 13 x 100 mm y 75 x 12mm

- Curitas y Torniquetes

- Agitador eléctrico

- Guantes quirúrgicos

- Envases rígidos para colocar material desechable

- Riñoneras

- Equipo de emergencia

- Estimulantes cardiacos

- Anticonvulsiones y Sedantes

- Broncodilatadores, Antieméticos

- Equipos de infusión(solución sangre)

- Aspirador portátil y Bombas de oxígeno

- Bajalenguas

- Jeringa de 2 a 10cc.

- Toalla de papel y Bolsas de papel

Procedimiento:

Antes de la punción venosa:

Preparar la punción venosa:

Llevar al donante a la sala de extracción de sangre

Brindar comodidad y confort, verificar sus datos del paciente

Examinar la región antecubital para seleccionar la vena

Identificar la bolsa de donación con etiquetas o con bolígrafo

Rotular los tubos con las etiquetas

Explicar el procedimiento al donante

Visualizar la vena y aplicar un torniquete

Retirar el torniquete para preparar el área y limpiar con jabón germicida durante 30 seg.

Eliminar el jabón, aplicar solución de alcohol acetona

y dejar secar

Cubrir el sitio con gasa estéril y no tocar la parte

desinfectada

Realizar la punción venosa:

Inspeccionar la bolsa, el anticoagulante debe estar

transparente

Colocar la bolsa en la balanza ajustándola a la cantidad de sangre que se va a extraer

Ajustar el torniquete, indicar al donante que cierre y abra la mano, durante la colección.

Efectuar la punción inmediatamente, observar el flujo sanguíneo a través del

tubo en dirección a la bolsa

Mezclar suavemente y periódicamente la sangre y el anticoagulante, para evitar la formación de coágulos

Después de llenar la bolsa, detener el flujo sanguíneo

y pesar la bolsa.

Grapar y anudar el tubo de la unidad de sangre. Cortar el

nudo. Recoger las muestras de sangre y retirar el torniquete.

Colocar la hora que terminó la donación y registrar las condiciones del proceso y colocar la unidad de sangre a temperatura adecuada, o debe conservarse a 1 a 6 ˚C.

Brindar cuidados al paciente:

- Mantener al donante sobre el sillón durante 10 min. observándolo

continuamente.

- Dar recomendaciones de no fumar, no ingerir bebidas alcohólicas, evitar subirse

a ascensores.

- Dar un refrigerio

- Despedirlo amablemente, invitándolo a una próxima donación por un período de

6 meses aproximadamente.

- Observar reacciones adversas antes, durante y después de la donación.

5. Explique los procedimientos de los laboratorios y banco de sangre en la

extracción a los donantes.

Para la extracción de los donantes se debe seguir varios procedimientos:

- Utilizar material estéril

- Identificar la bolsa de recolección de sangre, bolsas satélites y tubos, con un

sistema numérico, que no permita equivocaciones.

- Observar apariencia física de la bolsa y fecha de vencimiento.

- Aplicar método de asepsia y antisepsia.

- Extraer la cantidad de sangre indicada, en un tiempo de 8 a 12 min tiempo de

donación máximo <15 min.

- Mantener una comunicación constante

- Mantener controles de calidad relacionados con la cantidad de sangre a extraer

durante el proceso.

- Registrar en historia de donación cantidad de sangre extraída.

- Ejecutar plan de acción si ocurre una reacción adversa antes, durante o post

donación.

- Hacer control bacteriológico de la asepsia en el sitio de la punción.

6. Cite las diferencias de los tipos de transfusión autóloga y sugiera las técnicas

para la recolección de sangre.

Las diferencias de los tipos de transfusión autóloga son:

Donación predepósito

- La sangre se extrae antes de una

intervención programada y se

almacena hasta que sea necesaria.

Hemodilución intraoperatoria

- Se extraen una o dos unidades de

sangre al paciente al inicio de la

intervención y se sustituye con SSF,

ringer lactato, albúmina; se hace

durante o al final del acto quirúrgico.

Transfusión intraoperatoria

- Procesada por una máquina de

salvado de células, la cual recolecta,

procesa y transforma la sangre en un

circuito cerrado, máquina – paciente.

Tranfusión postoperatoria

- La sangre se colecta en el periodo

postoperatorio por recuperación de la

sangre vertida en el mediastino.

Trasfusión predepósito(especulativo)

- La sangre se almacena

prolongadamente en congelación de

la sangre autóloga.

Las técnicas de recolección de sangre serían:

Aplicar los mismos métodos asépticos y sistemas cerrados de bolsas plásticas

utilizados en la donación homóloga.

Utilizar un sistema numérico diferente de la donación homóloga.

Identificar la unidad o unidades de sangre con etiqueta de autotransfusión.

Aplicar los mismos cuidados de enfermería establecidos para el donante

homólogo.

7. Comente el término fraccionamiento de sangre y evalúe la forma de calibrar el

equipo utilizado en el estudio de los componentes sanguíneo.

El termino fraccionamiento de sangre se debe a la separación de los diferentes

componentes sanguíneos, por medio de un sistema cerrado de bolsas plásticas y

equipos de centrifugación a velocidad y temperaturas adecuadas, los cuales

satisfacen un mínimo de riesgo , las necesidades terapéuticas del paciente.

Se calibra antes de su puesta en funcionamiento, después de cada reparación y

periódicamente de forma rutinaria, con el fin de garantizar un correcto

funcionamiento. El intervalo de cada revisión estará determinado por el tipo de

componente a separar, el ritmo de utilización y la antigüedad de la centrífuga

refrigerada. Debe tener un registro de cada una de las revisiones efectuadas, donde

conste el nombre del responsable de la revisión, los resultados obtenidos y las

medidas correctivas aplicados. Para evaluar el funcionamiento del equipo se hace un

control de calidad del producto obtenido.

8. Describa la técnica de procesamiento del concentrado globular (CG) utilizando

centrífuga refrigerada.

Se mantiene la centrífuga a temperatura de 4 o 22 ˚C, luego se procesa unidades de

sangre completa para obtener el concentrado globular, se coloca las unidades en

bolsas plásticas y en las respectivas copas para pesarlas con relación a la unidad que

tenga mayor peso. Las copas se les colocan en el cabezal de la centrífuga y

cerramos la puerta de la centrífuga.

Después centrifugamos las unidades de sangre entre 4000 a 5000 rpm por 5 min. La

temperatura de la centrífuga debe ser 5 ˚C. Extraemos unidades de sangre ya

centrifugadas retirando la bolsa de plástico. Colocar la bolsa de sangre centrifugada

en el extractor del plasma. Liberar suavemente la placa móvil del extractor. Colocar

la pinza hemostática o utilizar el clip de plástico en la tubuladura que comunica a

una de las bolsas satélites.

Romper el sellado de la bolsa primaria dejando fluir el plasma a la primera bolsa

satélite. Inmediatamente se coloca en una balanza; para medir la cantidad de

plasma; removiendo de 232 a 258 g de plasma, dejará un residuo de células con un

hematocrito en 70 a 80%. Luego sellamos y separamos las bolsas, identificando la

bolsa primaria (concentrado globular) y las bolsas satélites (plasma fresco,

plaquetas, factor VIII, plasma pobre en factores I y VIII). Después conservamos el

concentrado globular a temperatura de 2 a 6 ˚C y se continúa procesando el plasma

fresco. Y en un libro se coloca los componentes procesados.

9. Indique las características de los plásticos empleados en el metabolismo

plaquetario.

Las características de los plásticos son:

- Facilitan el metabolismo plaquetario prolongado.

- Facilitan su supervivencia, al permitir intercambio gaseoso en el exterior.

- Es imprescindible la agitación para la viabilidad y eficacia del producto.

- Deben almacenarse a una temperatura de 20 a 24 ˚C, y ahí se requiere una

agitación suave y constante.

- El tipo de bolsa de plástico usada debe tener una vigencia de 3 a 5 días.

10. Exponga la preparación del crioprecipitados de factor VIII e indique el tipo de

sangre recomendado en la mezcla FAH.

Para la preparación se realiza el procedimiento siguiente:

- Centrifugar la sangre usando la centrífuga refrigerada, con la temperatura a 4˚C

a la revolución establecida.

- Luego se separa el plasma en cada bolsa n menor de 200 mL para pesarlas en

una balanza para ver su volumen. Se sella el tubo, luego se separa los glóbulos

rojos y se refrigera a una temperatura de 1 a 6 ˚C.

- Se congela el plasma rápidamente para que el proceso de congelación se

produzca y se realiza en un congelador mecánico a 70˚C, por inmersión de las

bolsas en un baño de alcohol etanol y hielo seco durante 15 min.

- Se descongela a una temperatura de 1 a 6 C las bolsas durante 14 a 18 h.

- Se centrifuga el pasma descongelado a altas revoluciones según el tipo de

centrífuga.

- Colocar la bolsa de plasma invertida y se deja pasar el plasma sobrenadante a la

bolsa satélite. Dejar 10 a 15 mL de plasma para resuspender el crioprecipitado

cuando se va a administrar.

- La bolsa de crioprecipitado debe ser debidamente identificada señalando su

fecha de expiración y se congelará rápidamente a 30 a 70˚ C.

El tipo de sangre recomendado en la mezcla de FAH debe contener como mínimo

80 UI de factor VIII, 250 mg de fibrinógeno, 30 % de factor XIII y 40 a 70% de

factor de Von Willebrand.

11. Señale las condiciones de eliminación de los leucocitos por centrifugación.

Las condiciones de eliminación de los leucocitos son los siguientes:

Para realizar la eliminación se debe hacer poco antes de la transfusión.

Se mantiene en agitación continua a T˚ ambiente hasta su separación de los

leucocitos.

La transfusión de plaquetas pobre en leucocitos a realizarse en un plazo de 6

horas desde que se abre el circuito cerrado de plaquetas.

Descartar el producto a las 24 horas, si es por sistema abierto.

12. Explique la plasmaféresis manual y detalle el procedimiento en la extracción de

sangre.

La plasmaféresis manual es un procedimiento en el cual se extrae la sangre del

donante dentro de un equipo especial; esta sangre se centrifuga para separar el

plasma de los eritrocitos y éstos por reinfusión se devuelven al donante o paciente.

El procedimiento es el siguiente:

- Se explica al paciente del procedimiento a realizar.

- Se realiza los pasos del procedimiento de la extracción de sangre.

- Se identifica las bolsas de donación con los datos exigidos.

- Luego se cierra todas las pinzas de rodillos y se conecta un frasco de SSF al

0.9% con un equipo de transfusión de doble o triple línea.

- Abrir las pinzas de rodillo W e Y, purgar el equipo eliminando todo .el aire del

tubo enviándolo a la trampa de aire, e inmediatamente después de cerrar las

pinzas de rodillo W e Y.

- Conectar el adaptador de aguja, el equipo de transfusión y al adaptador especial

del tubo de la unidad para plasmaféresis.

- Colocar el torniquete y recolectar la sangre por gravedad o de vacío previamente

descritos dentro de la unidad de recolección 1, y bloqueando previamente la

unidad de recolección 2 con una grapa.

- Soltar la presión del torniquete.

- Colocar dos grapas en el segmento en los puntos A y B. Sellar manualmente

cortando el tubo entre las dos grapas.

- Abrir la pinza de rodillo W e Y permitiendo que la SSF fluya hacia el brazo del

donante o paciente hasta que el tubo de donación esté libre de sangre, ajustar el

flujo de la SSF a un goteo lento, mediante la pinza de rodillo Y, terminando de

reinfundir aproximadamente el mismo volumen con SSF, cerrar las pinzas de

rodillo W e Y.

- Procesar la unidad de sangre y extraer el plasma.

- Devolver los eritrocitos de la unidad número 1 comparando el nombre del

donante o paciente con el de la unidad, introducir el conector del tubo de salida

de la unidad en la línea X.

- Resuspender los eritrocitos con SSF 0,9 % abrir las pinzas W e Y colocando la

unidad de eritrocitos en el paral.

- Cerrar todas las pinzas de rodillo y abrir las pinzas de rodillo X y W y permitir

que los eritrocitos fluyan a su máxima capacidad.

- Cerrar la pinza de rodillo X, después que todos los eritrocitos hayan sido

devueltos al donante o paciente, abriendo la pinza de rodillo W y drenar la línea

con SSF hasta que esté clara, cerrar la pinza de rodillo W. Quitar la grapa que

bloquea la unidad de recolección 2, iniciando la colección de sangre en la

unidad número 2 repitiendo los pasos descritos para la unidad de recolección 1,

desde el punto 8 al 12.

- Repetir el paso número 16 para la unidad de recolección 2.

- Abrir la pinza de rodillo W y Y y permitir que la SSF 0.9 % fluya hacia el brazo

del donante o paciente hasta limpiar la sangre de la SSF a un goteo mediante la

pinza de rodillo Y.

- Repetir los pasos 13 y 14.

- Cerrar la pinza de rodillo y abrir la pinza de rodillo Z y W, permitir que los

eritrocitos fluyan a su máxima capacidad.

- Repetir el paso 8 retirando la aguja del brazo del donante o paciente.

- Aplicar presión digital al donante o paciente en el sitio de la flebotomía por un

período de tiempo mayor del usual, debido a la frecuencia y duración del

proceso de plasmaféresis.

- Congelar el plasma inmediatamente si va a ser utilizado como P.F.C (plasma

fresco congelado); si este plasma es de un paciente, descartarlo.

EXAMEN N˚3

1. Señale los aspectos y fines terapéuticos en la toma de muestras de sangre

venosa.

Entre los aspectos y fines terapéuticos en la toma de muestras de sangre tenemos:

- Brindar posición cómoda.

- Revisar y elegir las venas para realizar la venopunción.

- Explicar al usuario el procedimiento para obtener mayor colaboración.

- Identificar el tubo con los datos del paciente, anotando y todo al lado del

paciente.

- Revisar el funcionamiento de la aguja y jeringa.

- Inspeccionar ambos brazos colocando el torniquete a 5 cm del sitio de punción.

- Seleccionar una vena firme y prominente.

- Colocar guantes quirúrgicos.

- Realizar la antisepsia, con una torunda de algodón impregnada en alcohol –

acetona en forma concéntrica luego secar con gasa seca.

- Utilizar la inyectadora con el bisel de la aguja hacia arriba e Introducir la aguja

en el centro de la vena en forma segura.

- Halar el émbolo lentamente, hasta extraer la cantidad de sangre indicada.

- Retirar el torniquete, luego la jeringa.

- Aplicar la gasa y hacer presión suavemente en el sitio de punción, mantener el

brazo extendido más o menos tres segundos.

- Separar la aguja y descartar en el envase rígido.

- Utilizar material estéril.

- Lavarse las manos antes y después de la toma.

2. ¿Cómo se realiza una toma de muestra de sangre capilar en el recién nacido?

Para realizar la toma de muestra de sangre se debe tener las siguientes

consideraciones:

Identificar el recién nacido.

Lavar las manos antes y después de tomar la muestra.

Identificar el tubo de colección de muestra con todos los datos de identificación.

Colocar guantes quirúrgicos.

Mantener al niño en un ambiente adecuado.

Colocar al niño en posición de cúbito supino.

Sujetar el talón por la parte externa del pie.

Calentar el talón friccionando suavemente la zona.

Limpiar con alcohol- acetona y secar con gasa.

Introducir la lanceta con un movimiento firme y preciso en la parte interna del

talón, para obtener buen sangrado.

Recoger la muestra con un tubo capilar heparinizado, llenado las ¾ partes del

tubo de ensayo.

Preparar una suspensión de eritrocitos 2 al 3%

Colocar gasa en la zona de punción y realizar cura.

3. Detalle las precauciones a considerar al obtener una muestra de sangre capilar

de un recién nacido.

Las precauciones a considerar son:

- Lavarnos las manos antes y después de tomar la muestra.

- No comprimir el talón del niño antes de la extracción.

- Descartar la lanceta en un envase rígido.

- Revisar los datos personales e historia clínica si corresponde con la boleta de

solicitud.

- Rotular el tubo de ensayo al lado de la cuna del niño, con la identificación:

nombre y apellido de la madre.

4. Mencione el sistema de lavado de células y las condiciones técnicas básicas.

Para el lavado de células:

1. Utilizar guantes.

2. Agregar una alícuota de SSF al tubo previamente identificado.

3. Agregar un volumen de GR al tubo que contiene la alícuota de SSF, mezclando

suavemente.

4. Agregar volúmenes de SSF a presión hasta las tres cuartas partes del tubo.

5. Colocar el tubo en la centrífuga calibrándolo con otro tubo que contenga igual

volumen de SSF.

6. Proceder al lavado de células de acuerdo a tiempo y revoluciones establecidas.

7. Lavar los GR las veces que sea necesario.

Las condiciones técnicas son:

- Realizar el lavado de células en los procedimientos indicados.

- Llenar con SSF las ¾ partes del tubo.

- Resuspender el paquete celular con pequeñas alícuotas de SSF, después de cada

lavado.

- Evitar el contacto de la luz del tubo con los dedos.

- Realizar periódicamente control de calidad a la centrífuga por personal técnico

especializado.

- Utilizar las revoluciones y tiempo de la centrífuga.

5. Explique la determinación del sistema ABO en los bancos de sangre.

Loa grupos sanguíneos ABO son determinados por exámenes de laboratorio

relativamente sencillos pero de especial cuidado.

La determinación se basa en la aglutinación directa de los hematíes con antisueros

comerciales anti- A, anti –B y anti- A, B (grupo hemático). Y en la presencia o

ausencia de las aglutininas anti – A o anti - B en el suero o plasma del individuo

(grupo sérico).

El grupo hemático y sérico se deben realizar simultáneamente debido a que son

pruebas complementarias y de esa forma la una verifica los resultados de la otra.

6. Indique las causas de discrepancia del sistema ABO en los Bancos de sangre.

Cualquier inconsistencia entre el resultado del grupo hemático y el sérico se

denomina una discrepancia la cual debe ser resuelta.

Pero las causas de discrepancia son:

Presencia de un anticuerpo muy ávido, conduce a reacciones falsas en ambas

fases del sistema ABO.

Formación de rouleaux, causado por la alteración de las proteínas de la sangre

en algunas enfermedades.

Presencia de Ac dirigidos contra el tinte usado para colorear los reactivos del

sistema ABO, específicamente el reactivo anti – B por el colorante acriflavina y

tartazine.

Presencia de una alta concentración de sustancias específicas de grupo

sanguíneo en el suero en estudio, que neutralizan el reactivo anti – A y/o anti –

B.

Subgrupos de A y B, causan reacciones débiles en la fase celular.

Presencia de células recientemente transfundidas de un grupo ABO diferente,

pueden dar origen a una reacción de campo mixto que semeje a ciertos grupos.

Contaminación bacteriana de los reactivos de grupo sanguíneo, causa reacciones

falsas positivas o falsas negativas, si el Ac específico es neutralizado.

7. Analice el método de absorción y elución en Inmunohematología.

Estos dos métodos nos permiten demostrar los antígenos débiles de A o B que no

son aglutinados por el reactivo anti A o anti B, se demuestra mediante la absorción

específica del correspondiente anticuerpo, separando el anticuerpo absorbido por

elución.

8. Describa la presencia o ausencia de antígeno D en una muestra de sangre.

Para hallar la presencia de antígeno D:

- Primero se prepara una suspensión celular de 2 a 3%.

- Marcar el tubo con Rho (1.4) y se agrega una gota de reactivo anti –D.

- Se añade una gota de la suspensión celular con pipeta de Pasteur.

- Mezclar y centrifugar.

- Leer y reportar la reacción en cruces en el formato correspondiente.

- Investigar el D débil, si el resultado es negativo.

Cuando no se observa aglutinación, determinar el D débil:

Agregar un tubo como control Rh (1.5) este se prepara colocando una gota de

SSF o albúmina bovina al 6%, más una gota de células en estudio preparados de

2 al 5%, o realice como control, un Coombs directo.

Se incuban los tubos 1.4 y 1.5 en baño maría a 37 grados por un tiempo mínimo

de 20 min.

Se centrifugan ambos tubos a 15 seg. A 3400 rpm o 1 min a 1000 rpm.

Suspender los botones celulares y examinar la aglutinación; si los eritrocitos, no

son aglutinados continuar con la fase antiglobulina.

Se lava cuatro veces con solución salina fisiológica, cumpliendo con la técnica

de lavado de células.

Agregar a cada tubo dos gotas de antiglobulina humana poliespecífica.

Mezclar y centrifugar a 15 seg. a 3400 rpm o 1 minuto por 1000 rpm.

Resuspender las células desprendiendo suavemente el botón, leer

macroscópicamente registrando los resultados.

Agregar una gota de células de control de Coombs a los resultados negativos,

centrifugar e interpretar resultado.

9. Indique el material y equipo que se emplea en los bancos de sangre cuando se

procede a determinar los antígenos del sistema Rho.

El material que se emplea es una muestra de sangre, centrífuga, pipeta Pasteur,

bulbos, tubos de ensayo, programador o gradilla, lámpara de lectura, baño de maría,

reactivo anti – D monoclonal, o policlonal, pizeta con solución salina fisiológica,

antiglobulina humana, células de Coombs, guantes, envase para descartar material,

lápiz graso.

10. ¿Cómo se determinan los antígenos?

Los antígenos se determinan fenotípicamente los Antígenos mayores del sistema

Rh. A partir del fenotipo se deduce el genotipo y se expresa en términos de

probabilidades.

11. Señale las pautas y normas específicas en la preparación de CCC.

Las pautas y normas específicas son:

Vigilar que la temperatura del baño de María se conserve a 37 grados.

Mezclar cada cierto intervalo de tiempo.

Hacer los lavados correctamente.

Realizar control de calidad del reactivo.

La suspensión de las CCC debe ser del 2 a 5%

12. Cite los fines de una prueba de antiglobulina directa.

Los fines para realizar una prueba de antiglobulina directa son:

- Determinar la sensibilización in vivo de los glóbulos rojos, cuando la reacción

entre el antígeno y su correspondiente anticuerpo se efectúa en el organismo

mientras ambos están circulando.

13. ¿Porque es importante la aplicación del suero de Coombs.?

Es importante la aplicación del suero de Coombs para confirmar las pruebas de

antiglobulina negativa en una muestra de sangre O Rh (D) positivo.

EXAMEN N˚ 4

1. Explique la investigación de anticuerpos atípicos con la utilización de células

detectoras.

Consiste en detectar anticuerpos circulantes en el suero mediante la sensibilización

del glóbulo rojo in vitro; estas células son elaboradas con genética conocida (R1, R1,

R2, R2rr) y cubren la gama de antígenos más comunes o clínicamente significativos.

2. Analice la identificación de anticuerpos irregulares en los laboratorios.

Consiste en la determinar la especificidad del Ac (anticuerpo) presente, por medio

de un panel de GR (glóbulo rojo) de genética conocida, utilizando medios de

reacción de caracterización al Ac en la prueba pantallas; según dicha reacción se

correrá un panel regular, panel caliente y panel frío o ambos.

3. ¿Cuál es el objetivo del panel dirigido?

El objetivo del panel dirigido es confirmar la especificidad de cada uno de los Ac,

que se encuentran mezclados en una muestra de suero.

4. ¿Cómo se miden los resultados del panel dirigido?

Se miden teniendo en cuenta los resultados:

- Si el tubo marcado D existe aglutinación, se confirma la presencia del Ac anti-

D, si el resultado es negativo ausencia del Ac anti D, por lo tanto éste no es el

que compone la mezcla de anticuerpos. Así sucede con los otros marcadores C y

Fy a

- Si el tubo marcado Tneg (testigo negativo), no hay aglutinación entonces es que

no existe otro Ac sino los descritos.

- Si en este tubo hay aglutinación, es que existe otro Ac que no hemos

identificado.

5. Detalle las condiciones donde se realiza la titulación de anticuerpos naturales e

inmunes.

Las condiciones que se realiza la titulación es de temperatura y medios de reacción

determina la concentración aproximada de un Ac natural o inmune en el suero en

estudio, utilizando el método de la doble dilución, y el resultado se expresa como el

valor recíproco de la mayor dilución en la que se observa aglutinación

macroscópica.

6. Describa el material y equipo requerido en la titulación de anti “A” y anti “B”.

El material y equipo son los siguientes:

- Suero en estudio.

- Hematíes conteniendo el Ag correspondiente al Ac a titular

- Pizeta con SSF

- Guantes quirúrgicos

- Programador o gradilla

- Lápiz graso

- Pipeta Pasteur de igual calibre

- Bulbo de goma

- Tubos de ensayo 12 x 75 mm

- Lámpara de lectura

- Baño de María a 37 ˚C, 56 a 70˚C

- Termómetro para baño de María

- Centrifuga

- Albúmina

- Antiglobulina humana (Coombs) CCC

- Envases para descartar material

- Formato y libro de registro de resultados

7. Señale la técnica que se utiliza para neutralizar el suero.

La técnica es la titulación de anti “A” y anti “B” inmunes. En la que se diluye de ¼,

3 gotas de solución salina fisiológica más 1 gota de suero en estudio; adecuar esta

proporción para obtener mayor número de gotas, ya que se debe comprobar si

ocurrió o no la neutralización de los anticuerpos naturales, utilizando pipetas de

Pasteur o automatizada.

8. ¿Cómo se realiza la titulación de crioaglutininas?

Se realiza la titulación de la siguiente manera:

Utilizar guantes quirúrgicos

Obtener el suero en estudio

Identificar una hilera de tubos 12 x 75mm con numeración de la doble dilución

½ hasta 1/1024.

Agregar un tubo adicional con el número 11.

Colocar una pipeta de Pasteur cuatro gotas de SSF, en cada uno de los tubos

excepto en el número 11.

Agregar al tubo ½ cuatro gotas de suero en estudio con pipeta de Pasteur.

Mezclar y pipetear el contenido del tubo ½, transferir cuatro gotas al tubo ¼ y

así sucesivamente hasta el tubo número 10, colocar las cuatro gotas restantes en

el tubo número 11.

Agregar a cada tubo, excepto en el número 11 una gota de células pantalla.

Incubar los tubos excepto el número 11 a 4˚C durante 30 minutos.

Leer por sedimentación (no centrifugar) las reacciones.

Reportar en cruces en formato correspondiente.

9. Cite las técnicas para diferenciar e interpretar los resultados entre el rouleaux

y una verdadera aglutinación.

Las técnicas para diferenciar e interpretar los resultados son:

- Después de una incubación y resuspensión de rutina, continuar con los pasos

siguientes:

Centrifugar de nuevo la mezcla suero/hematíes.

Eliminar el suero sobrenadante

Sustituirlo por un volumen equivalente de SSF (dos gotas) y mezclar

suavemente.

Centrifugar la mezcla de solución salina y hematíes.

Leer resuspendiendo la mezcla y observar la aglutinación.

Si las células se dispersan uniformemente se trata de un fenómeno de rouleaux.

La aglutinación verdadera permanecerá.

- Realizar el siguiente procedimiento:

Identificar un tubo ensayo 12 x 75 mm

Colocar dos gotas del suero problema.

Agregar una gota de la suspensión de los GR del 2 al 3% previamente

seleccionados y lavados una vez.

Incubar a 37˚C durante 30 minutos.

Retirar el sobrenadante con una pipeta de Pasteur.

Agregar igual volumen de SSF (dos gotas) y mezclar.

Centrifugar y leer suspendiendo el botón de células suavemente.

Si se trata de un fenómeno de rouleaux las células se dispersan uniformemente.

La verdadera aglutinación no será afectada.

10. ¿Qué son las pruebas transfusionales? Mencione los objetivos.

Son una serie de procedimientos que se realizan rutinariamente en el Banco de

Sangre con la finalidad de asegurar la compatibilidad sanguínea entre el receptor y

el donador para evitar reacciones hemolíticas, transfusionales en el usuario.

Los objetivos son:

- Detectar incompatibilidades del sistema ABO y Rh.

- Garantizar al receptor la administración de una transfusión ABO y Rh

compatibles.

- Detectar anticuerpos en el suero del receptor que estén dirigidos a los antígenos

del donante.

- Cumplir con la normativa de la Ley de Tranfusión y Bancos de sangre y su

Reglamento.

11. Defina el concepto de prueba cruzada menor.

Es un procedimiento inverso de la prueba cruzada mayor, en donde las células del

receptor se ponen en contacto con el suero o plasma del donante y los mismos pasos

de la prueba cruzada menor. También es una prueba opcional y se realiza cuando al

donante no se le investiga detección de anticuerpos.

12. Sugiera recomendaciones cuando se quiere transfundir a un paciente con

choque hemorrágico.

Las recomendaciones que yo sugería serían estos:

- Si hay tiempo determinar el grupo ABO y Rh del receptor y del donante.

- Si la situación no permite el paso número1 transfundir concentrado globular O

negativo, si ésta no existe emplear concentrado globular O positivo.

- Realizar la fase de centrifugación inmediata si el tiempo lo permite,

continuando con el procedimiento.

- Mantener informado al médico y personal de enfermería el resultado final de las

pruebas de compatibilidad.

- Registrar información en formatos correspondientes de los resultados del

proceso.

13. Explique las circunstancias para la administración de sangre y sus

componentes.

Se realiza la administración de sangre y sus componentes a fin de reponer el

elemento deficitario y evitar reacciones adversas.

También para garantizar la reidentificación tanto al paciente para quien la

transfusión fue preparada como la del producto procesado.

Administrar correctamente las unidades de sangre y/o componentes indicados al

paciente.

Señalar la competencia de cada miembro del equipo médico y enfermería que

participa en la aplicación del elemento sanguíneo.

14. Detalle los objetivos de una prueba cruzada caliente e indique el material y

equipo a utilizar.

Los objetivos son:

- Garantizar la compatibilidad sanguínea entre el suero del receptor y los GR del

donante, sin la interferencia de Ac fríos.

El Material y equipo son las siguientes:

- Guantes

- Suero fresco del receptor.

- Hematíes del dador.

- Pizeta con SSF

- Pipeta de Pasteur

- Bulbos

- Programador o gradilla

- Tubos de 12 x 75

- Lápiz de graso

- Centrífugas

- Baño de María a 37 ˚C

- Lámpara de lecturas

- Albumina

- Reactivo de AGH

- CCC

- Tarjetas de identificación

- Formato de solicitud de trasfusión

- Envases para desechar líquidos

- Material desecho

15. Señale las normas específicas que refuerzan una prueba cruzada in vivo.

Las normas específicas para una prueba cruzada in vivo son:

- El personal que trabaja en el banco de sangre debe participar en la

administración de la transfusión.

- Utilizar sangre o CG lo más fresca posible en el procedimiento de la prueba de

compatibilidad.

- Antes de administrar la sangre procesarla como CG pobre en leucocitos.

- Realizar los microhematócritos que estén indicados en el procedimiento.

- Dejar constancia escrita del procedimiento efectuado y del estado de salud

crítico del receptor.

EXAMEN N˚ 5

1. Explique las características de la absorción heteróloga.

Las características de la absorción heteróloga son:

- Separa mezclas de Alo Ac en suero y eluido como ayuda a su identificación.

- Retira anticuerpos existentes en el suero de un individuo, usando glóbulos rojos

con el Ag específico para ser usados como reactivos.

2. Indique el material y el equipo que se utiliza en las absorciones heterólogas.

El material y equipo son los siguientes:

- Muestra de suero suficiente para absorber

- Células rojas con genética conocida

- Pizeta con SSF

- Reactivos de AGH

- Baño de maría a 37 ˚C.

- Pipetas con bulbo de goma

- Tubo 13 x 100 y 12 x 75mm

- Centrífuga

- Lápiz graso

- Células pantalla

- Programador o gradilla de metal

- Etiquetas autoadhesivas

- Inyectadoras de 12 a 20 cc

- Yelco o scalp número 19

- Guantes

- Envases para descartar material.

3. Mencione las normas y orientaciones en la autoabsorción en frío y a 37˚ C.

Las normas y orientaciones en la autoabsorción en frío serían:

Que dispongamos de suficiente muestra de sangre problema con y sin

anticoagulante.

Utilizar la temperatura indicada para la autoabsorción.

Mantener la proporción celular, enzimas y suero, adecuado para la absorción.

En la autoabsorción con células tratadas con enzimas, la aglutinación persiste, se

debe repetir el procedimiento, usando una nueva muestra de células autólogas

frescas ficinadas.

En la autoabsorción de Ac fríos, si no hay aglutinación, la absorción es

satisfactoria y se identifica al suero como absorbido.

Si persiste la aglutinación es conveniente tratar una muestra fresca de células

autólogas con enzimas.

Las normas y orientaciones en la autoabsorción a 37 ˚C serían:

- Se debe extraer suficiente muestra de sangre con y sin anticoagulante, para

realizar las autoabsorciones.

- Practicar eluciones rápidas a 56 ˚C en las células autólogas.

- Tratar con enzimas las células autólogas, después de la elución a 56 ˚C.

- Realizar el procedimiento en forma continua sin obviar pasos.

- Si no se observa aglutinación en el tubo de células autólogas, el suero sólo

contenía AA.

- Si aglutina sólo las células pantalla el AA se absorbió y queda el aloAc el cual

se debe identificar.

- Si se observa aglutinación con las células autólogas y las pantallas, la

autoabsorción fue insuficiente, continuar realizando más autoabsorciones.

4. Señale los objetivos de la investigación en la preparación de una solución de

ficina al 1%.

Los objetivos son los siguientes:

- Identificar anticuerpos irregulares utilizando células tratadas con enzimas

proteolíticas.

5. Describa la técnica de investigación de anticuerpos irregulares en dos tiempos,

utilizando ficina o papaína.

Al describir la técnica primero se debe marcar los tubos 12 x 75mm, como muestra

se tenga en el panel, y se agrega un tubo de control adicional para autocontrol.

Luego se coloca en cada tubo un agota de GR del correspondiente frasco de panel.

En el tubo de AC se coloca una gota de células del paciente, en suspensión al 3%.

Se agrega una gota de solución enzimática en cada uno de los tubos del panel y se

mezcla bien. Se incuba a 37˚C por 10 a 15 minutos. Después se lava por tres veces

cada uno de los tubos con SSF, luego se agrega dos gotas de suero problema en

estudio a cada uno de los tubos.

Se mezcla e incuba a 37C durante 15 a 30 minutos con ficina o 30 min con papaína

o de acuerdo a lo indicado en el control de calidad.

Se centrifuga al tiempo y revoluciones establecidas.

Se lee y se observa si hay hemólisis o aglutinación, se anota los resultados en

cruces, tubo en mano.

Posteriormente se lava cuatro veces todos los tubos con SSF y se agrega a cada tubo

dos gotas de AGHP.

Se mezcla y se centrifuga al tiempo y revoluciones establecidas.

Finalmente se Lee y observar la aglutinación y se anota los resultados en cruces,

tubo en mano y se comprueba las pruebas de antiglobulina negativa con CCC.

6. Analice la elución por éter, cloroformo y sistemas R.E.S

La técnica de elución libera las moléculas de anticuerpos fijados a los glóbulos

rojos, mediante la destrucción del antígeno o cambiando las condiciones que

favorecen la disociación del complejo antígeno – anticuerpo. Y tiene como objetivo

separar auto y aloanticuerpo de la membrana de los glóbulos rojos en pacientes con

anemia hemolítica.

7. Comente la investigación de anticuerpos contra drogas que reaccionan por el

mecanismo de complejo inmune.

La investigación de anticuerpos se realiza en un medio in vitro donde demuestra la

formación de inmunocomplejos asociados a la interacción fármaco y antifármaco.

Los inmunocomplejos formados entre ciertos fármacos y sus Ac respectivos se unen

debidamente y de forma inespecífica a los hematíes. Los fijados activan el

complemento, lo que puede dar lugar a hemólisis in vivo.

8. Mencione la determinación de los antígenos del sistema MNSs.

La determinación del sistema MNSs son antígenos de grupos sanguíneos, donde son

los más importantes: M, N, S, s. Los antígenos MN genéticamente se transmiten por

un par de genes, determinando tres genotipos: MM, NN, MN. La composición de

los antígenos Ss es muy parecida, existiendo tres genotipos a los cuales han de

pertenecer todas las personas: SS, ss, Ss.

9. Exponga los antecedentes del antígeno P y las formas de su detección en la

muestras de sangre.

El primer antígeno descubierto principalmente fue originalmente llamado P y

posteriormente cambiado a P1, el cual representa el AG definitivo de este sistema.

Los Ag P, Pk y Luke (1Ke) forman parte de otro grupo de AG. Los GR que carecen

de P1, pero poseen P, poseen el fenotipo P2. P1 está presente sobre aproximadamente

80% de las personas de raza blanca y 94% de raza negra. El Ag P no ha sido aún

aislado al sistema y este fenotipo corresponde a aquellas personas que carecen de

P1, P y Pk.

10. Detalle el tema Duffy e indique el material y equipo utilizado para realizarlo.

El sistema Duffy presenta dos antígenos: Fya, Fyb, cuyos genes son alelos

codominantes. Ellos definen los cuatro fenotipos observados en este sistema de

grupos sanguíneos. La homocigocidad para un gen diferente Duffy (Fy) causa

ausencia de los antígenos.

El material y equipo utilizado en el sistema Duffy es:

Muestra de sangre, reactivo anti Fya, reactivo anti Fyb, albúmina al 6%, reactivo de

antiglobulina humana, células de control de Coombs, pizeta con solución salina

fisiológica, lámpara de lectura con espejo amplificador, tubos de ensayo 12 x

75mm, pipetas de Pasteur, bulbos de goma, programador o gradilla, lápiz graso y/o

marcadores, etiquetas, guantes quirúrgicos, hojas de registro, envases para desecho.

11. Cite la conformación del sistema Kell. Señale pautas de orientación y normas

específicas para su determinación.

El sistema Kell está conformado por dos antígenos principales Kell (K) y el

antígeno Cellano (K) que es un alelomorfo del Kell. Además existen otros antígenos

que pertenecen al sistema Kell como son: Kpa , KPb , Jpc, Isa y Jsb.

Las normas específicas para su determinación son:

- Antes de utilizar los reactivos leer instrucciones del fabricante.

- Montar paralelamente un autocontrol de la muestra en estudio; esta prueba debe

resultar negativa para que sea válida.

- Las células rojas que presentan una prueba de antiglobulina directa positiva, no

pueden estudiarse con este reactivo, ya que al usar la AGH, dará resultados

positivos.

- Se debe iniciar como control células rojas conocidas como Kell y Cellano

positivas y negativas.

12. Señale el sistema Diego en Inmunohematología y la interpretación de los

resultados de antiglobulina.

El sistema Diego comprende dos antígenos Dia y Dib y es útil como marcador racial,

ya que el antígeno Dia es prácticamente exclusivo de las poblaciones de origen

mongólico incluyendo los nativos americanos; estos antígenos por sí mismos

pueden ser importantes en investigaciones genéticas y en estudios de población y

familiares.

La interpretación de los resultados se da así:

Posibles reacciones con el reactivo Dia y Dib, reacciones con:

Anti Dia Anti Dib Fenotipo

+ + Di (a +b-)

+ + Di (a-b+)

0 0 Di (a-b+)