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DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO ABO y Rh PREPARACION DE LAS MUESTRAS DESTINADAS AL ESTUDIO INMUNOHETOLOGICO

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DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEOABO y Rh

PREPARACION DE LAS MUESTRAS DESTINADAS AL ESTUDIO INMUNOHETOLOGICO

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RECOLECCION DE LA MUESTRA

• Las muestras de sangre deben ser extraídas con y sin anticoagulante

• Deben estar correctamente identificadas

• No presentar coágulos ni hemolisis

• De las muestras sin anticoagulantes se debe separar el suero

no debe contener restos de fibrina

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LAVADO DE GLOBULOS ROJOS (MANUAL)

• En un tubo de hemolisis colocar 2 gotas de suero anticoagulada

• Añadir 4 ml. de solución fisiológica

• Centrifugar

• Decantar la solución sobrenadante.

• Realizar 3 ciclos de lavado

• Del concentrado celular preparar una suspensión celular al 3 % con solución salina

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- PREPARACION DE PANELES DE GLOBULOS ROJOS TESTIGO

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PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO

La aglutinación de los glóbulos rojos con sueros tipificadores anti A, anti B

Y anti AB indican la presencia del correspondiente antígeno, la ausencia de

aglutinación indica ausencia de este.

La aglutinación resulta de la fijación de los anticuerpos a los antígenos de varios

Eritrocitos, que forman una red o trama que mantiene unidas a las células.

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PRUEBA DIRECTA PARA DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO

Reacción de las células lavadas con el antisuero

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GRACIAS........

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PRUEBA INVERSA

Procedimiento para detectar anticuerpos anti ABO en el suero o plasma

Método directoReacciones de Células con antisuero

Método inversoReacciones del suero con células testigo Interpretación

Anti A Anti B Anti AB Células A Células B CélulasO

Grupo

0 0 0 + + 0 O

+ 0 + 0 + 0 A

0 + + + 0 0 B

+ + + 0 0 0 AB

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Los resultados de la prueba directa e inversa deben coincidir, sino lo hicieran

se debe repetir la prueba de bolsa y en tubo nuevo.

DETERMINACION DE FACTOR Rh

• Rotular un tubo de hemólisis con el código del donante y la letra D.

• Rotular otro tubo de hemólisis con el código del donante, que servirá de controlnegativo para la determinación de grupo Rh.

• Agregar 1 gota de suspensión de glóbulos rojos lavados al 3% del donante enambos tubos y 1 gota de suero anti-D en el primero, y al segundo agregaruna gota de reactivo Rhesus control o suero control negativo anti D.

• Mezclar y centrifugar a velocidad y tiempo establecido para cada centrífuga,Leer y consignar los resultados registrando la intensidad de la reacción de 1 a4 cruces.

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INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

• Si hay aglutinación igual o mayor a 2+ en el Tubo, la persona presenta elantígeno D en los eritrocitos, por lo tanto es D positivo.

• Si la aglutinación es 1+ o negativo en el tubo de centrifugación inmediata,incubar en Baño María a 37º durante 30 minutos, luego centrifugar y leer. Sies negativo debe continuarse el estudio en busca de expresiones más débileso variantes del antígeno D para definir así la presencia o ausencia delantígeno Rh, en el eritrocito.

• En el tubo control los eritrocitos deben presentar reacción negativa con elreactivo Rhesus control. En caso de reacción positiva, los resultados de ladeterminación son inválidos.

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INVESTIGACION DEL ANTIGENO D DEBIL

• Usar el mismo tubo que dio resultado negativo para Rh

• Lavar los eritrocitos de los tubos con abundante solución fisiológica

• Después del último lavado eliminar el suero fisiológico dejando los eritrocitosresuspendidos.

• Agregar dos gotas de suero Antiglobulina Humana.

• Mezclar y centrifugar

• Realizar la lectura

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INTERPRETACIÓN

Anti D InvestigaciónAg D débil

Test AGHDirecto

Informe

+--- ----

Rh positivo

O O O Rh negativo

O + O Rh positivo débil

O + + No i