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REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN 1695-7504

Determinación histológica y planimétrica de la composición de longanizas comercializadas en la provincia de Arauco y Concepción, región del Bbío-bío, Chile

Paola Camerati, René Garcés, PhD.

Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad San Sebastián Sede Concepción, Chile.

Contacto: [email protected]

Resumen

El Artículo 296º del RSA-Chile, clasifica a las longanizas dentro de las Cecinas Crudas Frescas. A pesar del desarrollo que ha tenido la industria cecinera, hay productos que aún son elaborados artesanalmente y con estándares bajos en calidad.

Chile no posee una normalización respecto de la composición de las longanizas en relación con los ingredientes y la relación carne:grasa es por esto que se decide plantear como objetivo la determinación histológica y planimétrica de la composición de longanizas comercializadas en la Provincia de Arauco y Concepción, Chile. El número de muestras correspondieron a 30 unidades. La composición carne:grasa se sometieron a la prueba de confirmación de hipótesis Test de Student. El estudio histológico fue de tipo descriptivo.

El mayor porcentaje de muestras se encontró en el Rango I (<30% de grasa), seguido por el Rango III (>40% de grasa), presentándose el valor más bajo en el Rango II (31- 40% de grasa). Mediante la comparación de datos por T de Student, se aceptó H0 (p<0,05). El estudio histológico evidenció sólo una muestra con presencia de tejido no comestible, y correspondió a tejido pulmonar. En relación a la composición histológica, se observaron musculatura estriada, musculatura lisa, tejido adiposo y tejido conectivo. Palabras claves: Embutidos, chacinería, chorizo. INTRODUCCIÓN Las longanizas son parte del grupo de alimentos denominados cecinas. La producción industrial de cecinas en Chile, ascendió a 244 mil toneladas el año 2008, lo que representa un incremento anual de 4,4 %, continuando la tendencia creciente de los últimos 16 años. Esto posibilitó un consumo unitario aparente de 15 kg per cápita. Para el año 2009, se estimó una

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disminución de un 5,0 % anual en la producción, totalizando 232 mil toneladas, y un consumo de 14 kg per cápita. Aunque el consumo nacional dista mucho de otros, como España por ejemplo (60 kg per cápita), las cifras mencionadas siguen aumentando. En Chile, la Región Metropolitana, ocupa el primer lugar en consumo, con 70 mil toneladas anuales (INE, 2009). La industria de cecinas es una de las que más ha avanzado en el último tiempo, con importantes innovaciones tecnológicas, tanto en los procesos de elaboración como distribución. Esto explica en parte que la producción nacional de cecinas haya pasado de 30.262 toneladas en 1979 a 244.324 toneladas en 2008 (ANIC, 2006). Sin embargo, a pesar del desarrollo que ha tenido esta industria, hay productos que aún son elaborados artesanalmente y con estándares bajos en calidad, malas condiciones higiénicas y sanitarias, las que pueden generar problemas de salud para los consumidores, además del perjuicio en la imagen para las cecinas en general (INE, 2009). El proceso de fabricación de las longanizas, se inicia con la selección del tipo de carne. Posteriormente se realiza el desposte, desde donde se obtienen los huesos (que se venden como subproductos), y la carne a procesar la cual a continuación es desmenuzada en una máquina cortadora. En la siguiente etapa de amasado, se forma una pasta con la carne. Esta se lleva posteriormente a un mezclador, donde se incorporan una serie de aditivos del tipo conservantes, colorantes, saborizantes, estabilizantes y agua. Además se emplean en menor proporción benzoato de sodio, sorbato de potasio, ácido ascórbico, glutamato monosódico, glucono-delta-lactona, nitrito de sodio (sal curante), sal común, azúcares, ciclamato de sodio y calcio y levaduras inactivas. Dentro de las especies se agregan pimienta, comino, cilantro, orégano, pimentón, clavo de olor, ajo, ají y nuez moscada. En general, estos aditivos y especias se utilizan en concentraciones bastante variables en las formulaciones, dependiendo del producto, de la maquinaria empleada, cantidad de carne, etc. A continuación, la mezcla pasa a la sección de embutidos donde se rellena el producto y se determina si será crudo, cocido, ahumado o escaldado, y si requiere maduración (Barillas, 2009). Las longanizas, al formar parte del grupo de alimentos denominados cecinas, son productos elaborados con partes comestibles de las especies de abasto, aves y caza autorizadas, picadas o no, con adición de sal y otros ingredientes, introducidos o no en tripas naturales o artificiales y sometidos a un proceso de maduración-desecación y opcionalmente ahumado, que les confiere las características propias organolépticas (Huges, 2005). Las longanizas también forman parte del grupo de alimentos denominados “No Listos Para Comer”, ya que Artículo 296º del RSA-Chile, las clasifica dentro de las Cecinas Crudas Frescas, junto a chorizo fresco, choricillos y otros. Y las define también como aquellas que, como resultado de su elaboración, no sufren alteración significativa en los valores de aw (actividad

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de agua) y pH respecto a los de la carne fresca. Pueden o no ser sometidas a proceso de aireación, curación, secado y/o ahumado (RSA-Chile, 1997). Aunque la definición de Huges (2005) es amplia, en el sentido de hablar de partes comestibles de las especies de abasto, nuestro Reglamento Sanitario de Alimentos (RSA-Chile), enuncia que las cecinas, sin otra denominación, son aquellos productos elaborados a base de carne y grasa de vacuno o cerdo, adicionados o no de aditivos, condimentos, especias, agua o hielo. Lo anterior, deja claro que las longanizas al ser consideradas como cecinas deben contener entre sus ingredientes carne, definiéndose esta última, también en este Reglamento, en su Artículo 268º, como la parte comestible de los músculos de los animales de abasto como bovinos, ovinos, porcinos, equinos, caprinos, camélidos, y de otras especies aptas para el consumo humano (RSA-Chile, 1997). En el Artículo 269º (RSA-Chile, 1997), por otra parte, se define que la carne comprende todos los tejidos blandos que rodean el esqueleto, incluyendo su cobertura grasa, tendones, vasos, nervios, aponeurosis, huesos propios de cada corte cuando estén adheridos a la masa muscular correspondiente y todos los tejidos no separados durante la faena, excepto los músculos de sostén del aparato hioídeo y el esófago. En este mismo Artículo, se define lo que se entiende por Subproducto Comestible, denominándose así a las partes y órganos que no son carne propiamente tales. Incluyéndose en esta categoría al corazón, hígado, riñones, timo, ubre, sangre, lengua, seso o grasa de las especies de abasto. Se exceptúan de esta categoría (Subproducto Comestible) a los pulmones (RSA-Chile, 1997). De encontrarse, por tanto algún tejido no incluido en la lista de subproductos anteriores, la Autoridad Sanitaria calificará al producto que lo contenga como Alterado. Para tal efecto, el Artículo 99º, define que es “aquel que ha experimentado por intervención del hombre, cambios que le modifican sus características o cualidades propias sin que se declaren expresamente en el rótulo, tales como: a) la extracción parcial o total de cualquiera de los componentes del producto original; b) la sustitución parcial o total de cualquiera de los componentes del producto original por otros inertes o extraños, incluida la adición de agua u otro material de relleno; c) la mezcla, coloración, pulverización o encubrimiento, en tal forma que se oculte su inferioridad o disminuya su pureza” (RSA-Chile, 1997). Aunque en el mercado chileno existe una amplia gama de longanizas tanto artesanales como industriales (Valenzuela et al., 2005), las longanizas no poseen una definición propia y tampoco una reglamentación de acuerdo a su composición, ya sea de materia grasa y constituyentes cárneos, sino más bien se engloba su definición y composición en un producto artesanal, sujeto a recetas con mayor o menor éxito en la elaboración y venta. Llegando incluso a crear, sin que exista formalmente, una denominación de origen y que el

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consumidor asocia a calidad organoléptica, ejemplo típico de lo anterior lo constituyen las “famosas” Longanizas de Chillán (Huges, 2005). Debido a que en Chile no existe una normalización respecto de la composición de las longanizas en lo que dice relación también con los ingredientes y relación carne:grasa es que se plantea un estudio preliminar de la composición de las longanizas que se venden en la Provincia de Concepción y Arauco; y cuyos resultados serán comparados con Codex alimentarios extranjeros, para intentar clasificar a este producto dentro de la reglamentación internacional, punto no menos importante en un mundo globalizado. Como ya se dijo, en Chile sólo existe normativa referente a que las longanizas llevan carne, pero no en cuanto a la relación carne: grasa, por lo cual se hace necesario contribuir al estudio de este producto que por definición es cárnico, por lo que el porcentaje de carne debe ser el mayoritario, y la grasa debe ser aporte para potenciar sabor junto con los aderezos ya que en términos prácticos la carne tiene un valor monetario más alto que la grasa. El objetivo de este trabajo fue la determinación histológica y planimétrica de la composición de longanizas comercializadas en la Provincia de Arauco y Concepción, Chile. METODOLOGÍA Obtención de la muestra. La investigación se efectuó en diversas carnicerías de las Provincias de Arauco y Concepción, Región del Bíobío, Chile. Las muestras consistieron en longanizas que se expenden normalmente en los lugares antes mencionados. Las cecinas fueron muestreadas por personal del Servicio Nacional de Salud. Determinación del número de muestras El número de muestras a analizar fue determinado según la fórmula de población infinita, que se expone a continuación:

El número de muestras obtenidas correspondió a 30 unidades en total. Recolección de la muestra y procesamiento Las longanizas fueron obtenidas en distintas carnicerías de la provincia de Concepción y Arauco. Se obtuvieron de 300 a 400g del producto, el que se mantuvo en el envoltorio con el cual fue muestreado.

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Una vez obtenidas las longanizas, éstas fueron guardadas en bolsas plásticas cada una de forma individual y debidamente rotuladas. En todo momento se conservaron a una temperatura entre 4ºC y 7ºC en una nevera portátil conteniendo bolsas de geles refrigerantes de tal manera de evitar que la temperatura ambiente produjera derretimiento de la grasa, lo cual alteraría el examen macroscópico. Las muestras fueron procesadas en el laboratorio de Histopatología de la Universidad San Sebastián. Aquellas que no se procesaron en el día, se mantuvieron en refrigerador a 4ºC, hasta por 48h y en sus envoltorios originales, para evitar deshidratación. Para el procesamiento de las longanizas en el examen macroscópico de la determinación de la relación carne:grasa, las longanizas se dividieron en dos trozos de 100g cada una, sólo se utilizó uno de ellos para este examen. El otro trozo restante (100g) se ocupó para realizar el estudio histológico. Estudio Planimétrico. Para el estudio planimétrico se utilizaron 100g (sin considerar la tripa) de longaniza. Para tener el peso exacto a estudiar se pesó en una balanza, de hasta 500g, para completar la cantidad requerida. Luego sobre una superficie lisa, antiadherente, fácil de limpiar y lavar se realizó la separación “manual” del contenido de carne y de grasa. La tripa no fue incluida en ninguna de las categorías anteriores (carne o grasa). Posteriormente, se pesó el contenido graso, lo que se logró utilizando pinzas de disección y acumulando los componentes grasos y cárneos en diferentes porciones. La separaración se realizó buscando primeramente la grasa, debido a que por su textura y color resulta más fácil de identificar macroscópicamente y de separar. El peso obtenido para cada componente fue representado como porcentaje. Los resultados obtenidos se agruparon en tres Rangos según el peso obtenido de la grasa: Rango I (<30% de grasa), Rango II (31-40% de grasa) y Rango III (>41% de grasa). Estudio Histológico. Se efectuó el estudio histológico con 100 g de muestra. Para esto, el trozo de muestra fue seccionado en tres sectores; por cada esquina y en el centro, los que a su vez se dividieron en cuatro porciones lo que finalmente significó un total de 12 unidades de análisis por cada muestra de longaniza. En el presente estudio los cortes que se efectuaron en los 100g de longaniza tuvieron un grosor máximo de 3mm. Para este efecto se midieron con una regla lineal los mm para luego realizar el corte de cada una de estas tres rodajas. Estas rodajas se dividieron en dos cortes diametrales y perpendiculares, para así obtener cuatro cortes simétricos como los que se describen en el Anexo 3. Una vez obtenidos los cortes de las longanizas a analizar, se realizó la inclusión.

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Análisis Estadístico. Para la composición planimétrica carne:grasa, los resultados se sometieron a la prueba de confirmación de hipótesis Test de Student. Con respecto al estudio de la composición histológica de las muestras de longanizas, éstas se sometieron a un análisis descriptivo. Cada muestra se observó a través de microscopia óptica y se fotografiaron en caso de detección de tejidos extraños para su identificación posterior. Se utilizó el software: GraphPad Prism 2003. RESULTADOS En la Tabla 1, se observa que 12 muestras se ubicaron en el Rango I, lo que representa un 40% del total. En el Rango II, se ubicaron 7 muestras lo que representa un 23,3% del total y al Rango III corresponden 11 muestras de longanizas, lo que representa un 36,7% del total. El promedio de grasa encontrado para cada Rango fue de 25,5% para el Rango I, 35,9% para el Rango II y 44,3% para el Rango III.

A partir de las muestras recolectadas, en la Figura 1, mediante la comparación de datos por T de Student, se acepta que la proporción de grasa en la masa es < 50%. (p<0,05).

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En la Figura 2, se presenta un corte de tejido con tinción de Hematoxilina- Eosina en 400X, que ilustra cuatro regiones estructurales. La región A representa un conjunto de células adiposas que fueron fijadas con Formalina al 10%, apreciándose espacios sin contenido y sólo delimitadas por sus membranas semipoligonales. Delimitando el tejido graso se observan dos bandas tisulares donde B y B’ representan tejido conectivo con presencia de matriz extracelular, C y C’ representan las aglomeraciones basofílicas que corresponden a varios núcleos de fibroblastos. La región determinada por D y D’ corresponden a inclusiones basofílicas de estructura granular. Al centro de la fotografía (E) se observa la presencia de un artefacto extrínseco, probablemente constituido por fibra vegetal ubicado en el recorrido óptico.

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En la Figura 3 se observan fibras musculares (Miocitos) en corte transversal (A) en los que se aprecia un sarcoplasma homogéneo y eosinofílico con presencia de varios núcleos (B) en la periferia de dichas células. Así mismo se aprecia un área (C) que presenta ruptura de membrana de la fibra muscular y pérdida de sarcoplasma de la misma.

En la Figura 4 se evidencia tejido pulmonar. Se aprecia una estructura tisular que se organiza en una disposición alveolar (A) aunque los límites entre dichos espacios no presentan núcleos de neumocitos (tipo I y II) y aparecen como una sustancia homogéneamente eosinofílica que delimitan espacios alveolares (tabiques alveolares (B)). Además se observan estructuras que asemejan ductos alveolares (C) a nivel del lobulillo.

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DISCUSIÓN Al analizar los Rangos de longanizas, se observó que el mayor porcentaje de muestras se ubicó en el Rango I (<30% de grasa). Como ya se mencionó en la revisión bibliográfica, en Chile no existe una estandarización del contenido tanto de carne como de grasa en la masa de las longanizas. Por lo anterior, se decidió comparar los resultados del presente estudio con reglamentos extranjeros, principalmente con el Codex Alimentarius Austriacus, Codex Alimentarius Germanicus y el Boletín Oficial de España (BOE), ya que todos ellos se rigen por un código común para comercialización de productos dentro de la Unión Europea (UE) y también se comparó con el Codex Alimentario Argentino por tener un producto similar al nuestro. Al comparar los resultados del presente estudio con el Codex Alimentarius Austriacus (1954), éste establece como máximo un 30% de grasa en embutidos que se asemejan a la longaniza chilena (Debreziner Rohwurst, Frische Rohwurst, o la Mettwurst). Los valores del Rango I del presente estudio son menores incluso que el Codex antes mencionado. También el porcentaje de muestras obtenidas en el presente estudio es menor a otros países europeos, por ejemplo España y su tradicional “Longaniza de Aragón”, la cual debe tener hasta un 30% de grasa en este tipo de producto (BOE, 2008). Otro país con el que es posible comparar nuestras longanizas es Alemania. En el Codex Alimentarius Germanicus (1974) indica que se acepta un máximo de 30% de contenido graso en sus longanizas. En Latinoamérica, Argentina en su Código Alimentario Argentino (2004), establece que la cantidad de materia grasa que entra en la composición de las longanizas no debe superar el 35%. Por lo tanto las longanizas del Rango I cumplirían con lo dispuesto por estos Codex, en cuanto a la relación carne:grasa. Las muestras encontradas en el presente estudio (12 muestras) y clasificadas en el Rango I, están por debajo de los porcentajes de grasa de los códices en los cuales fueron comparadas. Incluso en este caso, podría hablarse eventualmente de longanizas “bajas en grasas” o “Light”. Por todo lo anterior, las muestras de longanizas clasificadas del Rango I cumplirían con las exigencias carne:grasa de los códices alimentarios extranjeros y eventualmente podrían ser aceptadas sin problemas, desde el punto de vista de composición carne:grasa en dichos países ante una eventual exportación. Sin embargo, las muestras del Rango II (7 muestras) y el Rango III (11 muestras) superan al máximo de 30% de grasa permitido por el Codex Alimentarius Austriacus, el Codex Alimentarius Germanicus y el Boletín Oficial de España. En lo que respecta a lo dictaminado por el Codex Alimentario Argentino, sólo tres muestras del Rango II cumplirían con las exigencias de dicho códice (Anexo 5).

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En lo que respecta a Chile, si bien no existe reglamentación en cuanto al contenido graso de las longanizas, las muestras analizadas que obtuvieron porcentajes de grasa por sobre lo estipulado en cada códice consultado y por lo tanto se las podría categorizar como alimentos “Alterados” según el Reglamento Sanitario de los Alimentos (RSA, Chile, 1997). Las grasa de las longanizas cumple con la función de darle sabor, cremosidad y mejorar la jugosidad. Canaliza el aporte de las vitaminas A/D/E y K, pero las grasas sólo deben proporcionar entre un 30-35% de las calorías diarias (adultos relativamente activos) y no más de 76g de grasa para las mujeres como también no más de 99g de grasa para los hombres (Rodriguez et al., 2005), ya que estos embutidos poseen grasas clasificadas como saturadas, es decir, son aquellas en las que cada átomo de carbono está unido a un átomo de hidrógeno por lo que son sólidas a temperatura ambiente y son la principal causa de aumento de enfermedades cardíacas, obesidad y trastornos en la presión sanguínea entre otros. Todo este tipo de complicaciones en la salud de la población se debe a que el organismo al recibir las grasas de los alimentos y descomponerlas en ácidos grasos los pasa a la sangre, formando los triglicéridos. Los triglicérido a su vez favorecen la absorción de colesterol que en elevadas concentraciones constituye la producción de aterosclerosis de arterias vitales, causando enfermedad coronaria, cerebrovascular y vascular periférica (García, 2009). Por lo anterior, la cantidad ingerida de grasas debe ser regulada para que su consumo sea en forma apropiada (Díaz y Galgani, 1999). Respecto a la ingesta dietaria, la información de la cual dispone nuestro país, es escasa, especialmente en lo que refiere a estudios de seguimiento. La única información útil en este sentido proviene de los datos de encuesta realizados por el INE. Esta información muestra que, en promedio, la población está consumiendo mayor cantidad de carnes y cecinas (INE, 2009). En relación a la Figura 1, en el estudio de comparación de la presencia de grasa en longanizas muestreadas el porcentaje de grasa de las longanizas muestreadas es < 50%. No obstante, el porcentaje promedio de todas ellas arrojó un 34,8%, cifra no menor en cuanto a inocuidad alimentaria y características organolépticas refiere, ya que además como se mencionó se le podrían clasificar como producto Alterado al referirse una consulta o códigos alimentarios extranjeros o incluso hablar de fraude por su bajo contenido cárnico, aunque el término fraude alimentario no está contenido en el Reglamento Sanitario de los Alimentos como tal sino que los términos Alterados y Adulterados. En relación al estudio histológico, en la Figura 2 se observó tejido adiposo que por el hecho de que la muestra fue fijada con Formalina al 10%, los adipocitos aparecen como espacios vacíos y solos delimitados por sus membranas y por lo tanto no se logró realizar una coloración en la grasa. Aun así, se hace

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evidente que la fotografía presenta adipocitos ya que se evidencian los núcleos periféricos. En la Figura 3 se observa un corte transversal de fibras musculares. No hay elementos histológicos que permitan diferenciar si efectivamente se trata de una fibra muscular estriada, ya que la etapa de molienda en el proceso de fabricación de longanizas, impide la observación de las bandas de acto-miosina características en un corte de tejido muscular estriado. Además en la Figura 3, se destaca la pérdida de un área de una fibra muscular, ruptura producida debido a el proceso de elaboración de las longanizas, en donde la etapa de molienda y picado destruye dichas fibras musculares (Miocitos). Los componentes encontrados en la observación microscópica de las longanizas (Figura 2 y 3) están permitidas según el artículo 269º del Reglamento Sanitario de los Alimentos de nuestro país, por lo que son aceptados como componentes en la elaboración del embutido (RSA, Chile, 1997). Sólo una muestra presentó tejido pulmonar de nivel alveolar (Figura 4). Este tejido según el artículo 269º de Reglamento Sanitario de los Alimentos no forma parte de la categoría subproducto comestible y por lo tanto al encontrarse formando parte de la masa de la longaniza pasa a considerarse un producto “Alterado”, según el artículo 99º del Reglamento Sanitario de los Alimentos (RSA,Chile, 1997). No se observaron otros tejidos no comestibles en las muestras obtenidas. Esto sugiere que las fiscalizaciones realizadas por la Autoridad Sanitaria han sido eficientes ya que la fiscalización de carnes está reglamentada en el Artículo 86º del Reglamento Sanitario de los Alimentos, que estipula que los órganos, partes o especies enteras no aptas para el consumo humano, de las especies de abasto deberán ser destruidos o sometidos a tratamientos aprobados por la Autoridad Sanitaria, con el fin exclusivo de destinarlos al uso industrial no alimentario humano. Estas operaciones deberán realizarse en el recinto especialmente habilitado para ello, bajo la vigilancia y responsabilidad directa del Médico Veterinario, inspector de carnes (RSA-Chile, 1997). La identificación de tejido pulmonar en una muestra de longaniza, significa que los controles por parte de la Autoridad Sanitaria, en cuanto a materias primas con que se elaboran dichos embutidos, no han podido abarcar la enorme cantidad de marcas de longanizas que se venden en las zonas muestreadas. Pudiendo existir matanza de animales y distribución de sus carnes de forma clandestina, y utilización de estas carnes, no aptas para consumo humano, en la elaboración tanto de longanizas como de otros embutidos. Las industrias elaboradoras de cecinas artesanales son las más perjudicadas con estas malas prácticas, ya que el término artesanal, sólo

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comprende la producción de alimentos con predominio mayoritariamente manual y no el uso de materias primas de dudosa procedencia. En general las muestras de longanizas no presentaron problemas de montaje y tinción para la observación microscópica, sin embargo es recomendable, sobre todo en longanizas de picado fino el uso de corte histológico con micrótomo de congelación. Además para la determinación exacta de qué tipo de tejidos se encuentran en la masa del embutido, se hace necesario tinciones específicas para obtener la certeza de que tejido se trata, ya que con la técnica de tinción hematoxilina-eosina se necesita una vasta experiencia por parte del observador además de ser esta una observación más bien del tipo subjetiva. Incluso para evitar fraudes se hará necesario técnicas como el de la reacción en cadena de polimerasa (PCR). Para detectar carnes de otras especies animales diferentes a la de cerdo o vacuno, que tendrían menor valor comercial (ej., carne de equino, mula) o que estarían prohibidas (carne de perro o gato). En Chile es necesario por una parte, reformar el Reglamento Sanitario de los Alimentos en donde se especifique los ingredientes exactos que pueden usarse en la fabricación como así también la cantidad porcentual de grasa por cada gramo de longaniza que se fabrique, y por otra parte, que dichas reformas estipuladas sean fiscalizadas por los organismos competentes en materia de Alimentación y Salud Pública, para que así se pueda salvaguardar la salud de los consumidores con un producto de calidad e inocuidad alimentaria, sobre todo que este embutido por tradición es cada día más consumido por la población chilena. CONCLUSIONES - La relación carne:grasa de las longanizas muestreadas presentó 12 muestras con menos de 30% de grasa, 7 muestras entre 31% y 40% de grasa y 11 muestras con mas de 41% de grasa. - En relación a la composición histológica, se observaron mayoritariamente musculatura estriada. También se observaron la presencia de musculatura lisa, tejido adiposo, tejido conectivo. - En el estudio histológico, sólo una muestra tuvo presencia de tejido no comestible correspondiente a pulmón. BIBLIOGRAFÍA

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