Determinación de hCG: más que una prueba de embarazo……

Prof. María Isabel Camejo (PhD)Universidad Simón Bolívar

Departamento de Biología de Organismos

Desde tiempos muy remotos el hombre, ha querido conocer si una mujer está embarazada...

Diagnóstico de embarazo en la antigüedad

El Papiro Brugsch de 1350 AC, describe una prueba en la cual “un trozo de sandía triturado se mezclaba con leche de una mujer recién parida y se le daba a beber a la paciente; si vomitaba, ella estaba embarazada; si solo tenía flatulencia, ella no estaba embarazada”.

Diagnóstico de embarazo en la antigüedad

Otro papiro del Antiguo Egipto cuenta que, para detectar el embarazo se hacía orinar a la mujer durante varios días sobre semillas de trigo y cebada, mezcladas con sal. Si después de un tiempo germinaba la cebada, el hijo sería varón; si germinaba el trigo, sería mujer; si no germinaba ninguna semilla, la mujer no estaba embarazada. No se menciona el caso en el cual germinaran ambas semillas.

Diagnóstico de embarazo en la antigüedad

Pasaron tres mil trescientos años de los papiros egipcios para que en el año 1928, los ginecólogos Aschheim y Zondek (Alemania) describieran el método más antiguo para asegurar el diagnóstico temprano de un embarazo.

Este ensayo se realizaba, inyectando pequeñas cantidades de orina de mujer potencialmente embarazada a ratones hembras pre-púberes, de 3-5 semanas de edad, que eran sacrificadas al cabo de 100 horas, e inspeccionaban sus ovarios. Si se hallaban engrosados y congestivos, había un 80 % a un 98 % de posibilidades de estar embarazada.

Diagnóstico de embarazo en la antigüedad

Luego esta prueba de inyectar la orina de la mujer sospechosa de embarazo se realizó con otros animales como conejas, ratas y peces.

Esta prueba se basa en la similitud existente entre la hormona hCG y la LH, las cuales se unen a los mismos receptores celulares, pudiendo sustituir a la LH del animal y estimular el ovario del mismo.

La prueba del sapo

Se inyectaban 10 mL de orina en uno de los sacos linfáticos laterales

1-3 horas después, se extraía orina de la vejiga del sapo mediante la introducción de una pipeta en su cloaca y se observaban la presencia de espermatozoides directamente al microscopio.

En el año 1942 un citólogo argentino, Eduardo Patricio Diego de Robertis, demostró que la hCG actuaba sobre las células de Sertoli de sapos, provocando la expulsión de espermatozoides.

En 1947, su discípulo Carlos Galli Mainini observaba cómo la orina de mujeres embarazadas inyectadas en el saco linfático dorsal del Bufo Arenarium-Hensel (bufo arenarum) promovía la espermatogénesis bajo el estímulo de hCG.

Se obtienen resultados positivos a la media hora; el 80 % lo hace a la segunda hora y casi la totalidad a las 3 h, de allí en adelante es muy difícil que una prueba negativa se convierta en positiva.

http://pharmexec.mediwire.com/main/Default.aspx?P=Content&ArticleID=139523

Luego vinieron los immunotest………

de eso trataremos más adelante

Donde se produce la hCG?

Luego de la fecundación el embrión se desarrolla en la trompa de falopio por unos días. Aproximadamente el día 5 post- fecundación entra en el útero y al día 8-9 comienza la implantación y el contacto del embrión con la circulación materna.

Es en ese momento la hormona hCG que está produciendo el embrión comienza a pasar a la sangre de la madre. Luego de unos días la hCG ya es detectable en la madre por una prueba de embarazo, cuando aún la mujer no ha percibido la falta de la menstruación

Cuando se forma la placenta ella es la encargada de producir la

hCG durante el embarazo. Esta hormona alcanza sus máximas

concentraciones a la 9-10 semanas y luego disminuye.

Determinación de la hCG Immunoensayos

(A) Se coloca unas gotas de orin, si la mujer está embarazada contiene hCG

(B) Los anticuerpos contra hCG del kit (marcados) se unen a la hCG.

(C) Un conjunto anclado de anticuerpos se adhieren a las moléculas y capturan la hCG que tiene unido el anticuerpo marcado

(D) Un segundo set de anticuerpos capturan a los anticuerpos marcados. Lo que sirve como un control positivo que indica que la prueba se realizó adecuadamente.

Embarazada No embarazada

Determinación de hCG por

Electroquimioluminiscencia

Ensayo de detección por electro-quimio-luminiscencia (ECL)

Es un ensayo basado en anticuerpos, en el cual un anticuerpo de captura marcado con streptavidin es unido a esferas magnéticas y el anticuerpo de detección es marcado con etiquetas que contienen rutenio, (ruthenium-containing tag), el cual sirve como reportero. Luego de la aplicación de bajo voltaje al electrodo, se inicia una reacción cíclica de oxido-reducción de los iones del metal rutenio, lo cual genera luz. Mientras más tags estén unidos a la proteína (ejemplo cytokine o hCG) más luz es generada y esta señal puede ser medida.

http://apresslp.gvpi.net/apcyto/lpext.dll/Family/part1/lis01c004/lis01c004hfig?f=templates&fn=document-frame.htm&2.0

http://www.globalbiosystems.com/ECLtech.htm

¿Cuándo determinar la hCG?

ETG: Enfermedad trofoblástica gestacional

Valores de hCG en enfermedad

Aumentado: Melanoma, carcinoma de mama, carcinoma de cervix,

carcinoma gastrointestinal, de pulmón, de páncreas o de ovario (producción ectópica)

Cirrosis, úlcera duodenal, enfermedad intestinal inflamatoria, Mujeres post menopaúsicas con insuficiencia renal Tumor testicular no seminomatoso (70%). Seminoma

testicular (50-60% de los pacientes en estadio I) Pre-eclampsia (mayor concentración que en un grupo control

de mujeres en la misma edad gestacional).Disminuido: Amenaza de aborto, aborto incompleto, embarazo ectópico,

muerte intrauterina.

Conclusiones

La cuantificación de hCG es útil para determinar:

Embarazo intra o extrauterino

Predicción de aborto espontáneo

Riesgo a síndrome de Down

Diagnóstico y seguimiento de la enfermedad trofoblástica gestacional

Tumores productores de hCG

Determinación de hCG:

más que una prueba de embarazo……